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‘玛瑙红’樱桃胚败育观察及胚抢救技术体系的建立

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果树学报 2019年第5期36卷 663-670页

作者：邓彬洪怡田田张璐芳文晓鹏贵州大学农业生物工程研究院贵州大学生命科学学院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵阳550025

【目的】建立高效稳定的‘玛瑙红’樱桃胚抢救成苗技术。【方法】以‘玛瑙红’樱桃幼胚为材料,对不同发育时期的种胚进行解剖学观察和萌发实验,确定种胚败育时期和最佳胚抢救时间,设置不同植物生长调节剂配比研究其对种胚萌发及幼苗增... 详细信息

【目的】建立高效稳定的‘玛瑙红’樱桃胚抢救成苗技术。【方法】以‘玛瑙红’樱桃幼胚为材料,对不同发育时期的种胚进行解剖学观察和萌发实验,确定种胚败育时期和最佳胚抢救时间,设置不同植物生长调节剂配比研究其对种胚萌发及幼苗增殖的影响,确定最佳培养基配方。【结果】幼胚大规模败育发生在盛花期后30 d,最佳胚抢救时间为盛花期后25 d。胚萌发最佳培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)TDZ+0.5 mg·L^(-1)6-BA+1.0 mg·L^(-1)IBA,萌发率达70%。幼苗增殖最佳培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)TDZ+0.1 mg·L^(-1)6-BA+1.5 mg·L^(-1)IBA+0.5 mg·L^(-1)GA_3,增殖系数为5.45。幼苗经诱导生根后移栽至营养土中,成活率达90%。【结论】建立了‘玛瑙红’樱桃胚抢救技术体系,为‘玛瑙红’樱桃及其他核果类果树有效利用胚抢救技术解决杂交育种问题提供参考。

关键词： '玛瑙红’樱桃幼胚败育胚抢救植物生长调节剂

金荞麦茎叶总黄酮提取方法优化及其抗氧化活性

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草业科学 2023年第8期40卷 2162-2170页

作者：孙光张蓉刘凤丹陈光吉李世歌尚以顺宋莉班骞钟理龙忠富王茜李小冬贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院/山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室/贵州省农业生物工程重点实验室贵州贵阳550025 贵州省农业科学院草业研究所贵州贵阳550006 贵州鼎芯农牧科技有限公司贵州贵阳550006

本研究采用超声波辅助双水相萃取技术对金荞麦(Fagopyrum dibotrys)中黄酮类化合物的提取方法进行优化,并对所提取的活性物质进行抗氧化特性研究。首先以硫酸铵质量分数、液料比、超声时间为试验因子开展多因子响应面试验,以提取物中总... 详细信息

本研究采用超声波辅助双水相萃取技术对金荞麦(Fagopyrum dibotrys)中黄酮类化合物的提取方法进行优化,并对所提取的活性物质进行抗氧化特性研究。首先以硫酸铵质量分数、液料比、超声时间为试验因子开展多因子响应面试验,以提取物中总黄酮含量为评价指标,优化提取工艺。再以DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)、OH−(羟基)、O_(2)^(−)(超氧阴离子)自由基清除率为指标,对金荞麦提取物的抗氧化能力进行评价。结果显示,金荞麦总黄酮最优制备条件为硫酸铵质量分数15%、液料比38꞉1、超声时间47 min,提取到的总黄酮含量为78.52 mg·g^(−1)。金荞麦提取物对DPPH、OH^(−)、O_(2)^(−)自由基清除率的IC50值分别为0.1182、4.0710、25.3800 mg·mL^(−1)。

关键词：金荞麦黄酮类化合物双水相萃取响应面法抗氧化

贵州荞麦重要种质的遗传多样性分析及分子身份证构建

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华中农业大学学报 2024年第3期43卷 148-157页

作者：冷宇鑫闵义付阳云周奎何颖文晓鹏贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院/山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵阳550025

