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高原鼠兔发情周期性激素与性器官变化特征

兽类学报 2024年第3期44卷 351-359页

作者：王玉军张晓茜方有贵杨其恩贾功雪中国科学院西北高原生物研究所中国科学院高原生物适应与进化重点实验室西宁810001 中国科学院大学北京100049 玛多县农牧综合服务中心果洛813599 中国科学院西北高原生物研究所青海省动物生态基因组学重点实验室西宁810001

为研究雌性高原鼠兔(Ochotona curzoniae)的发情表征变化及其与性激素含量、生殖器官发育之间的关系,选取繁殖期与非繁殖期雌性高原鼠兔,通过外阴形态观察与阴道细胞涂片检测阴道的周期性变化,确定繁殖期鼠兔的发情周期在7~11 d,发情期... 详细信息

为研究雌性高原鼠兔(Ochotona curzoniae)的发情表征变化及其与性激素含量、生殖器官发育之间的关系,选取繁殖期与非繁殖期雌性高原鼠兔,通过外阴形态观察与阴道细胞涂片检测阴道的周期性变化,确定繁殖期鼠兔的发情周期在7~11 d,发情期持续3~4 d,而非繁殖期鼠兔的阴道维持在接近发情前期的状态。采集发情期、发情间期与非繁殖期雌性高原鼠兔的血清与尿液样本,使用酶联免疫吸附法检测雌二醇和孕酮含量。结果显示,发情期高原鼠兔血清雌二醇含量显著高于发情间期与非繁殖期(P=0.0338),而非繁殖期血清孕酮含量显著高于发情期与发情间期(P=0.0195)。尿液检测的灵敏度整体弱于血清,仅在发情期与非繁殖期间存在尿液雌二醇含量的显著差异(P=0.0009)。发情期卵巢重量极显著高于发情间期与非繁殖期(P研究确定了阴道细胞涂片法在高原鼠兔发情阶段判定中的有效性,描述了不同发情阶段高原鼠兔性激素与性器官变化特征,为雌性高原鼠兔季节性繁殖调控机制研究提供了重要基础数据。

关键词：高原鼠兔发情周期阴道脱落细胞雌二醇卵巢子宫

血液再生工程：体外红细胞制备技术的研究现状与前景

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协和医学杂志 2024年

作者：卓千莅张昭军方向东国家生物信息中心中国科学院北京基因组研究所中国科学院大学基因组与精准医学检测技术北京市重点实验室

体外红细胞制备技术为输血治疗提供了一种新的解决方案，能够确保血液供应的可持续性，减少对供血者的依赖，并降低传染病传播风险。本文通过综述体外细胞制备技术最新进展，包括不同细胞来源的红细胞制备技术，重点讨论永生化红细胞株... 详细信息

体外红细胞制备技术为输血治疗提供了一种新的解决方案，能够确保血液供应的可持续性，减少对供血者的依赖，并降低传染病传播风险。本文通过综述体外细胞制备技术最新进展，包括不同细胞来源的红细胞制备技术，重点讨论永生化红细胞株的培养技术及发展，强调提高脱核率和确保永生化红细胞株安全性的重要性，同时探讨其在临床转化中的潜力和挑战，以期为未来红细胞的持续供应和临床应用提供新思路。

关键词：体外红细胞制备永生化红细胞株脱核培养

精子鞭毛多发形态异常患者KLHL10基因突变分析

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中国优生与遗传杂志 2024年第7期32卷 1336-1342页

作者：张慧黄吴键陈国勇梅晓妍谢鹏郑海英兰风华张朵中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院基础医学实验室福建省移植生物学重点实验室中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院生殖医学中心福建医科大学福总临床医学院

目的探寻精子鞭毛多发形态异常患者的致病基因。方法通过全外显子组测序（WES）对患者样本进行检测，分析可能的致病基因；运用扫描电镜和透射电镜观察患者精子超微结构；通过定量聚合酶链反应（qPCR）分析精子中目的基因mRNA表达水... 详细信息

