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糖尿病肾病模型:动物模型、二维细胞模拟及三维类器官模型

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中国组织工程研究 2025年第17期29卷 3632-3640页

作者：钱足平陈勇冉燕达静静查艳遵义医科大学贵州省遵义市563000 贵州省人民医院肾内科贵州省贵阳市550002

背景:近几年来,人类多能干细胞衍生的肾类器官及糖尿病肾病啮齿动物模型取得了一定的进展。然而,由于糖尿病肾病发病受环境因素及遗传因素共同作用,发病机制复杂,并且对于此类患者的临床治疗方法需要因人而异。因此,需要开发更灵活和综... 详细信息

背景:近几年来,人类多能干细胞衍生的肾类器官及糖尿病肾病啮齿动物模型取得了一定的进展。然而,由于糖尿病肾病发病受环境因素及遗传因素共同作用,发病机制复杂,并且对于此类患者的临床治疗方法需要因人而异。因此,需要开发更灵活和综合的方法,从而发现强有力的临床前证据,以支持对糖尿病肾病患者进行更有针对性的干预。目的:从动物模型、二维细胞培养模拟及三维类器官模型等方面综述了糖尿病肾病模型的研究进展,为进一步的研究提供线索和思路。方法:以“糖尿病,糖尿病肾病,糖尿病肾病模型,糖尿病肾病动物模型,类器官,肾脏类器官,糖尿病肾病细胞模型,糖尿病肾病病证结合动物模型”为中文检索词,“Diabetes,diabetic nephropathy,diabetic kidney diseases,diabetic nephropathy models,diabetic nephropathy animal models,organoids,diabetic and organoids,diabetic and kidney organoids,kidney organoids,diabetic nephropathy cell models,diabetic nephropathy syndrome combined animal models”为英文检索词,检索中国知网及PubMed数据库,最终纳入101篇文献进行综述分析。结果与结论:糖尿病肾病体内模型和体外模型是深入研究糖尿病肾病发病机制的有力工具。动物模型可以观察到多系统之间的相互作用;二维细胞培养操作简便且成本较低;新兴的肾类器官填补了二维和整体水平之间的空白,无种属差异且一定程度模拟了人肾脏的复杂性。随着类器官技术的不断发展,肾类器官有望为探索糖尿病肾病的发病机制、病理生理过程和药物筛选提供一个新的视角。

关键词：糖尿病肾病肾脏类器官糖尿病肾病类器官细胞模型动物模型中医病证结合糖尿病肾病模型工程化组织构建

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醉茄素A抑制肾近端小管上皮细胞铁死亡

海南医学院学报 2025年

作者：钱睿卢守燕黄军悦张鹏马小梅杨晓军薛嵘甘肃省人民医院肾内科甘肃省人民医院心外科甘肃省人民医院放射科甘肃省人民医院普外科

目的：本研究旨在探究醉茄素A抑制顺铂对肾近端小管上皮细胞诱导死亡的作用及其分子机制。方法：采用CCK-8细胞活性实验检测顺铂和醉茄素A对细胞活性影响。通过流式细胞仪检测细胞中脂质ROS含量。通过PCR阵列实验分析HK-2细胞及原代肾... 详细信息

目的：本研究旨在探究醉茄素A抑制顺铂对肾近端小管上皮细胞诱导死亡的作用及其分子机制。方法：采用CCK-8细胞活性实验检测顺铂和醉茄素A对细胞活性影响。通过流式细胞仪检测细胞中脂质ROS含量。通过PCR阵列实验分析HK-2细胞及原代肾小管上皮细胞经顺铂和醉茄素A处理后的铁死亡相关基因的表达。通过Western blot检测FSP1蛋白的表达。通过小RNA（siRNA）干扰敲低细胞中FSP1基因表达。结果：醉茄素A能够抑制顺铂诱导的肾近端小管上皮细胞毒性。醉茄素A能够抑制顺铂诱导的肾小管上皮细胞铁死亡。在HK-2细胞和原代肾小管上皮细胞中被醉茄素A诱导显著共同上调的基因是NFE2L2和FSP1。其中在两种细胞中上调差异倍数最大的基因都是FSP1。同时发现，醉茄素A能够显著上调FSP1蛋白水平的表达。干扰了细胞中FSP1表达后，醉茄素A的铁死亡保护作用显著降低。结论：醉茄素A通过上调肾近端小管上皮细胞FSP1的表达抑制顺铂诱导的细胞铁死亡，从而抑制顺铂对细胞的毒性。