为精准鉴定贵州荞麦种质资源,采用SSR分子标记对60份荞麦种质进行遗传多样性分析,构建DNA分子身份证数据库。结果显示,从100对SSR引物中筛选出16对稳定性好、多态性丰富的引物,在60份供试种质中共扩增出174个多态性条带;Shannon’s信息... 详细信息

为精准鉴定贵州荞麦种质资源,采用SSR分子标记对60份荞麦种质进行遗传多样性分析,构建DNA分子身份证数据库。结果显示,从100对SSR引物中筛选出16对稳定性好、多态性丰富的引物,在60份供试种质中共扩增出174个多态性条带;Shannon’s信息指数、Nei’s多样性指数、多态信息指数均值分别为0.337、0.206、0.693,引物的多态性较好,能有效揭示60份荞麦种质的遗传多样性;在Dice遗传相似系数为0.374时,所有供试材料可聚为A、B、C三组;当Dice遗传相似系数为0.484时,将苦荞组(A组)更细分为A1、A2两个小组。采用毛细管电泳及8%的聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳对SSR标记扩增产物进行双验证,2种方法的聚类结果一致。结果表明,本研究开发的高效性SSR分子标记能够有效地鉴定贵州荞麦重要种质的遗传多样性且用于构建分子身份证。

关键词：荞麦 SSR标记毛细管电泳遗传多样性 DNA分子身份证

贵州地方粳稻‘黎平杂边禾’矮秆小粒突变体dss1鉴定与基因定位

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植物生理学报 2018年第7期54卷 1186-1194页

作者：曾晓芳黄仁权陈锡李岩李建容赵德刚贵州大学农业生物工程研究院/生命科学学院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵州省农业生物工程重点实验室贵阳550025 贵州省农业科学院国家DUS中心贵州分中心贵阳550006

本研究从贵州地方粳稻(Oryza sativa ***)品种‘黎平杂边禾’甲基磺酸乙酯(EMS)突变体库中筛选获得一份能稳定遗传的矮秆小粒突变体,暂命名为dss1(dwarf and small seed 1)。与野生型相比,dss1表现为植株矮化、株型直立、叶色深绿、籽... 详细信息

本研究从贵州地方粳稻(Oryza sativa ***)品种‘黎平杂边禾’甲基磺酸乙酯(EMS)突变体库中筛选获得一份能稳定遗传的矮秆小粒突变体,暂命名为dss1(dwarf and small seed 1)。与野生型相比,dss1表现为植株矮化、株型直立、叶色深绿、籽粒变小、第二节间严重缩短、穗长增加等典型油菜素内酯(BR)缺陷突变体的性状。显微观察结果表明dss1叶鞘表皮细胞的长度变短,可能是突变体第二叶鞘长度比野生型短的原因。对突变体的暗形态建成与BR敏感性研究表明,黑暗条件下突变体表现为去黄化表型,对外源BR敏感。遗传特性分析证明dss1突变体由一个隐性单基因位点控制。利用Mut Map技术将dss1基因定位于3号染色体上,筛选获得一个候选基因,测序结果表明,dss1候选基因为BR合成途径关键酶基因Os DWARF,dss1是由于该基因第5个外显子上第335位的氨基酸由苏氨酸(ACT)突变为异亮氨酸(ATT)所引起的。定位得到的矮化小粒基因DSS1为一个新的Os DWARF等位基因。

关键词：水稻矮化小粒突变体dss1 基因定位 OsDWARF基因油菜素内酯

转玉米ZmSDD1基因烟草降低气孔密度提高抗旱性

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植物生理学报 2014年第12期50卷 1889-1898页

作者：刘延波项阳秦利军赵德刚贵州大学农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室绿色农药与农业生物工程国家重点实验室培育基地生命科学学院基因工程实验室贵州550025

为了培育抗旱的烟草新品种并研究玉米SDD1基因(Zm SDD1)的功能,从玉米中同源克隆到Zm SDD1,构建了含有玉米Ubiquitin启动子驱动的Zm SDD1基因的植物表达载体p GM626-Ubi-Zm SDD1-ABt,并利用叶盘转化法遗传转化烟草,筛选获得转基因植株... 详细信息

