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急性心肌梗塞血小板中PKC底物磷酸化程度的实验研究

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中国医科大学学报 1998年第2期27卷 158-159页

作者：孙胜玫张丽霞郝一文宗志鸿于秉治解放军大连医高专生物化学教研室基础医学院生物化学教研室

目的：研究急性心肌梗塞（ＡＭＩ）时脂蛋白（ａ）［ＬＰ（ａ）］，血小板（ＰＬＴ）及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的关系。方法：分别以高ＬＰ（ａ）血症的急性心肌梗塞（ＡＭＩ）病人及健康对照者为对象，检测其ＰＬＴ及ＰＬＴ中ＰＫＣ底物... 详细信息

目的：研究急性心肌梗塞（ＡＭＩ）时脂蛋白（ａ）［ＬＰ（ａ）］，血小板（ＰＬＴ）及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的关系。方法：分别以高ＬＰ（ａ）血症的急性心肌梗塞（ＡＭＩ）病人及健康对照者为对象，检测其ＰＬＴ及ＰＬＴ中ＰＫＣ底物４０ｋｄ蛋白磷酸化程度，对检测结果进行统计学分析。结果：ＡＭＩ组ＰＬＴ数目及其４０ｋｄ蛋白磷酸化程度明显高于对照组。并且，磷酸化程度随时间延长而增强。结论：高ＬＰ（ａ）血症的ＡＭＩ患者ＰＬＴ数目及ＰＬＴ中ＰＫＣ底物４０ｋｄ蛋白磷酸化程度均增高。

关键词：心肌梗塞 AMI 血小板蛋白激酶C 脂蛋白(a)

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基于JPEG技术的CT图像压缩方法的研究

中国生物医学工程学报 2003年第4期22卷 337-342页

作者：王春胜尚雅琴解放军军需大学军需自动化教研室长春130062

CT图像在医学影像诊断中占有重要地位 ,CT图像压缩技术是PACS系统的重要组成部分。JPEG静止图像压缩标准目前已成为一种广泛应用的图像压缩技术。JPEG充分利用人眼的视觉特性 ,对DCT系数的低频系数进行细量化 ,而对高频系数进行粗量化 ... 详细信息

CT图像在医学影像诊断中占有重要地位 ,CT图像压缩技术是PACS系统的重要组成部分。JPEG静止图像压缩标准目前已成为一种广泛应用的图像压缩技术。JPEG充分利用人眼的视觉特性 ,对DCT系数的低频系数进行细量化 ,而对高频系数进行粗量化 ,但未对图像的边缘特征进行特殊的处理。而图像的部分边缘特征又正是隐含于DCT高频系数中。文中从图像边缘信息的谱分析入手 ,通过理论推导及实例分析得到平直单边缘图像子块其DCT系数能量的分布规律 ,并以此为理论基础设计出JPEG中DCT系数量化表 (Q表 ) ,实验结果表明该Q表对非平直边缘图象子块没有影响 ,而对含有平直边缘图像子块的边缘信息进行了有效的保持。

关键词： CT图像图像边缘频谱特征 JPEG 量化

蛋白激酶对活性氧调节7721人肝癌细胞生长的影响

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第1期34卷 67-72页

作者：刘珊林刘冠中程建施冬云陈惠黎张亚东复旦大学医学院生物化学教研室上海200032 复旦大学医学院生物化学教研室

以有义和反义人锰型超氧化物歧化酶 (MnSOD)、蛋白激酶B (PKB)cDNA分别转染人 772 1肝癌细胞系建立高、低表达MnSOD和PKB的模型 ,通过改变细胞内、外源性活性氧和抗氧化水平及PKB的活性 ,研究活性氧调节肝癌细胞生长过程中与PKB信号转... 详细信息

