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葛花解酒涤脂汤对酒精性肝病小鼠肝脏组织能量代谢的影响

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北京中医药大学学报 2024年第5期47卷 662-671页

作者：刘蕊易旭吴雪莉王硕石何典城游绍伟贵州中医药大学第二附属医院临床医学实验室贵阳550002 贵州中医药大学第二附属医院消化内科

目的检测酒精性肝病(ALD)小鼠肝脏组织能量代谢相关指标水平,并探讨葛花解酒涤脂汤的干预作用。方法 40只雄性C57BL/6J小鼠任意分为正常对照组、模型组、葛花解酒涤脂汤高剂量组(4.94 g/kg)、葛花解酒涤脂汤低剂量组(2.47 g/kg)和白藜... 详细信息

目的检测酒精性肝病(ALD)小鼠肝脏组织能量代谢相关指标水平,并探讨葛花解酒涤脂汤的干预作用。方法 40只雄性C57BL/6J小鼠任意分为正常对照组、模型组、葛花解酒涤脂汤高剂量组(4.94 g/kg)、葛花解酒涤脂汤低剂量组(2.47 g/kg)和白藜芦醇组(0.40 g/kg),每组8只。除正常对照组外,其他各组小鼠先予Lieber-DeCarli对照液体饲料喂养5 d,随后予Lieber-DeCarli酒精液体饲料喂养10 d,第16天灌胃31.5%乙醇溶液1次,以制备ALD小鼠模型。造模结束后第2天起,各干预组灌胃相应药物,每日1次,连续9 d。苏木素-伊红染色和油红O染色观察肝脏组织脂肪变性情况;分光光度法检测肝脏组织Na+K+-腺苷三磷酸(ATP)酶、Ca^(2+)Mg^(2+)-ATP酶活性,琥珀酸脱氢酶(SDH)、肝糖原含量;反相高效液相色谱法检测肝脏组织ATP、腺苷二磷酸(ADP)和腺苷一磷酸(AMP)含量,以及AMP/ATP值、总腺苷酸池(TAN)含量、能荷值(EC);实时荧光PCR法检测肝脏组织沉默信息调节因子1(SIRT1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α2 mRNA表达;蛋白质印迹法检测肝脏组织SIRT1、AMPKα2、AMPKβ1蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠肝脏组织脂肪变性病变明显,肝脏组织Ca^(2+)Mg^(2+)-ATP酶活性、SDH含量降低,肝糖原含量升高,EC、AMP/ATP值降低,ATP、ADP、AMP和TAN含量升高,SIRT1、AMPKα2 mRNA表达降低,AMPKβ1蛋白表达升高(均P<0.05)。与模型组比较,葛花解酒涤脂汤高、低剂量组肝脏组织脂肪变性明显减轻,肝脏组织Na+K+-ATP酶活性降低,EC及SIRT1、AMPKα2 mRNA表达升高(均P<0.05);葛花解酒涤脂汤低剂量组Ca^(2+)Mg^(2+)-ATP酶活性、SDH及ATP含量升高(均P<0.05);葛花解酒涤脂汤高剂量组AMP/ATP值升高(P<0.05);葛花解酒涤脂汤高、低剂量组和白藜芦醇组肝脏组织SIRT1蛋白表达升高(均P<0.05);葛花解酒涤脂汤低剂量组和白藜芦醇组AMPKα2蛋白表达升高(均P<0.05)。与葛花解酒涤脂汤高剂量组比较,葛花解酒涤脂汤低剂量组、白藜芦醇组肝脏组织ATP、TAN含量和EC升高,AMP/ATP值降低(均P<0.05);葛花解酒涤脂汤低剂量组AMPKα2 mRNA表达降低(P<0.05);白藜芦醇组SIRT1、AMPKα2蛋白表达升高(均P<0.05)。与葛花解酒涤脂汤低剂量组比较,白藜芦醇组AMPKβ1蛋白表达降低(P<0.05)。结论慢性酒精摄入引起的能量代谢改变可能与小鼠ALD发生有关,葛花解酒涤脂汤干预可以改善ALD小鼠肝脏能量代谢异常。

关键词：酒精性肝病葛花解酒涤脂汤能量代谢沉默信息调节因子1 腺苷酸活化蛋白激酶小鼠

基于MyD88/ERK通路及NF-κB核移位探讨大黄素对局灶性脑缺血大鼠的作用及机制

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中药新药与临床药理 2024年第7期35卷 1001-1007页

