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巨噬细胞极化在牙周炎发病及治疗中的作用

中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3246-3251页

作者：葛叡扬倪璨杨琨闫福华遵义医科大学口腔医学院/附属口腔医院贵州省遵义市563000 南京大学医学院附属口腔医院牙周病科江苏省南京市210008

背景:菌斑生物膜引发的宿主免疫反应是牙周炎进展和破坏的始作俑者,巨噬细胞是参与其中的主要免疫细胞,在炎症发生发展过程中发挥着重要作用。目的:主要对巨噬细胞极化与牙周炎的关系及通过调控巨噬细胞极化治疗牙周炎的相关进展进行综... 详细信息

背景:菌斑生物膜引发的宿主免疫反应是牙周炎进展和破坏的始作俑者,巨噬细胞是参与其中的主要免疫细胞,在炎症发生发展过程中发挥着重要作用。目的:主要对巨噬细胞极化与牙周炎的关系及通过调控巨噬细胞极化治疗牙周炎的相关进展进行综述。方法:应用计算机检索PubMed和中国知网数据库1990-2023年发表的相关文献,英文检索词为“macrophage polarization,M1/M2 macrophage,periodontitis,periodontitis treatment,macrophage polarization and periodontitis,osteoimmunology,ferroptosis,macrophage polarization and ferroptosis,periodontitis and ferroptosis”,中文检索词为“巨噬细胞极化,M1/M2巨噬细胞,牙周炎,牙周炎治疗,骨免疫,铁死亡”。经初筛后,选定96篇文献进行综述。结果与结论:巨噬细胞不同表型之间的转换与牙周炎组织破坏密切相关,其分泌的多种细胞因子和炎症递质参与调控了牙周组织的破坏与修复过程,调节巨噬细胞表型及细胞因子分泌有助于降低牙周炎炎症水平、改善牙周微环境,从而减少组织破坏或促进牙周组织再生。目前已有许多研究着力于开发药物或生物材料来调节巨噬细胞功能,从而达到免疫调控治疗牙周炎的目的,但由于巨噬细胞的作用贯穿牙周炎发生发展过程,在抗感染、骨破坏和骨修复过程中均扮演重要角色,且极化本身是一个复杂的动态过程,受诸多因素的影响,所以仍需探索更多可能的机制来明确材料或药物与巨噬细胞间的交互作用。

关键词：巨噬细胞极化牙周炎慢性炎症牙周组织再生治疗

水痘-带状疱疹病毒滴定方法的优化与应用评价

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国际病毒学杂志 2024年第2期31卷 134-139页

作者：张菱芳楚巧鸿李佳霍恕婷韩笑天邓瑶王海生谭文杰内蒙古医科大学基础医学院呼和浩特010110 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所应急技术中心国家卫生健康委员会生物安全重点实验室北京102206 温州医科大学检验医学院生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室 325035 河北医科大学河北医科大学第四医院石家庄050011

目的对水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)病毒滴定方法进行优化,并应用于中和抗体检测和抗病毒药物体外检测。方法采用VZV疫苗株Voka株在48孔板感染人视网膜上皮细胞(adult retinal pigment epithelial cell line-19,ARPE-... 详细信息

目的对水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)病毒滴定方法进行优化,并应用于中和抗体检测和抗病毒药物体外检测。方法采用VZV疫苗株Voka株在48孔板感染人视网膜上皮细胞(adult retinal pigment epithelial cell line-19,ARPE-19),连续7 d检测感染后病毒复制动力学与蚀斑特点;分别建立并优化活病毒滴定的蚀斑染色法和酶联免疫斑点法(enzyme linked immunospot assay,ELISPOT),同时对两种方法检测结果的相关性进行分析,并将改进后的方法应用于VZV药物抑制效果检测和血清中和抗体检测。结果VZV感染ARPE-19细胞(感染复数为0.05)后,第6天到达复制顶峰并形成肉眼可见蚀斑;蚀斑染色法中,添加0.2 mg/mL二乙胺乙基葡聚糖(diethylaminoethyl-dextran,DEAE-Dextran)后,较未添加组产生更大与边缘更加清晰的蚀斑。ELISPOT法可在感染后第3天进行计数,同时通过改变检测用抗体与显色液等,可产生更加清晰可计的斑点。两种方法可采用机器计数,检测病毒滴度或应用于体外检测抗VZV药物效力与血清中和抗体滴度,具有良好的相关性。结论优化后ELISPOT法快捷灵敏,可替代蚀斑染色法应用于VZV病毒滴度检测与相关应用。本研究为VZV的检测及疫苗药物研发提供了更简捷可靠的实验方法。

