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薯蓣丸联合依维莫司对TGF-β1诱导三阴性乳腺癌细胞上皮间质转化的抑制作用

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中成药 2024年

作者：骆小珊谢甦冯豆豆蒙雁云赵晶哲谢青凌湘力贵州医科大学贵州医科大学附属医院

目的探究薯蓣丸联合依维莫司抑制TGF-β1诱导三阴性乳腺癌细胞4T1、MDA-MB-231上皮间质转化的作用。方法分别将4T1、MDA-MB-231细胞分为空白组、诱导组，诱导组用TGF-β1细胞因子干预使细胞发生上皮间质转化；后续实验分为模型组、薯蓣... 详细信息

目的探究薯蓣丸联合依维莫司抑制TGF-β1诱导三阴性乳腺癌细胞4T1、MDA-MB-231上皮间质转化的作用。方法分别将4T1、MDA-MB-231细胞分为空白组、诱导组，诱导组用TGF-β1细胞因子干预使细胞发生上皮间质转化；后续实验分为模型组、薯蓣丸组、依维莫司组、薯蓣丸联合依维莫司组，CCK8法、平板克隆法、细胞划痕实验、Transewll实验检测细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力，Westernblot法检测细胞上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP9、MMP2及PTEN、PI3K、Akt、mTOR蛋白表达。结果与空白组比较，诱导组4T1、MDA-MB-231细胞形态由上皮样转化为间质样，E-cadherin蛋白表达降低（P＜0.01），N-cadherin、Vimentin蛋白表达升高（P＜0.05）；与模型组比较，各给药组2种细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力降低（P＜0.01），PTEN、E-cadherin蛋白表达升高（P＜0.05，P＜0.01），PI3K、Akt、mTOR、N-cadherin、Vimentin、MMP9、MMP2蛋白表达降低（P＜0.05，P＜0.01），以薯蓣丸联合依维莫司组更明显（P＜0.05，P＜0.01）。结论薯蓣丸联合依维莫司能抑制TGF-β1诱导三阴性乳腺癌细胞上皮间质转化，效果优于药物单用，其机制可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路相关。

关键词：薯蓣丸依维莫司三阴性乳腺癌 TGF-β1 上皮间质转化 PI3K/Akt/mTOR信号通路

6-姜烯酚通过调控微小RNA-26a-5p/DAPK1减轻脑缺血/再灌注损伤的机制研究

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中华危重病急救医学 2024年第6期36卷 616-623页

作者：李世欣饶欧阳朱宁周航向陶浚泠李叶红刘颖贵州医科大学贵阳贵州医科大学附属医院重症医学科贵阳

目的探讨6-姜烯酚(6-SH)是否通过促进微小RNA-26a-5p(miR-26a-5p)表达并抑制死亡相关蛋白激酶1(DAPK1), 减轻氧糖剥夺/复氧(OGD/R)神经细胞自噬及神经细胞钙超载, 并探究其潜在机制。方法取体外培养的对数生长期小鼠海马神经元HT22细胞,... 详细信息