关键词： FSP1 肾近端小管上皮细胞醉茄素A 顺铂铁死亡

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达格列净致溶血性贫血伴黄疸1例

医药导报 2025年

作者：王兰何琳边原王双梅成都市金牛区人民医院西药剂科四川省医学科学院.四川省人民医院电子科技大学附属医院药学部

1 病例介绍患者，男，69岁，身高154 cm，体质量54 kg。2023年4月2日因“无明显诱因出现口干、多饮、多尿，伴体重减轻”就诊成都市金牛区人民医院。既往病史及用药史：高血压病史9年，长期服用硝苯地平控释片30 mg，po，qd；发现血糖... 详细信息

1 病例介绍患者，男，69岁，身高154 cm，体质量54 kg。2023年4月2日因“无明显诱因出现口干、多饮、多尿，伴体重减轻”就诊成都市金牛区人民医院。既往病史及用药史：高血压病史9年，长期服用硝苯地平控释片30 mg，po，qd；发现血糖升高3年，未行降糖治疗。

关键词：达格列净溶血性贫血黄疸药物不良反应病例报告

STRO-1阳性与阴性骨髓间充质干细胞成骨能力的对比

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中国组织工程研究 2025年

作者：周万林何斌申雄成黄坤田仁元袁野黄文良遵义医科大学第三附属医院(遵义市第一人民医院)骨科遵义市红花岗区人民医院骨科贵州省茅台医院骨科

背景：随着年龄增长，骨髓间充质干细胞的再生能力和分化功能逐渐下降，导致骨组织修复效果减弱。因此，探索成骨潜能更高的骨髓间充质干细胞亚群对骨组织工程的发展具有重要意义。目的：评估STRO-1阳性和阴性骨髓间充质干细胞在成骨诱... 详细信息

背景：随着年龄增长，骨髓间充质干细胞的再生能力和分化功能逐渐下降，导致骨组织修复效果减弱。因此，探索成骨潜能更高的骨髓间充质干细胞亚群对骨组织工程的发展具有重要意义。目的：评估STRO-1阳性和阴性骨髓间充质干细胞在成骨诱导培养条件下的成骨分化能力差异。方法：分离并培养SD大鼠骨髓间充质干细胞，采用流式细胞术和免疫荧光鉴定CD29、CD45、CD90和STRO-1的表达；利用免疫磁细胞分选技术分离STRO-1阳性和阴性骨髓间充质干细胞，将两组细胞分别进行成骨诱导7,14 d，采用qPCR和Western blot分析两组细胞成骨相关基因(Ⅰ型胶原、Runt相关转录因子2、骨保护素、骨钙素)及蛋白表达水平差异，采用茜素红染色和碱性磷酸酶染色观察钙结节形成情况。结果与结论：流式细胞术显示CD29和CD90高表达，CD45低表达，STRO-1的阳性表达率为12.8%，免疫荧光结果与流式细胞术一致。磁细胞分选后发现STRO-1阳性细胞的集落形成率高于STRO-1阴性细胞；STRO-1阳性细胞在第14天的成骨分化能力显著高于第7天，且在第14天时成骨相关标志物的表达水平显著高于STRO-1阴性细胞，差异有显著性意义(P <0.01)。结果表明：STRO-1阳性骨髓间充质干细胞在成骨能力上具有显著优势，为骨组织工程中理想种子细胞的筛选提供了理论依据，未来在骨缺损修复中有望成为一种潜在的治疗手段。

关键词： STRO-1 骨髓间充质干细胞成骨分化免疫磁细胞分选骨缺损修复种子细胞骨组织工程工程化干细胞

口服海曲泊帕与皮下注射重组人血小板生成素用于单倍体造血干细胞移植

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中国组织工程研究 2025年第1期29卷 1-7页

作者：孔黛王新凯张文荟裴晓杭连成牛晓娜郭宏岗牛俊伟朱尊民刘忠文河南省人民医院血液科郑州大学人民医院河南省郑州市450000

背景:异基因造血干细胞移植是治疗恶性血液病的重要手段,术后血小板植入延迟是常见并发症,严重影响患者生存质量,然而,目前并无标准方案来提高血小板植入率和预防血小板植入延迟。目的:对比分析口服海曲泊帕与皮下注射重组人血小板生成... 详细信息

