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应激诱导蛋白Sestrin2对脂多糖诱发树突状细胞坏死性凋亡的影响

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中华危重病急救医学 2024年第3期36卷 237-243页

作者：吴梦瑶姚人骐段昱王陆郑丽玉贺鹏翼董宁吴瑶姚咏明解放军总医院医学创新研究部北京100853 解放军总医院第一医学中心普通外科北京100853 解放军总医院第一医学中心重症医学科北京100853

目的探讨应激诱导蛋白Sestrin2(SESN2)对脂多糖(LPS)联合泛天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)抑制剂zVAD诱导小鼠树突状细胞(DC)坏死性凋亡的影响。方法将培养至第3~10代小鼠骨髓来源树突状细胞系DC2.4给予LPS刺激0、6、12、24 h,... 详细信息

目的探讨应激诱导蛋白Sestrin2(SESN2)对脂多糖(LPS)联合泛天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)抑制剂zVAD诱导小鼠树突状细胞(DC)坏死性凋亡的影响。方法将培养至第3~10代小鼠骨髓来源树突状细胞系DC2.4给予LPS刺激0、6、12、24 h,并按照刺激时间点进行分组,采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测各组细胞SESN2蛋白表达水平。将过表达空载慢病毒(NC)、SESN2基因过表达RNA序列慢病毒(SESN2 LV-RNA)、小干扰空载慢病毒(NS)以及SESN2基因小干扰RNA序列慢病毒(SESN2 siRNA)分别转染至DC2.4细胞中,转染后72 h,于倒置荧光显微镜下观察细胞荧光表达改变。各转染组细胞给予LPS刺激24 h,同时设立空白对照组给予磷酸盐缓冲液(PBS)并培养24 h,采用Western blotting检测SESN2蛋白表达水平;给予LPS+zVAD刺激24 h,同时设立空白对照组给予PBS并培养24 h,采用Western blotting检测混合谱系激酶结构域样蛋白(MLKL)、磷酸化MLKL(p-MLKL)蛋白表达水平,使用激光共聚焦显微镜观察p-MLKL变化及阳性细胞数量,采用流式细胞术和Hoechst染色检测坏死性凋亡细胞比例。结果与LPS刺激0 h组相比,LPS刺激24 h组细胞SESN2蛋白表达明显升高,故将24 h作为后续实验LPS刺激时间点。成功转染慢病毒后培养24 h,SESN2 siRNA+LPS+zVAD组细胞MLKL磷酸化水平明显高于NS+LPS+zVAD组;SESN2 LV-RNA+LPS+zVAD组细胞MLKL磷酸化水平明显低于NC+LPS+zVAD组;且NS+LPS+zVAD组和NC+LPS+zVAD组MLKL磷酸化水平分别高于NS+PBS组、NC+PBS组。激光共聚焦显微镜下显示,各组细胞p-MLKL蛋白荧光表达数量及荧光强度变化趋势与上述结果一致。流式细胞术和Hoechst染色检测结果均显示,SESN2 siRNA+LPS+zVAD组坏死性凋亡细胞比例明显高于NS+LPS+zVAD组〔流式细胞术:(30.800±1.153)%比(20.800±1.114)%,Hoechst染色:(75.267±0.451)%比(46.267±3.371)%,均P<0.05〕,提示敲减SESN2表达可以进一步加剧细胞坏死性凋亡发生;SESN2 LV-RNA+LPS+zVAD组坏死性凋亡细胞比例明显低于NC+LPS+zVAD组〔流式细胞术:(7.160±0.669)%比(19.240±2.322)%,Hoechst染色:(32.433±3.113)%比(48.567±4.128)%,均P<0.05〕,提示过表达SESN2可以逆转上述改变。结论SESN2对于脓毒症状态下DC坏死性凋亡具有明显抑制效应,干预SESN2有助于调节脓毒症时DC介导免疫反应进程。