目的探讨6-姜烯酚(6-SH)是否通过促进微小RNA-26a-5p(miR-26a-5p)表达并抑制死亡相关蛋白激酶1(DAPK1), 减轻氧糖剥夺/复氧(OGD/R)神经细胞自噬及神经细胞钙超载, 并探究其潜在机制。方法取体外培养的对数生长期小鼠海马神经元HT22细胞, 用细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活性, 寻找Na2S2O4的最佳制模浓度。将HT22细胞分为空白对照组(NC组)、OGD/R组(无糖培养基+10 mmol/L Na2S2O4处理1.5 h后换正常培养基培养4 h)、6-SH干预组(OGD后用10 μmol/L 6-SH培养4 h)、阴性对照抑制剂预处理组(阴性对照抑制剂转染48 h后行OGD, 再用6-SH培养4 h)、miR-26a-5p抑制剂预处理组(miR-26a-5p抑制剂转染48 h后行OGD, 再用6-SH培养4 h)。采用CCK-8法检测各组细胞活性;透射电镜下观察细胞超微结构;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测DAPK1、miR-26a-5p基因表达;分子对接验证6-SH与miR-26a-5p的相互作用;双荧光素酶验证DAPK1与miR-26a-5p的靶向关系;流式细胞仪测定细胞内Ca2+水平;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测磷酸化谷氨酸受体2B(p-NMDAR2B)Ser1303、DAPK1、自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p-DAPK1 Ser308蛋白表达;免疫荧光法检测LC3和Beclin1的表达。结果 CCK-8法检测结果显示, 6-SH干预组细胞活性较OGD/R组明显升高, miR-26a-5p抑制剂预处理组细胞活性较6-SH干预组明显降低。透射电镜下显示, 6-SH干预组自噬小体较OGD/R组明显减少, miR-26a-5p抑制剂预处理组自噬小体较6-SH干预组明显增多。RT-qPCR检测结果显示, 与OGD/R组比较, 6-SH干预组miR-26a-5p表达明显上调, DAPK1 mRNA表达明显下调;与6-SH干预组比较, miR-26a-5p抑制剂预处理组miR-26a-5p表达明显下调, DAPK1 mRNA表达明显上调。分子对接验证6-SH与miR-26a-5p可互相作用。双荧光素酶报告基因检测显示, 与阴性对照组比较, mmu-miR-26a-5p显著下调m-DAPK1-3UTR-WT的荧光素酶表达, 说明两者之间存在结合作用。流式细胞仪检测结果显示, 与OGD/R组比较, 6-SH干预组细胞内Ca2+水平明显降低;与6-SH干预组比较, miR-26a-5p抑制剂预处理组Ca2+水平明显升高。Western blotting检测结果显示, 与OGD/R组比较, 6-SH干预组p-NMDAR2B Ser1303、DAPK1、Beclin1、LC3蛋白表达均明显降低(p-NMDAR2B Ser1303/β-actin:2.34±0.27比4.78±0.39, DAPK1/β-actin:1.40±0.13比2.37±0.21, Beclin1/β-actin:2.61±0.32比4.32±0.29, LC3/β-actin:2.52±0.45比5.09±0.18, 均P<0.05), p-DAPK1 Ser308蛋白表达明显升高(p-DAPK1 Ser308/β-actin:0.66±0.09比0.40±0.02, P<0.05);与6-SH干预组比较, miR-26a-5p抑制剂预处理组p-NMDAR2B Ser1303、DAPK1、Beclin1、LC3蛋白表达明显升高(p-NMDAR2B Ser1303/β-actin:4.08±0.14比2.34±0.27, DAPK1/β-actin:1.96±0.15比1.40±0.13, Beclin1/β-actin:3.92±0.31比2.61±0.32, LC3/β-actin:4.33±0.33比2.52±0.45, 均P<0.05), p-DAPK1 Ser308蛋白表达明显降低(p-DAPK1 Ser308/β-actin:0.33±0.12比0.66±0.09, P<0.05);免疫荧光法检测显示, 与OGD/R组比较, 6-SH干预组LC3、Beclin1荧光强度明显降低;与6-SH干预组比较, miR-26a-5p抑制剂预处理组LC3、Beclin1荧光强度明显升高。结论 6-SH可通过调控miR-26a-5p/DAPK1减轻细胞自噬及钙超载, 从而减轻神经细胞损伤。

关键词：自噬脑缺血/再灌注损伤钙超载 6-姜烯酚微小RNA-26a-5p/死亡相关蛋白激酶1

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成人重度烧伤患者肠内肠外营养的证据总结

中华护理杂志 2024年第9期59卷 1106-1113页

作者：谢玉生黄蓉蓉赵雪马蕾胡雁杨倩王乾沙明玥贵州医科大学护理学院贵阳市550025 贵州医科大学附属医院烧伤整形科贵州医科大学附属医院护理部贵州医科大学附属医院心血管内科复旦大学护理学院

目的系统检索并整合成人重度烧伤患者肠内肠外营养的证据。方法由2名经过系统学习循证护理学的研究生检索国内外指南网、相关机构网站及数据库内有关成人重度烧伤患者肠内肠外营养的临床决策、推荐实践、指南、专家共识、系统评价、证... 详细信息