为了培育抗旱的烟草新品种并研究玉米SDD1基因(Zm SDD1)的功能,从玉米中同源克隆到Zm SDD1,构建了含有玉米Ubiquitin启动子驱动的Zm SDD1基因的植物表达载体p GM626-Ubi-Zm SDD1-ABt,并利用叶盘转化法遗传转化烟草,筛选获得转基因植株。经反复干旱处理发现,转Ubiquitin::Zm SDD1基因烟草存活率比野生型高80%,转基因植株中PRO含量以及POD和SOD活性均显著高于野生型烟草植株,MDA含量则低于野生型植株。转Zm SDD1基因烟草植株和野生型植株的气孔导度、细胞间二氧化碳浓度和蒸腾速率在干旱后都有所下降,但转基因植株的净光合速率极显著高于野生型。转Ubiquitin::Zm SDD1烟草植株叶片表面气孔数较野生型相比减少50%。Real-time PCR结果显示转基因烟草和野生型相比负调控气孔密度的Zm SDD1基因和MAPK3基因表达量均极显著上调,正调控气孔密度的FAMA基因极显著下调。结果说明,转Zm SDD1植株比野生型植株抗旱的原因是由于Zm SDD1基因负调控了气孔发育相关基因的表达从而使气孔密度降低,减少蒸腾作用,减少水分散失从而提高抗旱性。

关键词：烟草气孔密度 ZmSDD1 抗旱

橘绿木霉GF-11发酵刺梨渣的响应面法优化

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中国生物防治学报 2024年第2期40卷 448-457页

作者：杨昌发唐彩艳孙冰张锐费正林葛永怡贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院/山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵阳550025

木霉具有抑制病原菌、促进植物生长和改善土壤营养等作用。刺梨渣是刺梨榨汁后的废弃物,具有极高的利用价值。本文拟采用刺梨渣为原料,麸皮为辅料进行固体发酵,以橘绿木霉GF-11的分生孢子数量为筛选指标,通过Plackett-Burman试验设计及B... 详细信息

木霉具有抑制病原菌、促进植物生长和改善土壤营养等作用。刺梨渣是刺梨榨汁后的废弃物,具有极高的利用价值。本文拟采用刺梨渣为原料,麸皮为辅料进行固体发酵,以橘绿木霉GF-11的分生孢子数量为筛选指标,通过Plackett-Burman试验设计及Box-Behnken设计-响应曲面法(responsesurface methodology,RSM)对影响发酵刺梨渣的条件进行优化。结果表明,培养基配方中对橘绿木霉GF-11产孢影响最显著的3个主要因素麸皮占比、接种量、发酵天数。优化后的发酵培养条件为麸皮占比61%、接种量10.48%、硫酸锌0.5%、含水率250%、发酵天数10d。在此优化条件下发酵获得橘绿木霉菌株GF-11的分生孢子产量为2.32×10^(10)CFU/g。该研究为刺梨渣发酵提供了合适的工艺条件,为减少刺梨渣污染环境及其有效利用提供了基础,也为生产高质量生物有机肥提供了新的途径。

关键词：橘绿木霉固体发酵响应面法刺梨渣

百脉根TALE转录因子家族的鉴定与生物信息学分析

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植物遗传资源学报 2019年第2期20卷 466-475页

作者：丘日光张天缘杨仕梅宋莉赵德刚贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院/山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室/贵州省农业生物工程重点实验室贵阳550025 贵州省农业科学院贵阳550006

三胺酸环延伸(TALE)蛋白是一类在植物生长发育过程中调控分生组织分化的转录因子。本研究通过生物信息学手段从豆科模式植物百脉根(Lotus japonicus(Regel)***)全基因组中筛选出分布于6条染色体上的40条TALE家族基因,并对其保守结构域... 详细信息