目的探寻精子鞭毛多发形态异常患者的致病基因。方法通过全外显子组测序（WES）对患者样本进行检测，分析可能的致病基因；运用扫描电镜和透射电镜观察患者精子超微结构；通过定量聚合酶链反应（qPCR）分析精子中目的基因mRNA表达水平；通过PubMed、中国知识基础设施工程（CNKI）等数据库检索目的基因突变相关临床病例。结果在本研究征集的患者中检测到一个KLHL10基因杂合突变：c.317C>T(***106Leu)，透射电镜结果表明患者精子鞭毛结构缺失或紊乱，未能找见轴丝中典型“9+2”结构。qPCR结果提示患者精子KLHL10 mRNA表达水平降低，只有正常对照组的一半，而与KLHL10相互结合的泛素连接酶CUL3(Cullin-3)的mRNA表达量却较正常对照升高2.5倍。结论本研究报道了精子鞭毛多发形态异常患者KLHL10基因C.317C>T突变，该突变位点首次报道可能通过单倍体剂量不足引起精子形态异常。

关键词：精子鞭毛多发形态异常全外显子组测序 KLHL10基因男性不育

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乌司他丁对脓毒症急性骨丢失的保护作用

中国组织工程研究 2024年第35期28卷 5649-5655页

作者：杨鹏唐玉彬杨京刘健姚润杰陈林苏楠陆军军医大学大坪医院骨质疏松与骨发育中心/战伤组织修复与康复医学研究室/全军军事训练伤防治与康复实验室/创伤与化学中毒国家重点实验室重庆市400042 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院急诊科甘肃省兰州市730050 华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科湖北省武汉市430030

背景:在脓毒症引发的全身炎症情况下机体会出现骨量快速丢失的现象,目前尚缺乏有效的治疗办法。乌司他丁作为一种抑炎类药物在全身炎症情况下对骨骼的具体保护作用和机制尚不明确。目的:探讨乌司他丁对脂多糖导致的急性骨丢失是否有缓... 详细信息

背景:在脓毒症引发的全身炎症情况下机体会出现骨量快速丢失的现象,目前尚缺乏有效的治疗办法。乌司他丁作为一种抑炎类药物在全身炎症情况下对骨骼的具体保护作用和机制尚不明确。目的:探讨乌司他丁对脂多糖导致的急性骨丢失是否有缓解作用。方法:(1)动物实验:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,对照组腹腔注射生理盐水,模型组腹腔注射脂多糖,实验组腹腔注射脂多糖与乌司他丁,其中乌司他丁连续注射3 d,每组10只。乌司他丁注射14 d后,进行股骨CT扫描与病理切片观察。(2)细胞实验:分离培养C57BL/6小鼠颅骨原代成骨细胞,分3组处理,对照组常规培养,模型组加入脂多糖,实验组加入脂多糖与乌司他丁,检测细胞增殖与成骨分化情况。分离培养C57BL/6小鼠骨髓单核细胞,分3组处理,对照组常规培养,模型组加入脂多糖,实验组加入脂多糖与乌司他丁,检测破骨分化情况。结果与结论:(1)动物实验:CT扫描与苏木精-伊红染色显示,脂多糖处理后小鼠骨量减少,乌司他丁可提升脂多糖处理后小鼠的骨量。抗酒石酸酸性磷酸染色显示,模型组骨组织破骨细胞数量增加,实验组骨组织破骨细胞数量较模型组显著减少。(2)细胞实验:CCK-8检测显示脂多糖处理抑制了成骨细胞的增殖,乌司他丁可提升脂多糖处理后成骨细胞的增殖。碱性磷酸酶染色、茜素红染色及成骨相关基因(碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素、骨桥素、RANKL、OPG)检测显示,脂多糖处理可抑制成骨细胞的成骨分化,提升RANKL/OPG比值;乌司他丁对脂多糖诱导的成骨细胞功能降低无明显作用,但可降低RANKL/OPG比值。抗酒石酸酸性磷酸酶与破骨相关基因(抗酒石酸酸性磷酸酶、基质金属蛋白酶9)检测显示,脂多糖处理可促进骨髓单核细胞的破骨分化,而乌司他丁可抑制脂多糖诱导的骨髓单核细胞破骨分化。(3)乌司他丁可明显抑制脂多糖引起的骨丢失,主要通过促进成骨细胞增殖、直接或间接抑制破骨细胞分化来缓解骨丢失,达到骨保护的作用。