作者：彭丽霖郑泽泉覃露露许浩游翁銮坤赵敏张嘉辉文龙龙刘茂才招远祺广州中医药大学第二临床医学院广州中医药大学第二附属医院

目的基于髓样分化因子88（My D88）/细胞外信号调节激酶（ERK）通路及核因子κB（NF-κB）核移位探讨大黄素对局灶性脑缺血大鼠的作用及机制。方法将SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、大黄素组，每组6只，采用大脑中动脉栓... 详细信息

目的基于髓样分化因子88（My D88）/细胞外信号调节激酶（ERK）通路及核因子κB（NF-κB）核移位探讨大黄素对局灶性脑缺血大鼠的作用及机制。方法将SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、大黄素组，每组6只，采用大脑中动脉栓塞法建立大脑中动脉短暂性闭塞模型（t MCAO）。大黄素组大鼠于造模前72、48、24 h，分别给予40 mg·kg-1大黄素灌胃给药，共3次。造模结束后24 h，对大鼠进行神经功能评分；采用TTC染色法检测脑组织梗死灶面积；HE染色法观察脑组织形态变化；RT-q PCR法检测脑组织中My D88、肿瘤坏死因子α（TNF-α） m RNA表达水平；Western Blot法检测脑组织中My D88、ERK、p-ERK、TNF-α蛋白表达水平；免疫荧光法检测脑组织中NF-κB蛋白表达。结果与假手术组比较，模型组大鼠神经功能评分显著升高（P<0.01），脑梗死面积显著增加（P<0.01）；缺血半暗带皮质区中出现细胞坏死，细胞形态异常，胞核破碎萎缩，细胞数量明显降低；脑组织中My D88、TNF-α m RNA表达水平显著升高（P<0.01,P<0.001）,My D88、p-ERK/ERK、TNF-α蛋白表达水平均明显升高（P<0.05,P<0.01,P<0.001）,NF-κB入核细胞数占比显著升高（P<0.001）。与模型组比较，大黄素组大鼠的神经功能评分明显降低（P<0.05），脑梗死面积明显缩小（P<0.05）；缺血半暗带皮质区的神经元数量及形态得到一定程度恢复；脑组织中My D88、TNF-α m RNA表达水平均明显降低（P<0.05,P<0.01）,My D88、p-ERK/ERK、TNF-α蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）,NF-κB入核细胞数占比显著降低（P<0.001）。结论大黄素对局灶性脑缺血大鼠具有预防保护作用，可能与其抑制My D88活化、ERK磷酸化及NF-κB核移位，进而下调炎症级联反应及TNF-α等促炎因子分泌，从而发挥抗炎作用有关。

关键词：大黄素缺血性卒中局灶性脑缺血 MyD88/ERK通路核因子κB 抗炎作用大鼠

来氟米特对类风湿关节炎滑膜细胞焦亡的调控作用

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中国医院药学杂志 2024年

作者：李浩杨豫正凌益马熙马武开贵州中医药大学第二附属医院风湿免疫科贵州中医药大学第二临床医学院

目的：探讨来氟米特调控CASP-1/3/IL-1β信号通路抑制人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞焦亡的作用机制。方法：组织块法培养人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（Human rheumatoid arthritis synovial fibroblast， HFLS-RA）予来氟米特及实验... 详细信息

目的：探讨来氟米特调控CASP-1/3/IL-1β信号通路抑制人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞焦亡的作用机制。方法：组织块法培养人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（Human rheumatoid arthritis synovial fibroblast， HFLS-RA）予来氟米特及实验相关试剂干预。HE染色和免疫组化鉴定细胞，流式细胞术检测细胞周期，ELISA、RT-qPCR和Western blot法检测信号通路中焦亡相关炎性蛋白IL-1β、IL-18、Caspase-1、Caspase-3、NLRP3和GSDMD表达量。结果：组织块法培养的细胞鉴定为HFLS-RA。细胞周期结果，在G1期，与阳性对照组比较，来氟米特组细胞DNA生成量升高（P<0.05）；在G2、S期，与阳性对照组比较，来氟米特组细胞DNA生成量降低（P<0.05）。ELISA结果显示，与阳性对照组比较，来氟米特组IL-1β、IL-18、Caspase-1、Caspase-3的分泌量降低（P<0.05）。RT-qPCR结果显示，与阳性对照组比较，来氟米特组IL-1β、IL-18、Caspase-1、Caspase-3、NLRP3和GSDMD的mRNA表达降低（P<0.05）。Western blot结果显示，与阳性对照组比较，来氟米特组IL-1β、IL-18、Caspase-1、Caspase-3、NLRP3和GSDMD蛋白表达量降低（P<0.05）。结论：来氟米特调控CASP-1/3/IL-1β信号通路中多个焦亡相关蛋白。通过抑制中上游的NLRP3、Caspase-1合成炎小体，减少GSDMD蛋白表达而抑制通路下游IL-1β、IL-18等炎症因子生成及释放，在细胞周期G0/G1起阻滞作用，可能是来氟米特治疗RA的机制之一。

