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Siglec-E影响小白菊内酯靶向MAPK/NF-κB通路抑制小胶质细胞M1极化

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陆军军医大学学报 2024年第7期46卷 651-660页

作者：付文莹王鹏博唐翔宇冯力元黄钰婷李鹏陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系生药学与中药学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系药剂学教研室重庆400038

目的探讨唾液酸结合样凝集素E(sialic acid binding lectin E,Siglec-E)对小白菊内酯(parthenolide,PTL)抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠小胶质细胞(BV2)M1极化作用的影响。方法①从基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)获取Siglece相关小鼠脑组织单细胞测序数据,分为野生型组(WT,n=3)和敲除型组(Siglece^(-/-),n=4)。从中筛选出小胶质细胞并分析相关差异基因及通路富集。通过shRNA干扰技术构建BV2细胞株模型,得到NC-shRNA BV2和Siglece-shRNA BV2细胞并检测Siglec-E(Siglece)表达水平。②将NC-shRNA和Siglece-shRNA细胞分别分为Control组、LPS组、PTL组和PTL+LPS组(n=3),采用RT-qPCR检测小胶质细胞M1极化标志物iNOS、IL-1β和IL-6的mRNA水平。将Siglece^(fl/fl)和Cx3cr1^(cre)小鼠交配,获得小胶质细胞特异性Siglec-E缺失(Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre))小鼠,并建立LPS诱导的神经炎症模型。③将出生4 d的各9只WT和Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)雄鼠分成Control组、LPS组和PTL+LPS组(n=3)。采用RT-qPCR、免疫荧光技术和Western blot验证敲除效果以及极化相关通路,研究Siglec-E影响PTL抑制小胶质细胞M1极化的机制。结果与NC-shRNA组比较,Siglece-shRNA组中Siglec-E表达显著降低(P<0.01),说明SiglecE敲除细胞模型建立成功。在LPS刺激的条件下,与Control组比较,NC-shRNA细胞和Siglece-shRNA细胞的iNOS、IL-1β和IL-6的mRNA水平均显著上调(P<0.01)。PTL与LPS共同作用下,NC-shRNA细胞中上述M1极化的标志物均明显下降(P<0.05)。而对于Siglece-shRNA细胞,上述M1极化的标志物无显著下调。PTL对BV2细胞JNK、IκB蛋白的磷酸化具有抑制作用(P<0.01),也可抑制NF-κB核转位,而下调Siglec-E则会减弱该作用。与WT组小鼠比较,Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)小鼠小胶质细胞Siglec-E表达显著降低(P<0.01),PTL对Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)小鼠小胶质细胞NF-κB磷酸化水平的抑制作用也降低。结论小胶质细胞Siglec-E缺失会减弱PTL靶向MAPK/NF-κB通路对其M1极化的抑制作用。

关键词：唾液酸结合样凝集素E 小胶质细胞小白菊内酯 M1极化

新兵知觉压力与认知灵活性、生活满意度的关系及正念认知干预研究

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陆军军医大学学报 2024年第10期46卷 1180-1186页

作者：张一苇彭李许辰李敏陆军军医大学(第三军医大学)医学心理系军事心理学教研室重庆400038

目的探讨认知灵活性在新兵知觉压力与生活满意度中的关系,构建正念认知干预方案,研究该方案对新兵认知灵活性和生活满意度的影响作用。方法采用整群抽样法对某部965名新兵进行问卷调查。评估工具包括中文版知觉压力量表(Chinese Perceiv... 详细信息

目的探讨认知灵活性在新兵知觉压力与生活满意度中的关系,构建正念认知干预方案,研究该方案对新兵认知灵活性和生活满意度的影响作用。方法采用整群抽样法对某部965名新兵进行问卷调查。评估工具包括中文版知觉压力量表(Chinese Perceived Stress Scale,CPSS)、认知灵活性量表(Cognitive flexibility Inventory,CFI)和生活满意度量表(Satisfaction Life Scale,SWLS)。其中61名新兵,以排为单位分为训练组(n=31)和对照组(n=30),训练组接受6周正念认知干预,对照组每周仅接受心理健康教育。采用问卷以及行为学实验(线索任务转换范式)对训练效果进行评估。结果①知觉压力和认知灵活性、生活满意度均呈显著负相关(r=-0.78,P学意义。结论正念认知干预能有效提升新兵认知灵活性水平,提升新兵的生活满意度水平。