关键词：脂多糖乌司他丁脓毒症成骨细胞破骨细胞骨丢失

高活性脐带间充质干细胞干预老年树鼩衰老脾脏的作用与机制

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4000-4010页

作者：叶丽田川赵晓娟陈梦蝶叶倩倩李强廖珠银李晔朱向情阮光萍何志旭舒莉萍潘兴华贵州医科大学基础医学院免疫学教研室组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明市干细胞与再生医学重点实验室基础医学实验室云南省昆明市650032 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作... 详细信息

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作用及机制。方法:从剖腹产的新生树鼩脐带组织中分离、培养和获得高活性脐带间充质干细胞,三系分化试剂盒检测成脂、成骨、成软骨分化能力,流式细胞术检测细胞周期和表面标志物。以感染复数值分别为100,120,140,160,180,200的吉凯基因绿色荧光蛋白转染第2代高活性脐带间充质干细胞,筛选最佳转染条件;转染后的第4代高活性脐带间充质干细胞尾静脉输注给老年治疗组树鼩,青年对照组和老年模型组不予特殊处理,治疗4个月时取脾脏组织,苏木精-伊红染色观察脾脏组织结构;β-半乳糖苷酶染色检测衰老相关半乳糖苷酶活性;免疫组织化学染色检测p21和p53蛋白表达水平;Ki67和PCNA免疫荧光染色检测细胞增殖活性;免疫荧光染色检测脾脏自噬蛋白分子Beclin1和APG5L/ATG5表达水平;活性氧荧光染色检测脾脏组织的活性氧含量;CD3免疫荧光染色检测总T淋巴细胞比例变化;酶联免疫吸附实验检测脾脏组织白细胞介素1β和转化生长因子β1分泌水平;DAPI复染细胞核观察绿色荧光蛋白标记的高活性脐带间充质干细胞在脾脏组织的分布情况。结果与结论:①高活性脐带间充质干细胞呈核小短梭形、鱼群样生长,G_(0)/G_(1)期占比大,具有向成脂、成骨和成软骨分化潜能。②感染复数为140且转染72 h为吉凯基因绿色荧光蛋白标记树鼩高活性脐带间充质干细胞的最佳条件。③与老年模型组相比,老年治疗组树鼩脾脏组织细胞排列紧密,白髓面积增加(P0.05),脾脏组织衰老相关半乳糖苷酶活性水平降低(P0.05)。与青年对照组相比,以上检测指标在老年治疗组中均有显著差异(P<0.05)。④冰冻组织切片观察可见老年治疗组树鼩脾脏组织中有绿色荧光蛋白标记的绿色荧光细胞。结果表明:静脉输注高活性脐带间充质干细胞可迁移至脾脏组织,抑制活性氧产生,下调衰老相关蛋白分子表达,诱导细胞自噬,促进细胞增殖,降低慢性炎症,进而改善脾脏组织结构和功能。

关键词：高活性脐带间充质干细胞树鼩脾脏衰老免疫自噬炎症

四氯虫酰胺亚致死胁迫对胡瓜新小绥螨捕食效能的影响

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应用昆虫学报 2024年第3期61卷 625-633页

作者：李亚迎刘明秀宋雪纯李士家马方芳张开军相栋陈翰秋尼玛玉珍刘怀西南大学植物保护学院昆虫学及害虫控制工程重庆市重点实验室长江上游农业生物安全与绿色生产教育部重点实验室重庆400715 西藏自治区农牧科学院蔬菜研究所拉萨850032

