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苗药验方四大血对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡和焦亡的影响

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南方医科大学学报 2021年第10期41卷 1473-1483页

作者：吴宁袁桃花姬进忠程瑶李明义梁玺孙见飞刘华吴昌学贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州医科大学临床医学院贵州贵阳550025 贵州医科大学医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

目的探讨苗药验方四大血(SX)对人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)凋亡和焦亡的影响。方法数据库检索RA及凋亡、焦亡相关靶蛋白;韦恩软件分析获得与RA相关凋亡及焦亡蛋白;RA-凋亡-焦亡靶蛋白互作(PPI)网络构建以获取RA中凋亡... 详细信息

目的探讨苗药验方四大血(SX)对人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)凋亡和焦亡的影响。方法数据库检索RA及凋亡、焦亡相关靶蛋白;韦恩软件分析获得与RA相关凋亡及焦亡蛋白;RA-凋亡-焦亡靶蛋白互作(PPI)网络构建以获取RA中凋亡和焦亡重要靶蛋白;Autodock vina软件进行分子对接验证SX主要活性成分与凋亡和焦亡相关蛋白的结合能力,并通过PyMoL软件进行可视化。人源第2代RA-FLSs MH7A细胞检测SX对MH7A细胞抑制率后分为空白对照组、雷公藤多甘片阳性对照组(TGT组,5 mg/L)及5、10、20、40 mg/L SX组,采用Wound-healing实验、Transwell法、ELISA法及Western blot法分别检测MH7A细胞的迁移和侵袭能力、凋亡和焦亡相关蛋白。结果获得RA相关凋亡靶蛋白9个、焦亡靶蛋白15个、RA-凋亡-焦亡重叠靶蛋白4个,SX主要活性成分与TNF-α、Fas、Bax等靶蛋白均具有较高亲和力;与空白组相比,给药处理24、48、72 h,随着SX浓度增加,对MH7A细胞抑制率增加(P<0.05),药物作用6、12、24 h,同一时间点内MH7A细胞划痕修复率随SX浓度增加而减少(P<0.05);药物作用24 h,20、40 mg/L SX组MH7A细胞侵袭个数减少(P<0.05);20、40 mg/L SX组和TGT组TNF-α、IL-1β、IL-18的表达水平均下降(P<0.05);20、40 mg/L SX组Bax/Bcl-2比值均增加(P<0.05);5、40 mg/L SX组Caspase-1表达量均减少(P<0.05);20、40 mg/L SX组Fas和FasL表达量均增加(P<0.05)。结论SX可诱导MH7A细胞凋亡、抑制其焦亡,减缓炎症反应,其作用机制可能与下调TNF-α、IL-1β、IL-18细胞因子水平,上调Bax、Fas、FasL,抑制Bcl-2和Caspase 1蛋白表达有关。

关键词：苗药方四大血类风湿性关节炎细胞凋亡细胞焦亡数据挖掘分子对接

混合式教学在《医用有机化学》实验教学中的应用初探

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南方医科大学学报 2021年

作者：钟曦唐黔生赵莲吴遵秋孙见飞刘红吴宁贵州医科大学基础医学院

本文结合医学院校《医用有机化学》实验课程的特点及现存实验教学问题和不足,提出以“绿色化学”为理念,依托智慧教育雨课堂、微课视频、虚拟仿真实验室等在线教育平台,以“综合设计性实验”为载体,培养大学生创新能力、实践能力的混合... 详细信息

本文结合医学院校《医用有机化学》实验课程的特点及现存实验教学问题和不足,提出以“绿色化学”为理念,依托智慧教育雨课堂、微课视频、虚拟仿真实验室等在线教育平台,以“综合设计性实验”为载体,培养大学生创新能力、实践能力的混合教学模式,旨在为《医用有机化学》实验教学改革提供参考。

关键词：混合式教学绿色化学综合设计性实验创新能力培养

去甲斑蝥素对环磷酰胺诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血功能的影响

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中国实验血液学杂志 2015年第3期23卷 826-831页

作者：郑丹沙启明王剑青刘正美万秀方王国川张亚莉杨国珍贵州医科大学医学检验学院贵州贵阳550004 安徽省六安市中医院检验科安徽六安237000 贵州医科大学附属医院生化科贵州贵阳550004

