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苜蓿轮枝菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立

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菌物学报 2024年第9期43卷 80-95页

作者：李茗乐雷荣杨藜孙夕雯杨益芬王新一范在丰段维军吴品珊中国农业大学植物保护学院农业农村部植物检疫性有害生物监测防控重点实验室北京100093 中国检验检疫科学研究院北京100176 宁波检验检疫科学技术研究院浙江宁波315012 成都海关技术中心四川成都610041 大连大学辽宁大连116622

苜蓿轮枝菌Verticillium alfalfae是我国重要的进境植物检疫对象,能够对十几种作物造成严重危害。为了快速检测苜蓿轮枝菌,本研究选用苜蓿轮枝菌的特征序列扩增区域[sequence characterized amplified region(SCAR)marker]作为目标基因... 详细信息

苜蓿轮枝菌Verticillium alfalfae是我国重要的进境植物检疫对象,能够对十几种作物造成严重危害。为了快速检测苜蓿轮枝菌,本研究选用苜蓿轮枝菌的特征序列扩增区域[sequence characterized amplified region(SCAR)marker]作为目标基因,设计了特异性引物Va-RPA-F/Va-RPA-R和CRISPR引导RNA(Va-crRNA),建立了重组酶聚合酶等温扩增技术结合CRISPR-Cas12a的快速检测方法。对该检测体系的反应时间、组分浓度等进行优化,结果显示苜蓿轮枝菌基因组DNA在39℃恒温条件下扩增30 min后,其扩增产物用基于CRISPR-Cas12a的荧光法和侧向流层析试纸条两种方法检测,可检测到10.6pg基因组DNA,其灵敏度与实时荧光定量PCR结果相当,加标回收实验结果证明本研究建立的方法可成功用于植物组织中苜蓿轮枝菌的快速检测。

关键词：苜蓿轮枝菌重组酶聚合酶等温扩增 CRISPR-Cas12a检测系统快速检测

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基于宏基因组的病毒识别生物信息学技术研究进展

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中华预防医学杂志 2024年第4期58卷 516-525页

作者：胡华锴刘雄郭金鹏陈勇王长军中国医科大学公共卫生学院沈阳110122 中国人民解放军疾病预防控制中心信息科北京100071 中国人民解放军疾病预防控制中心应急处置大队北京100071 中国人民解放军疾病预防控制中心卫勤部北京100071

当今,全球新型冠状病毒感染等传染病的暴发引起了人们对新发传染病的高度关注。随着下一代测序技术和病毒宏基因组生物信息技术的快速发展,环境和生物体内携带的各种已知和未知的病原微生物得以广泛检测和鉴定。同时,得益于机器学习方... 详细信息

当今,全球新型冠状病毒感染等传染病的暴发引起了人们对新发传染病的高度关注。随着下一代测序技术和病毒宏基因组生物信息技术的快速发展,环境和生物体内携带的各种已知和未知的病原微生物得以广泛检测和鉴定。同时,得益于机器学习方法的持续进步,多种快速且精准的病毒识别方法被广泛开发和应用。因此,本综述旨在全面概括病毒宏基因组领域中用于识别和预测病毒的主要方法、框架及适用范围。这将有助于更深入地理解病毒特征,发现潜在的新病原体,为传染病早期防控提供关键的技术支持。

关键词：宏基因组学病毒计算生物学机器学习

基于网络药理学和体外实验探究石杉碱甲对急性肺损伤中肺泡上皮细胞的作用及保护机制

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天然产物研究与开发 2024年第9期36卷 1600-1609页

作者：石俊唐佳佳张春阳陈韦齐曼陈旭昕韩志海华南理工大学医学院广州510006 解放军总医院第六医学中心呼吸与危重症医学科北京100048

基于网络药理学和体外实验,探讨石杉碱甲(huperzine A,Hup A)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中肺泡上皮细胞的作用及机制。首先从公共数据库查找Hup A、ALI的相关靶点,获取二者交集即为Hup A保护ALI的潜在靶点并进行富集分析;通... 详细信息

