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骨疏康颗粒影响破骨细胞外泌体治疗绝经后骨质疏松的机制研究

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中国中西医结合杂志 2024年第3期44卷 339-347页

作者：唐彬彬袁一峰刘康黄海周航史晓林浙江中医药大学附属第二医院骨伤二科杭州310005 浙江中医药大学第二临床医学院杭州310053

目的探究骨疏康颗粒(GSK)通过影响破骨细胞(OC)源性外泌体治疗绝经后骨质疏松(PMOP)的潜在机制。方法细胞实验建立OC和成骨细胞(OB)模型,制备GSK含药血清和对照血清,设空白组、对照组、对照外泌体组(对照血清)、药物外泌体组(GSK含药血... 详细信息

目的探究骨疏康颗粒(GSK)通过影响破骨细胞(OC)源性外泌体治疗绝经后骨质疏松(PMOP)的潜在机制。方法细胞实验建立OC和成骨细胞(OB)模型,制备GSK含药血清和对照血清,设空白组、对照组、对照外泌体组(对照血清)、药物外泌体组(GSK含药血清)。Western Blot检测两种血清干预OC后分泌的外泌体蛋白,电镜检测外泌体形态,荧光标记检测外泌体被OB摄取情况。随后开展OC来源外泌体干预OB模型研究。采用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP表达,Real-time PCR技术检测骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(RUNX2)基因表达情况。动物实验建立PMOP模型,分为假手术组,模型组和药物实验组,每组6只大鼠。模型组进行生理盐灌胃,药物实验组进行GSK灌胃。干预8周后处死,取各组大鼠股骨组织进行HE和TRAP染色,观察骨细胞分化情况。采用Western Blot检测股骨组织OCN、OPN、RUNX2、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)蛋白表达情况。结果实验成功构建OC、OB、PMOP大鼠模型。对照血清和GSK含药血清干预OC模型均表达出CD9、CD63、CD81蛋白,且两种血清处理后OC外泌体均能被OB摄取。对照外泌体组及药物外泌体组均抑制成骨分化因子ALP、OCN、OPN、RUNX2 mRNA的表达,但后者的抑制作用减弱(P实验结果显示,与模型组比较,大鼠股骨组织染色提示药物实验组骨小梁中破骨陷窝减少,骨密质部位破损现象减轻,骨吸收减少;药物实验组大鼠股骨组织中OB分化的标记物OCN、OPN、RUNX2蛋白表达均显著增加,同时RANKL、OPG蛋白表达均降低(P<0.01)。结论GSK含药血清可以抑制OC分化,有效改善OC外泌体对OB分化的抑制作用。另外,GSK能有效促进PMOP模鼠OB分化,同时减少OC分化。

关键词：骨疏康颗粒破骨细胞成骨细胞外泌体绝经后骨质疏松中药复方中成药

慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌的发病机制及中医药干预的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第4期30卷 228-239页

作者：彭鑫刘健栾哲宇封继宏天津中医药大学天津301617 天津中医药大学第二附属医院天津300250

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是临床常见的呼吸系统慢性疾病之一,其病程长且难以治愈,严重威胁人类健康。气道黏液高分泌(AMH)是COPD发生的独立危险因素,对疾病的发展和预后有极大影响。综述发现杯状细胞异常增生、黏蛋白过度分泌是导致AMH... 详细信息