以有义和反义人锰型超氧化物歧化酶 (MnSOD)、蛋白激酶B (PKB)cDNA分别转染人 772 1肝癌细胞系建立高、低表达MnSOD和PKB的模型 ,通过改变细胞内、外源性活性氧和抗氧化水平及PKB的活性 ,研究活性氧调节肝癌细胞生长过程中与PKB信号转导途径的关系。结果表明 ,低浓度外源性活性氧过氧化氢 (1～ 10μmol/L)应激及MnSOD低表达细胞中内源性活性氧水平升高 ,都可促进肝癌细胞增殖 ,而抗氧化剂丹参素 (4 0mg/L)干预及MnSOD高表达使细胞内源性活性氧水平相对下降 ,都可一定程度抑制细胞的生长。采用3 2 P参入法检测细胞PKB酶活性 ,发现细胞内、外源性活性氧均能激活PKB ,而采用抗氧化干预 ,能明显抑制PKB的酶活性。采用RT PCR法检测AP 1转录因子组成成员c fos和c jun基因的mRNA表达 ,发现与PKB活性呈正比。说明活性氧在特定细胞内氧化 /还原环境下可通过激活PKB途径传递信号、调控转录因子AP 1表达、促进肝癌细胞生长

关键词： PKB 活性氧抗氧化 AP-1 肝癌细胞

高活性脐带间充质干细胞干预老年树鼩衰老脾脏的作用与机制

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4000-4010页

作者：叶丽田川赵晓娟陈梦蝶叶倩倩李强廖珠银李晔朱向情阮光萍何志旭舒莉萍潘兴华贵州医科大学基础医学院免疫学教研室组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明市干细胞与再生医学重点实验室基础医学实验室云南省昆明市650032 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作... 详细信息

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作用及机制。方法:从剖腹产的新生树鼩脐带组织中分离、培养和获得高活性脐带间充质干细胞,三系分化试剂盒检测成脂、成骨、成软骨分化能力,流式细胞术检测细胞周期和表面标志物。以感染复数值分别为100,120,140,160,180,200的吉凯基因绿色荧光蛋白转染第2代高活性脐带间充质干细胞,筛选最佳转染条件;转染后的第4代高活性脐带间充质干细胞尾静脉输注给老年治疗组树鼩,青年对照组和老年模型组不予特殊处理,治疗4个月时取脾脏组织,苏木精-伊红染色观察脾脏组织结构;β-半乳糖苷酶染色检测衰老相关半乳糖苷酶活性;免疫组织化学染色检测p21和p53蛋白表达水平;Ki67和PCNA免疫荧光染色检测细胞增殖活性;免疫荧光染色检测脾脏自噬蛋白分子Beclin1和APG5L/ATG5表达水平;活性氧荧光染色检测脾脏组织的活性氧含量;CD3免疫荧光染色检测总T淋巴细胞比例变化;酶联免疫吸附实验检测脾脏组织白细胞介素1β和转化生长因子β1分泌水平;DAPI复染细胞核观察绿色荧光蛋白标记的高活性脐带间充质干细胞在脾脏组织的分布情况。结果与结论:①高活性脐带间充质干细胞呈核小短梭形、鱼群样生长,G_(0)/G_(1)期占比大,具有向成脂、成骨和成软骨分化潜能。②感染复数为140且转染72 h为吉凯基因绿色荧光蛋白标记树鼩高活性脐带间充质干细胞的最佳条件。③与老年模型组相比,老年治疗组树鼩脾脏组织细胞排列紧密,白髓面积增加(P0.05),脾脏组织衰老相关半乳糖苷酶活性水平降低(P0.05)。与青年对照组相比,以上检测指标在老年治疗组中均有显著差异(P<0.05)。④冰冻组织切片观察可见老年治疗组树鼩脾脏组织中有绿色荧光蛋白标记的绿色荧光细胞。结果表明:静脉输注高活性脐带间充质干细胞可迁移至脾脏组织,抑制活性氧产生,下调衰老相关蛋白分子表达,诱导细胞自噬,促进细胞增殖,降低慢性炎症,进而改善脾脏组织结构和功能。