关键词：应激诱导蛋白Sestrin2 坏死性凋亡脓毒症树突状细胞免疫反应

老年人群咽喉反流性疾病发生的危险因素及合并肺炎患者的临床特征分析

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中华医学杂志 2024年第1期104卷 45-51页

作者：王立辉杜海涛朱文娅吕昆明李毅万军陈倩倩解放军总医院医学院北京100853 解放军总医院第二医学中心消化内科北京100853 解放军总医院第六医学中心老年医学科北京100037 解放军总医院第一医学中心消化内科北京100853

目的探究老年人群咽喉反流性疾病发生的危险因素,并分析合并肺炎患者的临床特征。方法回顾性纳入2020年6月至2022年7月于解放军总医院第二医学中心行24 h咽喉pH值监测的患者,以及2017年3月至2022年7月于该院行24 h食管pH值监测结果阳性... 详细信息

目的探究老年人群咽喉反流性疾病发生的危险因素,并分析合并肺炎患者的临床特征。方法回顾性纳入2020年6月至2022年7月于解放军总医院第二医学中心行24 h咽喉pH值监测的患者,以及2017年3月至2022年7月于该院行24 h食管pH值监测结果阳性的患者。24 h咽喉反流监测结果阳性的为咽喉反流组,阴性者为非咽喉反流组;单纯合并胃食管反流病的肺炎患者为食管反流肺炎组,单纯合并咽喉反流性疾病的肺炎患者为咽喉反流肺炎组。收集患者的基本资料、共患疾病情况、用药情况及相关检查检验结果等。采用多因素logistic回归模型分析老年人群中咽喉反流性疾病的危险因素,并分析其与肺炎发生的关系。结果最终纳入80例24 h咽喉pH值监测的患者,咽喉反流组34例均男性,年龄(73±12)岁;非咽喉反流组46例[男44例,女2例,年龄(78±11岁)]。多因素logistic回归分析显示,老年人群咽喉反流性疾病的危险因素包括≤70岁的人群(OR=13.07,95%CI:2.53~67.68)、体质指数(BMI)(OR=1.37,每增加1 kg/m^(2),95%CI:1.03~1.83)、服用安定类药物(OR=8.00,95%CI:1.40~45.73)、钙通道阻滞剂(OR=5.27,95%CI:1.13~24.53)均P<0.05;服用抑酸剂(OR=0.19,95%CI:0.04~0.90,P=0.035)是老年人群发生咽喉反流性疾病的保护因素。与非咽喉反流组相比,咽喉反流组的肺炎发生率更高[44.1%(15/34)比21.7%(10/46),P=0.033]。食管反流肺炎组共32例[男31例,女1例,年龄(84±12)岁];咽喉反流肺炎组共15例[男15例,年龄(79±11)岁];与咽喉反流肺炎组患者相比,食管反流肺炎组使用抗生素疗程更长[(27.7±27.0)比(14.6±13.9)d,P=0.034],发生频率更高[(4.3±3.0)比(1.8±1.5)次/年,P<0.001],最高体温更高[(38.2±0.9)比(37.6±1.1)℃,P=0.037]。结论老年人群咽喉反流性疾病的危险因素包括年龄≤70岁、较高的BMI、服用安定类药物、钙通道阻滞剂。咽喉反流性疾病肺炎发病率更高,但肺炎病情较轻。

关键词：反流,胃胃食管反流咽喉反流肺炎老年人危险因素

双能CT的虚拟去钙技术对非创伤性股骨头坏死周围骨髓水肿的检出价值

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中华医学杂志 2024年第7期104卷 533-539页

作者：杨淑辉李天然卢晶武艳斌张鹏举尚柳彤钟燕杨本涛首都医科大学附属北京同仁医院放射科北京100005 解放军总医院第四医学中心放射诊断科北京100048 解放军总医院第四医学中心骨科研究所骨科再生医学北京市重点实验室全军骨科战创伤重点实验室北京100048