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是临床常见的呼吸系统慢性疾病之一,其病程长且难以治愈,严重威胁人类健康。气道黏液高分泌(AMH)是COPD发生的独立危险因素,对疾病的发展和预后有极大影响。综述发现杯状细胞异常增生、黏蛋白过度分泌是导致AMH的直接原因,其发病机制可能与吸入异质性颗粒、气道炎症反应、黏蛋白/水盐比例失衡及相关信号通路调控等密切相关。中医学认为COPD AMH属于肺胀病痰饮证范畴,对该病的治疗多在立足于肺胀病的基础上从痰论治。笔者对近年来中医药领域开展的相关研究总结后发现有效干预COPD AMH的单味中药以化痰类为主,中药有效成分以黄酮类、萜类、酚类、生物碱类为主,中药复方主要以清热化痰、温化寒痰、燥湿化痰、益气活血化痰、补益肺脾肾立法,其作用机制为直接抑制或通过抑制气道炎症反应、调节水通道蛋白以纠正黏蛋白/水盐比例失衡、调控信号通路等途径间接抑制气道上皮杯状细胞化生和黏蛋白表达,以改善COPD黏液过量分泌。但目前仍存在研究侧重中药复方而对中药及有效成分研究较少、作用机制研究不够深入透彻、各研究结果无法互通、基础研究临床转化率不足等问题。该文对中医药治疗COPD AMH研究现状进行了系统综述,并就存在的问题提出了思考,以期为临床合理用药及进一步研究提供参考。

关键词：慢性阻塞性肺疾病(COPD) 气道黏液高分泌(AMH) 发病机制中医药研究进展

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泛凋亡的分子机制及其在部分疾病中的研究进展

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解放军医学杂志 2024年

作者：宋宇琪杨文明魏涛华杨玉龙李子龙安徽中医药大学第一临床医学院安徽中医药大学第一附属医院脑病科新安医学教育部重点实验室

机体细胞死亡可通过不同程序进行，包括细胞凋亡、焦亡和坏死性凋亡等。泛凋亡（PANoptosis是近年发现的一种新的炎症细胞死亡方式，可由不同刺激因素触发，并整合多种可诱导细胞死亡的成分组装成多种类型的大分子复合物——PANoptosom... 详细信息

机体细胞死亡可通过不同程序进行，包括细胞凋亡、焦亡和坏死性凋亡等。泛凋亡（PANoptosis是近年发现的一种新的炎症细胞死亡方式，可由不同刺激因素触发，并整合多种可诱导细胞死亡的成分组装成多种类型的大分子复合物——PANoptosome，进而介导细胞死亡。鉴于PANoptosis在整个疾病谱中的影响，促进或抑制其发生过程可能阻止多种疾病的发展。本文综述PANoptosis的发生机制及其在部分疾病中的研究进展，探讨多种程序性细胞死亡途径之间的串扰，以期为相关疾病的治疗提供新思路。

关键词：泛凋亡细胞死亡疾病分子机制

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中国免疫学杂志 2024年

作者：田美慧卯银辉佘书仪刘昱成吕海洋孙维芳汤勇长春中医药大学附属医院长春中医药大学中医学院长春中医药大学临床医学院

目的：基于“鼻-脾相关”理论探讨瘦素（leptin）与变应性鼻炎（Allergic rhinitis，AR）的潜在关联及作用机制。方法：利用瘦素与AR的全基因组关联研究（genome wide association study，GWAS）汇总数据进行工具变量（instrumental var... 详细信息

目的：基于“鼻-脾相关”理论探讨瘦素（leptin）与变应性鼻炎（Allergic rhinitis，AR）的潜在关联及作用机制。方法：利用瘦素与AR的全基因组关联研究（genome wide association study，GWAS）汇总数据进行工具变量（instrumental variable，IV）的筛选，采用双样本孟德尔随机化（Mendelian randomization，MR）方法分析leptin与AR之间的因果关系。将24只健康SPF级大鼠随机分为空白组、脾虚组、鼻炎组、脾虚鼻炎组，每组6只。分别建立脾虚、变应性鼻炎及脾虚变应性鼻炎大鼠模型。造模后观察各组大鼠鼻部症状评分、脾虚证候评分情况，HE染色法观察大鼠鼻黏膜及结肠的病理改变，ELISA法检测大鼠血清leptin、白介素（IL）-6、IL-10、IFN-γ的含量，Western blot 法检测各组大鼠鼻黏膜中leptin、ErK 1/2、p-ErK 1/2、JNK、p-JNK蛋白表达水平。结果：MR结果显示，leptin与AR之间存在因果关系(P1)。动物实验结果显示，与空白组比较，鼻炎组、脾虚鼻炎组的鼻部症状评分显著上升(P中医辨证论治思想提供理论支持。