关键词：水痘-带状疱疹蚀斑法酶联免疫斑点法中和抗体抗病毒药物

海南省39株幽门螺杆菌的耐药性及毒力基因特征

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贵州医科大学学报 2024年第4期49卷 479-488页

作者：卓书伟林美幸吴翔潘静琳周海清陈海陈峥宏贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 海南省中医院检验科海南海口570203 海南省中医院消化内科海南海口570203 海南省中医院医院感染管理科海南海口570203

目的了解海南省幽门螺杆菌(Hp)耐药性及其毒力基因vacA、cagA和iceA基因型特征。方法对146例上消化道症状疾病患者进行胃镜检查,取胃黏膜组织进行Hp的分离和培养,对Hp进行药敏检测;通过聚合酶链式反应(PCR)对毒力基因cagA、vacA和iceA... 详细信息

目的了解海南省幽门螺杆菌(Hp)耐药性及其毒力基因vacA、cagA和iceA基因型特征。方法对146例上消化道症状疾病患者进行胃镜检查,取胃黏膜组织进行Hp的分离和培养,对Hp进行药敏检测;通过聚合酶链式反应(PCR)对毒力基因cagA、vacA和iceA进行检测和分型,cagA测序进行聚类分析、并构建系统进化树;使用Fisher确切概率法分析各型毒力基因和患者疾病发生的相关性。结果共培养出39株Hp,对阿莫西林和克拉霉素的耐药率分别为2.6%和48.7%;39株均为vacA^(+)菌株,iceA 1型26株、2型13株;33株为cagA^(+)菌株,其中5株为西方型(EPIYA-ABC型),28株为东亚型(EPIYA-ABD型);cagA^(+)和vacA^(+)菌株与胃和十二指肠疾病有显著的相关性(P0.05)。结论海南省胃和十二指肠Hp患者中Hp毒力基因多样化,vacA s1am2/cagA^(+)基因型在消化性溃疡患者中占优势,不同毒力基因型对胃和十二指肠疾病的发生具有明显的差别,阿莫西林可作为该地区根除Hp首选抗生素。

关键词：幽门螺杆菌耐药性基因多样性消化性溃疡 cagA vacA iceA

M6A修饰EGLN3、FOSL2参与鼻咽癌辐射抗拒

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中华放射肿瘤学杂志 2024年第2期33卷 158-167页

作者：王天翔章平川陈坤何侠尹丽南京医科大学附属肿瘤医院、江苏省肿瘤医院、江苏省肿瘤防治研究所放疗科南京210009不详南京医科大学第四临床医学院南京211166 南京医科大学肿瘤个体化医学协同创新中心南京211166

目的基于芯片数据并通过细胞实验验证鼻咽癌受m6A甲基化调控的关键放射抗拒基因。方法从GEO数据库分别下载鼻咽癌放射抗拒基因与鼻咽癌m6A调控基因以及鼻咽癌基因mRNA表达谱芯片数据,使用R软件进行差异基因的筛选与统计学分析,采用生物... 详细信息