目的以MRI为参考标准,评价双能CT的虚拟去钙(VNCa)技术对非创伤性股骨头坏死(ONFH)周围骨髓水肿(BME)的检出价值。方法前瞻性纳入2022年10月至2023年5月解放军总医院第四医学中心非创伤性ONFH患者,分析其MRI及双能CT图像。以MRI图像的... 详细信息

目的以MRI为参考标准,评价双能CT的虚拟去钙(VNCa)技术对非创伤性股骨头坏死(ONFH)周围骨髓水肿(BME)的检出价值。方法前瞻性纳入2022年10月至2023年5月解放军总医院第四医学中心非创伤性ONFH患者,分析其MRI及双能CT图像。以MRI图像的评价结果作为参考标准,计算两名放射科医师在VNCa彩色编码图像上主观判断ONFH周围BME的诊断效能。比较VNCa图像和MRI显示的BME范围的差异,并比较正常骨髓和BME的传统CT值及VNCa CT值的差异。对于差异有统计学意义的CT值勾画受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),找出区分正常骨髓和BME的阈值,评价诊断效能。结果共纳入ONFH患者30例,男24例,女6例,年龄(39±12)岁;其中双侧髋关节18例,单侧髋关节12例,共48个髋关节,其中34个髋关节在MRI上显示BME。两名医师在VNCa彩色编码图上主观检出BME的灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)和准确度分别为97.1%(33/34)和97.1%(33/34)、92.9%(13/14)和71.4%(10/14)、97.1%(33/34)和89.2%(33/37)、92.9%(13/14)和90.9%(10/11)、95.8%(46/48)和89.6%(43/48),差异均无统计学意义(均P>0.05)。VNCa彩色编码图像与MRI对BME范围的显示差异无统计学意义(P=1.160)。两名放射科医师测量的传统CT值和VNCa CT值的一致性较好,组内相关系数(ICC)分别为0.948(95%CI:0.908~0.971)、0.982(95%CI:0.969~0.990)。正常骨髓的传统CT值为(400.7±82.8)HU,BME的传统CT值为(443.7±65.7)HU,差异无统计学意义(P=0.062);正常骨髓的VNCa CT值为(-103.1±27.8)HU,BME的VNCa CT值为(-32.9±25.7)HU,差异有统计学意义(P-74.5 HU时,诊断BME的灵敏度、特异度、PPV、NPV和准确度分别为97.1%、92.9%、97.1%、92.9%和95.8%。结论双能CT的VNCa技术对非创伤性ONFH周围BME的检出效能较高,且能准确显示BME的范围。

关键词：股骨头坏死骨髓水肿虚拟去钙双能CT

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遗传性耳聋临床诊疗研究进展

临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2024年第1期38卷 8-17页

作者：王洪阳关静张娇王秋菊中国人民解放军总医院

随着现代科学技术的飞速发展,临床诊疗技术和方法不断发展和完善。本专栏的开辟旨在创建一个学术交流平台,针对本学科临床工作中的热点和难点,邀请在相关领域做出大量工作并颇有建树的专家和教授,介绍他们的见解和经验,以飨读者。圆桌... 详细信息

随着现代科学技术的飞速发展,临床诊疗技术和方法不断发展和完善。本专栏的开辟旨在创建一个学术交流平台,针对本学科临床工作中的热点和难点,邀请在相关领域做出大量工作并颇有建树的专家和教授,介绍他们的见解和经验,以飨读者。圆桌论坛为个人意见不具共识性。

关键词：遗传性耳聋基因鉴定三级预防

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镜下全内技术后交叉韧带重建与常规技术比较

中国矫形外科杂志 2024年第12期 1089-1094页

作者：刘昭白晓东杨军邢更彦张浩冲安伯京解放军总医院第三医学中心骨科

[目的]比较镜下全内技术与常规技术重建后交叉韧带（posterior cruciate ligament, PCL）的临床结果。[方法]回顾性分析2016年7月—2021年7月镜下重建PCL 74例患者的临床资料。依据医患沟通结果，31例采用自体半腱肌肌腱为移植物，以全... 详细信息