关键词：类风湿关节炎细胞焦亡来氟米特滑膜成纤维细胞 CASP-1/3/IL-1β信号通路

盐酸青藤碱诱导黏连性膝关节强直家兔成纤维细胞凋亡的机制研究

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生物化学与生物物理进展 2024年第4期51卷 959-968页

作者：侯新聚雷洪峰陈勇黎芙希孙敬宁刘佳铭马红梅南昌市洪都中医院南昌330008 广州中医药大学第四临床医学院广州510006 广州中医药大学第二临床医学院广州510006

目的观察盐酸青藤碱对膝关节黏连强直的家兔成纤维细胞增殖和相关基因表达的影响,并进一步尝试探讨其对抗膝关节黏连强直的作用机制。方法以体外培养法培养成纤维细胞,并设对照组、盐酸青藤碱低中高浓度实验组。CCK-8法检测成纤维细胞... 详细信息

目的观察盐酸青藤碱对膝关节黏连强直的家兔成纤维细胞增殖和相关基因表达的影响,并进一步尝试探讨其对抗膝关节黏连强直的作用机制。方法以体外培养法培养成纤维细胞,并设对照组、盐酸青藤碱低中高浓度实验组。CCK-8法检测成纤维细胞增殖的情况;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测经过盐酸青藤碱处理后,成纤维细胞相关基因mRNA表达的改变,用ELISA法检测药物的作用对血清中炎症因子等水平的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测相关蛋白质的表达。结果盐酸青藤碱能降低成纤维细胞存活率,且随浓度升高存活率逐渐降低。盐酸青藤碱中各个组的效果均十分明显(P<0.05)。在相关基因的mRNA表达层面,与对照组比较,盐酸青藤碱各组炎症因子均显著下调(P<0.05),凋亡蛋白的表达量显著上升、Bcl-2的mRNA表达量下降(P<0.05),而PI3K/mTOR/AKT3信号通路分子的mRNA表达量均下降(P<0.05)。在蛋白质表达层面,与对照组相比较,中、高剂量盐酸青藤碱组血清中炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β、TGF-β的水平均明显下调(P<0.05),凋亡蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3/7及Bax的表达量均上调,并且与给药剂量成正相关,而抗凋亡蛋白Bcl-2、PI3K/AKT3/mTOR信号通路的表达量则与给药剂量成负相关。盐酸青藤碱对家兔膝关节成纤维细胞的存活表现为显著的抑制作用,作用机制或与下调炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β的表达,并促进凋亡蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3/7及Bax的表达,抑制Bcl-2的表达,抑制其下游PI3K/AKT3/mTOR信号通路的基因表达有关。结论盐酸青藤碱可抑制黏连性膝关节强直家兔膝关节成纤维细胞的炎症反应和加速成纤维细胞的凋亡,或可通过该机制为改善和治疗黏连性膝关节强直提供新的方法。

关键词：盐酸青藤碱黏连性膝关节强直家兔成纤维细胞

机器人辅助椎弓根置钉临床疗效的系统评价再评价

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中国循证医学杂志 2024年第5期24卷 584-590页

作者：孙文熙高泽辉丘明旺林锐王洪伸陈博来林涌鹏广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广东省中医院广州510120 广州中医药大学第二附属医院/中医证候全国重点实验室广州510120

目的对机器人辅助椎弓根置钉疗效的系统评价/Meta分析(SR/MA)进行再评价。方法计算机检索CNKI、VIP、WanFang Data、SinoMed、PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science数据库,搜集有关机器人辅助椎弓根置钉的SR/MA,检索时... 详细信息

