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微环DNA载体介导的shRNA在HBV转基因小鼠中的抗病毒作用

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解放军医学杂志 2017年第11期42卷 979-984页

作者：李秀梅刘光泽谢勇孔祥平解放军第458医院全军肝病中心、全军转基因动物重点实验室广州510600

目的探讨微环DNA载体介导的shRNA对HBV转基因小鼠体内乙肝病毒复制及表达的抑制效应。方法采用分子克隆技术制备靶向HBV基因的shRNA通用质粒p U6-shRNA HBV和微环shRNA质粒p MC-U6-shRNA HBV。将HBV转基因小鼠随机分为微环shRNA组、通... 详细信息

目的探讨微环DNA载体介导的shRNA对HBV转基因小鼠体内乙肝病毒复制及表达的抑制效应。方法采用分子克隆技术制备靶向HBV基因的shRNA通用质粒p U6-shRNA HBV和微环shRNA质粒p MC-U6-shRNA HBV。将HBV转基因小鼠随机分为微环shRNA组、通用质粒shRNA组和无关质粒对照组,利用水动力转染技术分别导入p MCU6-shRNA HBV、p U6-shRNA HBV及对照载体p U6-control。于转染后第1、7、14、21、28、35天,分别采用Real-time PCR及化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)检测转基因小鼠血清HBV DNA及HBs Ag水平,免疫组化染色观察转基因小鼠肝脏HBc Ag的表达。结果质粒注射后第7~21天,p U6-shRNA HBV及p MC-U6-shRNA HBV对转基因小鼠血清HBs Ag的表达及HBV DNA的复制均有明显抑制作用,与p U6-control相比差异有统计学意义(P第35天基本回复至对照水平;至注射后35d,p MC-U6-shRNA HBV依然保持较强的体内抑制作用,与其他两组比较差异有统计学意义(P肝病毒的抑制作用持续时间更长久。采用微环DNA作为shRNA的体内递送载体与普通的质粒载体相比具有一定优势。

关键词：微环载体 shRNA 转基因小鼠乙型肝炎

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血液净化在重症肝病中的应用研究进展

肝脏 2024年第8期29卷 889-891页

作者：姚红宇周霞刘鸿凌解放军总医院第五医学中心肝病医学部联勤医学重点专科

血液净化技术是指通过分离、吸附等方法对血液或血浆中特定物质进行清除，临床上常用的方式有治疗性血浆置换、双重滤过血浆置换技术、免疫吸附、血浆透析滤过等。血液净化治疗多用于难治或少见疾病，涉及多学科，特别在重症肝病、肝衰... 详细信息

血液净化技术是指通过分离、吸附等方法对血液或血浆中特定物质进行清除，临床上常用的方式有治疗性血浆置换、双重滤过血浆置换技术、免疫吸附、血浆透析滤过等。血液净化治疗多用于难治或少见疾病，涉及多学科，特别在重症肝病、肝衰竭、药物中毒等方面研究较多，研究结果提示其能稳定患者病情、纠正内环境、提高存活率。

关键词：血液净化重症肝病进展

来源：博看期刊

治疗性双质粒HBV DNA疫苗的体外转染表达与鉴定

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天津医药 2006年第3期34卷 145-147页

作者：饶桂荣刘惠萍何晓嫱杨富强莫国玉陈光明广州解放军第458医院全军肝病中心 510600

目的:探讨治疗性双质粒HBVDNA疫苗转染COS-7细胞后目的基因的表达情况。方法:以脂质体转染试剂LipofectamineTM2000介导,将带有preS2+S基因的重组疫苗质粒pS2.S和带有hIL2+hIFNγ融合基因的重组佐剂质粒pFP分别转染COS-7细胞,同时设立... 详细信息

目的:探讨治疗性双质粒HBVDNA疫苗转染COS-7细胞后目的基因的表达情况。方法:以脂质体转染试剂LipofectamineTM2000介导,将带有preS2+S基因的重组疫苗质粒pS2.S和带有hIL2+hIFNγ融合基因的重组佐剂质粒pFP分别转染COS-7细胞,同时设立空质粒转染和未转染细胞为对照组,于转染后24,48,72,96h采用ELISA法检测细胞培养上清的HBsAg、融合蛋白白细胞介素(IL-2)及干扰素(IFN-γ)的表达,并测定融合蛋白的IL-2、IFN-γ活性,采用ECLWesternblotting分析和鉴定目的蛋白preS2+S、IL-2及IFN-γ的分子质量大小。结果:双质粒在转染COS-7细胞后不同时间均可进行分泌表达,且48h时目的蛋白的表达量达峰值,其中表达的融合蛋白具有较高的IL-2和IFN-γ的生物学活性,pS2.S和pFP的转染上清分别在30.6ku和110ku处有特异性阳性反应条带。结论:HBVDNA疫苗质粒pS2.S和佐剂质粒pFP在COS-7细胞的最佳表达时间是转染后48h,并鉴定双质粒表达产物的分子质量大小分别为30.6ku和110ku。

