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基于DNA条形码及HPLC对市售刺五加的种质资源鉴定和质量评价

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药学学报 2024年第7期59卷 2171-2178页

作者：刘珊瑚张志飞黄钰莹刘子齐陈文沁阿木拉哈王馨石玥张晓芹何高洁安克露王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102 黑龙江北草堂中药材有限责任公司黑龙江哈尔滨150900

刺五加Acanthopanax senticosus(*** Maxim.)Harms是我国东北道地药材之一,本研究根据之前的叶绿体基因组测序结果,选取atpI和atpB_rbcL基因片段对市售刺五加样品进行种质资源鉴定,并利用HPLC对其紫丁香苷含量进行测定,以期确定市售刺... 详细信息

刺五加Acanthopanax senticosus(*** Maxim.)Harms是我国东北道地药材之一,本研究根据之前的叶绿体基因组测序结果,选取atpI和atpB_rbcL基因片段对市售刺五加样品进行种质资源鉴定,并利用HPLC对其紫丁香苷含量进行测定,以期确定市售刺五加的主流种质和质量。本研究从24省47市收集80份刺五加样品并提取DNA,通过PCR扩增atpI和atpB_rbcL基因片段,分析结果表明,2个基因片段联合分析形成7个单倍型(H2、H5、H8、H10、H12、H14、H23),其中来自黑龙江伊春、哈尔滨尚志、黑龙江绥化、辽宁抚顺、辽宁本溪、吉林长白和吉林靖宇的单倍型H2是主流单倍型,占总样本量的58.75%。H14和H23为产地独有单倍型,分别来自黑龙江省双鸭山市饶河县和黑龙江省绥化市明水县。通过HPLC检测市售刺五加样品中的紫丁香苷含量,结果表明73.96%样品紫丁香苷含量符合药典标准。样品间的紫丁香苷含量差异显著,在0.0037%~0.5245%之间,相差0.5208%,说明刺五加市场样品质量参差不齐,但是不同单倍型之间市售刺五加紫丁香苷含量没有显著性差异。市场样品中单倍型H23中的紫丁香苷含量比较高,因此可能是质量比较好的种质。本文对刺五加市场样品的种质资源和药材质量进行研究,有利于指导刺五加市场样品流通、临床合理用药和后续优良品种筛选。

关键词：刺五加 DNA条形码分子鉴定紫丁香苷质量评价

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玉女煎对棕榈酸诱导的L细胞损伤的影响

中国病理生理杂志 2024年第4期40卷 706-712页

作者：王岩松苏萌吕洁雷莉妍陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西咸阳712000

目的:研究玉女煎对棕榈酸(PA)诱导的肠L细胞损伤的影响。方法:(1)将不同浓度(1.5、3和6 g/L)玉女煎溶液分别与二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)溶液(100 mg/L)混合并避光反应30 min,采用全波长酶标仪检测吸光度的变化,评价玉女煎对DPPH·... 详细信息

目的:研究玉女煎对棕榈酸(PA)诱导的肠L细胞损伤的影响。方法:(1)将不同浓度(1.5、3和6 g/L)玉女煎溶液分别与二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)溶液(100 mg/L)混合并避光反应30 min,采用全波长酶标仪检测吸光度的变化,评价玉女煎对DPPH·的清除作用。(2)将小鼠肠内分泌细胞系GLUTag分为空白对照组、PA(400μmol/L)组、PA+玉女煎(1.5 g/L)组、PA+玉女煎(3 g/L)组和PA+玉女煎(6 g/L)组,通过Hoechst 33342细胞核染色实验和MTT实验评价玉女煎对PA诱导的细胞凋亡的影响。(3)将GLUTag细胞分为空白对照组、PA组和PA+玉女煎(6 g/L)组,采用免疫荧光染色检测细胞内胰高血糖素样肽1(GLP-1)表达水平,通过2´,7´-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,通过Western blot实验检测超氧化物歧化酶1(SOD1)表达水平。结果:(1)玉女煎在体外可显著清除DPPH·(P组比较,玉女煎能以浓度依赖性方式抑制PA诱导的GLUTag细胞活力降低,在6 g/L时效果最明显(P组比较,6 g/L玉女煎能显著恢复GLUTag细胞的GLP-1(P化应激水平抑制PA诱导的GLUTag细胞损伤。

关键词：玉女煎棕榈酸肠L细胞氧化应激

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麝香对Aβ_(1-42)诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用研究

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中药药理与临床 2024年第4期40卷 83-89页

作者：谢林江秦涛宋才友楚志力邓婷谢丹妮徐颖孙涛成都中医药大学中药材标准化教育部重点实验室西南特色中药资源国家重点实验室成都611137 金堂县第二人民医院成都610404