基于网络药理学和体外实验,探讨石杉碱甲(huperzine A,Hup A)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中肺泡上皮细胞的作用及机制。首先从公共数据库查找Hup A、ALI的相关靶点,获取二者交集即为Hup A保护ALI的潜在靶点并进行富集分析;通过构建蛋白互作网络及“成分-靶点-通路”网络进而筛选Hup A保护ALI的核心靶点并进行分子对接验证;进一步采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠肺泡上皮细胞(MLE-12)构建细胞模型加以Hup A预处理,分别检测细胞活性、白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平、超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)水平、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平验证Hup A的保护作用,最后蛋白免疫印迹实验验证关键靶点的蛋白水平变化。网络药理学分析结果显示Hup A共有144个潜在治疗靶点,Hup A参与调节蛋白激酶活性、氧化应激、炎症反应等生物学过程和磷脂酰肌醇-3-激酶-丝苏氨酸蛋白激酶(phosphatidyl-inositol 3-kinase-serine-threonine kinase,PI3K-Akt)通路、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路等信号通路;分子对接结果显示Hup A与Akt1、Akt2和Mapk1(又称细胞外蛋白调节激酶(extracellular regulated protein kinases,Erk))均具有较好的结合活性;细胞实验显示Hup A可以改善LPS诱导的细胞活性下降(P<0.05),降低IL-6、MDA、p-Erk1/2/Erk1/2水平(P<0.05),提高SOD与p-Akt1/Akt1水平(P<0.05)。综上,Hup A可能通过调控Akt1和Mapk1保护肺泡上皮细胞进而缓解LPS诱导的ALI。

关键词：石杉碱甲急性肺损伤 Akt1 网络药理学分子对接

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SHERLOCK-HBA检测方法的建立及其在血液鉴别中的应用

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生物化学与生物物理进展 2024年第8期51卷 1971-1982页

作者：姚乾威何红霞胡胜赵一霞罗雨季安全孙启凡山西医科大学法医学院太原030001 公安部鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室北京100038 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071

目的基于规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/CRISPR关联蛋白质系统(Cas)技术建立检测血液特异性血红蛋白α(HBA)mRNA的方法,以准确、快速地鉴定血液样本。方法本研究通过设计和筛选血液特异性HBA mRNA上的CRISPR RNA(crRNA)短片段,基于C... 详细信息

目的基于规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/CRISPR关联蛋白质系统(Cas)技术建立检测血液特异性血红蛋白α(HBA)mRNA的方法,以准确、快速地鉴定血液样本。方法本研究通过设计和筛选血液特异性HBA mRNA上的CRISPR RNA(crRNA)短片段,基于CRISPR/Cas技术原理建立了SHERLOCK-HBA检测方法,对5种体液(包括外周血、月经血、唾液、阴道分泌液、精液)共79份样本进行检测以评价所建方法鉴别血液的能力,并通过种属特异性实验、灵敏度实验、模拟混合斑检测、模拟降解样本检测、实际案件样本检测等进一步验证实验体系的法医学应用能力。结果该方法检测人源血液的相对荧光单位(RFU)值显著高于非血液(P<0.0001)以及非人源血液样本(P<0.0001),对血液RNA的检出灵敏度可达1×10^(-3) ng,且可成功检测出混合斑迹以及陈旧降解斑迹中的微量血液成分。结论本研究成功建立了一种基于CRISPR/Cas技术的SHERLOCK-HBA检测体系,能准确、灵敏地鉴定血液,操作简单、快速,为快速识别血液类样本提供了新的思路和参考。

关键词：法医遗传学血液鉴定血红蛋白α CRISPR/Cas SHERLOCK

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桃园蚜虫对吡虫啉和双丙环虫酯的敏感度监测

果树学报 2024年第9期41卷 1836-1845页

作者：刘新新吴萌萌薛丽王甦郭晓军肖达徐庆宣北京市农林科学院植物保护研究所·农业农村部北方果蔬有害生物绿色防控重点实验室(部省共建)·北方果树病虫害绿色防控北京市重点实验室北京100097 山东省诸城市农业技术推广中心山东诸城262200

【目的】评估桃蚜Myzus persicae和桃粉蚜Hyalopterus amygdali种群对两种常用杀虫剂吡虫啉和双丙环虫酯的敏感性。【方法】2022年和2023年在我国不同桃产区桃园采集桃蚜和桃粉蚜种群,利用玻璃管药膜法测定了两种蚜虫的毒力水平。【结果... 详细信息