关键词：肝炎疫苗乙型疫苗 DNA转染质粒

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砥砺奋进筑辉煌扬帆进取向未来

实用皮肤病学杂志 2024年第1期17卷 I0001-I0001,M0004页

作者：杨蓉娅解放军总医院第七医学中心皮肤科解放军总医院全军皮肤损伤修复研究所解放军总医院第七医学中心党委《实用皮肤病学杂志》《中华医学美学与美容学杂志》

新春伊始,万象更新。值此甲辰龙年到来之际,本刊编委会、编辑部全体同仁谨向所有关心、支持我刊的历届编委、审稿专家及作者、读者致以最衷心的感谢、最诚挚的问候和最美好的祝福!

关键词：审稿专家历届编委祝福编委会

甲基丙烯酰化透明质酸/脱细胞华通胶水凝胶支架的制备与表征

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中国组织工程研究 2024年第22期28卷 3517-3523页

作者：袁勋丁振罡付力伟吴江郑亚哲张智超田广招眭翔刘舒云郭全义贵州医科大学附属医院骨科贵州省贵阳市550004 解放军总医院第一医学中心骨科研究所骨科再生医学北京市重点实验室全军骨科战创伤重点实验室北京市100853

背景:随着组织工程为关节软骨损伤修复这一世界难题带来了新的希望,构建成分仿生的光固化3D打印水凝胶支架对软骨组织工程具有重要意义。目的:通过数字光处理3D打印技术构建成分仿生的甲基丙烯酰化透明质酸/脱细胞华通胶水凝胶支架,评... 详细信息

背景:随着组织工程为关节软骨损伤修复这一世界难题带来了新的希望,构建成分仿生的光固化3D打印水凝胶支架对软骨组织工程具有重要意义。目的:通过数字光处理3D打印技术构建成分仿生的甲基丙烯酰化透明质酸/脱细胞华通胶水凝胶支架,评价其生物相容性。方法:从人脐带中分离提取华通胶组织后进行脱细胞处理,冷冻干燥后磨成粉末,溶于PBS中制备50 g/L的脱细胞华通胶溶液。制备甲基丙烯酰化透明质酸,冻干后溶于PBS中制备50 g/L的甲基丙烯酰化透明质酸溶液。将脱细胞华通胶溶液与甲基丙烯酰化透明质酸溶液以体积比1∶1混合,加入光引发剂后作为生物墨水。通过数字光处理3D打印技术分别制备甲基丙烯酰化透明质酸水凝胶支架(记为HAMA水凝胶支架)与甲基丙烯酰化透明质酸/脱细胞华通胶水凝胶支架(记为HAMA/WJ水凝胶支架),表征支架的微观结构、溶胀性能、生物相容性与促软骨分化性能。结果与结论:①扫描电镜下见两组支架均呈三维立体的网状结构,其中HAMA/WJ水凝胶支架纤维连接更加均匀;两组支架均在10 h内达到溶胀平衡,HAMA/WJ水凝胶支架的平衡溶胀比低于HAMA水凝胶支架(P<0.05)。②CCK-8实验显示相较于HAMA水凝胶支架,HAMA/WJ水凝胶支架可促进骨髓间充质干细胞的增殖;死活染色显示骨髓间充质干细胞在两组支架上生长良好,并且HAMA/WJ水凝胶支架上的细胞立体分布均匀、细胞数量更多;鬼笔环肽染色显示相较于HAMA水凝胶支架,HAMA/WJ水凝胶支架上的骨髓间充质干细胞黏附与铺展更佳。③将骨髓间充质干细胞接种于两组支架后进行成软骨诱导培养,qRT-PCR检测结果显示,HAMA/WJ水凝胶支架组聚集蛋白聚糖、SOX9、Ⅱ型胶原mRNA表达量均高于HAMA水凝胶支架组(P<0.05,P<0.01)。④结果表明,数字光处理3D生物打印HAMA/WJ水凝胶支架可促进骨髓间充质干细胞的增殖、黏附及成软骨分化。