关键词：高活性脐带间充质干细胞树鼩脾脏衰老免疫自噬炎症

星形孢菌素诱导NG108-15细胞凋亡(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第7期24卷 41-47+103页

作者：张百芳彭芳芳章江洲武栋成武汉大学医学院生物化学教研室武汉大学医学院生物化学教研室武汉 430071 中国

目的:研究星形孢菌素是否能引起NG108-15细胞的凋亡及它对数种与凋亡相关基因蛋白表达水平的影响。方法:用相差显微镜、荧光显微镜和透射电镜观察形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯带:免疫印迹法检测凋亡相关基因蛋白的表达水平。结果... 详细信息

目的:研究星形孢菌素是否能引起NG108-15细胞的凋亡及它对数种与凋亡相关基因蛋白表达水平的影响。方法:用相差显微镜、荧光显微镜和透射电镜观察形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯带:免疫印迹法检测凋亡相关基因蛋白的表达水平。结果:经星形孢菌素0.1μmol/L处理后NG108-15细胞呈典型的凋亡形态学变化,星形孢菌素处理后6h即出现DNA凋亡梯带,可持续至24h,Bax蛋白表达在星形孢菌素处理后6h开始上升,12h至最高峰,24h后下降,Bcl-2蛋白表达在星形孢菌素处理后3h明显上升,随后逐渐下降,星形孢菌素处理后6h可见caspase-3切割产物出现,但Cdk5蛋白的表达水平未见明显变化,p53蛋白表达在星形孢菌素处理12h后下降。结论:星形孢菌素诱导了NG108-15细胞的凋亡,可能与Bax蛋白表达的增加及caspase-3切割有关,而与p53和Cdk5无明显相关性。

关键词：星形孢菌素 NG108-15细胞细胞凋亡 DNA断片 bax基因 bcl-2基因 p53基因细胞周期素依赖激酶

肝细胞内两种磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性

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复旦学报（医学版） 2001年第3期28卷 198-201页

作者：卢虹陈迎风吴兴中复旦大学基础医学院生物化学教研室上海200032

目的　观察肝细胞内磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性。方法　采用化学诱癌法、免疫法、亲和层析法、WesternBlot技术等方法。结果　 (1)钙离子依赖性PC PLC活性在诱癌过程中逐步升高 ;(2 )鞘磷脂酶活性在诱癌过程中无显著改变 ;(3)PC PL... 详细信息

目的　观察肝细胞内磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性。方法　采用化学诱癌法、免疫法、亲和层析法、WesternBlot技术等方法。结果　 (1)钙离子依赖性PC PLC活性在诱癌过程中逐步升高 ;(2 )鞘磷脂酶活性在诱癌过程中无显著改变 ;(3)PC PLC抗体对钙非依赖性PC PLC活性具有显著抑制 ;(4 )肝细胞中存在着与PC PLC抗体相结合的蛋白质 ;(5 )钙依赖性和钙非依赖性PC PLC的蛋白峰有部分重叠 ;(6 )亲和层析柱提纯的酶蛋白只有钙非依赖性PC PLC活性。

关键词：磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C 肝癌中性鞘磷脂酶

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间羟苯甲酸4－羟化酶纯化及部分性质研究

生物化学与生物物理进展 1996年第4期23卷 337-342页

作者：陈瑞细川桂一首都医科大学生物化学教研室日本川崎医科大学生物化学教研室

经超声破碎、硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤、磷酸钙胶层析和离子交换层析等步骤，从Ｃｏｍａｍｏｎａｓｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ菌株中获得了ＳＤＳ－ＰＡＧＥ单一条带，相对分子质量为６２×１０３的间羟苯甲酸４－羟化酶比活提高２１倍... 详细信息