[目的]比较镜下全内技术与常规技术重建后交叉韧带（posterior cruciate ligament, PCL）的临床结果。[方法]回顾性分析2016年7月—2021年7月镜下重建PCL 74例患者的临床资料。依据医患沟通结果，31例采用自体半腱肌肌腱为移植物，以全内技术PCL重建（全内组），另外43例采用异体肌腱为移植物，常规镜下PCL重建（常规组）。比较两组围手术期、随访及影像资料。[结果]全内组在切口总长度[(7.1±1.3) cm vs (10.3±2.4) cm, P<0.001]、下地行走时间[(3.4±2.1) d vs (5.6±3.2) d,P<0.001]、早期并发症发生率（3.2%vs 9.3%, P=0.043）、住院时间[(7.4±1.8) d vs (10.3±3.6) d, P<0.001]均显著优于常规组。全内组恢复完全负重活动时间显著早于常规组[(93.6±11.7) d vs (128.4±12.4) d, P<0.001]。术后两组VAS评分、Lysholm评分、IKDC评级、膝伸屈ROM、后抽屉试验和后向Lachman试验均显著改善（P<0.05），术后3个月和末次随访时，全内组的膝伸屈活动度[(124.4±3.6)°vs (116.5±3.2)°, P<0.001;(138.7±3.6)°vs (132.6±5.8)°, P<0.001]、Lysholm评分[(124.4±3.6) vs (116.5±3.2), P<0.001;(138.7±3.6) vs (132.6±5.8), P<0.001]和IKDC评级均显著优于常规组。影像方面，术后3个月，全内组股骨隧道内口缩小[例,缩小/无变化/扩大,(23/8/0) vs (13/27/3), P<0.001]占比显著优于常规组（P<0.05）。[结论]应用镜下全内技术PCL重建膝PCL的临床结果优于常规镜下PCL重建。

关键词：关节镜后交叉韧带重建半腱肌肌腱移植物全内技术常规技术

静态牵伸在单髁置换术患者围手术期康复护理中的应用

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中华护理杂志 2024年第12期59卷 1462-1467页

作者：陈玉娥高远孔丹谷思琪康珊珊解涛解放军总医院第一医学中心骨科北京市100853 解放军总医院第一医学中心护理部北京市100853 解放军总医院第二医学中心康复科

目的探讨静态牵伸联合循序渐进康复护理在单髁置换术患者围手术期康复护理中的应用效果。方法采用便利抽样法,选取2022年1月—2023年6月在北京市某三级甲等医院骨科择期行单髁置换患者74例,采用随机数字表法分为试验组和对照组,每组各3... 详细信息

目的探讨静态牵伸联合循序渐进康复护理在单髁置换术患者围手术期康复护理中的应用效果。方法采用便利抽样法,选取2022年1月—2023年6月在北京市某三级甲等医院骨科择期行单髁置换患者74例,采用随机数字表法分为试验组和对照组,每组各37例。试验组给予静态牵伸与循序渐进康复护理,对照组仅给予循序渐进康复护理,持续干预4周。比较两组干预前后的膝关节活动度、膝关节功能得分、舒适度和康复自我效能感的得分。结果最终试验组纳入35例,对照组纳入36例。试验组干预后的膝关节活动度、膝关节功能得分、舒适度得分、康复自我效能感得分均高于干预前及对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论静态牵伸联合循序渐进康复护理可有效改善单髁置换术患者的膝关节功能及活动度,提高患者的舒适度,提升其生活质量,增进其康复自我效能感,有助于实现早日康复。