关键词：华通胶甲基丙烯酰化透明质酸水凝胶支架数字光处理3D打印软骨损伤骨髓间充质干细胞组织工程

镍钛记忆合金三脚固定器治疗月骨缺血性坏死的远期疗效

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中国修复重建外科杂志 2024年第9期38卷 1059-1064页

作者：宋慕国徐永清何晓清李川中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院骨科昆明650032 昆明医科大学研究生院昆明650500

目的探讨镍钛记忆合金三脚固定器治疗月骨缺血性坏死(Kienb?ck病)的远期疗效。方法回顾分析2011年1月—2013年9月采用镍钛记忆合金三脚固定器治疗且随访10年以上的22例Kienb?ck病患者临床资料。男14例,女8例;年龄20~64岁,平均45岁。Lich... 详细信息

目的探讨镍钛记忆合金三脚固定器治疗月骨缺血性坏死(Kienb?ck病)的远期疗效。方法回顾分析2011年1月—2013年9月采用镍钛记忆合金三脚固定器治疗且随访10年以上的22例Kienb?ck病患者临床资料。男14例,女8例;年龄20~64岁,平均45岁。Lichtman分期均为Ⅲb期。按照国际内固定研究协会(AO/ASIF)分型:B1型6例,B2型2例,B3型10例,C2型4例。病程18~50个月,平均30.7个月。记录患者手术时间、术中出血量及并发症发生情况。手术前后通过腕关节正侧位X线片测量腕关节高度比及舟月角;通过Jamar测力计测量双手握力;采用疼痛视觉模拟评分(VAS)评价腕关节疼痛程度,Mayo评分评估腕关节功能,并测量腕关节桡偏、尺偏、背伸、掌屈活动度。结果手术时间45~60 min,平均52.21 min;术中出血量50~60 mL,平均58.63 mL。术中未发生神经、血管损伤。22例均获随访,随访时间10~13年,平均11.3年。术后3个月X线片示月骨密度较术前降低。术后3~6个月(平均4.5个月)舟骨和大-小多角骨实现了满意融合,融合后腕关节高度比和舟月角均较术前显著改善,差异有统计学意义(P<0.05)。术后患者腕关节疼痛均得到缓解,舟骨旋转和脱位情况也得到改善,随访期间未发现桡腕关节退行性改变,无内固定物松动、断裂或月骨持续坏死加重等情况发生。末次随访时,患者腕关节桡偏、尺偏、背伸、掌屈活动度及VAS评分、患侧握力均较术前显著改善,差异有统计学意义(P<0.05);患侧握力达健侧的99.00%±1.25%。Mayo评分为72~93分,平均85分;获优14例、良5例、满意3例,优良率86.4%。结论使用镍钛记忆合金三脚固定器行舟-大-小多角骨融合术治疗Ⅲb期Kienb?ck病,能有效融合且显著减轻患者疼痛、改善手部功能并防止进一步恶化,可获得良好远期疗效。

关键词：腕关节月骨缺血性坏死镍钛记忆合金三脚固定器远期疗效

糖尿病足溃疡合并下肢血管病变的外科诊疗全国专家共识(2024版)

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第3期40卷 206-220页

作者：中国老年医学学会烧创伤分会中华医学会烧伤外科学分会中国医师协会创面修复专业委员会胡大海黄跃生付小兵郭光华王克甲石文龙陶克不详空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032 南方科技大学医院创面修复科南方科技大学医学院创面修复与再生医学研究所深圳518055 解放军总医院医学创新研究部创伤修复与组织再生研究中心北京100853 南昌大学第一附属医院烧伤整形与创面修复医学中心空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心空军军医大学第一附属医院甲乳血管外科温州医科大学附属第一医院创面修复与再生医中心创面修复科

糖尿病足溃疡合并下肢血管病变具有发病率高、愈合缓慢、预后差的特点,如不经规范治疗易导致截肢甚至危及生命。针对合并下肢血管病变的治疗对改善糖尿病足溃疡的愈合进程至关重要,在临床实践中逐渐得到重视。近年来,关于糖尿病足溃疡... 详细信息