目的:探讨去甲斑蝥素(NCTD)对环磷酰胺(CTX)诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血的影响及机制。方法:采用CTX腹腔注射法复制白细胞减少症模型,以NCTD干预模型大鼠,全自动血细胞分析仪检测外周血白细胞(WBC)数量,骨髓组织作切片HE染色观... 详细信息

目的:探讨去甲斑蝥素(NCTD)对环磷酰胺(CTX)诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血的影响及机制。方法:采用CTX腹腔注射法复制白细胞减少症模型,以NCTD干预模型大鼠,全自动血细胞分析仪检测外周血白细胞(WBC)数量,骨髓组织作切片HE染色观察病理改变,流式细胞术检测骨髓细胞增殖周期、凋亡率,免疫组织化学法检测骨髓组织中凋亡相关蛋白BCL-2、BAX的表达。结果:NCTD干预白细胞减少症模型后,外周血WBC显著升高;模型大鼠骨髓骨髓组织结构破坏,造血细胞明显减少,NCTD干预后促进骨髓组织细胞结构显著恢复;NCTD可促使白细胞减少症模型大鼠骨髓细胞增殖及周期的转化,显著抑制CTX所诱导的骨髓细胞凋亡与坏死,上调抑凋亡蛋白BCL-2表达,下调促凋亡蛋白BAX的表达。结论:NCTD可刺激CTX诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血,促进外周血白细胞水平的恢复,其机制可能与NCTD调控骨髓细胞周期、抑制细胞凋亡等有关。

关键词：去甲斑蝥素环磷酰胺白细胞减少症造血细胞周期细胞凋亡

环磷酸腺苷反应元件结合蛋白在耐药性癫痫发病机制中的作用研究进展

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中华神经科杂志 2023年第1期56卷 111-117页

作者：李婧萱时黛伍国锋贵州医科大学临床医学院贵阳550001 贵州医科大学临床医学院贵州医科大学附属医院急诊科贵阳550001

现今研究发现在耐药性癫痫形成过程中, 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白可能通过抑制γ-氨基丁酸表达使癫痫反复发作, 造成神经元受损, 抗癫痫药物靶点效果减弱或失效, 继而使用抗癫痫药物不能控制癫痫发作的程度和频率, 癫痫患者呈持续发... 详细信息

现今研究发现在耐药性癫痫形成过程中, 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白可能通过抑制γ-氨基丁酸表达使癫痫反复发作, 造成神经元受损, 抗癫痫药物靶点效果减弱或失效, 继而使用抗癫痫药物不能控制癫痫发作的程度和频率, 癫痫患者呈持续发作状态, 形成耐药性癫痫。由此, 本文就环磷酸腺苷反应元件结合蛋白导致耐药性癫痫产生的机制进行综述, 为找到治疗耐药性癫痫患者的方法提供思路。

关键词：癫痫 γ氨基丁酸脑源性神经营养因子钙调蛋白结合蛋白质类环磷酸腺苷反应元件结合蛋白

大麻素受体-2激动剂AM1241对肝纤维化小鼠肝组织血小板衍生生长因子表达的影响

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中华肝脏病杂志 2017年第11期25卷 841-846页

作者：何萍吴雅峰杨唤英程明亮梁跃东王豫萍贵州医科大学医学检验学院贵阳550004 贵州医科大学附属医院贵阳550004 贵阳市公共卫生救治中心 550003

目的研究大麻素受体-2（CB2）激动剂AM1241对四氯化碳（CCl4）诱导的实验洼肝纤维化小鼠肝组织中血小板衍生生长因子（PDGF）、Ⅲ-型胶原（Col-Ⅲ）基因与蛋白表达的影响。方法38只8周龄C57BL／6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组、CB2... 详细信息