目的:探讨麝香对阿尔兹海默症(AD)细胞模型氧化应激损伤及凋亡的保护作用。方法:使用LC-MS/MS法分析麝香化学成分。通过β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导PC12细胞建立体外AD细胞模型,采用CCK-8法测定PC12细胞存活率,考察Aβ_(1-42)对P... 详细信息

目的:探讨麝香对阿尔兹海默症(AD)细胞模型氧化应激损伤及凋亡的保护作用。方法:使用LC-MS/MS法分析麝香化学成分。通过β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导PC12细胞建立体外AD细胞模型,采用CCK-8法测定PC12细胞存活率,考察Aβ_(1-42)对PC12的细胞毒性及麝香对Aβ_(1-42)诱导PC12细胞损伤的保护作用;采用Annexin V-FITC/PI双染色法检测麝香对Aβ_(1-42)致PC12细胞凋亡的影响,JC-1法检测麝香对Aβ_(1-42)致PC12细胞线粒体膜电位的影响;采用探针DCFH-DA检测麝香对Aβ_(1-42)致PC12细胞内活性氧(ROS)的影响;采用超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒检测麝香对Aβ_(1-42)致PC12细胞内抗氧化酶活性水平的影响;采用Western blot法检测PC12细胞内相关凋亡蛋白BAX、BCL-2和Cleaved caspase-3的表达以及核因子红细胞2相关因子2(Nrf-2)、血红素加氧酶-1(HO-1)和Kelch样ECH相关蛋白1(Keap 1)的表达。结果:通过LC-MS/MS法鉴定出麝香的7种化学成分分别为:次黄嘌呤、雄烯二酮、表睾酮、十六碳酰胺、麝香酮、油酸酰胺、硬脂酰胺。与空白对照组比较,模型对照组PC12细胞存活率显著降低(P组相比,麝香0.025、0.05、0.1 mg/mL组细胞存活率明显升高(P组中线粒体膜电位显著升高(P组GSH-Px活力显著升高(P化应激和凋亡。

关键词：麝香 β-淀粉样蛋白1-42 氧化应激细胞凋亡核因子红细胞2相关因子2/血红素加氧酶-1/Kelch样ECH相关蛋白1信号通路

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鹿皮胶对气血亏虚模型小鼠的保护作用

中成药 2024年

作者：毛洪运刘雨彤崔杰李梦雨郑云枫张童侯蓉华永庆许惠琴江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏省中药资源产业化过程协同创新中心南京中医药大学药学院贵州广济堂健康药业有限公司

目的研究鹿皮胶对气血亏虚模型小鼠的改善作用。方法将60只小鼠随机分为空白组、模型组、阿胶组(0.8g/kg)和鹿皮胶低、中、高剂量组(0.585、1.17、2.34g/kg)，每组10只，给予相应药物干预15d，除空白组外，其余各组小鼠于第2、5天通过... 详细信息

目的研究鹿皮胶对气血亏虚模型小鼠的改善作用。方法将60只小鼠随机分为空白组、模型组、阿胶组(0.8g/kg)和鹿皮胶低、中、高剂量组(0.585、1.17、2.34g/kg)，每组10只，给予相应药物干预15d，除空白组外，其余各组小鼠于第2、5天通过腹腔注射环磷酰胺和皮下注射乙酰苯肼建立气血亏虚模型。给药结束后，计算各组小鼠体征评分，爬杆实验测定力竭时间，检测外周血常规及血清EPO、IL-3、SCF、BUN、LD水平，检测肝糖原水平及肌肉组织ATP酶活性，流式细胞术检测BMNCs凋亡率及其CD34+细胞表达率。结果与模型组比较，鹿皮胶高剂量组小鼠体征评分降低(P组织Na+-K+-ATPase活性升高(P化、升高外周血细胞数目，促进糖原合成及升高ATP酶活性等能量利用有关。

关键词：鹿皮胶气血亏虚益气补血造血干细胞抗疲劳

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纳米钝化材料的制备及对土壤中铅的影响

吉林农业大学学报 2024年第3期46卷 482-488页

作者：赵超越李伟平丁传波刘文丛杨桂霞吉林农业大学资源与环境学院长春130118 吉林农业大学中药材学院长春130118

为解决农田重金属污染问题,采用静电纺丝技术,制备偕胺肟化聚丙烯腈/膨润土(AOPAN/MMT)复合纳米纤维。以盐酸羟胺水溶液对其改性,获得偕胺肟化纤维材料(偕胺肟化率38%),增加其活性位点,从而增强对Pb离子的吸附,并使用复合纤维进行外源... 详细信息

