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KRT18与mRNA及长链非编码RNA互作调控椎间盘髓核细胞损伤的机制

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 312-321页

作者：刘钟元李扬张志文湖北中医药大学针灸骨伤学院湖北省武汉市430061 湖北中医药大学附属医院、湖北省中医院、湖北省中医药研究院湖北省武汉市430061

背景:椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用,其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关,但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定。目的:探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间盘髓... 详细信息

背景:椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用,其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关,但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定。目的:探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间盘髓核细胞的影响及机制。方法:对因腰部骨折或椎间盘退行性病变而接受椎间融合术的患者进行人体髓核组织取样获得正常髓核细胞和退变髓核细胞,并进行iRIP-seq、功能富集分析以及DNA微阵列分析,随后根据分析结果在髓核细胞中敲低KRT18,通过蛋白免疫印迹及qRt-PCR在蛋白和RNA水平检测相关基因水平的表达。结果与结论:通过iRIP-seq分析发现GUAAUC和AGCCUC序列中存在大量的KRT18结合位点,表明KRT18可参与调控RNA的转录、翻译、稳定性或在细胞信号传导途径中发挥作用。其能够与成熟的mRNA稳定结合,其中表达较高的基因包括CRLF1及IGFBP4等,同时与其结合的长链非编码RNA的峰值基因包括SNHG25、SNHG12、NEAT1、USP32、EIF4A2和CDH4,这些基因多涉及细胞凋亡、炎症等多种生物过程,并且能介导细胞外基质代谢的相关通路,KRT18能够调控它们的稳定性、转运、翻译、剪接等多个方面的功能,进而影响基因的表达和细胞功能。实验结果验证了在髓核细胞中敲低KRT18,细胞外基质代谢水平被抑制出现失衡,导致体外椎间盘退变。该研究首次从KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合的角度探讨其调控机制,并推测了KRT18在椎间盘退变发病机制中的潜在功能,为今后KRT18关键功能的研究奠定了基础。

关键词：椎间盘退行性变 RNA结合蛋白 KRT18 iRIP-seq mRNA 长链非编码RNA

暖宫调经汤口服联合八髎穴隔姜灸治疗阳虚宫寒型卵巢早衰患者65例临床观察

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中医杂志 2025年第1期 59-64页

作者：孟昱琼高强翟婷婷杨志虹贵州中医药大学第一附属医院贵州中医药大学针灸推拿学院

目的观察在西医常规治疗基础上应用暖宫调经汤口服及八髎穴隔姜灸治疗阳虚宫寒型卵巢早衰患者的临床疗效。方法 130例阳虚宫寒型卵巢早衰患者根据患者意愿分为治疗组和对照组各65例。对照组给予西医常规治疗，治疗组在对照组治疗基础... 详细信息

目的观察在西医常规治疗基础上应用暖宫调经汤口服及八髎穴隔姜灸治疗阳虚宫寒型卵巢早衰患者的临床疗效。方法 130例阳虚宫寒型卵巢早衰患者根据患者意愿分为治疗组和对照组各65例。对照组给予西医常规治疗，治疗组在对照组治疗基础上予暖宫调经汤口服，每日1剂，同时进行八髎穴隔姜灸治疗，每日1次，两组均治疗3个月。治疗前后检测两组患者卵巢功能指标[包括卵巢体积、卵泡数量、卵巢收缩期峰值血流速度（PSV）、子宫内膜厚度]及血清性激素六项[孕酮（P）、雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）水平与催乳素（PRL）和睾酮（T）]、抗苗勒管激素（AMH）水平，并于治疗前后比较两组患者中医证候积分（包括性欲减退、腰骶酸痛、畏寒肢冷、神疲乏力、面色晦暗、小腹胀痛、舌淡、脉沉涩评分）。治疗后判定临床疗效及安全性。结果与本组治疗前比较，两组治疗后卵巢体积、卵泡数量、PSV、子宫内膜厚度及P、E2、AMH水平均明显升高，FSH、LH、PRL、T水平及腰骶酸痛、性欲减退、腰骶酸痛、性欲减退、面色晦暗、脉沉涩评分、中医证候积分均明显降低（P中医证候积分明显低于对照组（P0.05）。结论在西医常规治疗基础上应用暖宫调经汤口服及八髎穴隔姜灸治疗阳虚宫寒型卵巢早衰可显著改善卵巢功能及临床症状，调节性激素水平，从而提高临床疗效。