目的基于芯片数据并通过细胞实验验证鼻咽癌受m6A甲基化调控的关键放射抗拒基因。方法从GEO数据库分别下载鼻咽癌放射抗拒基因与鼻咽癌m6A调控基因以及鼻咽癌基因mRNA表达谱芯片数据,使用R软件进行差异基因的筛选与统计学分析,采用生物信息学方法对这些基因进行生物学过程、信号通路及互作网络分析。分别通过敲低m6A调控因子、放射抵抗株构建,以实时反转录PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法对上述鼻咽癌m6A差异放射抗拒基因进行筛选验证。甲基化RNA免疫共沉淀后实时定量PCR(MeRIP-qPCR)验证筛选基因的m6A修饰及与甲基转移酶3(METTL3)直接结合的能力。在鼻咽癌细胞中转染筛选基因的siRNA,电离辐射处理后,用CCK-8、EdU法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,克隆形成实验检测放射敏感性。通过配对t检验,比较电离辐射处理后对照组与EGLN3敲减组Fe^(2+)丰度及脂质过氧化程度的差异趋势。结果芯片数据GSE48501与GSE200792、GSE53819交集得到6个差异基因,分别是EGLN3、FOSL2、ADM、JUN、VEGFA、PRDM1。经TNMplot、KMplot等生信数据平台进一步筛选得到目标基因EGLN3、FOSL2。目标基因mRNA直接与METTL3结合并受到其介导的m6A修饰。目标基因在电离辐射后的亲代细胞中呈现剂量、时间梯度上调;在放射抵抗细胞中也显著上调。沉默EGLN3/FOSL2后的鼻咽癌细胞经照射处理后,细胞增殖活性下降更多,与未下调者的放射增敏比的差异有统计学意义。沉默EGLN3后的鼻咽癌细胞经照射处理后,显著下调谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达,并进一步增加Fe^(2+)丰度及脂质过氧化程度,通过诱发铁死亡发挥放疗增敏作用。结论EGLN3、FOSL2在鼻咽癌中通过METTL3介导的m6A甲基化修饰发挥放射抵抗作用;下调EGLN3并联合电离辐射可以增加鼻咽癌细胞内Fe^(2+)丰度、脂质过氧化程度并降低GPX4表达,以铁死亡途径增鼻咽癌放射敏感性。

关键词：鼻咽肿瘤放射敏感性 m6A甲基化铁死亡

检测痘苗病毒体外感染的病灶形成方法的优化与应用

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病毒学报 2024年第3期40卷 492-499页

作者：楚巧鸿冯霞李佳张菱芳单徐畅舒畅程雪婷霍恕婷邓瑶谭文杰中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会生物安全重点实验室北京102206 温州医科大学检验医学院生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室温州325035 内蒙古医科大学基础医学院呼和浩特010110 新乡医学院公共卫生学院新乡453003

本研究旨在建立一种快速、通用、高通量的病灶形成测定法(Focus-forming assay, FFA),用于痘苗病毒(Vaccinia virus, VACV)的研究。首先采用经典噬斑染色法与免疫噬斑法对不同VACV代表性毒株(Western Reserve strain, WR;Tiantan strain... 详细信息

本研究旨在建立一种快速、通用、高通量的病灶形成测定法(Focus-forming assay, FFA),用于痘苗病毒(Vaccinia virus, VACV)的研究。首先采用经典噬斑染色法与免疫噬斑法对不同VACV代表性毒株(Western Reserve strain, WR;Tiantan strain, VTT;Modified Ankara strain, MVA)在BHK-21细胞和Vero细胞上的噬斑特性进行评估,通过实验条件(包括显色液、非特异性染色、细胞培养板和病毒培养时间)的优化,提高病灶的可视化质量和测定的准确性。并基于改进优化的FFA法研究了VACV在BHK-21细胞和Vero细胞上的生长曲线,同时对FFA法的重复性进行了评估。研究发现BHK-21细胞对VACV的感染更加敏感,适宜于多种VACV滴度测定。实验条件的优化显著提高了病灶的可视化质量和测定的准确性。应用FFA法发现WR、VTT和MVA毒株在BHK-21细胞上能够有效复制,而MVA在Vero细胞上的复制受限,且FFA法在同一实验内具有良好的重复性,变异系数在0.17%到3.50%之间。改进后的FFA法是一种快速、通用、高通量的方法,适用于痘苗病毒滴度的测定,为痘苗病毒的研究和应用提供了可靠的技术支持。