为解决农田重金属污染问题,采用静电纺丝技术,制备偕胺肟化聚丙烯腈/膨润土(AOPAN/MMT)复合纳米纤维。以盐酸羟胺水溶液对其改性,获得偕胺肟化纤维材料(偕胺肟化率38%),增加其活性位点,从而增强对Pb离子的吸附,并使用复合纤维进行外源重金属土壤钝化试验及小白菜盆栽试验。扫描电镜(SEM)观察所制备纤维表面光滑。傅里叶红外光谱(FTIR)分析证实膨润土(MMT)与聚丙烯腈(PAN)成功复合,并且成功引入偕胺肟基。水接触角试验证明MMT掺杂及改性提升了纤维的湿润性。热重(TG)分析显示膨润土增加了复合纳米纤维的热稳定性。研究表明,制备偕胺肟化聚丙烯腈/膨润土复合纳米纤维对水溶液中Pb离子的最大吸附量为92.390 mg/g。Pb污染土壤钝化试验表明,添加复合纤维可使土壤中有效态Pb含量降低,降低率为89.53%。盆栽试验中,试验组小白菜鲜质量、干质量分别为7.54 g和0.65 g,地上部、根部Pb含量分别为0.46 mg/kg和3.68 mg/kg,降低了小白菜对Pb的吸收。有望成为具有一定应用前景的Pb污染农田土壤钝化材料。

关键词：聚丙烯腈膨润土静电纺丝土壤铅钝化材料

基于代谢组学及转录组学研究灰毡毛忍冬不同品种黄酮类成分差异积累的转录调控机制

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2666-2679页

作者：张惊宇龙雨青曾娟付学森何佳蔚周日宝刘湘丹湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湘产大宗道地药材种质资源及规范化种植重点研究室湖南长沙410208 湖南省普通高等学校中药现代化研究重点实验室湖南长沙410208 湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心湖南长沙410208

为探究湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬黄酮类成分差异积累的分子调控机制,该研究以灰毡毛忍冬2个品种花、茎和叶为材料,采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术和高通量转录组测序(RNA-seq)技术进行代谢组学和转录组学联合分析,筛选黄酮... 详细信息

为探究湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬黄酮类成分差异积累的分子调控机制,该研究以灰毡毛忍冬2个品种花、茎和叶为材料,采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术和高通量转录组测序(RNA-seq)技术进行代谢组学和转录组学联合分析,筛选黄酮类差异代谢物、关键差异表达基因及相应转录因子,并随机挑选其中14条差异表达基因进行qRT-PCR验证。结果表明,代谢组学分析共筛选出黄酮类化合物生物合成相关途径差异代谢物17个,包括柚皮苷查尔酮、芹菜素、槲皮苷等;转录组学分析共筛选出黄酮类化合物生物合成相关途径差异表达基因19条,包括2条CHS、3条CHI等;调控网络分析和加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选出调节黄酮类成分积累的关键酶基因CHS1、FLS1和HCT;同时发现MYB12和LBD4这2个转录因子可能通过调控关键酶基因CHS1、FLS1和HCT的表达来调控黄酮类成分的生物合成;qRT-PCR结果显示,随机选取的14个差异表达基因的表达模式与RNA-seq结果基本一致。该研究初步解析了2个品种灰毡毛忍冬黄酮类成分差异积累的转录调控机制,为进一步阐明其中关键酶基因及相应转录因子对灰毡毛忍冬黄酮类成分积累的调控作用奠定基础。

关键词：灰毡毛忍冬黄酮类化合物转录代谢组学联合分析转录因子调控机制

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不同盆栽人参土壤酚酸含量及酶活性变化

吉林农业大学学报 2024年第1期46卷 98-106页

作者：战宇张连学孟祥茹王恩鹏王欢唐敏李琼陈长宝长春中医药大学吉林省人参科学研究院长春130117 吉林农业大学中药材学院长春130118

人参连作障碍是制约人参产业可持续发展的重大产业问题,至今未能有效解决。酚酸类化合物是导致人参连作障碍的主要化感物质之一,以未栽参的新林地土壤为对照(ck),研究老参地(L_(1))、新林土(X_(1))、根际土(G_(1))、新林土拌腐烂茎叶(X_... 详细信息