关键词：卵巢早衰卵巢功能性激素水平隔姜灸八髎穴阳虚宫寒暖宫调经汤

三种腰椎间盘突出症大鼠模型制备方法的比较与评价

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2930-2936页

作者：尹浩吉美奇胡志祥吴涵吕恒李圣云李蕾翟春涛吕玉娥山西中医药大学第二临床学院山西省晋中市030619 山西省针灸医院山西省太原市030006

背景:目前实验中有多种腰椎间盘突出症大鼠模型,但各自存在一定的优缺点,其中最常见的造模方法包括自体髓核移植和纤维环穿刺模型。目的:建立自体髓核移植模型(剪除棘突+乳突/剪除侧突+乳突)以及纤维环穿刺模型,比较及评估3种模型的特... 详细信息

背景:目前实验中有多种腰椎间盘突出症大鼠模型,但各自存在一定的优缺点,其中最常见的造模方法包括自体髓核移植和纤维环穿刺模型。目的:建立自体髓核移植模型(剪除棘突+乳突/剪除侧突+乳突)以及纤维环穿刺模型,比较及评估3种模型的特点。方法:将40只成年雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只,分别为假手术组、棘突组、侧突组及纤维环穿刺组,其中假手术组大鼠仅切开皮肤,暴露棘突后并缝合;棘突组大鼠剪除L5棘突和乳突并取2枚尾椎髓核放于椎间孔处;侧突组大鼠剪除L5侧突和乳突并取2枚尾椎髓核放于椎间孔处;纤维环穿刺组大鼠剪除乳突后,进行纤维环穿刺术,并行椎间盘注射白细胞介素1β。分别在造模前和造模后检测大鼠热缩足潜伏期,造模结束后2周进行腰椎MRI检测;苏木精-伊红染色和番红-固绿染色观察椎间盘病理改变;免疫荧光观察CD68阳性表达。结果与结论:①热痛阈检测结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠在造模后痛觉敏感均降低,耐受时间均降低(P<0.05);②腰椎MRI影像显示:棘突组和纤维环穿刺组髓核组织突出明显,更符合常见腰椎间盘突出患者MRI影像;③苏木精-伊红染色观察:与假手术组比较,各模型组髓核组织存在不同程度退变,炎性细胞浸润和脊索细胞降解,出现空洞样改变,其中纤维环穿刺组病理改变最严重;④番红-固绿染色显示:与假手术组比较,3组模型的髓核组织边界模糊,存在广泛炎性反应,纤维环存在不同程度退变;⑤CD68+免疫荧光阳性结果显示:与假手术组相比,3组模型的CD68+表达更高、范围更广,其中纤维环穿刺组表达最高。结果说明3种方法均能有效建立腰椎间盘突出大鼠模型,其中剪除乳突后建立纤维环穿刺模型优于剪除棘突+乳突组自体髓核移植模型,前2种模型优于剪除侧突+乳突组自体髓核移植模型。

关键词：自体髓核移植纤维环穿刺腰椎间盘突出症 MRI CD68+ 动物模型

新医科视角下专创融合培育针灸推拿学人才的现实困境与实施策略

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中国中医药现代远程教育 2025年第2期23卷 186-188页

作者：陈邵涛刚晓超张晓林管其凡高天姣史航宇刘明军长春中医药大学针灸推拿学院吉林长春130000 湖北中医药大学针灸骨伤学院湖北武汉430000

作为新兴事物,“专创融合”培育模式在培育针灸推拿学人才时面临理念不普及、保障不完善、考核评价单一等问题。基于此,文章提出一些针对性实施策略,深入思考新时代背景下的医学教育改革与人才培养模式,为新医科视角下针灸推拿专业与创... 详细信息

作为新兴事物,“专创融合”培育模式在培育针灸推拿学人才时面临理念不普及、保障不完善、考核评价单一等问题。基于此,文章提出一些针对性实施策略,深入思考新时代背景下的医学教育改革与人才培养模式,为新医科视角下针灸推拿专业与创新创业教育的有机融合提供新思路。

关键词：新医科专创融合针灸推拿学人才培养现实困境实施策略

针刺不同腧穴对急性尿潴留大鼠膀胱功能的影响

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世界科学技术-中医药现代化 2019年第4期21卷 715-720页