关键词：单髁置换术静态牵伸康复护理膝关节功能

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戈谢病的特异性治疗进展

中华内科杂志 2024年第7期63卷 702-711页

作者：孟岩解放军总医院第一医学中心儿科北京

戈谢病是一种多系统受累的罕见遗传性溶酶体贮积症, 尽早治疗有助于延缓疾病进展, 提高患者生活质量, 延长患者预期寿命。戈谢病的特异性治疗包括酶替代治疗、底物减少疗法、造血干细胞移植、分子伴侣疗法和基因治疗。目前酶替代治疗和... 详细信息

戈谢病是一种多系统受累的罕见遗传性溶酶体贮积症, 尽早治疗有助于延缓疾病进展, 提高患者生活质量, 延长患者预期寿命。戈谢病的特异性治疗包括酶替代治疗、底物减少疗法、造血干细胞移植、分子伴侣疗法和基因治疗。目前酶替代治疗和底物减少疗法的药物已获批上市, 其他新型治疗方案仍在临床研究中。本文综述并探讨了不同分型戈谢病特异性治疗的最新进展及不同分型患者特异性治疗的方案选择, 以期为临床医生治疗该病提供参考。

关键词：戈谢病特异性治疗酶替代治疗底物减少疗法

术前丙氨酸氨基转移酶与天冬氨酸氨基转移酶比值作为胰腺癌根治性胰十二指肠切除术预后标志物的临床研究

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中华肝胆外科杂志 2024年第2期30卷 124-129页

作者：李明泰崔成昊王砚伟刘哲梁雨荣解放军医学院研究生院北京100853 解放军总医院第一医学中心肝胆胰外科医学部、解放军总医院肝胆外科研究所、全军数字肝胆外科重点实验室北京100853

目的评估天冬氨酸氨基转移酶与丙氨酸氨基转移酶比值(DRR)对于接受根治性胰十二指肠切除术的胰腺导管腺癌(PDAC)患者术后总生存的预测价值。方法回顾性分析2015年1月至2020年12月于解放军总医院行根治性胰十二指肠切除术且术后病理诊断... 详细信息

目的评估天冬氨酸氨基转移酶与丙氨酸氨基转移酶比值(DRR)对于接受根治性胰十二指肠切除术的胰腺导管腺癌(PDAC)患者术后总生存的预测价值。方法回顾性分析2015年1月至2020年12月于解放军总医院行根治性胰十二指肠切除术且术后病理诊断为PDAC的137例患者临床资料,其中男性97例,女性40例,年龄(58±10)岁。根据DRR最佳生存风险截断值将患者分组,比较关键临床病理指标的组间差异。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,生存率比较采用log-rank检验。采用多因素Cox分析评估影响预后的危险因素。结果将137例PDAC患者依据DRR最佳截断值1.1分为两组:DRR≥1.1为高DRR组(n=29);DRR<1.1为低DRR组(n=108)。低DRR组患者累积生存率优于高DRR组,差异有统计学意义(P=0.003)。多因素Cox回归分析结果显示,DRR≥1.1(HR=2.485,95%CI:1.449~4.261,P=0.001)、术前胆道引流(HR=1.845,95%CI:1.030~3.306,P=0.039)、淋巴结转移N2分期(HR=2.240,95%CI:1.123~4.470,P=0.022)、高级别肿瘤分化(HR=2.001,95%CI:1.279~3.129,P=0.002)、脉管内癌栓(HR=2.240,95%CI:1.123~4.470,P=0.022)是接受根治性胰十二指肠切除的PDAC患者总生存期差的危险因素。结论DRR对于接受根治性胰十二指肠切除术的PDAC患者术后总生存具有预测价值,DRR≥1.1是PDAC患者术后总生存差的危险因素。

关键词：胰腺肿瘤胰十二指肠切除术天冬氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶总生存期

基于脱细胞方法制备3D植物肝组织工程支架及表征

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中国组织工程研究 2024年第29期28卷 4645-4651页