关键词：痘苗病毒噬斑实验病灶形成实验滴度测定

HucMSC-Ex调控自噬增强高糖环境下真皮成纤维细胞功能

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中国细胞生物学学报 2024年第5期46卷 928-938页

作者：缪徐李淋丽钱晖许文荣史惠江苏大学医学院江苏省医学科学与检验医学重点实验室镇江212000 南京医科大学附属常州第二人民医院常州213000

该研究旨在探讨在高糖损伤模型中,人脐带间充质干细胞源外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cell-derived exosome,hucMSC-Ex)对真皮成纤维细胞(dermal fibroblasts,DFs)的影响,并探究自噬在糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcer,DFU)修复中的作用。通过多种方法(包括形态分析、粒度测量、表面标记表征等)对hucMSC和hucMSC-Ex进行全面的鉴定。同时,使用Western blot和免疫荧光分析鉴定原代DFs表面标志物。通过流式细胞术、qRT-PCR、活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测以及线粒体膜电位的检测,分别评估高糖损伤模型中DFs的凋亡情况、炎症因子表达水平、活性氧产生情况和线粒体功能。为了深入研究自噬在修复DFU中的作用,该研究通过免疫组织化学染色和Western blot技术检测DFU患者组织中LC3BII/I的表达情况,并提取组织蛋白进行自噬相关蛋白的表达差异情况分析。此外,在使用自噬诱导剂和抑制剂后,对DFs给予hucMSC-Ex处理,观察其增殖和迁移情况。研究结果表明,hucMSC-Ex可能通过调控自噬反应来增强高糖损伤下DFs的功能,从而促进DFU的修复。

关键词： hucMSC-Ex 糖尿病足溃疡 DFs 自噬

脓毒症心肌病患者生长分化因子15的表达及其对疾病的诊断价值

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中华危重病急救医学 2024年第2期36卷 137-141页

作者：王琳李筱妍张丽中孙媛山西医科大学第三医院、山西白求恩医院、山西医学科学院、同济山西医院呼吸与危重症医学科太原030032 上海市浦东新区周浦医院、上海健康医学院附属周浦医院呼吸与危重症医学科上海201318 山西医科大学第三医院、山西白求恩医院、山西医学科学院、同济山西医院检验科太原030032

目的探讨生长分化因子15(GDF15)在脓毒症心肌病患者中的表达及其对脓毒症心肌病的诊断价值。方法采用观察性研究,选取山西白求恩医院2022年5月至2023年3月收治的50例脓毒症心肌病患者作为试验组,46例急性冠脉综合征(ACS)患者作为病例对... 详细信息

目的探讨生长分化因子15(GDF15)在脓毒症心肌病患者中的表达及其对脓毒症心肌病的诊断价值。方法采用观察性研究,选取山西白求恩医院2022年5月至2023年3月收治的50例脓毒症心肌病患者作为试验组,46例急性冠脉综合征(ACS)患者作为病例对照组,以及同期体检中心49例健康体检者作为健康对照组。记录研究对象人口学资料和临床指标,采用双夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清GDF15水平。同时追踪随访脓毒症心肌病患者28 d转归情况,并分为存活组和死亡组。分析比较各组受试者血清GDF15水平及其与临床指标的相关性;二元Logistic回归分析脓毒症心肌病发病的危险因素;受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估GDF15水平在脓毒症心肌病诊断中的价值。结果试验组血清GDF15水平明显高于病例对照组和健康对照组〔ng/L:314.14(221.96,469.56)比39.08(26.27,76.85)、6.39(3.35,14.42),均P学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ,r=0.316、P=0.025)均具有相关性,而与白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、降钙素原、C-反应蛋白、乳酸、白蛋白等其他临床指标均无相关性(r值分别为0.086、0.123、-0.051、0.055、0.119、0.199、-0.234,均P>0.05)。脓毒症心肌病患者死亡组(30例)血清GDF15水平、SOFA评分和APACHEⅡ评分均较生存组(20例)明显升高〔GDF15(ng/L):382.93±159.61比289.66±158.46,SOFA(分):10.00(7.00,12.00)比6.00(5.00,9.50),APACHEⅡ(分):21.70±6.07比14.85±7.57,均P生物标志物用于脓毒症心肌病的早期诊断。

