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低氧对人骨髓间充质干细胞趋化因子受体CXCR4和CX_3CR1表达的影响

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第23期13卷 4485-4489页

作者：朱洁周竹娟龚自力郑健解放军第三军医大学新桥医院神经内科重庆市400037

背景：移植的骨髓间充质干细胞能向损伤病灶部位定向迁移，进而发挥治疗作用，但关于其向病灶定向迁移的具体机制还不十分清楚。目的：观察低氧对人骨髓间充质干细胞趋化因子受体CXCR4和CX3CIR1表达的影响。设计、时间和地点：细胞学体... 详细信息

背景：移植的骨髓间充质干细胞能向损伤病灶部位定向迁移，进而发挥治疗作用，但关于其向病灶定向迁移的具体机制还不十分清楚。目的：观察低氧对人骨髓间充质干细胞趋化因子受体CXCR4和CX3CIR1表达的影响。设计、时间和地点：细胞学体外观察，于2008-02／2009-02在解放军第三军医大学新桥医院中心实验室进行。材料：骨髓标本取自解放军第三军医大学附属新桥医院血液科收治的15-40岁正常或原发病未累及骨髓患者。方法：穿刺采集骨髓，密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化入骨髓间充质干细胞。取生长良好的第3代细胞接种于25cm。培养瓶中，培养至70％-80％融合后，置于37℃、体积分数分别为3％O2、5％CO2，92％N2的饱和湿度孵育箱内培养48h，以常氧培养作为对照。主要观察指标：相差显微镜下观察细胞形态，流式细胞仪检测细胞表面标记物，Realtime荧光定量PCR法检测CXCR4和CX3CR1 mRNA的表达，免疫细胞化学和Westernblot法检测CXCR4和CX3CR1蛋白的表达。结果：体外分离纯化的人骨髓间充质干细胞呈成纤维细胞样，培养12-14d达90％汇合，呈极性排列，集落呈漩涡状：CD105和CD29阳性率分别为99．38％和99．13％，而CD14，CD45均呈阴性表达。在体积分数为3％的02培养条件下，人骨髓间充质干细胞CXCR4和CX3CR1mRNA的表达分别是常规培养条件下的2．130倍和2．361倍，CXCR4和CX3CR1蛋白的表达分别是常规培养条件下的1．69倍和1．93倍，CXCR4和CX3CR1主要表达于人骨髓间充质干细胞的胞膜和胞浆。结论：体积分数为3％的02低氧条件能够促进人骨髓间充质干细胞趋化因子受体CXCR4和CX3CR1mRNA及蛋白的表达，这可能是体内移植的骨髓间充质干细胞向损伤病灶定向迁移的机制之一。

关键词：人骨髓间充质干细胞低氧 CXCR4 CX3CR1

PDTC抑制NF-κB表达对兔蛛网膜下隙出血后脑血管重构的影响

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第二军医大学学报 2014年第5期35卷 505-508页

作者：张建忠金海加龙连圣辛志成李夏良蒋超超周政解放军98医院神经外科湖州313000 武警浙江嘉兴医院神经内科嘉兴314000 第三军医大学新桥医院神经外科重庆400037

目的观察兔蛛网膜下隙出血模型基底动脉核因子κB(NF-κB)的表达及其对脑血管重构的影响。方法 16只雄性新西兰大白兔随机分为SAH组和吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组,各8只。SAH组枕大池二次穿刺并注入自体动脉血造模,PDTC组在SAH后应... 详细信息

目的观察兔蛛网膜下隙出血模型基底动脉核因子κB(NF-κB)的表达及其对脑血管重构的影响。方法 16只雄性新西兰大白兔随机分为SAH组和吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组,各8只。SAH组枕大池二次穿刺并注入自体动脉血造模,PDTC组在SAH后应用PDTC注入枕大池进行干预。模型制作完成后7 d处死动物,取其基底动脉测量平滑肌厚度。免疫组化法及蛋白质印迹法检测基底动脉中NF-κB、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达。结果与SAH组相比,PDTC干预后,基底动脉中NF-κB与PCNA蛋白表达减少,平滑肌厚度变薄,与SAH组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PDTC可通过抑制NF-κB的激活减轻SAH后脑血管壁平滑肌增殖性改变。