关键词：鼻脾相关变应性鼻炎瘦素孟德尔随机化脾虚

内源性大麻素受体在针刺镇痛机制中的研究进展

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针刺研究 2024年第1期49卷 88-93页

作者：刘文浩吴军尚华丽博潘志锋张海波许能贵何怡瀚广州中医药大学针灸康复临床医学院广州510006 广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院广州510120 省部共建中医湿证国家重点实验室广州510120 广州中医药大学华南针灸研究中心广州510006

内源性大麻素系统作为维持和平衡人体各项机能的重要生物网络,参与疼痛、情绪、学习记忆等多项生理功能,其中内源性大麻素受体(包括Ⅰ型、Ⅱ型)在疼痛的调控中发挥着重要的作用,也成为针刺镇痛机制研究中的重要靶点。在中枢和外周神经... 详细信息

内源性大麻素系统作为维持和平衡人体各项机能的重要生物网络,参与疼痛、情绪、学习记忆等多项生理功能,其中内源性大麻素受体(包括Ⅰ型、Ⅱ型)在疼痛的调控中发挥着重要的作用,也成为针刺镇痛机制研究中的重要靶点。在中枢和外周神经系统中,针刺可以分别激活大麻素Ⅰ型受体和Ⅱ型受体,参与到中枢痛觉信号和相关递质的传导以及外周与疼痛相关的炎性反应中,进而缓解模型动物的痛觉超敏。本文系统总结了上述机制在不同类型动物模型中的作用,以期为针刺镇痛机制研究提供新思路。

关键词：内源性大麻素系统针刺镇痛内源性大麻素受体动物实验综述

加味芍药甘草汤含药血清对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞迁移、侵袭和血管生成的影响

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中药药理与临床 2024年

作者：温小慧刘学红黄诗雅李坤寅关永格广州中医药大学第三临床医学院广州中医药大学第三附属医院

目的：通过体外实验探讨加味芍药甘草汤对子宫腺肌病（Adenomyosis，AM）异位子宫内膜间质细胞（Endometrial stromal cells，EScs）的迁移、侵袭和血管生成过程的影响。方法：原代收集、培养并分离EScs，利用细胞免疫组化法进行细胞鉴... 详细信息

目的：通过体外实验探讨加味芍药甘草汤对子宫腺肌病（Adenomyosis，AM）异位子宫内膜间质细胞（Endometrial stromal cells，EScs）的迁移、侵袭和血管生成过程的影响。方法：原代收集、培养并分离EScs，利用细胞免疫组化法进行细胞鉴定，通过Transwell迁移、侵袭实验检测加味芍药甘草汤对EScs迁移、侵袭能力的影响，通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测EScs中血管生成相关因子mRNA的表达，通过免疫荧光标记细胞中微血管密度（Microvascular density，MVD）。结果：收集、培养并分离的6例人AM原代细胞均为EScs。与空白对照组相比，1.69 g/kg加味芍药甘草汤10%含药血清组和地诺孕素组的细胞迁移和侵袭能力均显著降低（P<0.01），加味芍药甘草汤10%含药血清组Vegf、Hif-1α、Pdgf、Ang、Fgf1和Fgf2的mRNA表达明显下调（P<0.05或P<0.01），MVD免疫荧光明显降低（P<0.05），地诺孕素组Vegf、Pdgf、Ang和Fgf1的mRNA表达明显下调（P<0.05或P<0.01）；与正常对照血清组相比，加味芍药甘草汤10%含药血清组和地诺孕素组的细胞迁移和侵袭能力明显降低（P<0.05或P<0.01），加味芍药甘草汤10%含药血清组Fgf1和Fgf2的mRNA表达明显下调（P<0.05），地诺孕素组Ang的mRNA表达明显下调（P<0.05）。结论：所获细胞为EScs，加味芍药甘草汤含药血清可以限制EScs的迁移、侵袭能力，抑制血管生成相关因子的表达。