关键词：知觉压力认知灵活性生活满意度线索任务转换

TIMBER对意外创伤肢体功能障碍康复期患者创伤后应激症状的影响

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陆军军医大学学报 2024年第4期46卷 396-402,F0003页

作者：刘洋黄英陈翰韩亚楠许辰李敏陆军军医大学(第三军医大学)医学心理系军事心理学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院康复医学科重庆400038

目的探讨基于正念的消退和再巩固创伤干预(trauma interventions using mindfulness based extinction and reconsolidation, TIMBER)对意外创伤肢体功能障碍康复期患者创伤后应激症状的影响。方法采用方便取样的方法,选取2022年3月至... 详细信息

目的探讨基于正念的消退和再巩固创伤干预(trauma interventions using mindfulness based extinction and reconsolidation, TIMBER)对意外创伤肢体功能障碍康复期患者创伤后应激症状的影响。方法采用方便取样的方法,选取2022年3月至2023年5月陆军军医大学第一附属医院康复医学科收治的创伤康复期患者(impact of event scale-revised, IES-R总分≥33分)46例,采用随机数字表法分为干预组和对照组,干预组接受TIMBER干预,对照组进行心理健康相关知识宣教。在干预前(T1)、干预结束时(T2)和干预结束后1个月(T3)使用事件影响量表修订版(IES-R)、医院焦虑抑郁量表(HADS)、睡眠状况自评量表(SRSS)对所有被试进行测量,比较两组患者创伤后应激症状、焦虑症状、抑郁症状和睡眠的变化。结果两组患者人口统计学信息及各心理学变量在T1时差异均无统计学意义(P>0.05);干预组在T2和T3时的IES-R总分及各维度评分、焦虑、抑郁和睡眠评分显著低于对照组(P学意义(P学意义(P>0.05)。结论 TIMBER可以显著改善意外创伤肢体功能障碍康复期患者的创伤后应激症状、焦虑抑郁症状及睡眠。

关键词：正念消退与再巩固干预创伤后应激症状创伤康复

普通病房护士安宁疗护基本能力评估量表的研制及信效度检验

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陆军军医大学学报 2024年第20期 2337-2345页

作者：吴昱齐雷蕾马会娟王鹏宇罗羽陆军军医大学(第三军医大学)护理系陆军军医大学(第三军医大学)陆军特色医学中心胸外科陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队卫生统计学教研室

目的研制普通病房护士安宁疗护基本能力量表，并检测其信效度。方法通过文献回顾、小组讨论、专家咨询、小样本预调查等方法募集、筛选条目初步形成测试量表；于2021年1-3月用该量表对1 000名来自各内科、各外科、急诊科、妇产科及重... 详细信息

目的研制普通病房护士安宁疗护基本能力量表，并检测其信效度。方法通过文献回顾、小组讨论、专家咨询、小样本预调查等方法募集、筛选条目初步形成测试量表；于2021年1-3月用该量表对1 000名来自各内科、各外科、急诊科、妇产科及重症监护室等科室的护士进行调查；使用SPSS和AMOS软件对数据进行项目分析、探索性因子分析和验证性因子分析，以验证量表的信效度，最终形成正式量表。结果经因子分析提取5个公因子，37个条目，累计方差贡献率71.031%,量表整体Cronbach’s α系数为0.953,折半信度为0.772,重测信度为0.963,验证性因子分析模型拟合良好，χ2/df=2.57,近似误差均方根（root mean square error of approximation, RMSEA）=0.059,比较拟合指数（comparative fit index, CFI）=0.909,增量拟合指数（incremental fit index, IFI）=0.910,非规范拟合指数（Tucker-Lewis index, TLI）=0.901。结论本研究构建的普通病房护士安宁疗护基本能力评估量表信效度良好，可以用于评价普通病房护士安宁疗护基本能力。