关键词：蛛网膜下隙出血血管平滑肌 NF-κB 吡咯烷二硫代氨基甲酸盐

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模拟动作电位微电场效应能直接始动髓鞘化

中国临床康复 2006年第34期10卷 16-17,i0001页

作者：刘磊赵士福解放军第三二四医院神经内科重庆市400020 解放军第三军医大学新桥医院神经内科重庆市400037

目的:探讨模拟动作电位微电场效应能否直接始动中枢神经轴突髓鞘化。方法:选取2根直径5μm碳纤维(中科院上海生命科学研究院神经科学研究所提供)。将正负极分别与2根碳纤维的导引铜丝相连,刺激频率1Hz,电压40mV,电流10μA,分波宽1×10-2... 详细信息

目的:探讨模拟动作电位微电场效应能否直接始动中枢神经轴突髓鞘化。方法:选取2根直径5μm碳纤维(中科院上海生命科学研究院神经科学研究所提供)。将正负极分别与2根碳纤维的导引铜丝相连,刺激频率1Hz,电压40mV,电流10μA,分波宽1×10-2s,1×10-3s,1×10-4s,1×10-5s4组。将碳纤维铺于神经元与胶质细胞共培养的培养皿底部,模拟神经轴索。通入1Hz,40mV,10μA的单相方波电流,30min/次,1次/d。连续10d,动态观察胶质细胞生长及包裹碳纤维情况。结果:①相差显微镜观察:波宽1×10-3s组,培养第7天,可见细胞团粘附于负极碳纤维,细胞团中生长出细胞膜样物质包绕碳纤维并沿纤维向两端延伸。波宽1×10-4s组,培养第12天始,可见小而圆的细胞靠近负极碳纤维。②SP免疫组化染色:波宽1×10-4s,1×10-3s组,有少突胶质细胞或其前体包裹碳纤维负极。结论:动作电位传导过程中造成的局部负电场能直接始动并参与中枢神经轴突髓鞘化。

关键词：髓鞘少突胶质细胞动作电位轴突

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自发性脑出血动物模型的研究进展

中华脑血管病杂志（电子版） 2021年第2期15卷 64-69页

作者：张钦杨清武中国人民解放军陆军军医大学(原第三军医大学)第二附属医院(新桥医院)神经内科重庆400037

脑出血是致死致残率最高的脑卒中类型,至今仍无明确有效的治疗手段。缺乏与脑出血临床特征相契合的动物模型可能是阻碍其研究的根本原因。本文通过回顾现有自发性脑出血小鼠模型,共发现2种高血压脑出血模型、1种自发性深部脑出血模型和... 详细信息

脑出血是致死致残率最高的脑卒中类型,至今仍无明确有效的治疗手段。缺乏与脑出血临床特征相契合的动物模型可能是阻碍其研究的根本原因。本文通过回顾现有自发性脑出血小鼠模型,共发现2种高血压脑出血模型、1种自发性深部脑出血模型和5种脑淀粉样血管病模型。高血压模型其中一种是双转基因小鼠,通过过表达人肾素和血管紧张素原,导致小鼠高血压。然而,该模型脑出血的发生需要结合高盐饮食和一氧化氮合酶抑制剂。另一种则采用皮下缓慢释放血管紧张素Ⅱ和抑制一氧化氮合酶导致慢性高血压,随后急性注射血管紧张素Ⅱ进一步提升血压造成血压剧烈波动诱导脑出血发生。自发性深部脑出血模型可能是除高血压因素外研究深部脑出血最理想的小鼠模型。5种淀粉样血管病模型均建立在淀粉样前体蛋白突变型的转基因小鼠,但关于其脑出血特征的研究比较匮乏。目前自发性脑出血仍缺少公认的广泛使用的动物模型,理想的脑出血模型应能最大限度模拟疾病的发展特征,只有开展符合临床实际需要的脑出血基础研究,才有望为脑出血防治提供新的有效靶点。

关键词：自发性脑出血动物模型高血压脑淀粉样血管病

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皮质下缺血性血管性认知损害的特点

中国神经精神疾病杂志 2010年第5期36卷 309-312页

作者：李玲郑健陈建忠邓春红解放军四十四医院内二科贵阳550004 第三军医大学新桥医院神经内科

目的观察皮质下缺血性血管性认知损害(subcortical ischemic vascular cognitive impairment,SIVCI)患者各阶段认知损害特点,研究其神经心理学损害特征及可能的病理生理机制。方法对45例SIVCI患者(其中30例非痴呆型皮质下缺血性认知损... 详细信息