作者：胡婧婧何松霖张大旭赵烁史潇楠李伟龙叶淑君王静怡郭全义阎丽解放军总医院第二医学中心老年医学科北京市100853 解放军总医院第一医学中心骨科研究所骨科再生医学北京市重点实验室全军骨科战创伤重点实验室北京市100853

背景:组织工程为肝衰竭这一临床困境带来了新的希望,通过简单的制备方法制备植物脱细胞纤维支架对肝脏组织工程具有重要意义。目的:采用新鲜苹果切片和十二烷基硫酸钠溶液制备苹果组织脱细胞支架材料,并评估其生物相容性。方法:将新鲜... 详细信息

背景:组织工程为肝衰竭这一临床困境带来了新的希望,通过简单的制备方法制备植物脱细胞纤维支架对肝脏组织工程具有重要意义。目的:采用新鲜苹果切片和十二烷基硫酸钠溶液制备苹果组织脱细胞支架材料,并评估其生物相容性。方法:将新鲜苹果分别采用磷酸盐缓冲液和十二烷基硫酸钠溶液进行脱细胞处理,然后用磷酸盐缓冲液进行脱毒获得处理后的苹果组织和苹果脱细胞支架材料,然后在扫描电镜下观察苹果材料的脱细胞效果。实验从BALB/C小鼠腹股沟脂肪中提取脂肪干细胞,并且通过流式细胞术鉴定其干细胞相关标记物(CD45,CD34,CD73,CD90,CD105)的表达。然后分为无支架对照组和有支架组,在两组中接种等量脂肪干细胞,通过CCK-8、苏木精-伊红染色、鬼笔环肽骨架染色评价该脱细胞支架与脂肪干细胞的生物相容性,在光学显微镜、扫描电镜下观察细胞在支架上的黏附及生长情况。然后将支架分为非诱导组和成肝诱导组,将脂肪干细胞种植在脱细胞苹果支架上,分别在普通培养基和成肝诱导培养基中培养14 d后进行对比,通过肝细胞标记物(白蛋白、细胞角蛋白18、细胞色素P450家族1亚家族1)进行免疫荧光染色,通过酶联免疫吸附实验来检测白蛋白、甲胎蛋白的分泌情况,并通过扫描电镜观察支架上诱导培养的细胞形态,验证该脱细胞支架材料上肝细胞相关蛋白的表达。最后,实验通过将钴60照射消毒后的苹果脱细胞支架移植于小鼠肝脏表面,28 d后通过大体观及苏木精-伊红染色观察该支架的降解情况。结果与结论:①扫描电镜结果显示,脱细胞后的苹果支架材料具有约100μm大小的孔隙结构,不存在残余细胞。②通过流式细胞学鉴定,提取培养的细胞为脂肪间充质干细胞。③CCK-8结果表明,所制备的苹果组织脱细胞支架材料无细胞毒性;苏木精-伊红染色和鬼笔环肽骨架染色观察到脂肪间充质干细胞能够在苹果组织脱细胞支架上黏附和聚集生长。④免疫荧光染色、酶联免疫吸附实验结果显示,培养在苹果组织脱细胞支架上的脂肪间充质干细胞高表达白蛋白、甲胎蛋白、细胞角蛋白18及细胞色素P450家族1亚家族1肝脏相关蛋白,说明被诱导分化为了具有肝细胞功能的肝细胞样细胞。⑤干预7 d时植入的苹果脱细胞支架与肝脏融合,部分支架已经降解,干预28 d时苹果脱细胞支架已完全降解,被新生组织替代。⑥结果表明,来源于苹果组织制备的脱细胞支架材料具有良好的生物相容性,可促进脂肪间充质干细胞的增殖、黏附及成肝细胞分化。

关键词：植物组织支架脱细胞肝衰竭脂肪间充质干细胞组织工程肝细胞样细胞