目的研究大麻素受体-2（CB2）激动剂AM1241对四氯化碳（CCl4）诱导的实验洼肝纤维化小鼠肝组织中血小板衍生生长因子（PDGF）、Ⅲ-型胶原（Col-Ⅲ）基因与蛋白表达的影响。方法38只8周龄C57BL／6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组、CB2受体激动剂（AM1241）3mg／kg组、9mg／kg组。除对照组外，其余组用30％CCl4复制肝纤维化模型，每周3次，5ml／kg，共16周，造模同时CB2受体激动剂干预组每天分别给予3mg／kg、9mg／kg AM1421，按实际体质量调整给药腹腔注射，对照组采用相同溶剂和方法。采用血清酶学检测血清天冬氨酸氨基转移酶（AST），采用组织切片苏木素-伊红染色观察小鼠肝脏炎症情况及纤维化程度，利用Real-time PCR和免疫组织化学法检测PDGF、Col-Ⅲ基因和蛋白在肝组织中的表达水平。多组间比较采用单因素方差分析。结果与对照组相比，模型组肝纤维化程度严重、血清AST均明显增高[（742±300．8）U／L对比（118．1±31．1）U／L]（P〈0．05），肝组织PDGF、Col-ⅢmRNA和蛋白的表达均明显增强（P〈0．05）；与模型组比较，A1241 3mg／kg组、9mg／kg组肝纤维化程度明显减轻，血清AST明显降低[分别为（116．6±13．68）U／L对比（742±300．8）U／L，（113．8±16．01）U／L对比（742±300．8）U／L]（P〈0．05），肝组织PDGF、Col-ⅢmRNA和蛋白的表达均有所降低护〈0．05）。结论CB2受体激动剂AM1241可抑制肝纤维化小鼠肝组织PDGF基因和蛋白的表达，使细胞外基质合成减少。

关键词：肝硬化受体,大麻素血小板衍生生长因子 Ⅲ型胶原 AM1241

甲状腺癌相关基因1在乳腺癌组织的表达及对乳腺癌细胞增殖凋亡的影响及机制

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中华实验外科杂志 2018年第8期35卷 1523-1525页

作者：包刚李兴潘卫黄建军周恬樊秀月贵州医科大学附属医院乳腺外科贵阳550004 贵州医科大学医学检验学院贵阳550004

目的探讨甲状腺癌相关基因1（TC-1）在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞增殖凋亡的影响。方法反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot法检测乳腺癌组织及对应的癌旁组织中TC-1的表达水平。以乳腺癌细胞转染TC-1小干扰RNA（TC-1 ... 详细信息

目的探讨甲状腺癌相关基因1（TC-1）在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞增殖凋亡的影响。方法反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot法检测乳腺癌组织及对应的癌旁组织中TC-1的表达水平。以乳腺癌细胞转染TC-1小干扰RNA（TC-1 siRNA）和小干扰RNA阴性对照（siRNA control），命名为干扰组和阴性组，同时以不做处理的细胞为对照组。噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot检测β-连环蛋白（β-catenin）、Wnt下游靶基因（c-Myc）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）表达。结果TC-1在乳腺癌组织中水平高于癌旁组织（t=17.746，P=0.000；t=12.705，P=0.000）。对照组和阴性组细胞凋亡率、存活率、TC-1、β-连环蛋白（β-catenin）、c-Myc、Cleaved Caspase-3比较无明显变化。干扰组细胞凋亡率高于对照组，细胞存活率低于对照组，β-catenin、c-Myc水平低于对照组，Cleaved Caspase-3水平高于对照组（t=13.986、7.015、10.457、27.886、7.426，P=0.000、0.002、0.001、0.000、0.002）。结论TC-1在乳腺癌组织中表达上调，干扰TC-1能够抑制乳腺癌细胞增殖，促进乳腺癌细胞凋亡，Wnt信号通路可能是其作用机制之一。

关键词：乳腺癌增殖凋亡甲状腺癌相关基因1

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八元瓜环与常山碱的相互作用模式

高等学校化学学报 2020年第2期41卷 277-283页

作者：蒋静陈晓丽黄亚励张奇龙徐红杨小生贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550025 贵州医科大学公共卫生学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025 贵州医科大学基础医学院贵阳550025

利用紫外吸收光谱、荧光光谱、核磁共振氢谱及红外光谱等方法考察了八元瓜环(Q[8])对常山碱(Feb)的包结作用;采用紫外吸收光谱法研究了Q[8]对Feb理化性质的影响及不同pH条件下Q[8]/Feb包合物溶液中Feb的释放及Q[8]/Feb包合物在人工肠液... 详细信息