【目的】评估桃蚜Myzus persicae和桃粉蚜Hyalopterus amygdali种群对两种常用杀虫剂吡虫啉和双丙环虫酯的敏感性。【方法】2022年和2023年在我国不同桃产区桃园采集桃蚜和桃粉蚜种群,利用玻璃管药膜法测定了两种蚜虫的毒力水平。【结果】2022年监测结果表明,浙江省嘉兴市的桃蚜种群对吡虫啉最敏感,LC50为0.222 mg·L^(-1),相比之下,河北省秦皇岛市、陕西省西安市和甘肃省兰州市的桃蚜种群表现出较低敏感性。2023年,浙江省杭州市的桃蚜种群对吡虫啉最敏感,LC50为1.574 mg·L^(-1)。对比两年的监测数据发现,山东省青岛市桃蚜对吡虫啉的敏感度变化不大,陕西省咸阳市桃蚜种群显示出对吡虫啉的敏感度降低的趋势。对于双丙环虫酯,2022年河北省秦皇岛市的桃蚜种群对双丙环虫酯最敏感,LC50为0.011 mg·L^(-1)。2023年,浙江省杭州市的桃蚜种群对双丙环虫酯最敏感,LC50为0.159 mg·L^(-1)。对比分析发现,甘肃省兰州市的桃蚜种群对双丙环虫酯的敏感度呈增加趋势。桃粉蚜的监测结果表明:云南省昆明市的桃粉蚜种群对吡虫啉和双丙环虫酯均表现出最高的敏感度,然而,河北省秦皇岛市和安徽省宿州市的桃粉蚜种群对吡虫啉的敏感度显著降低。【结论】不同地区和年份的桃蚜和桃粉蚜种群对吡虫啉表现出显著的敏感度差异。两种蚜虫对双丙环虫酯的敏感度差异不显著,均处于敏感水平。

关键词：桃园桃蚜桃粉蚜吡虫啉双丙环虫酯敏感度

心肌营养因子-1与心血管系统疾病及其他疾病相关性研究进展

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临床检验杂志 2024年第8期42卷 597-602页

作者：张菲娅张冬青中国人民解放军总医院京西医疗区四海桥门诊部北京100097 中国人民解放军总医院第四医学中心检验科北京100048

心肌营养因子-1(CT-1)作为白介素-6超家族细胞因子的重要一员,在不同的组织和细胞类型上具有多种效能,通过调节多种信号通路协同发挥作用,在体内多个脏器均有表达。现已证实CT-1与心血管疾病的发生发展密切相关,近些年CT-1与肿瘤,骨代... 详细信息

心肌营养因子-1(CT-1)作为白介素-6超家族细胞因子的重要一员,在不同的组织和细胞类型上具有多种效能,通过调节多种信号通路协同发挥作用,在体内多个脏器均有表达。现已证实CT-1与心血管疾病的发生发展密切相关,近些年CT-1与肿瘤,骨代谢等疾病相关性研究逐渐增多,并证实其血浆浓度在多种疾病中高表达,CT-1是一种很有研究价值的生物标志物,本文主要阐述CT-1的生物作用,在不同疾病诊断、监测中的应用潜力。

关键词：心肌营养因子心血管疾病肿瘤代谢性疾病神经系统疾病诊断治疗

心脏康复整合理念的课程思政在老年心血管病教学中的作用

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中国继续医学教育 2024年第9期16卷 127-130页

作者：付士辉骆雷鸣赵亚力平萍解放军总医院海南医院心内科海南三亚572013 解放军总医院第二医学中心老年心内科北京100853 联勤保障部队药品仪器监督检验总站生物科北京100071

目的探讨基于心脏康复整合理念的课程思政在老年心血管病临床教学中的作用。方法选取解放军总医院海南医院2019级、2021级临床医学专培生作为研究对象,共112名。随机分为对照组和研究组,各56名。对照组采用基于心脏康复整合理念的专科... 详细信息

目的探讨基于心脏康复整合理念的课程思政在老年心血管病临床教学中的作用。方法选取解放军总医院海南医院2019级、2021级临床医学专培生作为研究对象,共112名。随机分为对照组和研究组,各56名。对照组采用基于心脏康复整合理念的专科实操教学方法,研究组采用基于心脏康复整合理念融入课程思政内容的教学方法。对比分析2组理论和实操考核成绩得分、田纳西自我概念量表(Tennessee self concept scale,TSCS)、教学满意度以及自我效能评价得分。结果研究组理论和实操考核成绩得分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组TSCS得分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组对教学的满意度(91.07%)高于对照组(71.43%),差异有统计学意义(P<0.05);研究组自我效能评价得分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于心脏康复整合理念融入思政教育效果显著,可有效提升临床医学专培生的理论和实操考核成绩得分、TSCS得分、教学满意度和自我效能评价得分。基于心脏康复整合理念的思政教育,体现了老年心血管病诊疗的真正价值。