关键词：普通病房护士安宁疗护基本能力量表研制信度效度

Fgl2对小鼠急性肾损伤中巨噬细胞极化的作用

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陆军军医大学学报 2024年第13期46卷 1467-1476页

作者：朱琳许桂莲谢攀彭侃夫陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院肾内科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院免疫学教研室重庆400038

目的探讨纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein2,Fgl2)对顺铂诱导的急性肾损伤(cisplatin-induced acute kidney injury,Cis-AKI)中巨噬细胞极化的作用。方法选取24只8~10周龄(体质量20~25 g)的雄性野生型(Fgl2^(+/+))小鼠和Fgl2基因敲除(Fgl2^(-/-))小鼠各12只。单次腹腔注射生理盐水(saline)或顺铂(cisplatin,Cis)处理3 d,按随机数字表法分成4组(n=6):Fgl2^(+/+)Saline组、Fgl2^(+/+)Cis组、Fgl2^(-/-)Saline组和Fgl2^(-/-)Cis组。3 d后,检测肾功能相关指标血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)的水平,HE染色评估肾损伤程度;Western blot检测肾组织中Fgl2和肾损伤分子1(kidney injury molecule 1,Kim-1)的表达;RT-qPCR检测Fgl2、Kim-1、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)、IL-6、IL-12p40、IL-1β、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、TNF-α的表达;免疫组化检测肾脏Fgl2和巨噬细胞(F4/80^(+))的表达;免疫荧光检测肾组织中巨噬细胞(F4/80^(+))和M1型巨噬细胞(F4/80^(+)CD86^(+))的表达;流式细胞术检测肾组织中巨噬细胞(F4/80^(+))及M1型巨噬细胞(F4/80^(+)MHCⅡ+)、M2型巨噬细胞(F4/80^(+)CD206^(+))的表达。结果与Fgl2^(+/+)Saline组比较,Fgl2^(+/+)Cis组小鼠肾功能显著下降(P<0.05),肾小管损伤病理评分显著升高(P<0.05),肾组织Fgl2表达显著上调(P<0.05);与Fgl2^(+/+)Cis组相比,Fgl2^(-/-)Cis组小鼠肾功能显著下降(P<0.05),肾损伤相关分子Kim-1、NGAL表达显著升高(P<0.05),肾小管损伤病理评分显著升高(P<0.05),巨噬细胞浸润显著增加(P<0.05),M1型巨噬细胞相关分子IL-6、IL-1β、TNF-α和iNOS表达显著上升(P<0.05),流式细胞术结果显示M1型巨噬细胞百分比显著升高(P<0.05),M2型巨噬细胞百分比无明显变化,且M1型占比显著高于M2型(P<0.05)。结论Fgl2基因敲除可通过促进巨噬细胞向M1型转化加重Cis-AKI。