作者：何婷杨硕莫倩贵州中医药大学针灸骨伤学院

目的:探讨针刺不同腧穴对急性尿潴留大鼠膀胱功能的影响。方法:40只SD大鼠随机分为模型组、三阴交组、合谷组、中髎(次髎)组,每组10只。均先采用0.9%生理盐水进行膀胱灌注60 min,测定正常状态下膀胱的尿动力学指标,继予0.9%生理盐水进... 详细信息

目的:探讨针刺不同腧穴对急性尿潴留大鼠膀胱功能的影响。方法:40只SD大鼠随机分为模型组、三阴交组、合谷组、中髎(次髎)组,每组10只。均先采用0.9%生理盐水进行膀胱灌注60 min,测定正常状态下膀胱的尿动力学指标,继予0.9%生理盐水进行膀胱灌注造模。造模成功后,模型组不予针刺治疗,三阴交组、合谷组、中髎(次髎)组进行针刺。观察灌注期间大鼠基础膀胱内压、排尿时膀胱收缩时间、最大逼尿肌收缩压、排尿间隔时间、排尿阈值压、收缩后膀胱内压的改变。结果:与正常基线相比,模型组大鼠基础膀胱内压、收缩后膀胱内压明显升高(P 0.05);针刺干预后,三阴交组、中髎(次髎)组与针刺前相比,最大逼尿肌收缩压升高(P 0.05),排尿时膀胱收缩时间增加(P 0.05);合谷组最大逼尿肌收缩压、排尿阈值压、收缩后膀胱内压、排尿时膀胱收缩时间、排尿间隔时间均未见显著差异(P> 0.05)。结论:针刺治疗AUR大鼠主要是通过刺激相关神经节段腧穴中髎(次髎)、三阴交从而使AUR大鼠最大逼尿肌收缩压升高、收缩后膀胱内压减少、排尿时膀胱收缩时间增加、排尿间隔时间缩短,效应具有穴位特异性。

关键词：针刺不同腧穴急性尿潴留大鼠膀胱功能

近部与远部穴位埋线对原发性痛经大鼠子宫前列腺素、血清IL-2及脾脏NK细胞的影响

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针刺研究 2021年第3期46卷 221-225页

作者：杨雯雯陈盼碧金灵敏唐徐韵秦中银周杨嘉琪陈艺贵州中医药大学研究生院贵阳550000 贵州中医药大学针灸骨伤学院贵阳550002

目的:观察近部与远部穴位埋线对原发性痛经(PD)大鼠子宫组织前列腺素E2(PGE2)和前列腺素F2α(PGF2α)含量、血清白细胞介素-2(IL-2)含量、脾脏自然杀伤(NK)细胞活性的影响,探讨近部与远部穴位埋线对PD大鼠的效应差异。方法:雌性Wistar... 详细信息

目的:观察近部与远部穴位埋线对原发性痛经(PD)大鼠子宫组织前列腺素E2(PGE2)和前列腺素F2α(PGF2α)含量、血清白细胞介素-2(IL-2)含量、脾脏自然杀伤(NK)细胞活性的影响,探讨近部与远部穴位埋线对PD大鼠的效应差异。方法:雌性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、近部埋线组、远部埋线组,每组8只。皮下注射苯甲酸雌二醇(第1天和第10天按0.5 mg/只注射,第2~9天按0.2 mg/只注射)联合腹腔注射缩宫素(末次苯甲酸雌二醇给药24 h后,2 U/只)制备PD大鼠模型。近部埋线组选取"关元""次髎"埋线治疗,远部埋线组选取"三阴交""地机"埋线治疗,均于造模前1天进行。造模结束后,比较各组大鼠30 min内扭体次数,子宫质量,ELISA法测定子宫组织PGE2、PGF2α含量及血清IL-2含量,MTT比色法检测脾脏NK细胞活性。结果:与对照组比较,模型组大鼠扭体次数增多(P<0.01);与模型组比较,近部、远部埋线组扭体次数均减少(P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠子宫质量增加(P<0.01),子宫组织PGE2含量降低(P<0.01)、PGF2α含量升高(P<0.01),血清IL-2含量降低(P<0.01),脾脏NK细胞活性降低(P<0.01);与模型组比较,近部、远部埋线组子宫质量均降低(P<0.01,P<0.05),子宫组织PGE2含量升高(P<0.01)、PGF2α含量降低(P<0.01),血清IL-2含量升高(P<0.01),脾脏NK细胞活性升高(P<0.01)。近部埋线组较远部埋线组PGF2α含量降低(P<0.05),脾脏NK细胞活性升高(P<0.01)。结论:近部穴位埋线与远部穴位埋线均可提高PD大鼠子宫PGE2含量、血清IL-2含量及脾脏NK细胞活性,降低子宫PGF2α含量,从而达到镇痛效果。且近部取穴治疗一定程度上要优于远部取穴。

