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内蒙古阿拉善驼乳制品中乳酸菌分离鉴定及微生物多样性研究

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中国食品学报 2024年第6期24卷 392-401页

作者：苏茜孙洁杜萍赵洁于洁陈永福内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室、农业农村部奶制品加工重点实验室、内蒙古自治区乳品生物技术与工程重点实验室呼和浩特010018

内蒙古传统乳制品是乳酸菌的优质培养基,为保藏内蒙古阿拉善地区驼乳制品中的乳酸菌资源,并研究其中微生物多样性,本研究分别采用纯培养方法与宏基因组测序技术进行分析。宏基因组分析表明:阿拉善地区鲜驼乳微生物多样性明显高于酸驼乳... 详细信息

内蒙古传统乳制品是乳酸菌的优质培养基,为保藏内蒙古阿拉善地区驼乳制品中的乳酸菌资源,并研究其中微生物多样性,本研究分别采用纯培养方法与宏基因组测序技术进行分析。宏基因组分析表明:阿拉善地区鲜驼乳微生物多样性明显高于酸驼乳,18份样品中共鉴定到157个种。鲜驼乳的优势菌种为乳酸乳球菌(13.22%)和桂林不动杆菌(10.65%);酸驼乳的优势菌种为瑞士乳杆菌(72.66%)、马乳酒样乳杆菌(8.32%)和乳酸乳球菌(4.28%)。纯培养进一步从鲜驼乳和酸驼乳中分离到121株乳酸菌,鉴定为4个属的14个种,其中鲜驼乳的优势菌株为乳酸乳球菌(62.00%),酸驼乳的优势菌株为瑞士乳杆菌(40.00%)、马乳酒样乳杆菌(19.00%),与宏基因组测序结果一致。宏基因组测序联合纯培养法可有效实现驼乳样品微生物多样性分析与乳酸菌资源挖掘,为驼乳的工业化生产与乳酸菌资源利用提供理论依据。

关键词：驼乳乳酸菌微生物多样性宏基因组

基于透明质酸的刺激响应纳米给药系统的研究进展

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化学通报 2024年第3期87卷 271-281,309页

作者：于根浦许洋石健贺佳伟乔明慧黄宝慧美如瓦提·马拉孜支德福大连民族大学生物技术与资源利用教育部重点实验室大连116600

透明质酸(HA)是一种天然多糖,具有良好的生物相容性和生物降解性,利用HA构建的纳米载体自身就具有肿瘤靶向功能,可以作为抗癌药物载体将药物靶向传递到肿瘤细胞内从而实现精准到达病患处。近年来HA在肿瘤靶向给药系统中的应用越来越受... 详细信息

透明质酸(HA)是一种天然多糖,具有良好的生物相容性和生物降解性,利用HA构建的纳米载体自身就具有肿瘤靶向功能,可以作为抗癌药物载体将药物靶向传递到肿瘤细胞内从而实现精准到达病患处。近年来HA在肿瘤靶向给药系统中的应用越来越受到研究者的关注,已成为了靶向治疗肿瘤的一大研究热点。基于HA的基本特性和肿瘤靶向的生理学基础,在不同的刺激响应下,HA型纳米给药系统能将药物集中释放于肿瘤的微环境内,更好地杀死肿瘤细胞,同时避免其他正常组织受到药物的损害。本文主要综述了HA型纳米药物输送系统在各种刺激响应下释放药物的最新研究进展。

关键词：透明质酸药物载体靶向治疗

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短命植物二裂婆婆纳的生长、生殖和资源配置

生态学杂志 2024年第5期43卷 1249-1254页

作者：严佳玥张博魏岩新疆农业大学草业学院/新疆草地资源与生态重点实验室/西部干旱荒漠区草地资源与生态教育部重点实验室乌鲁木齐830052

短命植物是温带荒漠的重要植物类群,对其生长、生殖和资源配置的研究有助于深入了解短命植物的生存策略。本研究以分布于准噶尔荒漠的1年生短命植物二裂婆婆纳(Veronica biloba L.)为对象,对其物候特征、生长动态、种子输出进行研究。... 详细信息

短命植物是温带荒漠的重要植物类群,对其生长、生殖和资源配置的研究有助于深入了解短命植物的生存策略。本研究以分布于准噶尔荒漠的1年生短命植物二裂婆婆纳(Veronica biloba L.)为对象,对其物候特征、生长动态、种子输出进行研究。结果表明:(1)二裂婆婆纳3月19日出苗,在幼苗四叶期(32 d)进入生殖生长,发育节律快,生活周期短,仅62 d。(2)子叶于盛果期枯黄脱落,生存时间49 d;根长在苗期生长较快,进入生殖期停止伸长,根系浅;随着植物由营养生长进入生殖生长,地上生物量呈现快速增加的趋势,地下生物量增加缓慢;根冠比由苗期的3.1下降为果熟期的0.091。(3)同一种群植物体生物量大小变化幅度大(0.0126~0.2269 g),变异系数为0.8;繁殖器官与营养器官生物量、地下生物量与总生物量之间为幂函数异速生长关系;随着植株总生物量的增加,根冠比呈线性降低,种子生物量呈线性增加,但繁殖分配比例差异不显著,维持在相对稳定水平(30.7%)。二裂婆婆纳的资源配置策略使不同大小个体的植株都能保持稳定比例的种子输出,对维持种群的更新与繁衍具有重要的生态意义。