糖尿病足溃疡合并下肢血管病变具有发病率高、愈合缓慢、预后差的特点,如不经规范治疗易导致截肢甚至危及生命。针对合并下肢血管病变的治疗对改善糖尿病足溃疡的愈合进程至关重要,在临床实践中逐渐得到重视。近年来,关于糖尿病足溃疡合并下肢血管病变的临床研究已见诸多报道,为了进一步规范临床诊疗,由中国老年医学学会烧创伤分会、中华医学会烧伤外科学分会、中国医师协会创面修复专业委员会牵头的专家组共同审议并编写了《糖尿病足溃疡合并下肢血管病变的外科诊疗全国专家共识(2024版)》。该共识以文献证据为基础,内容涵盖了糖尿病足溃疡合并下肢血管病变的疾病特征、临床诊疗循证证据以及新技术和新治疗方法的应用,旨在为临床工作者提供关于糖尿病足溃疡合并下肢血管病变最佳筛查和诊疗方法的明确指导,希望为从事糖尿病足创面治疗的医务人员提供规范性的临床实践依据。

关键词：糖尿病足糖尿病血管病变外周动脉疾病微循环截肢术创面修复专家共识

一次性微创通道下髓核摘除治疗腰椎间盘突出症的对比研究

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颈腰痛杂志 2024年第05期45卷 946-949页

作者：周鑫易蕊肖波刘达李浩杨淮河吴良红刘书玲周江军中国人民解放军联勤保障部队第908医院骨科中国人民解放军总医院第七医学中心中国人民解放军联勤保障部队西部战区总医院江西省科学技术信息研究所

目的比较一次性微创通道下椎间盘髓核摘除术(TD)与经皮椎间孔镜椎间盘髓核摘除术(PTED)治疗腰椎间盘突出症的手术效果。方法回顾性研究2021年1月至12月收治的腰椎间盘突出症患者共63例，其中，TD组28例，PTED组35例，统计两组患者的... 详细信息

目的比较一次性微创通道下椎间盘髓核摘除术(TD)与经皮椎间孔镜椎间盘髓核摘除术(PTED)治疗腰椎间盘突出症的手术效果。方法回顾性研究2021年1月至12月收治的腰椎间盘突出症患者共63例，其中，TD组28例，PTED组35例，统计两组患者的手术时间、出血量、切口长度、透视次数、住院时间、并发症、复发率，以及术前、术后腰腿痛VAS、JOA、ODI评分、MacNab分级等随访指标，进行对比研究。结果 TD组的手术时间、透视次数明显少于PTED组，PTED组的出血量、切口长度、住院天数均少于TD组。两组患者术后第3天、1个月、3个月、6个月、12个月的腰腿痛VAS评分、JOA评分、ODI评分均较术前明显改善(P第3天的腰痛VAS评分优于TD组，两组腿痛VAS评分差异无统计学意义(P>0.05);两组术后1个月、3个月、6个月、12个月的腰腿痛VAS评分、JOA评分、ODI评分差异均无统计学意义(P>0.05)。末次随访时，两组患者均未出现复发病例。PTED组优良率为94.29%,TD组优良率为92.86%,两组优良率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TD与PTED对腰椎间盘突出症的疗效相当，取得了良好的临床疗效，可作为腰椎间盘突出症的一种微创治疗方法。

关键词：腰椎间盘突出症微创治疗一次性微创通道经皮椎间孔镜

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肾上腺消融术治疗原发性醛固酮增多症的应用与展望

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中国实用内科杂志 2024年第8期 649-652页

作者：祝之明孙芳陆军军医大学大坪医院高血压内分泌科全军高血压代谢病中心重庆市高血压研究所

原发性醛固酮增多症（primary aldosteronism,PA）的患病率高，危害性大，但其筛查率较低，诊断与评估不够精准，药物和手术治疗均有一定的局限性。对不适于药物和手术治疗的PA患者，经皮肾上腺消融术是一个可选择的治疗措施，它具有疗... 详细信息

原发性醛固酮增多症（primary aldosteronism,PA）的患病率高，危害性大，但其筛查率较低，诊断与评估不够精准，药物和手术治疗均有一定的局限性。对不适于药物和手术治疗的PA患者，经皮肾上腺消融术是一个可选择的治疗措施，它具有疗效确切、安全及副反应少的特点。为有效治疗PA，可依据PA患者的临床特征及其意愿进行治疗策略评估，确定最适合的精准治疗方案，以减少副反应及其远期心脑血管风险。

关键词：原发性醛固酮增多症治疗经皮肾上腺消融术