关键词：加味芍药甘草汤子宫腺肌病迁移侵袭血管生成

基于“肺与大肠相表里”探讨中医药调控肠道菌群治疗慢性阻塞性肺疾病的内涵

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 169-177页

作者：王晗笑栾哲宇封继宏天津中医药大学天津301617 天津中医药大学第二附属医院天津300250

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种异质性肺部状态,其特征是持续性、并通常是进行性的气流阻塞,包括支气管炎、细支气管炎在内的气道异常及呼吸困难、咳嗽、咳痰在内的慢性呼吸道症状等,是世界范围内的主要死亡原因之一。中医学提出“肺与... 详细信息

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种异质性肺部状态,其特征是持续性、并通常是进行性的气流阻塞,包括支气管炎、细支气管炎在内的气道异常及呼吸困难、咳嗽、咳痰在内的慢性呼吸道症状等,是世界范围内的主要死亡原因之一。中医学提出“肺与大肠相表里”,认为肺脏和大肠在生理病理方面相互联系影响,可采用补益肺脾肾,以及祛痰、逐瘀等治法肺肠同治。肠道菌群在人体的免疫、神经和代谢等方面发挥着重要作用,并可能通过影响肺肠组织结构功能,调节肺部炎症和免疫等作用于COPD。中医药能够调控肠道菌群使其恢复平衡,从而有利于COPD的恢复,如以补益肺补肾为主的治法能够调控肠道菌群,改善肺肠组织损伤,调节肺部免疫;以祛痰、逐瘀为主的治法能够调控肠道菌群,降低肺部炎症反应。该文基于“肺与大肠相表里”,以肠道菌群为关键点,阐述了中医药调控肠道菌群治疗COPD的内涵,旨在为临床通过肠道菌群治疗COPD提供新思路。

关键词：慢性阻塞性肺病肠道菌群中医药肺与大肠相表里

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基于NrF2/HO-1/NF-κB信号通路探讨马齿苋外用对变应性接触性皮炎小鼠的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：王小雪樊官伟蒲翔张仲昭陈霞唐英吴娜娜骆江利孔祥艳贵州中医药大学天津中医药大学第一附属医院贵州中医药大学第一附属医院

目的：基于核因子E2相关因子2（NrF2）/血红素加氧酶-1（HO-1）/核因子-κB（NF-κB）信号通路探讨马齿苋外用对变应性接触性皮炎（ACD）小鼠的保护作用机制。方法：将70只6周龄SPF级雌性KM小鼠适应性喂养1周，随机分成空白组、模型组... 详细信息

目的：基于核因子E2相关因子2（NrF2）/血红素加氧酶-1（HO-1）/核因子-κB（NF-κB）信号通路探讨马齿苋外用对变应性接触性皮炎（ACD）小鼠的保护作用机制。方法：将70只6周龄SPF级雌性KM小鼠适应性喂养1周，随机分成空白组、模型组、复方醋酸地塞米松乳膏组(2.075×10-2g·g-1)、空白基质乳膏组、马齿苋低剂量乳膏组(0.1 g·g-1)、马齿苋高剂量乳膏组(0.2 g·g-1)、马齿苋+抑制剂组(0.2 g·g-1+30 mg·kg-1ML385)，每组10只。于实验前一天对小鼠进行颈背部剃毛处理，除正常组外其余各组小鼠采用2，4-二硝基氯苯（DNCB）建立ACD模型，经分组给药处理后，观察小鼠皮肤皮损评分、苏木素-伊红（HE）染色皮肤组织病理学变化，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠血清中白细胞介素（IL-6）、IL-1β、活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）水平，免疫组化（IHC）、蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测小鼠皮肤组织Nrf2/ HO-1/ NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠皮肤皮损评分升高（P<0.01）、皮肤组织出现严重的病理损伤、小鼠血清中IL-1β、IL-6、ROS、MDA含量上升（P<0.01），SOD含量下降（P<0.01）；皮肤组织中NrF2、HO-1、核因子κB抑制因子α（IκBα） mRNA及蛋白表达水平上调（P<0.01），磷酸化（p）-IκBα、p-NF-κB p65蛋白及NF-κB p65 mRNA表达水平下调（P<0.01）。与模型组及空白基质乳膏组比较，经马齿苋治疗后皮肤皮损评分下降（P<0.01）、皮肤组织病理损伤减轻、小鼠血清中IL-1β、IL-6、ROS、MDA含量降低（P<0.01），SOD含量上升（P<0.01）；皮肤组织中NrF2、HO-1、IκBα mRNA及蛋白表达水平下调（P<0.05或P<0.01），p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白及NF-κB p65 mRNA表达水平上调（P<0.05或P<0.01）。与马齿苋+抑制剂组比较，马齿苋高剂量乳膏组皮肤皮损评分降低（P<0.01）、皮肤组织病理损伤减轻、小鼠血清中IL-1β、IL-6、ROS、MDA含量降低（P<0.05或P<0.01），SOD含量上升（P<0.01）；皮肤组织中NrF2、HO-1、IκBα蛋白及NrF2、HO-1 mRNA表达水平上调（P<0.05或P<0.01），p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白及NF-κB p65 mRNA表达水平下调（P<0.05）。结论：马齿苋可通过调节NrF2/HO-1/NF-κB信号通路改善DNCB诱导的小鼠ACD皮肤损伤。