目的对机器人辅助椎弓根置钉疗效的系统评价/Meta分析(SR/MA)进行再评价。方法计算机检索CNKI、VIP、WanFang Data、SinoMed、PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science数据库,搜集有关机器人辅助椎弓根置钉的SR/MA,检索时限均为建库至2023年4月28日。由2名研究者独立筛选文献、提取资料后,分别使用PRISMA、AMSTAR-Ⅱ、ROBIS和GRADE工具评价纳入研究的报告质量、方法学质量、偏倚风险以及证据质量强度。结果共纳入20篇SR/MA。纳入研究结论显示机器人辅助椎弓根置钉准确性相比徒手置钉可能更高,并发症数量更少。所有SR/MA的报告质量、方法学及置钉疗效的证据质量均为低或极低,偏倚风险为高风险。其主要原因包括纳入研究的异质性偏高,研究方法和选择标准模糊、关键报告流程缺失等。结论机器人辅助椎弓根置钉相比传统徒手置钉可能具有更好的临床疗效,但相关SR/MA的质量较低。

关键词：骨科手术机器人椎弓根螺钉系统评价再评价

小柴胡颗粒的化学成分及大鼠口服后的入血成分分析

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中国中药杂志 2024年

作者：刘晓丽欧沛思林爱华刘奕明广州中医药大学第二临床医学院广州中医药大学第二附属医院珠海医院广东省中医证候临床研究重点实验室

运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱（UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS）技术及超高效液相色谱串联三重四极杆质谱（UPLC-MS/MS）对小柴胡颗粒化学成分及大鼠口服后的入血成分进行鉴定。采用CORTECS UPLC C18+（2.1×100 mm，1.6 μm... 详细信息

运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱（UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS）技术及超高效液相色谱串联三重四极杆质谱（UPLC-MS/MS）对小柴胡颗粒化学成分及大鼠口服后的入血成分进行鉴定。采用CORTECS UPLC C18+（2.1×100 mm，1.6 μm）色谱柱，乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，在电喷雾离子源正、负离子模式下采集数据后与对照品比较保留时间、精确分子质量、二级离子碎片以及参照相关文献进行化学成分鉴别；通过皮下注射干酵母建立大鼠发热模型后，灌胃给予正常及模型组大鼠小柴胡颗粒，给药后于不同时间点眼眶静脉取血，分离血浆，在多反应监测模式（MRM）下进行扫描鉴定入血成分。从小柴胡颗粒中共初步鉴定出112种化学成分，包括63种黄酮类、31种皂苷类、6种有机酸类、4种苯丙素类、3种氨基酸类以及5种其他类化合物；从血浆中鉴定得到18个入血原型成分。该研究鉴定了小柴胡颗粒化学成分及入血成分，为进一步的药效物质基础及质量控制研究奠定了基础。

关键词：小柴胡颗粒化学成分入血成分 UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS UPLC-MS/MS

基于网络药理学、分子对接和动物实验探究党参-茯苓药对对酒精性肝病的作用机制

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中国药理学通报 2024年第5期40卷 945-954页

作者：蔡世揿毛雷鸣周丽芳黄聪周素芳贵州中医药大学第一临床医学院贵州贵阳550000 贵阳市第二人民医院中医科贵州贵阳550081 贵州中医药大学基础医学院机能学实验室贵州贵阳550000 贵州中医药大学第一附属医院消化内科贵州贵阳550000

目的研究党参-茯苓治疗酒精性肝病的潜在机制。方法利用TCMSP、Swiss Target Prediction获得党参茯苓有效成分及作用靶点;OMMI、DisGeNET、GeneCards数据库获取酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)疾病靶点;STRING数据库构建PPI网... 详细信息

目的研究党参-茯苓治疗酒精性肝病的潜在机制。方法利用TCMSP、Swiss Target Prediction获得党参茯苓有效成分及作用靶点;OMMI、DisGeNET、GeneCards数据库获取酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)疾病靶点;STRING数据库构建PPI网络;使用Bioconductor软件进行GO、KEGG通路富集分析。Cytoscape3.7.1软件构建“药物-成分-靶点-疾病”网络,筛选关键靶点进行分子对接;通过实验验证党参茯苓对ALD大鼠的作用。结果剔除重复的靶点,获得36个化学成分和529个潜在作用靶点。GO富集分析,得到了生物过程2245条、细胞组成74条和分子功能相关125个。KEGG富集分析涉及了159个信号通路,其中包括PI3K-Akt、MAPK和AGE-RAGE信号通路。分子对接结果显示,AKT1、MMP9等靶点可能是党参-茯苓治疗ALD的关键靶点。实验表明,党参-茯苓能改善ALD大鼠肝细胞炎症水平,降低ALD大鼠TC、TG、AST、ALT、GGT水平,PCR检测得出党参-茯苓可降低PI3K、AKT表达,电镜结果显示党参-茯苓影响细胞自噬,促进自噬溶酶体生成。结论初步揭示党参-茯苓可能是通过影响AKT、TNF和MAPK的表达,减轻炎性细胞浸润,推测党参-茯苓可能通过PI3K-Akt信号通路影响自噬,从而治疗ALD,并通过PCR检测初步验证,为深入探索党参-茯苓药对治疗ALD提供依据。