关键词：物候生长动态繁殖输出繁殖分配

钙结合蛋白S100A4对BCG感染THP-1细胞自噬的调控作用

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畜牧兽医学报 2024年第1期55卷 311-322页

作者：刘悦阳李梦媛聂雪伊马亚博侯雨欣马伯利杨易徐金瑞宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室银川750021 宁夏医科大学回医药现代化教育部重点实验室银川750010

本研究旨在探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1后,钙结合蛋白S100A4对细胞自噬的调控作用。以感染复数为10∶1的BCG感染THP-1细胞不同时间,用Western blot检测S100A4和LC3Ⅱ的表达... 详细信息

本研究旨在探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1后,钙结合蛋白S100A4对细胞自噬的调控作用。以感染复数为10∶1的BCG感染THP-1细胞不同时间,用Western blot检测S100A4和LC3Ⅱ的表达,以确定最佳感染时间,并采用透射电镜观察自噬体数量变化。在BCG单独感染或与S100A4小干扰RNA共处理THP-1细胞12 h后,采用qRT-PCR检测S100A4及自噬相关因子--微管相关蛋白轻链3II (microtubule-associated protein light chain 3Ⅱ, LC3Ⅱ)、自噬相关蛋白7(autophagy-related gene 7, Atg7)、Beclin-1在mRNA水平上的表达,采用Western blot检测S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1在蛋白水平的表达。利用mRFP-GFP-LC3检测自噬流,激光共聚焦显微镜观察细胞中mRFP-LC3和mRFP-GFP-LC3点状聚集。结果显示:在BCG感染THP-1细胞不同时间后,S100A4和LC3Ⅱ在蛋白表达水平随感染时间的延长先上升后下降,在12 h时表达最高(P<0.001),且自噬体数量明显增多。在mRNA水平上,与siNC组相比,siNC+BCG感染组S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1的mRNA表达水平显著上调(P<0.05),当BCG和siS100A4共处理后,S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1在mRNA水平的表达显著(P<0.05)或极显著(P<0.01,P<0.001)下调;在蛋白水平上,与未感染组相比,S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1的蛋白表达量显著增多(P<0.05),BCG和siS100A4共处理后,S100A4、LC3Ⅱ、Atg7、Beclin-1的蛋白表达量均极显著减少(P<0.001);与未感染组相比,BCG组自噬体的数量极显著增多(P<0.01),siS100A4+BCG组与siNC+BCG组相比,自噬体的数量显著减少(P<0.05)。S100A4对BCG感染巨噬细胞诱导的自噬具有调控作用,S100A4能够促进BCG诱导的THP-1细胞自噬。

关键词：结核分枝杆菌细胞自噬 S100A4 THP-1细胞

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养殖海湾淤泥质海岸沉积物微塑料污染特征

环境科学 2024年第5期45卷 3078-3087页

作者：宋可心贺金成李昌文解思琦刘宝堃黄伟冯志华江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室江苏海洋大学江苏省海洋生物产业技术联合创新中心江苏海洋大学自然资源部滨海盐沼湿地生态与资源重点实验室自然资源部第二海洋研究所海洋生态系统与生物地球化学重点实验室

微塑料污染是当前环境领域广泛关注的前沿问题,海洋环境介质微塑料污染广为报道,但深层沉积物中微塑料污染特征如何却鲜见报道.基于此,在典型养殖海域海州湾附近淤泥质海岸设置3个采样点,分析沉积物柱状样中微塑料污染特征.结果表明,该... 详细信息

微塑料污染是当前环境领域广泛关注的前沿问题,海洋环境介质微塑料污染广为报道,但深层沉积物中微塑料污染特征如何却鲜见报道.基于此,在典型养殖海域海州湾附近淤泥质海岸设置3个采样点,分析沉积物柱状样中微塑料污染特征.结果表明,该研究区域沉积物中微塑料丰度为(0.12±0.07)n·g^(-1),处于中等污染水平.沉积物柱状样中微塑料总和是表层5 cm沉积物中微塑料丰度的3.43~6.00倍.沉积物柱状样中微塑料丰度展现区域差异性,不同深度的沉积物中微塑料丰度不存在显著性差异,但随深度增加呈指数减少.沉积物含水率、深度和微塑料之间的关系表明,沉积物中微塑料丰度与沉积物物理性质有关.透明和黑色微塑料在各站位占比均最高,纤维是沉积物中最常见的微塑料形态,粒径小的微塑料占主体,微塑料材质的密度均不妨碍其出现在沉积物中.微塑料污染特征在不同深度沉积物中变化较大.