人参连作障碍是制约人参产业可持续发展的重大产业问题,至今未能有效解决。酚酸类化合物是导致人参连作障碍的主要化感物质之一,以未栽参的新林地土壤为对照(ck),研究老参地(L_(1))、新林土(X_(1))、根际土(G_(1))、新林土拌腐烂茎叶(X_(2))和根际土拌腐烂茎叶(G_(2))5个处理不同盆栽人参土壤在不同生长时期的酚酸含量及酶活性变化,为解析人参连作障碍产生原因提供理论依据。采用HPLC检测和酶活性测定法分析不同盆栽人参土壤在不同生长时期的酚酸含量和土壤酶活性变化,并对不同盆栽人参地上和地下生长情况进行监测。研究发现:4种酚酸类化合物均在不同盆栽人参土壤中检出,含量由高到低为苯甲酸、水杨酸、肉桂酸、没食子酸;随栽培时间延长,土壤中酸酚含量呈递增趋势。不同盆栽人参土壤酶活性差异显著,各组蔗糖酶活性均呈先上升后下降趋势;L_(1),X_(2)组漆酶活性呈上升趋势,X_(1),G_(1)组呈下降趋势,G_(2)组呈先下降后上升趋势;L_(1),X_(2),X_(1)组过氧化氢酶活性呈先下降后上升趋势,G_(1),G_(2)组呈上升趋势;L_(1),X_(1),G_(1)组酸性磷酸酶活性呈上升趋势,X_(2),G_(2)组呈先上升后下降趋势;G_(1)组脲酶活性呈下降趋势,L_(1),X_(1),G_(1),X_(2)组呈先下降后上升趋势。X_(1)组地上及地下根部长势最好且无病斑,G_(2)组地上、地下生长均受抑制,且X_(1)组根质量增长率显著高于L_(1),X_(2),G_(1),G_(2)组。因此可推测,土壤酶活性与根系分泌物、植株残体脱落和病原微生物代谢产物等密切相关,可能会通过影响土壤中酚酸类物质积累来影响土壤酶活性,进而影响人参对养分的吸收利用,最终导致人参连栽障碍发生。

关键词：人参连作障碍酚酸酶活性

贵州省主要药用植物常见有害生物种类及田间危害情况初报

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耕作与栽培 2004年第5期24卷 33-36页

作者：夏忠敏张忠民莫雪梅李大庆颜兴贵邓治乾肖卫平龙光泉夏福成贵州省植保植检站贵阳550001 贵州省中药材无害化治理项目组

通过对贵州省药用植物种植区的调查,对危害情况有了进一步了解,贵州省药用植物主要发生的有害生物种类及田间消长规律,为推广无害化治理技术,抓住关键时期及时进行用药提供了科学依据。

关键词：贵州药用植物生物种类田间危害田间消长规律

京大戟醋制前后乙酸乙酯部位毒性与血清代谢组学差异研究

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中国中药杂志 2024年

作者：邵霞张丽曹雨诞南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心

研究京大戟醋制前后乙酸乙酯部位的毒性差异，并借助非靶向代谢组学探究其醋制减毒的作用机制。采用UFLC-Q-TOF-MS对京大戟醋制前后乙酸乙酯部位的萜类成分变化进行研究。正常大鼠灌胃给予生、醋京大戟乙酸乙酯部位，通过组织病理形态... 详细信息

研究京大戟醋制前后乙酸乙酯部位的毒性差异，并借助非靶向代谢组学探究其醋制减毒的作用机制。采用UFLC-Q-TOF-MS对京大戟醋制前后乙酸乙酯部位的萜类成分变化进行研究。正常大鼠灌胃给予生、醋京大戟乙酸乙酯部位，通过组织病理形态学观察，血清肝肾功能、氧化损伤、炎性损伤指标和细胞凋亡因子检测，评价京大戟醋制前后乙酸乙酯部位的毒性差异。利用血清代谢组学技术，寻找内源性代谢物的变化，通过主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)，寻找与京大戟醋制减毒相关的差异代谢物及代谢通路。京大戟醋制后乙酸乙酯部位的萜类成分含量大幅降低。组织病理切片和各指标结果表明京大戟醋制前后乙酸乙酯部位均能诱导肝、胃、肠毒性，其相关毒性与氧化损伤、炎性损伤、细胞凋亡有关，醋制后乙酸乙酯部位毒性降低。血清代谢组学筛选了13个差异代谢物，得到了5条主要代谢通路；由PCA和PLS-DA得分图可知，京大戟醋制前后乙酸乙酯部位均可造成大鼠体内内源性代谢谱的紊乱，主要集中在脂质代谢、原发性胆汁酸生物合成、花生四烯酸代谢等方面，醋制能缓解上述代谢紊乱。由此可知，京大戟乙酸乙酯部位确有肝、胃、肠毒性，醋制后萜类成分含量降低致其毒性下降，其作用机制可能与减轻氧化损伤、炎性损伤、细胞凋亡和改善脂质代谢有关。

关键词：京大戟乙酸乙酯部位醋制毒性氧化损伤炎性损伤细胞凋亡血清代谢组学