关键词：原发性痛经近部埋线远部埋线前列腺素E2 前列腺素F2α 脾脏自然杀伤细胞活性

“双固一通”电针对老年阳虚大鼠抗疲劳能力及肝脏线粒体呼吸功能的影响

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针刺研究 2013年第4期38卷 259-264页

作者：王华刘静刘建民吕景芳陈明扬王静芝湖北中医药大学针灸骨伤学院武汉430061

目的:探讨"双固一通"电针治疗对老年阳虚模型大鼠抗疲劳能力及其肝脏线粒体呼吸功能的影响。方法:SD雄性大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、"双固一通"电针组、电针对照组。除正常对照组外,其余3组大鼠每日皮下注射D-半乳糖再肌肉... 详细信息

目的:探讨"双固一通"电针治疗对老年阳虚模型大鼠抗疲劳能力及其肝脏线粒体呼吸功能的影响。方法:SD雄性大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、"双固一通"电针组、电针对照组。除正常对照组外,其余3组大鼠每日皮下注射D-半乳糖再肌肉注射氢化可的松制作老年阳虚模型。"双固一通"电针组取"关元""后三里""百会",电针对照组取"中极""阴陵泉""印堂",每次治疗15min,每周治疗6次,共4周。以游泳力竭实验潜伏期判定大鼠抗疲劳能力;采用Clark氧电极法检测肝脏线粒体的呼吸功能,包括Ⅲ态呼吸耗氧速率(R 3)、Ⅳ态呼吸耗氧速率(R 4)、呼吸控制率(RCR)以及磷氧比值(P/O)。结果:各组大鼠平均游泳力竭时间比较,模型组较正常对照组明显缩短(P<0.01),"双固一通"电针组比模型组明显延长(P<0.01),且"双固一通"电针组与电针对照组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠肝线粒体R 3各组间未显示明显差异;模型组R 4较正常对照组明显增加(P<0.01),"双固一通"电针组较模型组明显降低(P<0.01),且"双固一通"电针组与电针对照组之间比较差异有统计学意义(P<0.05);各组大鼠肝线粒体RCR和P/O比较,模型组两项指标较正常对照组均明显降低(P<0.01),而"双固一通"电针组两项指标较模型组均明显升高(P<0.01,P<0.05),电针对照组两项指标与"双固一通"电针组比较明显降低(P<0.05)。结论:"双固一通"配穴电针治疗能明显改善老年阳虚模型大鼠抗疲劳能力,可能与其能降低老年阳虚模型大鼠肝脏细胞线粒体R 4,提高其RCR及P/O,改善肝脏线粒体呼吸功能,继而改善机体代谢有关,且"双固一通"电针疗效优于"中极""阴陵泉""印堂"配伍电针治疗。

关键词：阳虚证老年电针疗法关元后三里百会抗疲劳肝脏线粒体呼吸功能

电针对胰岛素抵抗大鼠下丘脑磷脂酰肌醇3激酶及磷脂酰肌醇3激酶催化亚基蛋白表达的影响

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针刺研究 2014年第1期39卷 46-51,57页

作者：王静芝王华周焕娇刘建民唐宏图杨丰李念梁凤霞湖北中医药大学针灸骨伤学院武汉430061

目的:观察"双固一通"电针法对胰岛素抵抗模型大鼠下丘脑中的磷脂酰肌醇3激酶(PI 3Kp 110)及磷脂酰肌醇3激酶催化亚基(p-PI 3Kp 110)蛋白表达的影响,探讨"双固一通"电针法改善胰岛素抵抗的机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模... 详细信息