目的观察皮质下缺血性血管性认知损害(subcortical ischemic vascular cognitive impairment,SIVCI)患者各阶段认知损害特点,研究其神经心理学损害特征及可能的病理生理机制。方法对45例SIVCI患者(其中30例非痴呆型皮质下缺血性认知损害患者、15例皮质下缺血性痴呆患者)和15名年龄、性别和教育程度匹配的正常对照,运用蒙特利尔认知测评量表和简易精神状态检查量表检测总体认知功能。结果与对照组比较,非痴呆型皮质下缺血性认知损害组患者仅执行(2.70±1.34vs4.53±0.75)、注意(3.47±1.22vs5.07±0.78)和延迟回忆(3.00±1.11vs4.53±0.64)等认知功能水平降低(P0.05);皮质下缺血性痴呆组执行(1.87±1.06vs4.53±0.75)、注意(2.33±1.05vs5.07±0.78)、延迟回忆(1.80±1.27vs4.53±0.64)、抽象(0.93±0.88vs1.73±0.46)和定向(2.00±1.20vs5.20±0.77)等认知功能水平均降低(P0.05)。结论 SICVI患者执行、注意、延迟回忆等皮质下认知功能较早受累且受损害程度较重,可能与缺血性小血管病变损害脑深部白质中认知纤维环路有关。

关键词：皮质下缺血性血管性认知损害小血管病变

白细胞介素1β转化酶在脑缺血再灌注损伤中的表达及对细胞凋亡的调节作用(英文)

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中国临床康复 2005年第25期9卷 233-235,F0003页

作者：赵士福蔡文琴刘磊王竹筠解放军第三军医大学新桥医院神经内科重庆市400037 解放军第三军医大学神经生物学教研室 400038 解放军第三二四医院神经内科重庆市400020

背景:细胞凋亡是缺血再灌注损害的重要形式之一,白细胞介素1β转化酶是细胞凋亡关键调节因子,其激活可导致蛋白降解引起细胞凋亡。目的:观察在脑缺血再灌注过程中白细胞介素1β转化酶基因的表达及其与细胞凋亡的关系,探讨其在调控脑缺... 详细信息

背景:细胞凋亡是缺血再灌注损害的重要形式之一,白细胞介素1β转化酶是细胞凋亡关键调节因子,其激活可导致蛋白降解引起细胞凋亡。目的:观察在脑缺血再灌注过程中白细胞介素1β转化酶基因的表达及其与细胞凋亡的关系,探讨其在调控脑缺血后细胞凋亡中的作用。设计:随机对照试验。材料:实验于1996-03/2000-12在解放军第三军医大学神经科学中心完成。选择成年W istar大鼠64只,随机分为2组,脑缺血再灌注组:采用四血管阻塞全脑缺血模型,缺血30m in 后再灌注,根据处死时间分为再灌注3,6,12,24,48,72h 和7d 共7个时间点,每个时间点8只。假手术组8只,仅分离,未夹闭双侧颈总动脉。方法:假手术组和脑缺血再灌注组再灌注后每个时间点随机选取4只大鼠采用免疫组化和原位杂交检测。其余4只用于原位末端标记检测。主要观察指标:①各组大鼠脑组织白细胞介素1β转化酶蛋白和m RNA的表达。②各组大鼠脑组织神经细胞凋亡情况。结果:64只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠脑组织白细胞介素1β转化酶m RNA 和蛋白的表达:假手术组脑组织多数脑区白细胞介素1β转化酶mRNA 和蛋白有少量表达,脑缺血组白细胞介素1β转化酶m RNA 和蛋白在神经元内及小胶质细胞均有表达,分布在大脑皮质、小脑蒲肯野细胞、海马及皮质下白质。在缺血再灌注12h 后白细胞介素1β转化酶基因表达增加,48～72h 为表达高峰,第7天表达下降。②各组大鼠脑组织神经细胞凋亡情况:细胞凋亡在缺血再灌注12h 出现犤(49.4±6.8)个/切片犦,高峰时间在72h犤(228.6±29.8)个/切片犦,且白细胞介素1β转化酶蛋白和m RNA 的表达在分布上与神经细胞凋亡的发生有显著相关性(r=0.89,0.68,P 神经细胞凋亡的调节。

关键词：脑缺血白细胞介素-1β转换酶细胞凋亡

高压氧抑制一氧化氮生成改善缺血性脑细胞凋亡

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中国微循环 2005年第1期9卷 21-23,i004页

作者：刘磊赵士福解放军第三二四医院神经内科重庆400020 第三军医大学新桥医院神经内科

目的探讨高压氧对脑缺血再灌流脑皮层一氧化氮 (NO)生成的影响及其对脑细胞的保护作用。方法采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭30min再灌流模型。用电化学及免疫细胞化学方法检测脑皮层一氧化氮生成、一氧化氮合酶 (NOS)表达及神经细胞凋亡。... 详细信息