关键词：网络药理学分子对接动物实验酒精性肝病党参-茯苓细胞自噬

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基于水通道蛋白与芳香类中药相关性探讨阿尔茨海默病机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第17期30卷 227-238页

作者：陈森林黄赛娥王志晨李艳况时祥福建中医药大学福建省认知康复重点实验室福建中医药大学附属康复医院贵州中医药大学第二附属医院

阿尔茨海默病（AD）是一种与年龄相关的神经退行性疾病，属中医学“痴呆”范畴。中医学认为“痰、湿、瘀、毒”是其发生、发展的重要病机，应用芳香类中药清除互结之痰湿、瘀毒是中医治疗AD的重要方法。水通道蛋白（AQPs）参与中枢神经... 详细信息

阿尔茨海默病（AD）是一种与年龄相关的神经退行性疾病，属中医学“痴呆”范畴。中医学认为“痰、湿、瘀、毒”是其发生、发展的重要病机，应用芳香类中药清除互结之痰湿、瘀毒是中医治疗AD的重要方法。水通道蛋白（AQPs）参与中枢神经系统（CNS）水液代谢，在CNS的脑水平衡中起着重要作用，深度参与了AD发生发展过程。AQPs可能是大量芳香类中药的关键作用靶点之一。该文从AQPs与AD重要病机“痰、湿、瘀、毒”的内在关系出发，探讨芳香类中药治疗AD的现代医学内涵，为中医药防治AD提供思路。

关键词：阿尔茨海默病水通道蛋白芳香类中药芳香疗法痰湿瘀毒

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电针通过调控ILC2功能和白色脂肪棕色化治疗肥胖大鼠的作用机制

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World Journal of Acupuncture-Moxibustion 2024年第2期34卷 138-146页

作者：陈剑坤吴苑李文珍黄梦芬黄彬谢长才李际强卢月陈裕中医湿证国家重点实验室广州中医药大学第二附属医院广州511400 广州中医药大学第二临床医学院广州511400 广州中医药大学针灸康复临床医学院广州511400 广州中医药大学广州511400

Objective:To observe the effects of electroacupuncture(EA)on type 2 innate lymphoid cell(ILC2)function in white adipose tissue(WAT)of high-fat diet(HFD)-induced obese rats to reveal the mechanism underlying weight ***:Male Winstar rats(n=15)were randomly divided into control,HFD,and HFD+EA groups,with five rats in each *** obesity model was established by feeding rats with a ***(2 Hz,1 mA)was applied to"Zhongwan(CV12)"bilateral"Tianshu(ST25)""Zusanli(ST36)"and"Sanyinjiao(SP6)"for15 min,7 days a week,for a total of 5 *** EA treatment,the HFD group was fed a HFD,whereas rats in the control group were maintained on a normal *** was no intervention in either the control or the HFD *** weight was measured ***-field adipocyte morphology,adipocyte volume,and the number of abdominal WAT were observed under a microscope after sectioning and hematoxylin and eosin *** levels of IL-5(interleukin-5),IL-13(interleukin-13),IL-33(interleukin-33),and ST2(growth stimulating gene 2 protein)in the WAT were assayed using enzymelinked immunosorbent assay and reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR).The expression levels of browning markers including PGClα(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha),PPARγ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma),PRDM16(histone-lysine Nmethyltransferase),and UCP1(uncoupling protein 1 in WAT were detected by western blot analysis and ***:After a 7-week induction period,rats in both the HFD and HFD+EA groups were 20%heavier than their initial weights before modeling(P<0.01,P<0.001).Following a 5-week EA intervention,the body mass and Lee index of obese rats were significantly reduced(P<0.05).The HE results showed that adipocytes in the HFD group displayed a significant increase in diameter and a decrease in number compared to the control ***,in the HFD+EA group,white adipocytes exhibited reduced diameter and appeared more regular i

关键词： Obesity Type 2 innate lymphoid cells Browning Adiposetissue Electroacupuncture