【目的】本研究旨在研究亚致死浓度四氯虫酰胺对胡瓜新小绥螨Neoseiulus cucumeris(Oudemans)捕食作用的影响,进而评价其对天敌捕食螨的安全性。【方法】在实验室内条件下,采用叶片残毒法和二次中毒法进行四氯虫酰胺对胡瓜新小绥螨雌成... 详细信息

【目的】本研究旨在研究亚致死浓度四氯虫酰胺对胡瓜新小绥螨Neoseiulus cucumeris(Oudemans)捕食作用的影响,进而评价其对天敌捕食螨的安全性。【方法】在实验室内条件下,采用叶片残毒法和二次中毒法进行四氯虫酰胺对胡瓜新小绥螨雌成螨的毒力测定,并测定亚致死剂量(LC_(15)、LC_(30))的四氯虫酰胺对胡瓜新小绥螨雌成螨取食柑橘始叶螨Eotetranychus kankitus(Ehara)的捕食量、捕食功能反应及捕食速率的影响。【结果】叶片残毒法和二次中毒法测定四氯虫酰胺对胡瓜新小绥螨的LC_(50)分别为400.29和3.86×10^(5)μg/m L。亚致死剂量的四氯虫酰胺处理下胡瓜新小绥螨对柑橘始叶螨各个螨态的功能反应类型均为Holling-Ⅱ,但其参数发生改变,其对叶螨的最大日捕食量降低,处理猎物的时间延长。此外,在亚致死剂量四氯虫酰胺胁迫下,胡瓜新小绥螨对柑橘始叶螨的捕食量和捕食速率均降低。【结论】四氯虫酰胺对胡瓜新小绥螨存在副作用,影响捕食螨的控害能力,与捕食螨联合使用时应间隔一定的安全期后再释放天敌捕食螨。

关键词：胡瓜新小绥螨四氯虫酰胺亚致死效应捕食功能反应捕食速率

短时高温胁迫对携带球孢白僵菌的巴氏新小绥螨的生物学特性的影响

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应用昆虫学报 2024年第3期61卷 606-614页

作者：刘明秀尼玛玉珍冯小天李宣良杨瑒张开军相栋陈翰秋李亚迎刘怀西南大学植物保护学院昆虫学及害虫控制工程重庆市重点实验室长江上游农业生物安全与绿色生产教育部重点实验室重庆400715 西藏自治区农牧科学院蔬菜研究所拉萨850032

【目的】评价短时高温胁迫对携带球孢白僵菌Beauveria bassiana(Vuillemin)的巴氏新小绥螨Neoseiulus barkeri(Hughes)的生物学特性的影响,明确短时高温环境下巴氏新小绥螨携带球孢白僵菌联合应用防控柑橘始叶螨Eotetranychus kankitus(... 详细信息

【目的】评价短时高温胁迫对携带球孢白僵菌Beauveria bassiana(Vuillemin)的巴氏新小绥螨Neoseiulus barkeri(Hughes)的生物学特性的影响,明确短时高温环境下巴氏新小绥螨携带球孢白僵菌联合应用防控柑橘始叶螨Eotetranychus kankitus(Ehara)的可行性。【方法】测定35℃高温胁迫2、4和6 h后巴氏新小绥螨携带的球孢白僵菌Bb025菌株孢子的残留量,评价35℃高温胁迫4 h对携带球孢白僵菌的巴氏新小绥螨对柑橘始叶螨的捕食功能反应及其发育和繁殖的影响。【结果】35℃高温短时胁迫2、4和6 h后,巴氏新小绥螨雌成螨携带的孢子数量和25℃不同处理时间处理后所携带的孢子数量无显著差异(χ^(2)=0.001,P=0.978)。尽管随处理时间的延长巴氏新小绥螨携带的孢子数量逐渐减少,但在6 h仍能达到105个数量级。此外,携带球孢白僵菌的巴氏新小绥螨雌成螨在35℃高温胁迫4h后对柑橘始叶螨若螨的捕食量与25℃处理时无显著性差异(P>0.05),且其对柑橘始叶螨若螨的捕食潜能(a'/T_(h))小幅增加;但每日35℃高温胁迫4 h下,携带球孢白僵菌的巴氏新小绥螨发育加快、产卵前期延长、产卵量和寿命降低。【结论】短时高温环境下,巴氏新小绥螨仍可携带大量的球孢白僵菌孢子,携带球孢白僵菌的巴氏新小绥螨对柑橘始叶螨具有较好的防控能力,但短时高温对携带球孢白僵菌的巴氏新小绥螨的生殖和寿命等方面存在不利影响。本研究结果对研发菌螨协同联合应用的可持续性综合防控柑橘害螨的策略具有一定指导的意义。