目的探讨高压氧对脑缺血再灌流脑皮层一氧化氮 (NO)生成的影响及其对脑细胞的保护作用。方法采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭30min再灌流模型。用电化学及免疫细胞化学方法检测脑皮层一氧化氮生成、一氧化氮合酶 (NOS)表达及神经细胞凋亡。结果缺血再灌流期沙土鼠脑皮层中NO的含量显著增加 ,3型NOS均有表达 ,缺血再灌流第2d ,iNOS的表达最为明显 ,同时NO的生成达到高峰。缺血再灌流第1、2、3d ,沙土鼠脑皮层均可见凋亡细胞 ,以第2、3d更为明显。高压氧暴露能明显抑制iNOS表达 ,减少NO生成 ,减轻神经细胞凋亡。结论高压氧能抑制沙土鼠脑缺血再灌流期脑皮层NO生成 ,减轻神经细胞凋亡 ,从而起到脑保护作用。

关键词：高压氧一氧化氮凋亡脑缺血

血管性痴呆患者事件相关电位P300改变与认知功能障碍的关系

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中国临床康复 2004年第28期8卷 6035-6037页

作者：郑健赵莘瑜李凤鹏解放军第三军医大学新桥医院神经内科重庆市400037

目的:评价事件相关电位P300作为血管性痴呆患者认知功能障碍客观指征的临床价值。方法:对30例缺血性血管性痴呆患者、30例无痴呆的脑梗死患者和30例正常对照者,采用电生理技术检测事件相关电位P300,应用简明精神状态量表(MMSE)、痴呆简... 详细信息

目的:评价事件相关电位P300作为血管性痴呆患者认知功能障碍客观指征的临床价值。方法:对30例缺血性血管性痴呆患者、30例无痴呆的脑梗死患者和30例正常对照者,采用电生理技术检测事件相关电位P300,应用简明精神状态量表(MMSE)、痴呆简易筛查量表(BSSD)和瑞文标准智力测验(RSPM)评价认知功能,采用MRI技术测定脑叶和海马体积。结果:①血管性痴呆组P300峰潜伏时(435.57±89.95)ms较脑梗死组(367.77±29.14)ms和正常对照组(341.90±29.27)ms明显延长(F=5.16,P<0.01)。②血管性痴呆患者P300峰潜伏时与MMSE,BSSD评分呈负相关(r=-0.87,-0.89,t=6.89,7.05,P<0.01)。③血管性痴呆组额叶和颞叶体积犤(15.19±1.51)%,(4.57±0.51)%犦比正常对照组犤(16.72±1.46)%,(4.92±0.50)%犦显著较小(T=2.85,P<0.01;T=2.21,P<0.05)。④血管性痴呆患者P300峰潜伏时与额叶和颞叶体积呈负相关(r=-0.56,-0.62,t=5.53,6.65,P<0.01)。结论:血管性痴呆患者P300峰潜伏时的延长反映与认知功能相关脑区的病理改变,客观反映认知功能障碍程度。

关键词：血管性痴呆患者事件相关电位P300 认知功能障碍正常颞叶对照组改变结论负相关智力测验

应用黛力新与氯米帕明治疗神经症患者的定量效果评估

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中国临床康复 2004年第15期8卷 2826-2828页

作者：周竹娟郑健戴光明帅杰李黔宁肖道泓邹永琴解放军第三军医大学新桥医院神经内科重庆市400037

目的:评价黛力新治疗神经症的疗效。方法:选择60例神经症患者,随机分为黛力新治疗组和氯米帕明对照组,治疗并随访4周,在治疗前和治疗后1,2,4周进行汉密尔顿焦虑量表(HAMA)和抑郁量表(HAMD)、焦虑自评量表(SAS)和Zung量表的测定,并于治... 详细信息

目的:评价黛力新治疗神经症的疗效。方法:选择60例神经症患者,随机分为黛力新治疗组和氯米帕明对照组,治疗并随访4周,在治疗前和治疗后1,2,4周进行汉密尔顿焦虑量表(HAMA)和抑郁量表(HAMD)、焦虑自评量表(SAS)和Zung量表的测定,并于治疗前和治疗4周后进行事件相关电位P300的测定,同时进行不良反应观察。结果:黛力新治疗组治疗1周后HAMA,HAMD,SAS和Zung量表评分明显下降(P新治疗组和氯米帕明对照组P300潜伏期在治疗4周后分别为(315.64±14.11),(320.22±15.20)ms,与治疗前(347.32±15.26),(350.46±18.74)ms相比,均明显缩短(P新重。结论:黛力新和氯米帕明治疗神经症均有效,黛力新在起效快、服用方便、副作用小等方面较氯米帕明有优势。

关键词：黛力新氯米帕明治疗神经症不良反应