三胺酸环延伸(TALE)蛋白是一类在植物生长发育过程中调控分生组织分化的转录因子。本研究通过生物信息学手段从豆科模式植物百脉根(Lotus japonicus(Regel)***)全基因组中筛选出分布于6条染色体上的40条TALE家族基因,并对其保守结构域、基因结构、系统进化、在染色体上的分布、理化性质以及部分典型基因的组织表达差异等进行分析。根据结构域不同可将百脉根TALE家族分为BELL和KNOX两个亚族;百脉根TALE家族在进化上较为保守,分化上与大豆存在较大差异;该家族基因有外显子4～6个,氨基酸序列长度在271～792之间,家族成员蛋白均为弱酸性蛋白。Realtime PCR分析表明该家族基因表达与motif元件数之间存在相关性;BELL亚族主要在顶芽表达,KNOX亚族则主要在根组织中表达。研究结果为进一步克隆百脉根TALE基因和分析其功能奠定基础。

关键词：百脉根 TALE转录因子家族生物信息学系统进化基因表达

花溪盾孢囊霉:一个发现于中国贵阳的丛枝菌根真菌新种

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菌物学报 2023年第8期42卷 1661-1672页

作者：陈德瑶龙春丽何荣健董芮豪江龙贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院、山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室贵州贵阳550025 铜仁职业技术学院贵州铜仁554300

本研究从贵阳市花溪区的金佛山方竹根际土壤中分离得到盾孢囊霉属的一个新物种:花溪盾孢囊霉。孢子透明至近透明,大小为187–361×210–378μm,产孢细胞为浅黄色至淡黄棕色;发芽盾室透明至淡黄棕色,具有4–8个裂片;孢子壁有3层:3层外壁... 详细信息

本研究从贵阳市花溪区的金佛山方竹根际土壤中分离得到盾孢囊霉属的一个新物种:花溪盾孢囊霉。孢子透明至近透明,大小为187–361×210–378μm,产孢细胞为浅黄色至淡黄棕色;发芽盾室透明至淡黄棕色,具有4–8个裂片;孢子壁有3层:3层外壁层(OWL1-3),2层中壁层(MWL1-2)和3层内壁层(IWL1-3),OWL2与IWL3在Melzer’s试剂中呈深粉色到亮红棕色。基于核rDNA序列[覆盖部分SSU(small subunit)、整个ITS(internal transcribed spacer)和部分LSU(large subunit)区段;SSU-ITS-LSU]的系统发育分析表明,该种位于盾孢囊霉属,且形成独立分支。本研究对该种进行了详细的形态描述和特征图示,并讨论了与其近缘种的鉴别特征。

关键词：丛枝菌根真菌形态学 SSU-ITS-LSU 分类

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杜仲种子人工老化对活力的影响

植物生理学报 2022年第10期58卷 1890-1898页

作者：张娟李悦欣赵德刚贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵阳550025 贵州省农业科学院贵州省农业生物技术重点实验室植物保育技术应用工程研究中心贵阳550006

杜仲(Eucommia ulmoides)是杜仲科杜仲属植物,为第三纪孑遗树种,近缘种已灭绝。杜仲种子采收以后活力会迅速下降。为探究其原因,本研究以‘华仲15号’杜仲种子为材料,采用高温(40℃)高湿(相对湿度95%)人工老化处理,分析老化过程中杜仲... 详细信息

杜仲(Eucommia ulmoides)是杜仲科杜仲属植物,为第三纪孑遗树种,近缘种已灭绝。杜仲种子采收以后活力会迅速下降。为探究其原因,本研究以‘华仲15号’杜仲种子为材料,采用高温(40℃)高湿(相对湿度95%)人工老化处理,分析老化过程中杜仲种子生理生化变化及膜结构相关基因表达特征,发现随人工老化时间增加,种子活力不断下降,相对电导率及丙二醛(MDA)含量上升,可溶性蛋白和可溶性糖含量均下降,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性降低,膜结构相关基因EuPLD、Eu LOX和Eu LEA表达水平上调。结果说明杜仲种子人工老化过程中活力降低与种子膜损伤及膜结构相关基因表达水平变化有关。研究结果为判断杜仲种子老化程度以及研究延缓种子老化措施提供理论基础。

关键词：杜仲人工老化种子活力老化生理膜结构相关基因