关键词：顺铂急性肾损伤纤维蛋白原样蛋白2 巨噬细胞

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疟疾疫苗的突破性进展

科学通报 2024年

作者：刘太平徐文岳陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院病原生物学教研室

Malaria is still one of the most devastating diseases worldwide. Over the past three decades, significant efforts have been made to develop highly efficient vaccines against malaria. Recently, two subunit malaria vaccines, RTS,S/AS01(called Mosquirix) and R21/Matrix-M, were sequentially recommended by the World Health Organization(WHO) for vaccination of children in moderate to high malaria-endemic regions. This was a significant breakthrough in the development of antimalarial ***,S/AS01, also called Mosquirix, was designed by Walter Army Institute and GSK corporation in 1987. RTS,S/AS01is a Plasmodium falciparum CSP-based recombinant protein vaccine and contains the NANP major repeats and C-terminal domain of CSP, which is coexpressed with fused and free hepatitis B surface antigen(HBsAg) at a ratio of 1:3 and formulated with the AS01 adjuvant. In 2011 and 2012, phase III studies showed that RTS,S/AS01 is safe and tolerant, and had a moderate protection efficacy in reducing both mortality and morbidity of infants and children in malaria-endemic regions. In Oct 2021, RTS,S/AS01 was approved by WHO, which allowed the vaccination of children in malaria-endemic regions. Therefore, RTS,S/AS01 became the first licensed malaria vaccine to be used in Africa. In a major analysis in Africa, RTS,S/AS01 exhibited considerable effect in reducing deaths and severe malaria. However, RTS,S/AS01 is relatively expensive, and could not be manufactured in enough doses for *** improve the immunogenicity of the CSP-based malaria vaccine, R21, a next-generation RTS,S-like vaccine, was developed by Professor Adrian V. S. Hill at the University of Oxford. In contrast to RTS,S, R21 particles are formed from a single CSP-HBsAg fusion protein, which leads to a vaccine composed of a much higher proportion of CSP than RTS,***, R21 was designed to elicit a stronger anti-CSP antibody response while minimizing the anti-HBsAg antibody response, making it a promising RTS,

关键词：

HES5对肾小管上皮细胞转分化和凋亡的影响及其机制研究

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陆军军医大学学报 2024年第11期46卷 1214-1225页

作者：张羽寒衡雪朱琳谢攀许桂莲彭侃夫陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院肾科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院烧伤科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院免疫学教研室重庆400038

目的探讨HES5(hairy and enhancer of split 5)对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化和凋亡的作用及其潜在机制。方法分析和筛选GSE66494数据中的差异表达基因。建立小鼠的输尿管梗阻模型(unilateral uretera obstruction,UUO),检测肾... 详细信息

目的探讨HES5(hairy and enhancer of split 5)对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化和凋亡的作用及其潜在机制。方法分析和筛选GSE66494数据中的差异表达基因。建立小鼠的输尿管梗阻模型(unilateral uretera obstruction,UUO),检测肾组织中HES5的表达水平。TGF-β1(10 ng/mL)处理HK-2细胞24 h建立肾小管上皮-间质转化模型后,通过qRT-PCR和Western blot检测HES5的表达水平。用过表达HES5的质粒转染HK-2细胞,24 h后检测其纤连蛋白(Fibronectin,FN)、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)和波形蛋白(Vimentin)及凋亡相关标志物(Bax、Bcl2)等蛋白表达;然后,将HK-2细胞分为4组:Control组、siHES5组、TGF-β1组、siHES5+TGF-β1组,检测各组的纤维化及凋亡标志物的表达情况。运用TUNEL及流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。Western blot检测各组AKT、p-AKT、PI3K、p-PI3K的蛋白表达。通过加入PI3K抑制剂(LY294002)处理过表达HES5的HK-2细胞后,检测Vimentin的表达。结果HES5的表达在慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)和小鼠纤维化肾组织中均显著上调;过表达HES5可以促进HK-2细胞中FN、CollagenⅠ、Vimentin、Bax的合成,抑制Bcl2的表达(P<0.05);敲低HES5不仅下调纤维化标志物的表达,还抑制了肾小管上皮细胞凋亡;此外,HES5基因敲低使TGF-β1诱导的HK-2细胞内PI3K/AKT信号通路的激活程度降低(P<0.05);PI3K/AKT信号通路抑制剂减弱了HES5对Vimentin的诱导作用。结论敲低HES5可以抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化和凋亡,这可能与PI3K/AKT信号通路活性降低有关。

关键词： HES5 上皮-间质转分化细胞凋亡 PI3K/AKT信号通路 TGF-β1

知觉压力对常驻高原军人睡眠质量的影响:职业紧张的调节作用

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陆军军医大学学报 2024年第14期46卷 1618-1625页

作者：许珂赵梦雪王佳张晶轩夏凡蒋娟冯正直陆军军医大学(第三军医大学)护理系野战护理学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)医学心理系重庆400038

目的探讨常驻高原军人睡眠质量特点,以及知觉压力、职业紧张等因素对其影响。方法本研究采用横断面研究设计方案。于2023年2月,应用自编的人口学资料调查表、匹兹堡睡眠质量指数量表(Pittsburgh sleep quality index,PSQI)、知觉压力量... 详细信息