目的系统检索并整合成人重度烧伤患者肠内肠外营养的证据。方法由2名经过系统学习循证护理学的研究生检索国内外指南网、相关机构网站及数据库内有关成人重度烧伤患者肠内肠外营养的临床决策、推荐实践、指南、专家共识、系统评价、证据总结等文献,检索时限为建库至2023年4月。由2名具有硕士学历且经过复旦大学循证培训的研究人员采用评价工具对文献进行方法学质量评价,并根据主题对证据进行提取与汇总。结果纳入28篇文献,包括临床决策1篇、指南9篇、专家共识3篇、系统评价9篇、证据总结6篇,从营养风险筛查和评估、能量需求计算、营养支持时机与途径、营养素摄入、营养支持监测及效果评价6个方面总结了20条证据。结论该研究总结的成人重度烧伤患者肠内肠外营养的证据较为全面、科学,建议临床应用时,根据证据的促进及阻碍因素等进行针对性的筛选,科学开展成人重度烧伤患者的营养支持。

关键词：烧伤营养支持肠内营养肠外营养循证护理学

穴位注射通过p38丝裂原活化蛋白激酶通路抑制变应性鼻炎大鼠黏蛋白异常分泌及鼻黏膜炎性反应的机制研究

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针刺研究 2024年

作者：周芋伶王钰嘉张倩侯珣瑞周科安李丽红贵州医科大学附属医院

目的：观察穴位注射对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、磷酸化（p）-p38 MAPK、黏蛋白5亚型AC（MUC5AC）及血清相关炎性因子的影响，探讨穴位注射改善变应性鼻炎大鼠鼻黏膜炎性反应的作用机制。方法：SD大鼠随机分... 详细信息

目的：观察穴位注射对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、磷酸化（p）-p38 MAPK、黏蛋白5亚型AC（MUC5AC）及血清相关炎性因子的影响，探讨穴位注射改善变应性鼻炎大鼠鼻黏膜炎性反应的作用机制。方法：SD大鼠随机分为正常组、模型组、穴位注射组和非经非穴组，每组7只，采用卵清蛋白致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型，双侧“迎香”和“印堂”穴位注射地塞米松和１%利多卡因混合液0.05 mL进行干预，非经非穴组于非经非穴点注射作对照，隔3 d治疗一次，共4次。叠加量化记分法评估大鼠鼻部过敏症状；HE染色法观察鼻黏膜病理形态学变化；ELISA法检测血清组胺（HA）、白细胞介素（IL）-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量；实时荧光定量PCR法检测鼻黏膜MUC5AC mRNA的表达；Western blot法检测鼻黏膜p38 MAPK、p-p38 MAPK、MUC5AC蛋白的表达。结果：与正常组比较，模型组大鼠鼻痒、喷嚏次数明显增多（P＜0.01），血清HA、IL-6、IL-8、TNF-α含量，鼻黏膜p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白，MUC5AC mRNA及蛋白表达均明显升高（P＜0.01）。与模型组和非经非穴组比较，穴位注射组大鼠鼻痒、喷嚏次数明显减少（P＜0.01），血清HA、IL-6、IL-8、TNF-α含量及鼻黏膜p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白，MUC5AC mRNA及蛋白表达均明显降低（P＜0.01，P＜0.05）。结论：穴位注射可减少变应性鼻炎大鼠喷嚏、挠鼻次数和MUC5AC的分泌，减轻鼻黏膜炎性反应，其作用机制可能与穴位注射抑制p38 MAPK磷酸化从而减少炎性因子释放有关。

关键词：变应性鼻炎穴位注射 p38丝裂原活化蛋白激酶炎性反应细胞因子黏蛋白5亚型AC

银杏叶提取物激活Nrf2/ARE通路改善慢性间歇性低氧诱导大鼠血管内皮功能障碍

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中国药理学通报 2024年

作者：司胜勇李虹漫缪思斯韩肖李治菁韦朝俊刘大男贵州医科大学附属医院高血压科

目的探讨银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract，GBE）对慢性间歇性低氧（chronic intermittent hypoxia，CIH）诱导大鼠血管内皮功能障碍的影响及相关机制。方法构建CIH大鼠模型，并用50、100 mg·kg-1的GBE灌胃，检测各组大鼠尾动... 详细信息