关键词：马齿苋外用治疗核因子E2相关因子2(NrF2)/血红素加氧酶-1(HO-1)/核因子-κB(NF-κB) 变应性接触性皮炎作用机制

基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP诱导的肺泡上皮细胞凋亡探讨人参皂苷Rg1减轻脓毒症急性肺损伤的作用和机制

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中国中药杂志 2024年第14期49卷 3837-3847页

作者：仲凯强黄荫桂陈秀萍陈瑞邬楚雯邹佳桢奚小土李俊闫春江广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第二附属医院广东广州510120 广东药科大学生命科学与生物制药学院广东广州510006 广东省中医急诊研究重点实验室广东广州510006 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405

探讨人参皂苷Rg1(GRg1)对脓毒症急性肺损伤(SALI)的干预疗效与作用机制。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立SALI小鼠模型,随机分组给予GRg1干预,记录存活与体质量变化情况,小鼠无创肺功能检测系统检测肺功能,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织... 详细信息

探讨人参皂苷Rg1(GRg1)对脓毒症急性肺损伤(SALI)的干预疗效与作用机制。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立SALI小鼠模型,随机分组给予GRg1干预,记录存活与体质量变化情况,小鼠无创肺功能检测系统检测肺功能,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织损伤情况,酶联免疫吸附实验(ELISA)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测炎症因子含量与表达,流式细胞术、TUNEL染色等检测凋亡情况,蛋白质印迹(Western blot)、qRT-PCR检测凋亡相关分子胱天蛋白酶3(caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)与内质网应激相关分子蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核翻译起始因子2α激酶(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)的活化表达情况。此外,利用脂多糖(LPS)体外诱导小鼠肺泡上皮细胞损伤模型,给予内质网应激激动剂衣霉素(TUN)验证GRg1的作用机制。结果显示,与模型组相比,GRg1干预可提高CLP小鼠生存时间,减缓其体质量下降,改善其受损的肺功能指标。同时,与模型组相比,GRg1给药组小鼠肺组织病理损伤评分降低,肺组织湿干比和肺泡灌洗液蛋白含量降低,血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及肺组织中上述细胞因子的mRNA表达下降,肺泡上皮细胞凋亡比例明显下降,caspase-3、Bax表达下调,Bcl-2表达上调,PERK、eIF2α、ATF4、CHOP活化及表达下调。体外结果显示联合TUN后,GRg1降低凋亡细胞比例、下调凋亡相关蛋白表达的作用被抑制。综上,GRg1可减少肺泡上皮细胞凋亡,抑制肺部炎症渗出,减轻肺损伤,改善肺功能,可能与PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路相关。

关键词：脓毒症人参皂苷Rg1 急性肺损伤内质网应激细胞凋亡

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