利用紫外吸收光谱、荧光光谱、核磁共振氢谱及红外光谱等方法考察了八元瓜环(Q[8])对常山碱(Feb)的包结作用;采用紫外吸收光谱法研究了Q[8]对Feb理化性质的影响及不同pH条件下Q[8]/Feb包合物溶液中Feb的释放及Q[8]/Feb包合物在人工肠液和人工胃液中的释放。结果表明,在pH=1. 2的盐酸介质中,Q[8]与Feb可形成摩尔比1∶1的稳定主客体包合物,结合常数为4. 20×10^4L/mol。在pH=1. 2(人工胃液的pH值)时,Feb可与Q[8]形成稳定包合物;在pH=6. 8(人工肠液的pH值)时,Q[8]/Feb包合物可释放出单纯的游离Feb。因此,Q[8]可作为Feb的一种潜在药物载体为减轻Feb呕吐副反应提供借鉴。

关键词：八元瓜环常山碱主客体包合物药物释放

吴茱萸碱作用mTOR信号通路引起胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

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中国中药杂志 2015年第16期40卷 3262-3266页

作者：刘鑫杨丽毕瑩王良宏黄海贵州省人民医院检验科贵州贵阳550004 贵州医科大学医学检验学院临床生化教研室贵州贵阳550004

吴茱萸碱(evodiamine)是中药吴茱萸最主要的具有抗肿瘤活性的生物碱之一,研究初步探讨吴茱萸碱作用哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用机制,为其抗肿瘤机制的探索及胃癌临床治疗奠定基础。采用MTT法... 详细信息

吴茱萸碱(evodiamine)是中药吴茱萸最主要的具有抗肿瘤活性的生物碱之一,研究初步探讨吴茱萸碱作用哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用机制,为其抗肿瘤机制的探索及胃癌临床治疗奠定基础。采用MTT法观察吴茱萸碱单独作用对SGC-7901细胞及对人外周血单个核细胞(PBMCs)的细胞毒效应。Real-time PCR,Western blot分别检验吴茱萸碱单独或联合胱天蛋白酶抑制剂(z-VAD-fmk)作用后,m TOR,p70S6K和4EBP1基因表达以及m TOR和p-m TOR蛋白表达。结果表明,吴茱萸碱抑制SGC-7901细胞增殖存在时间剂量依赖性,且对人PBMCs无细胞毒作用。吴茱萸碱及联合z-VAD-fmk分别作用后,细胞变圆,漂浮于培养基中;与对照组比较,2种处理方法均能抑制m TOR,p70S6K和4EBP1基因表达,存在显著性差异,且与吴茱萸碱单独作用比较,联合z-VAD-fmk作用对基因表达抑制率加强;Western blot结果显示吴茱萸碱可以抑制m TOR和p-m TOR蛋白的表达无论是否有z-VAD-fmk的参与,且z-VAD-fmk阻断胱天蛋白酶作用后,抑制率增强。综上说明吴茱萸碱可能通过m TOR信号通路促进胃癌SGC-7901细胞凋亡。

关键词：吴茱萸碱 mTOR信号途径胃癌SGC-7901细胞细胞凋亡

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急性肝衰竭时小鼠上消化道及胆汁菌群的变化

中华医学杂志 2017年第21期97卷 1664-1667页

作者：刘华娟余蕾胡亚欣程明亮贵州医科大学临床医学院 550004 贵州医科大学附属医院检验科贵州医科大学附属医院感染科

目的研究急性肝衰竭时小鼠上消化道和胆汁内菌群的变化。方法实验分为D－氨基半乳糖建立的肝衰竭模型组（M组）和正常对照组，采集小鼠口腔、胃、十二指肠盥洗液、胆汁，高通量测序技术测定细菌16 S rDNA的V3＋V4区，得出细菌丰度及... 详细信息

目的研究急性肝衰竭时小鼠上消化道和胆汁内菌群的变化。方法实验分为D－氨基半乳糖建立的肝衰竭模型组（M组）和正常对照组，采集小鼠口腔、胃、十二指肠盥洗液、胆汁，高通量测序技术测定细菌16 S rDNA的V3＋V4区，得出细菌丰度及多样性信息；LEfSe （LDA effect size）分析找出肝衰竭前后各段的差异菌。结果门水平上，M组小鼠口腔和胃内TM7的相对丰度高于正常对照组（P〈0.05）。科水平上，与正常对照组相比，M组胃内巴斯德氏菌科（Pasteurellaceae）减少（P〈0.05），胆汁内乳杆菌科（Lactobacillaceae）增多（P〈0.05）。结论急性肝衰竭时小鼠上消化道及胆汁内菌群有显著改变。

关键词：急性肝衰竭肠道菌群 16S rDNA 生物多样性分析 LEfSe分析