目的探讨银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract，GBE）对慢性间歇性低氧（chronic intermittent hypoxia，CIH）诱导大鼠血管内皮功能障碍的影响及相关机制。方法构建CIH大鼠模型，并用50、100 mg·kg-1的GBE灌胃，检测各组大鼠尾动脉收缩压（systolic blood pressure，SBP）；HE染色检测主动脉组织形态；DAF-FM DA染色和硝酸还原酶法检测NO水平；ELISA法检测血清ET-1、TNF-α、IL-6水平；DHE染色检测主动脉组织活性氧水平；试剂盒检测血清MDA、SOD、GSH-Px水平；Western blot检测主动脉组织VCAM-1、ICAM-1、细胞核Nrf2、HO-1、NQO1水平。结果 GBE明显降低CIH大鼠的尾动脉SBP、ET-1、活性氧、MDA、VCAM-1、ICAM-1、TNF-α、IL-6水平，明显增加NO、SOD、GSH-Px、细胞核Nrf2、HO-1、NQO1水平。GBE明显改善CIH大鼠主动脉组织形态学。结论 GBE可改善CIH模型大鼠血管内皮功能障碍，降低血压，其机制可能与激活Nrf2/ARE通路、抑制氧化应激与炎症反应有关。

关键词：银杏叶提取物 Nrf2/ARE通路慢性间歇性低氧血管内皮功能障碍高血压氧化应激

银杏叶提取物激活Nrf2/ARE通路改善慢性间歇性低氧诱导大鼠血管内皮功能障碍

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中国药理学通报 2024年 1837-1844页

作者：司胜勇李虹漫缪思斯韩肖李治菁韦朝俊刘大男贵州医科大学附属医院高血压科

目的探讨银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract,GBE）对慢性间歇性低氧（chronic intermittent hypoxia,CIH）诱导大鼠血管内皮功能障碍的影响及相关机制。方法构建CIH大鼠模型,并用50、100 mg·kg-1的GBE灌胃,检测各组大鼠尾动脉收... 详细信息

目的探讨银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract,GBE）对慢性间歇性低氧（chronic intermittent hypoxia,CIH）诱导大鼠血管内皮功能障碍的影响及相关机制。方法构建CIH大鼠模型,并用50、100 mg·kg-1的GBE灌胃,检测各组大鼠尾动脉收缩压（systolic blood pressure,SBP）;HE染色检测主动脉组织形态;DAF-FM DA染色和硝酸还原酶法检测NO水平;ELISA法检测血清ET-1、TNF-α、IL-6水平;DHE染色检测主动脉组织活性氧水平;试剂盒检测血清MDA、SOD、GSH-Px水平;Western blot检测主动脉组织VCAM-1、ICAM-1、细胞核Nrf2、HO-1、NQO1水平。结果GBE明显降低CIH大鼠的尾动脉SBP、ET-1、活性氧、MDA、VCAM-1、ICAM-1、TNF-α、IL-6水平,明显增加NO、SOD、GSH-Px、细胞核Nrf2、HO-1、NQO1水平。GBE明显改善CIH大鼠主动脉组织形态学。结论 GBE可改善CIH模型大鼠血管内皮功能障碍,降低血压,其机制可能与激活Nrf2/ARE通路、抑制氧化应激与炎症反应有关。

关键词：银杏叶提取物 Nrf2/ARE通路慢性间歇性低氧血管内皮功能障碍高血压氧化应激

存在不同级别骶髂关节炎的强直性脊柱炎患者骶髂关节表观弥散系数与SPARCC评分的相关性

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中国医学影像技术 2024年

作者：张紫微王家维曾琪眭贺李语梁晨黄曌殊朱霞宋玲玲贵州医科大学附属医院影像科

目的观察存在不同级别骶髂关节炎的强直性脊柱炎（AS）患者骶髂关节表观弥散系数（ADC）与加拿大脊柱关节炎研究协会（SPARCC）评分的相关性。方法前瞻性对35例AS患者（AS组）和30名健康对照（HC组）行骶髂关节MR检查；判断AS组骶髂关... 详细信息