关键词：心脏康复整合理念课程思政老年心血管病临床教学理论实操

冻存GGTA1/β4GalNT2双基因敲除近交系五指山小型猪猪皮异种移植的效果观察

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中华损伤与修复杂志（电子版） 2024年第1期19卷 61-67页

作者：李峰黎君友冯书堂李国平戴一凡解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部北京100048 解放军总医院第四医学中心创伤外科研究室北京100048 北京盖兰德生物科技有限公司 102206 南京医科大学 211166

目的观察采用液氮保存GGTA1/β4GalNT2双基因敲除近交系五指山小型猪猪皮异种移植的效果。方法采用冻存双基因敲除猪断层皮片及市售基因转染猪皮进行异种移植。切取双基因敲除猪皮后采用玻璃化方法储皮,使用时复温。受体为恒河猴,分为... 详细信息

目的观察采用液氮保存GGTA1/β4GalNT2双基因敲除近交系五指山小型猪猪皮异种移植的效果。方法采用冻存双基因敲除猪断层皮片及市售基因转染猪皮进行异种移植。切取双基因敲除猪皮后采用玻璃化方法储皮,使用时复温。受体为恒河猴,分为实验组和对照组,每组4只。于每只猴背部切除4块4 cm×4 cm的皮肤,形成全层皮肤切除模型,分别移植冻存双基因敲除猪皮和基因转染猪皮。术后不同时间点观察皮片成活情况,通过颜色、质地等评估皮片活力,留取标本进行病理检查;于术前及术后4、7、10、14、21 d取血清,检测IL-2、IL-4、IFN-γ、IL-12含量。结果实验组猪皮存留于创面时间[10~21(14.5±3.4)d]长于对照组[7~14(10.6±2.7)d],差异有统计学意义(t=3.272,P=0.004)。术后第4天两组皮片均活力良好;术后第7天,实验组2个皮片局部有小水疱,对照组6个皮片皮下有大水疱;术后第10天,实验组5个皮片被完全撕脱,6个皮片整体仍温暖、柔软,对照组4个皮片整体仍温暖、柔软;术后第12天,实验组和对照组分别有3个、1个皮片整体仍温暖、柔软;术后第14天,实验组1个皮片仍保持温暖、柔软,对照组皮片则全部失活。病理观察显示,两组术后第4天皮片组织形态均完整;术后第7天,实验组皮片表皮细胞结构完整,对照组皮片表皮层细胞数量减少,两组均可见部分皮片与基底床形成嫁接;术后第10天,实验组表皮层细胞数量减少,表皮与真皮交界面局部分离,对照组表皮层细胞数量较前进一步减少,仍可见部分皮片与基底床嫁接现象;术后第14天,实验组表皮层细胞数量明显减少,仍可见嫁接现象,对照组可见基底床炎细胞浸润。实验组术后第10天血清IL-2和IL-4水平、术前与术后第4天血清IFN-γ水平、术后第14天血清IFN-γ/IL-4高于对照组。结论采用冻存GGTA1/β4GalNT2双基因敲除近交系五指山小型猪猪皮移植后皮片存留于创面情况良好,可获得较长的创面存留时间。

关键词：低温保存皮肤异种移植

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医院后勤智能化升级改造典型案例研究

中文科技期刊数据库（全文版）工程技术 2024年第4期 0043-0046页

作者：李水静中国人民解放军总医院服务保障中心北京100039

在国家“新基建”背景下,为满足院区日益提高的保障标准,我院改造了锅炉房汽水换热站内的换热设备及附属设备,替换了原有的为院区内各换热站提供蒸汽热源的燃气锅炉房,并引入了智能化市政热力站和控制设备。在热力站智能化改造升级完成... 详细信息

在国家“新基建”背景下,为满足院区日益提高的保障标准,我院改造了锅炉房汽水换热站内的换热设备及附属设备,替换了原有的为院区内各换热站提供蒸汽热源的燃气锅炉房,并引入了智能化市政热力站和控制设备。在热力站智能化改造升级完成后,我院构建出覆盖全院区热源、热网、热用户的全信息化系统,实现了智能化操控、全方面监控目标,并在能耗节约方向有了显著提升,为医院的供热运行管理提供了高效的运行保障能力。

关键词：医院后勤智能化升级改造