关键词：球孢白僵菌巴氏新小绥螨高温胁迫捕食功能反应联合应用

鸡痘病毒282E_4株TK基因重组载体质粒的构建

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中国兽医学报 1996年第3期16卷 234-238页

作者：顾万钧金宁一殷震解放军农牧大学基因工程实验室

应用已克隆的鸡痘病毒（ＦＰＶ）２８２Ｅ＿４株基因组ＴＫ基因，在ＮｃｏⅠ部位引入痘苗病毒Ｐ７．５启动子和Ｐ１１启动子控制下的大肠杆菌ＬａｃＺ基因，经酶切鉴定，成功地构建了用于ＦＰＶ重组的载体质粒。与亲本毒株在鸡胚成纤维... 详细信息

应用已克隆的鸡痘病毒（ＦＰＶ）２８２Ｅ＿４株基因组ＴＫ基因，在ＮｃｏⅠ部位引入痘苗病毒Ｐ７．５启动子和Ｐ１１启动子控制下的大肠杆菌ＬａｃＺ基因，经酶切鉴定，成功地构建了用于ＦＰＶ重组的载体质粒。与亲本毒株在鸡胚成纤维细胞内共转染，产生了表达ＬａｃＺ基因的重组鸡痘病毒。经传代筛选、纯化，重组病毒较稳定。实验结果表明，以ＴＫ基因构建的重组载体质粒可用于外源基因的重组表达研究。

关键词：鸡痘病毒 TK 基因重组载体质粒重组FPV

HIV-1中国流行株gag与hIL-2在重组痘苗病毒中的共表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究

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中国免疫学杂志 2002年第5期18卷 297-300页

作者：王莉馨金宁一王宏伟秦云龙罗坤葛涛江文正金洪涛解放军军需大学研究所解放军基因工程重点实验室长春130062

目的：将HIV-1中国流行株B亚型gag基因、gag和hIL-2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达，以期获得重组痘苗病毒，观察细胞因子的佐剂作用，与核酸疫苗混合免疫，评价免疫效果，为新型艾滋病疫苗研制开发打下基础。方法：将HIV-1中国流行... 详细信息

目的：将HIV-1中国流行株B亚型gag基因、gag和hIL-2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达，以期获得重组痘苗病毒，观察细胞因子的佐剂作用，与核酸疫苗混合免疫，评价免疫效果，为新型艾滋病疫苗研制开发打下基础。方法：将HIV-1中国流行株 gag基因、gag和hIL-2基因片段插入到 pJ38载体启动子下游，经同源重组和血凝素阴性空斑筛选重组痘苗病毒，SDS-PAGE、Western blot检测目的蛋白。以重组病毒和核酸疫苗免疫Balb/c小鼠，进行淋巴细胞转化实验、CTL、CD4+、CD8+ T细胞数目以及血清抗体的细胞免疫和体液免疫指标检测。结果：获得了重组痘苗病毒 vJ38gag和 vJ38gag-IL-2。与 vJ38-gag相比，vJ38gag-IL-2，具有更好的免疫原性，重组痘苗病毒免疫3次的效果好于重组病毒免疫2次，以2rVV-DNA混合免疫效果最好。结论：重组痘苗病毒vJ38gag和vJ38gag-IL-2能够表达外源蛋白并诱导机体产生细胞免疫和体液免疫。细胞因子IL-2发挥了免疫佐剂的作用。

关键词： HIV-1 中国流行株gag基因 hIL-2 痘苗病毒表达 DNA疫苗