目的探讨常驻高原军人睡眠质量特点,以及知觉压力、职业紧张等因素对其影响。方法本研究采用横断面研究设计方案。于2023年2月,应用自编的人口学资料调查表、匹兹堡睡眠质量指数量表(Pittsburgh sleep quality index,PSQI)、知觉压力量表(perceived stress scale,PSS-10)、工作内容问卷(job content questionnaire,JCQ),对整群抽取的常驻我国高原某部的3784名高原军人进行测查。结果常驻高原军人PSQI总分为(5.37±2.78)分,PSQI总分及各维度得分均显著高于我国平原常模(P军龄、民族、驻守高原时长、文化程度、家庭结构的常驻高原军人PSQI得分差异具有统计学意义(P军人的PSQI得分显著低于高知觉压力组(t=-12.108,P军人睡眠质量较差。年龄、军龄、驻守高原时长、民族、家庭结构、文化程度、知觉压力、职业紧张是常驻高原军人睡眠质量的重要影响因素。驻守高原时长、职业紧张能调节常驻高原军人睡眠质量与知觉压力的关系。

关键词：高原军人睡眠质量知觉压力职业紧张

半乳糖上调内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平抑制巨噬细胞活性

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陆军军医大学学报 2024年第13期46卷 1502-1511页

作者：吴妮婷摄渊婷刘红梅李瑾贾乙陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系药剂学教研室重庆400038

目的探究半乳糖对人原代肺动脉内皮细胞上唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin 9,Siglec-9)聚糖配体表达的影响及作用机制。方法采用流式细胞术确定内皮细胞表面Siglec-9聚糖配体的表达并鉴定该... 详细信息

目的探究半乳糖对人原代肺动脉内皮细胞上唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin 9,Siglec-9)聚糖配体表达的影响及作用机制。方法采用流式细胞术确定内皮细胞表面Siglec-9聚糖配体的表达并鉴定该聚糖配体末端糖苷键类型;分别用左旋葡萄糖、葡萄糖、N-乙酰基葡萄糖、甘露糖、N-乙酰基甘露糖、半乳糖、唾液酸、蔗糖处理内皮细胞48 h,采用流式细胞术检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体的表达;将内皮细胞分为对照组和半乳糖组(n=3),Western blot、流式细胞术、免疫荧光分析半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体表达的影响;α2-3,6,8唾液酸酶处理内皮细胞后,Western blot检测半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体恢复时间的影响;半乳糖处理内皮细胞后,Western blot检测分析细胞内唾液酸合成关键酶(GNE、NANS、NANP、CMAS、NPL以及ST3Gals)表达水平,并用RT-qPCR验证相关蛋白的mRNA表达;siRNA敲低NANP、CMAS及ST3Gal-Ⅲ,Western blot检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平变化;巨噬细胞与内皮细胞共培养实验分析Siglec-9聚糖配体的增加对巨噬细胞的凋亡与吞噬能力的影响。结果内皮细胞上表达有Siglec-9聚糖配体且该配体为末端结构为α2-3连接的唾液酸糖蛋白;与对照组比较,半乳糖组内皮细胞上该聚糖配体表达水平显著增加(P<0.01),但半乳糖的添加对该配体的自我恢复时间无影响;与对照组比较,半乳糖处理的内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ表达水平升高(P<0.05,P<0.01),且RT-qPCR验证结果与其一致;抑制内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ的表达后,内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平下降(P<0.01)。共培养实验中,与未处理组比较,半乳糖处理的内皮细胞促进巨噬细胞凋亡增加(P<0.01),并导致其吞噬能力减弱(P<0.05)。结论半乳糖通过NANP-CMAS-ST3Gal-Ⅲ通路上调内皮细胞上Siglec-9聚糖配体水平,从而抑制巨噬细胞活性。

关键词：半乳糖内皮细胞唾液酸特异性Ig样凝集素-9聚糖配体唾液酸合成关键酶巨噬细胞