目的观察存在不同级别骶髂关节炎的强直性脊柱炎（AS）患者骶髂关节表观弥散系数（ADC）与加拿大脊柱关节炎研究协会（SPARCC）评分的相关性。方法前瞻性对35例AS患者（AS组）和30名健康对照（HC组）行骶髂关节MR检查；判断AS组骶髂关节炎分级和SPARCC评分，根据有无骶髂关节面下骨髓水肿（BMO）将其分为BMO亚组（n=19）与非BMO亚组（n=16），测量其骶髂关节ADC(ADC骶髂)；绘制受试者工作特征曲线，计算曲线下面积（AUC），分析ADC骶髂用于AS骶髂关节炎分级的效能；以Pearson相关分析观察不同骶髂关节炎分级AS患者ADC骶髂与SPARCC评分的相关性。结果BMO亚组、非BMO亚组ADC骶髂分别为（4.85±1.44）×10-4及（4.30±0.64）×10-4mm2/s，差异无统计学意义（P＞0.05）且均高于HC组[ADC为（3.32±1.36）×10-4mm2/s，P均＜0.05]。以ADC骶髂评估AS骶髂关节炎的敏感度分别为49.44%、51.94%、73.06%及60.50%，特异度分别为75.00%、78.92%、83.33%及66.67%，AUC分别为0.613、0.712、0.837及0.645。AS骶髂关节炎Ⅱ、Ⅲ级患者ADC骶髂分别与SPARCC评分呈中-高度正相关（r=0.580、0.933，P均＜0.05），而Ⅰ、Ⅳ级患者ADC骶髂与SPARCC评分无明显相关（P均＞0.05）。结论存在Ⅱ、Ⅲ级骶髂关节炎的AS患者的ADC骶髂与其SPARCC评分呈正相关；ADC骶髂可作为监测AS患者骶髂关节BMO的可靠定量参数。

关键词：脊柱炎,强直性骶髂关节磁共振成像前瞻性研究

单侧双通道脊柱内镜与单通道脊柱内镜下经椎间孔腰椎椎间融合术治疗单节段退行性腰椎管狭窄症伴腰椎滑脱的前瞻性对比研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第5期38卷 521-528页

作者：吴帝求舒涛卢黔威沈茂贵州医科大学临床医学院贵阳550004 贵州医科大学附属医院骨科贵阳550004

目的比较单侧双通道脊柱内镜下经椎间孔腰椎椎间融合术(unilateral biportal endoscopic transforaminal lumbar interbody fusion,UBE-TLIF)与单通道脊柱内镜下经椎间孔腰椎椎间融合术(endoscopic transforaminal lumbar interbody fusion,Endo-TLIF)对单节段退行性腰椎管狭窄症伴腰椎滑脱的治疗效果。方法纳入2019年11月—2023年5月收治且符合选择标准的81例单节段退行性腰椎管狭窄症伴腰椎滑脱患者,随机分为UBE-TLIF组(39例)和Endo-TLIF组(42例)。两组患者性别、年龄、身体质量指数、手术节段及术前腰、腿痛疼痛视觉模拟评分(VAS)、Oswestry功能障碍指数(ODI)、血清学指标肌酸激酶(creatine kinase,CK)和C反应蛋白(C reactive protein,CRP)水平等基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。记录并比较两组患者总失血量(total blood loss,TBL)、术中失血量、隐性失血量(hidden blood loss,HBL)、术后引流量、手术时间;比较两组术前1 d及术后1、3、5 d血清学指标CK、CRP水平,术前1 d及术后1 d、3个月、6个月、12个月腰、腿痛VAS评分、ODI及术后12个月椎间融合率。结果所有手术均顺利完成,无切口感染、血管神经损伤、硬膜外血肿、硬脑膜撕裂和术后截瘫等情况发生。UBE-TLIF组手术时间少于Endo-TLIF组,但术中失血量、TBL、HBL均多于Endo-TLIF组,差异均有统计学意义(P0.05)。UBE-TLIF组术后1、3 d CK水平及术后1、3、5 d CRP水平均高于Endo-TLIF组(P0.05)。两组患者均获随访12个月。两组术后各时间点腰、腿痛VAS评分及ODI均较术前显著改善(P0.05)。术后12个月两组椎间融合率比较差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论UBE-TLIF与Endo-TLIF均为治疗退行性腰椎管狭窄症伴腰椎滑脱的有效方法,但与Endo-TLIF相比,UBE-TLIF需在微创技术上进一步改进,以减少组织创伤与失血量。