关键词：脓毒症脓毒症心肌病生长分化因子15

CVA6分子进化与其相关手足口病流行的研究

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微生物学免疫学进展 2024年

作者：韦欢欢朱俊萍广西医科大学第二附属医院医学检验科首都医科大学基础医学院基础医学国家级实验教学示范中心

手足口病（hand， foot and mouth disease， HFMD）是一种可由多种肠道病毒引起的以儿童急性感染为主的全球性传染病。近期，柯萨奇病毒A组6型（coxsackievirus A6， CVA6）引起的典型及非典型HFMD在多个国家及地区发病率明显上升且临... 详细信息

手足口病（hand， foot and mouth disease， HFMD）是一种可由多种肠道病毒引起的以儿童急性感染为主的全球性传染病。近期，柯萨奇病毒A组6型（coxsackievirus A6， CVA6）引起的典型及非典型HFMD在多个国家及地区发病率明显上升且临床表现多样。而CVA6的分子进化、人群群体免疫屏障的建立等均可影响HFMD的暴发流行及病原谱的变迁。现就CVA6的流行、分子进化与重组、氨基酸变异、结构解析及血清流行病学研究作一概述，旨在为HFMD的防控提供思路。

关键词：手足口病柯萨奇病毒A组6型临床症状分子进化基因重组结构解析氨基酸变异血清流行病学

基于生物信息学分析Midkine在胆管癌中的表达及其对预后的预测价值

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同方期刊数据库

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临床肝胆病杂志 2024年第7期 1428-1437页

作者：谷月月于书敏常秀娟高旭东黄加干贾晓东曾珍安徽医科大学解放军307临床学院安徽医科大学第五临床医学院中国人民解放军总医院第五医学中心肝病医学部北京大学三〇二临床医学院中国人民解放军总医院第五医学中心肿瘤医学部

目的研究中期因子（MDK）在胆管癌（CCA）中的表达及其对患者预后的预测价值，探索MDK可能影响CCA进展的机制。方法从癌症基因组图谱（TCGA）数据库获取CCA样本数据信息，分析MDK在癌与癌旁组织中的表达差异及其与临床特征的相关性，... 详细信息

目的研究中期因子（MDK）在胆管癌（CCA）中的表达及其对患者预后的预测价值，探索MDK可能影响CCA进展的机制。方法从癌症基因组图谱（TCGA）数据库获取CCA样本数据信息，分析MDK在癌与癌旁组织中的表达差异及其与临床特征的相关性，使用基因表达综合数据库（GEO）和解放军总医院第五医学中心2018年6月—2021年9月经手术切除的11例CCA患者的临床资料进行相关验证。通过STRING和Cytoscape构建蛋白互作网络，使用基因本体（GO）和京都基因与基因组数据库（KEGG）进行富集分析，探讨MDK相关基因所参与的生物学过程和肿瘤相关通路。此外，应用TIMER和TISIDB数据库分析CCA肿瘤组织中MDK的表达与免疫细胞浸润的相关性。计量资料两组间比较采用成组t检验或MannWhitney U检验。计数资料组间比较采用Fisher精确概率法。应用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，并采用Log-rank检验进行组间比较。两变量间的相关性采用Spearman相关性分析。结果比较TCGA数据库中CCA患者肿瘤组织及癌旁组织中MDK的表达水平，非配对分析结果和配对分析结果均显示，MDK在CCA肿瘤组织中的表达水平高于癌旁组织（P值均免疫检查点调节剂VTCN1(r=-0.393,P=0.018 3)、LTA(r=-0.380,P=0.022 7)和PVR(r=-0.350,P=0.037 3)呈负相关。结论 MDK高表达提示CCA患者预后不佳，MDK有潜力成为预测CCA患者预后的分子标志物，其可能通过调控泛素介导的蛋白质水解过程及调控B淋巴细胞和树突状细胞的浸润促进CCA的发生发展。

关键词：胆管上皮癌中期因子预后