背景:异基因造血干细胞移植是治疗恶性血液病的重要手段,术后血小板植入延迟是常见并发症,严重影响患者生存质量,然而,目前并无标准方案来提高血小板植入率和预防血小板植入延迟。目的:对比分析口服海曲泊帕与皮下注射重组人血小板生成素促进恶性血液病患者单倍体造血干细胞移植后血小板植入的安全性及有效性。方法:回顾性分析2016年1月至2022年10月进行单倍体造血干细胞移植的163例恶性血液病患者的临床资料。+2 d开始皮下注射重组人血小板生成素的患者共72例,归为重组人血小板生成素组;+2 d开始口服海曲泊帕的患者共27例,归为海曲泊帕组;未应用海曲泊帕及重组人血小板生成素的64例患者归为空白对照组。对3组植入情况、100 d内Ⅱ-Ⅳ度急性移植物抗宿主病发生率、1年生存率、1年复发率及安全性进行分析。结果与结论:(1)中位随访时间52(12-87)个月,空白对照组、重组人血小板生成素组、海曲泊帕组患者中性粒细胞植入时间分别为(12.95±3.88)d,(14.04±3.71)d,(13.89±2.74)d,差异无显著性意义(P=0.352);血小板植入时间分别为(15.16±6.27)d,(17.67±6.52)d,(17.00±4.75)d,差异无显著性意义(P=0.287);(2)空白对照组、重组人血小板生成素组、海曲泊帕组第60天血小板完全植入率分别为64.06%,90.28%,92.59%,差异有显著性意义(P0.05);(5)随访期内,3组患者均未发生血栓事件;(6)结果表明,重组人血小板生成素、海曲泊帕均可提高恶性血液病患者单倍体造血干细胞移植后血小板的植入率,疗效相当且安全性良好。

关键词：恶性血液病单倍体造血干细胞移植海曲泊帕重组人血小板生成素移植物抗宿主病血小板植入植入率

SD大鼠乳鼠原代皮质神经元和小胶质细胞同时提取并培养的实验方法

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1395-1400页

作者：何龙才宋文学明江陈光唐王军浩廖益东崔君拴徐卡娅贵州医科大学贵州省贵阳市550004 贵阳市第一人民医院贵州省贵阳市550002 贵州医科大学附属医院神经外科贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院高压氧科贵州省贵阳市550004

背景:原代皮质神经元和小胶质细胞在探索神经系统疾病细胞疗法中起着至关重要的作用,而目前获得2种细胞的方法大多较繁琐,需分别单独提取。因此找到一种便捷、快速可同时提取2种细胞的方法十分关键。目的:探索一种新型同时提取原代皮质... 详细信息

背景:原代皮质神经元和小胶质细胞在探索神经系统疾病细胞疗法中起着至关重要的作用,而目前获得2种细胞的方法大多较繁琐,需分别单独提取。因此找到一种便捷、快速可同时提取2种细胞的方法十分关键。目的:探索一种新型同时提取原代皮质神经元及小胶质细胞的方法。方法:取24 h内新生SD大鼠乳鼠,将大脑取出放入装有DMEM的培养皿中,去除软脑膜后备用。同一脑组织,先提取原代神经元,再将剩余脑组织用于提取小胶质细胞,整个过程在冰上操作。原代皮质神经元提取培养步骤:镊子夹取2.0-3.0 mm厚度大脑皮质组织置于培养皿,用木瓜蛋白酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈互相粘连的组织悬液,吸上清细胞悬液,过滤、分装到15 mL离心管中,离心并重悬后将细胞接种于左旋多聚赖氨酸包被的6孔板爬片上放入细胞培养箱,每隔1 d观察神经元形态,第7天进行MAP2和β-Tubulin免疫荧光染色鉴定。小胶质细胞提取培养步骤:夹取上一步取皮质后剩余脑组织,厚度8-10 mm,置于培养皿,用胰酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈匀浆,然后将匀浆转移到培养瓶中培养,第14天将培养瓶封口后进行恒温水平摇床振荡2 h,小胶质细胞脱落于上清中;取纯化后的小胶质细胞继续培养3 d进行Iba1免疫荧光染色鉴定。结果与结论:(1)神经元培养24 h后贴壁、胞体变大,部分神经元长出突触;培养到第3,5天时胞体进一步增大,大部分神经元已呈突触形态,部分神经元成团生长;第7天时,神经元突触延长增粗并互相连接成网。经β-Tubulin、MAP2免疫荧光染色鉴定为神经元。(2)小胶质细胞培养第1天换液后可见细胞贴壁生长;第3,5,7天时细胞密度均较小,细胞形态呈高亮椭圆或圆形,但已基本成团块状生长于其他细胞上层;第10天时小胶质细胞密度明显增大;第14天时小胶质细胞呈致密团块状生长于其他细胞上层,此时可进行分离纯化。取分离纯化后细胞再培养至第3天,经Iba1免疫荧光鉴定为小胶质细胞,且纯度大于95%。(3)结果表明,经此法提取并培养获得的原代皮质神经元和小胶质细胞纯度高、形态好、成活率高。