关键词：腰椎管狭窄症腰椎滑脱单侧双通道脊柱内镜技术经椎间孔腰椎椎间融合术

单侧双通道脊柱内镜技术对侧椎板下入路治疗腰椎侧隐窝狭窄合并同节段椎间孔狭窄的早期疗效

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中国修复重建外科杂志 2024年第7期38卷 874-879页

作者：舒涛吴帝求滕飞张一鸣姚锋张森焱廖子龙沈茂贵州医科大学临床医学院贵阳550004 贵州医科大学附属医院骨科贵阳550004

目的探讨单侧双通道脊柱内镜技术(unilateral biportal endoscopy,UBE)对侧椎板下入路治疗腰椎侧隐窝狭窄合并同节段椎间孔狭窄的早期疗效。方法回顾分析2021年9月—2023年12月收治且符合选择标准的15例腰椎侧隐窝狭窄合并同节段椎间孔... 详细信息

目的探讨单侧双通道脊柱内镜技术(unilateral biportal endoscopy,UBE)对侧椎板下入路治疗腰椎侧隐窝狭窄合并同节段椎间孔狭窄的早期疗效。方法回顾分析2021年9月—2023年12月收治且符合选择标准的15例腰椎侧隐窝狭窄合并同节段椎间孔狭窄患者临床资料。男5例,女10例;年龄46~83岁,平均70.3岁。手术节段:L_(4)、512例,L_(5)、S_(1)3例。病程12~30个月,平均18.7个月。所有患者均接受UBE对侧椎板下入路手术治疗。记录手术时间、术中出血量、术后住院时间以及并发症发生情况。手术前后采用疼痛视觉模拟评分(VAS)评价腰腿痛程度,日本骨科协会(JOA)评分以及Oswestry功能障碍指数(ODI)评价腰部功能,术后6个月采用MacNab标准对患者疗效进行评价。术后复查MRI和CT,观察侧隐窝和椎间孔狭窄是否去除,测量椎管横截面积(cross-sectional area of the spinal canal,CSA-SC)、椎间孔横截面积(cross-sectional area of the intervertebral foramen,CSA-IVF)和小关节横截面积(cross-sectional area of the facet joint,CSA-FJ)。结果手术时间55~200 min,平均127.5 min;术中出血量10~50 mL,平均27.3 mL;术后住院时间3~12 d,平均6.8 d。患者均获随访,随访时间6~12个月,平均8.9个月。术后1 d及1、3、6个月腰、腿痛VAS评分以及ODI均较术前降低,且随时间延长呈逐渐下降趋势;JOA评分则呈逐渐增高趋势;上述指标各时间点间差异均有统计学意义(P<0.05)。术后6个月根据MacNab标准评估手术疗效:优10例、良4例、可1例,优良率93.33%。影像学复查示侧隐窝及椎间孔所受压迫已明显解除,最大程度保留患侧关节突关节;术后3 d CSA-SC及CSA-IVF较术前增加、CSA-FJ较术前减小,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论UBE对侧椎板下入路能在保留双侧关节突关节同时,对侧隐窝及同节段椎间孔进行充分减压,早期疗效较好,有望避免腰椎医源性不稳所致的融合手术,但中、远期疗效有待进一步随访明确。

关键词：单侧双通道脊柱内镜技术腰椎管狭窄症侧隐窝椎间孔对侧入路