目的:观察"双固一通"电针法对胰岛素抵抗模型大鼠下丘脑中的磷脂酰肌醇3激酶(PI 3Kp 110)及磷脂酰肌醇3激酶催化亚基(p-PI 3Kp 110)蛋白表达的影响,探讨"双固一通"电针法改善胰岛素抵抗的机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、预防组、电针组、脑脊液组及阻滞剂组,每组10只。以高脂饮食喂养复制胰岛素抵抗模型大鼠。预防组、电针组、脑脊液组和阻滞剂组电针"关元""后三里""丰隆""中脘",每周治疗5次,预防组治疗16周,其余各组治疗8周。脑脊液组进行脑室内人工脑脊液灌注,阻滞剂组脑室内灌注渥曼青霉素。观察造模后及治疗后各组大鼠体质量(BW)、空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)水平,并比较各组胰岛素敏感指数(IAI);Western blot法检测大鼠下丘脑PI 3Kp 110及p-PI 3Kp 110蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组、预防组、电针组、脑脊液组及阻滞剂组造模后BW、FPG及FINS明显升高(P<0.01,P<0.05),IAI降低(P<0.01);与模型组比较,治疗后预防组与电针组大鼠BW、FPG、FINS降低(P<0.05,P<0.01),脑脊液组BW、FPG降低(P<0.05,P<0.01),预防组、电针组及脑脊液组IAI升高(P<0.05);与阻滞剂组比较,脑脊液组、电针组及预防组BW、FPG、FINS降低(P<0.05,P<0.01),IAI升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组下丘脑PI 3Kp 110及pPI 3Kp 110蛋白表达减少(P<0.01);与模型组比较,预防组、电针组、脑脊液组PI 3Kp 110及p-PI 3Kp 110蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05);与阻滞剂组比较,预防组、电针组、脑脊液组PI 3Kp 110及pPI 3Kp 110蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05)。结论:"双固一通"电针法改善胰岛素抵抗状态,与提高模型大鼠下丘脑中PI 3Kp 110蛋白及p-PI 3Kp 110蛋白表达有关。

关键词：胰岛素抵抗电针干预空腹血糖空腹血清胰岛素下丘脑磷脂酰肌醇3激酶蛋白表达

“标本配穴”针灸对腹泻型肠易激综合征大鼠自主神经功能及相关因子的影响

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针刺研究 2023年第7期48卷 635-642页

作者：周绪柳王华李佳吴松吴帆卢威付伊萌湖北中医药大学针灸骨伤学院武汉430061

目的:观察“标本配穴”针灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠自主神经功能及相关因子的影响。方法:雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、标本配穴组与常规配穴组,每组10只。采用急-慢性应激联合番泻叶灌胃法制备IBS-D大鼠模型。标本配穴... 详细信息

目的:观察“标本配穴”针灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠自主神经功能及相关因子的影响。方法:雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、标本配穴组与常规配穴组,每组10只。采用急-慢性应激联合番泻叶灌胃法制备IBS-D大鼠模型。标本配穴组予“关元”、双侧“足三里”“内关”针灸治疗,常规配穴组予双侧“足三里”“天枢”“上巨虚”针灸治疗,均毫针直刺,留针15 min,并将艾条置于穴位上方2~3 cm,每穴悬灸15 min,1次/d,连续21 d。记录各组大鼠粪便含水率,旷场实验观察大鼠活动的总路程及方格间穿行次数,腹壁回缩反射(AWR)评分评价内脏高敏性,HE染色观察结肠组织病理形态,电生理记录仪分析大鼠心率变异性(HRV)的低频(LF)成分、高频(HF)成分及LF/HF值,ELISA法检测血浆去甲肾上腺素(NE)和血清降钙素基因相关肽(CGRP)的含量,Western blot法和免疫荧光染色法检测结肠组织中5-羟色胺(5-HT)的表达水平及荧光强度。结果:与正常组比较,造模大鼠粪便含水率显著升高(P针灸组治疗后粪便含水率、AWR评分明显降低(P针灸能有效调节IBS-D模型大鼠的HRV各项频域指标及血浆中NE含量,改善其自主神经功能,并对血清CGRP及结肠中5-HT等相关因子的表达有良性调整作用,进而改善其内脏高敏感性。

关键词：腹泻型肠易激综合征针灸标本配穴内脏高敏感性自主神经功能