关键词：原代皮质神经元小胶质细胞 SD大鼠细胞提取细胞培养

基于定量CT分析正常体质量指数人群内脏脂肪面积与甘油三酯-葡萄糖指数的相关性

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中国医学影像技术 2025年

作者：李鑫周阳邹智周菁张潇琳屈敏李昊李永丽河南大学人民医院医学影像科郑州大学人民医院医学影像科河南省人民医院健康管理学科阜外华中心血管病医院健康管理学科

目的基于定量CT（QCT）分析正常体质量指数（BMI）人群内脏脂肪面积（VFA）与甘油三酯-葡萄糖（TyG）指数的相关性。方法回顾性分析1358名接受QCT体质成分测定且BMI正常的健康成年体检者，根据QCT所测VFA将其分为正常内脏脂肪组(正常... 详细信息

目的基于定量CT（QCT）分析正常体质量指数（BMI）人群内脏脂肪面积（VFA）与甘油三酯-葡萄糖（TyG）指数的相关性。方法回顾性分析1358名接受QCT体质成分测定且BMI正常的健康成年体检者，根据QCT所测VFA将其分为正常内脏脂肪组(正常组，VFA＜100cm2，n=509)、轻度内脏脂肪蓄积组(轻度组，100cm2≤VFA＜150cm2，n=431)及重度内脏脂肪蓄积组(重度组，VFA≥150cm2，n=418)。分别以Pearson或Spearman相关分析观察20～40、41～60及61～90岁BMI正常男、女性一般资料、体质成分与TyG指数的相关性；采用多元线性回归分析筛选BMI正常人群TyG指数的独立影响因素。结果各年龄段BMI正常男性低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、总胆固醇（TC）、谷丙转氨酶（GPT）、VFA及皮下脂肪面积（SFA）与TyG指数呈弱-低度正相关（r=0.143～0.459，P均＜0.05），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）与TyG指数呈弱-低度负相关（r=－0.410～－0.222，P均＜0.05）。各年龄段BMI正常女性LDL-C、VFA及SFA与TyG指数呈弱-低度正相关（r=0.206～0.495，P均＜0.05）。谷丙转氨酶（GPT）、TC、VFA及肝脏脂肪含量（LFC）均为BMI正常人群TyG指数的独立危险因素（P均＜0.05），HDL-C为其独立保护因素（P＜0.05）。结论 BMI正常人群VFA与TyG指数呈正相关；基于QCT测量腹部体质成分联合血脂指标对预测腹型肥胖人群胰岛素抵抗及相关代谢性疾病具有一定潜力。

关键词：身体成分脂肪组织体层摄影术,X线计算机甘油三酯-葡萄糖指数

急性基底动脉闭塞患者经机械取栓获得首过效应后预后不良预测因素

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中国介入影像与治疗学 2025年

作者：丁运马圆吕朋华李沛城李波袁晨李婉慈顾典一陈珑苏州大学附属第一医院介入放射科苏北人民医院介入放射科

目的　探讨急性基底动脉闭塞（BAO）患者经机械取栓（MT）获得首过效应（FPE）后预后不良的预测因素。方法　回顾性纳入82例MT后获得FPE的急性BAO患者并根据90天后改良Rankin量表（mRS）评分将其分为预后良好组（mRS评分≤3，n=48）与... 详细信息