经超声破碎、硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤、磷酸钙胶层析和离子交换层析等步骤，从Ｃｏｍａｍｏｎａｓｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ菌株中获得了ＳＤＳ－ＰＡＧＥ单一条带，相对分子质量为６２×１０３的间羟苯甲酸４－羟化酶比活提高２１倍，产率为３０％此酶为ＦＡＤ加单氧酶，催化间羟苯甲酸转变为３。

关键词：间羟苯甲酸4 羟化酶性质提纯

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超临界CO_2技术萃取蛋黄磷脂

生物化学与生物物理进展 1995年第4期22卷 366-370页

作者：赖炳森毛中兴沈晓京孙树秦解放军北京医学高等专科学校生物化学教研室

采用新型物理分离技术──超临界ＣＯ＿２萃取法，提取天然蛋黄粉中的磷脂．在４０ＭＰａ，先去除蛋黄粉中甘油三酯和胆固醇，再萃取磷脂．结果显示，磷脂纯度为９５％，Ｎ／Ｐ比值为１．００３，λ＿（ｍａｘ）＝２１４ｎｍ，薄层层析... 详细信息

采用新型物理分离技术──超临界ＣＯ＿２萃取法，提取天然蛋黄粉中的磷脂．在４０ＭＰａ，先去除蛋黄粉中甘油三酯和胆固醇，再萃取磷脂．结果显示，磷脂纯度为９５％，Ｎ／Ｐ比值为１．００３，λ＿（ｍａｘ）＝２１４ｎｍ，薄层层析显示磷脂着色点清晰，并去除了绝大部分甘油三酯和胆固醇。此法操作简单、产品质量高、安全和不污染环境，还可得到天然纯蛋黄油和蛋白。

关键词：磷脂蛋黄超临界CO2萃取

醛糖还原酶基因 5′调控区新的点突变对基因表达调控的影响(英文)

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生物化学与生物物理学报 2003年第10期35卷 904-908页

作者：谢平李清解刘美莲黄建军曾卫民陈淑华宋惠萍中南大学湘雅医学院生物化学教研室中南大学湘雅医学院生物化学教研室长沙410078

为了进一步研究醛糖还原酶 (AR)基因 5′调控区存在的可引起蛋白质表达发生改变的遗传变异及其对糖尿病并发症的影响 ,应用PCR SSCP对中国人 2型糖尿病患者的AR基因 5′调控区进行筛选 ,在两名糖尿病患者中发现一新点突变C- 1 6 7→A ,... 详细信息

为了进一步研究醛糖还原酶 (AR)基因 5′调控区存在的可引起蛋白质表达发生改变的遗传变异及其对糖尿病并发症的影响 ,应用PCR SSCP对中国人 2型糖尿病患者的AR基因 5′调控区进行筛选 ,在两名糖尿病患者中发现一新点突变C- 1 6 7→A ,使AR基因 5′调控区产生一个新的CCAAT盒。含点突变的两名患者尽管患病多年 ,长期处于高血糖状态 ,但无糖尿病并发症发生。而且他们的红细胞中AR活性都很低 ,处于无视网膜病变患者组的下限范围。将含野生型和点突变DNA片段分别克隆至氯霉素乙酰转移酶报告基因载体 (pCAT) ,检测CAT的活性确定野生型和突变型序列的转录活性。同时进行凝胶滞留试验以观测DNA与蛋白质的相互作用。结果显示 :含C- 1 6 7→A的启动子相对转录活性 (5 .7% )明显低于野生型(15 .7% )。凝胶滞留试验中 ,突变序列迁移速率较野生型慢。以上结果说明 ,AR基因 5′调控区C- 1 6 7→A点突变干扰了启动子区顺式作用元件与反式作用因子的结合 ,导致AR基因转录活性降低 ,使患者组织中AR活性下降 ,从而阻止或减缓 2型糖尿病视网膜病变发生发展。

关键词：醛糖还原酶基因点突变糖尿病慢性并发症