目的　探讨急性基底动脉闭塞（BAO）患者经机械取栓（MT）获得首过效应（FPE）后预后不良的预测因素。方法　回顾性纳入82例MT后获得FPE的急性BAO患者并根据90天后改良Rankin量表（mRS）评分将其分为预后良好组（mRS评分≤3，n=48）与预后不良组（mRS评分＞3，n=34）；比较组间资料，将差异有统计学意义的变量纳入多因素logistic回归分析，筛选急性BAO经MT获得FPE后预后不良的独立预测因素。结果　与预后良好组相比，预后不良组患者年龄更大、治疗前美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分及中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）更高（P均＜0.05），合并糖尿病、心房颤动（AF）及急性卒中Org 10 172治疗试验（TOAST）分型心源性栓塞者占比亦更高（P均＜0.05），而治疗前格拉斯哥昏迷量表（GCS）评分、后循环Alberta卒中项目早期CT评分（pc-ASPECTS）及基底动脉CT血管成像（BATMAN）评分更低（P均＜0.05）。多因素logistic回归分析显示，合并AF［OR（95%CI）=29.769（1.470，602.943）］、治疗前NLR高［OR（95%CI）=1.212（1.016，1.446）］者预后相对不良（P均＜0.05），而治疗前GCS评分［OR（95%CI）=0.615（0.429，0.882）］、pc-ASPECTS［OR（95%CI）=0.263（0.092，0.748）］及BATMAN评分较高者［OR（95%CI）=0.260（0.085，0.796）］预后相对较好（P均＜0.05）。结论　合并AF、术前低GCS评分、高NLR、低pc-ASPECTS及低BATMAN评分是急性BAO患者经MT获得FPE后预后不良的预测因素。

关键词：大脑梗死基底动脉机械溶栓预后

神经生长因子促进兔骨髓间充质干细胞软骨分化并抑制肥大分化

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1336-1342页

作者：杨治航孙祖延黄文良万喻陈仕达邓江遵义医科大学第三附属医院(遵义市第一人民医院) 贵州省遵义市563000

背景:神经生长因子是一种诱导神经生长的蛋白质,能调节间充质干细胞的增殖、分化等生物学行为。目的:探讨神经生长因子对骨髓间充质干细胞成软骨分化的促进作用。方法:分离培养兔骨髓间充质干细胞,将神经生长因子通过慢病毒转染的方式... 详细信息

背景:神经生长因子是一种诱导神经生长的蛋白质,能调节间充质干细胞的增殖、分化等生物学行为。目的:探讨神经生长因子对骨髓间充质干细胞成软骨分化的促进作用。方法:分离培养兔骨髓间充质干细胞,将神经生长因子通过慢病毒转染的方式转染到骨髓间充质干细胞,以转染空载病毒为对照,CCK-8法、细胞划痕实验、茜素红染色、Western blot检测神经生长因子对骨髓间充质干细胞增殖、迁移、肥大分化、成软骨分化的影响。为进一步探讨神经生长因子对骨髓间充质干细胞成软骨分化的促进作用,转染空载病毒和转染神经生长因子的骨髓间充质干细胞分别加入白细胞介素1β诱导培养14 d,Western blot检测成软骨分化、肥大分化相关蛋白的表达。结果与结论:(1)CCK-8检测结果表明神经生长因子对骨髓间充质干细胞增殖没有明显影响;(2)与对照组相比,过表达神经生长因子后细胞迁移能力增强,成软骨相关蛋白Ⅱ型胶原、SOX9的表达上调(P<0.05),肥大相关蛋白Ⅹ型胶原、RUNX2的表达下调(P<0.05);(3)与空载病毒+白细胞介素1β组相比,过表达神经生长因子+白细胞介素1β组成软骨相关蛋白Ⅱ型胶原、SOX9的表达上调(P<0.05),肥大相关蛋白Ⅹ型胶原、RUNX2的表达下调(P<0.05);(4)结果表明,神经生长因子可促进骨髓间充质干细胞成软骨分化。

关键词：神经生长因子骨髓间充质干细胞软骨分化骨关节炎软骨细胞肥大分化