关键词：微塑料(MPs) 沉积物柱状样淤泥质海岸海州湾养殖海湾

基于磷脂酶水解圈定向筛选高效聚对苯二甲酸乙二醇酯降解酶

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微生物学报 2024年第3期64卷 745-754页

作者：徐翰蔡忆梅陈晓倩黄青松吴敬陈晟颜正飞江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 江南大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室江苏无锡214122 江南大学教育部食品安全国际合作联合实验室江苏无锡214122

【目的】目前自然环境中聚对苯二甲酸乙二醇酯(polyethylene terephthalate,PET)废弃物的积累严重威胁生态健康,因此PET的降解问题已成为全球性的热点问题。生物酶法降解PET技术以其绿色环保而备受关注,但天然PET降解酶的催化活性普遍偏... 详细信息

【目的】目前自然环境中聚对苯二甲酸乙二醇酯(polyethylene terephthalate,PET)废弃物的积累严重威胁生态健康,因此PET的降解问题已成为全球性的热点问题。生物酶法降解PET技术以其绿色环保而备受关注,但天然PET降解酶的催化活性普遍偏低,亟待进一步定向改造。现阶段定向进化为快速提高PET降解酶催化性能提供了可能,其中筛选方法是成功获得高性能突变体的关键所在。本研究旨在提出一种新型高效灵敏的筛选方法并应用于褐色喜热裂孢菌(Thermobifida fusca)来源角质酶Tfu-0883的定向改造,以期快速获得PET降解活性提高的突变体。【方法】基于易错PCR构建突变体文库,涂布于卵黄磷脂平板,以水解圈的大小作为筛选指标获得PET降解活性提高的突变体;对突变体进行酶学定性并筛选出潜在的分子改造位点,最终获得高性能突变体。【结果】从卵黄磷脂平板中挑取水解圈直径最大的单菌落,即突变体H10(N2D/D94H/A149E),其PET降解能力是野生型的1.5倍,最适温度与pH分别为60℃和8.0。突变体H10中第2位和第149位氨基酸残基远离底物结合凹槽,其突变会导致酶蛋白稳定性下降;第94位氨基酸残基则位于底物结合凹槽附近,由负电荷氨基酸Asp突变为正电荷氨基酸His,有利于吸附在带负电荷的PET表面,是突变体H10降解能力提升的关键因素;随后将野生型的第94位氨基酸残基Asp分别突变为His及同为正电荷且空间位阻更小的Lys和Arg,突变体D94H、D94K和D94R对PET降解能力均有提升,其中,突变体D94K降解PET能力是野生型的3.6倍。【结论】本研究基于磷脂酶水解圈构建了一种新的PET降解酶定向筛选方法,以此获得了降解活性提高的突变体,并证实角质酶Tfu-0883第94位氨基酸残基位点具有提升其PET降解活性的潜在能力。

关键词：定向进化 PET降解水解圈热稳定性分子改造

Arthrobacter sp. EpRS66β-呋喃果糖苷酶重组表达及酶促合成低聚乳果糖

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微生物学通报 2024年

作者：霍润甜夏伟刘展志吴敬江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江南大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室

【背景】低聚乳果糖是一种新型的功能性低聚糖，具有改善肠道菌群及提高免疫力等功能，被应用于食品、饲料等行业，市场需求量逐年增加。β-呋喃果糖苷酶对乳糖的受体特异性较高，工业上常以其制备低聚乳果糖，但现有酶种转化率较低，... 详细信息

【背景】低聚乳果糖是一种新型的功能性低聚糖，具有改善肠道菌群及提高免疫力等功能，被应用于食品、饲料等行业，市场需求量逐年增加。β-呋喃果糖苷酶对乳糖的受体特异性较高，工业上常以其制备低聚乳果糖，但现有酶种转化率较低，生产成本较高。【目的】挖掘新型β-呋喃果糖苷酶基因，探究其酶学性质及制备低聚乳果糖能力。【方法】克隆Arthrobacter sp. EpRS66的β-呋喃果糖苷酶基因，将其在大肠杆菌中重组表达，研究重组酶的酶学性质，优化其催化制备低聚乳果糖的反应条件。【结果】重组酶的最适温度为40 ℃，最适pH值为6.0，在pH 5.0-8.0范围内稳定性良好，在40 ℃下的半衰期为20 min。利用重组酶制备低聚乳果糖，以15%蔗糖和15%乳糖为底物，在40 ℃、pH 6.0，加酶量25 μg/mL的条件下反应2 h，转化率最高达到32.2%；而在30%蔗糖和30%乳糖的高底物浓度下，转化率也可达到30.8%。【结论】本研究提供了一种能有效催化低聚乳果糖形成的新型β-呋喃果糖苷酶，为工业化生产低聚乳果糖提供新的选择。

关键词：低聚乳果糖 β-呋喃果糖苷酶酶学性质酶转化

内蒙古地区自然发酵乳中乳酸菌的分离鉴定及优良菌株筛选

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食品与发酵工业 2024年

作者：雷雪艳赵丽霞李瑜刘文俊内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室农业农村部奶制品加工重点实验室内蒙古自治区乳品生物技术与工程重点实验室

鲜乳及其发酵乳是牧民日常饮食中主要的营养物来源之一，其中含有丰富的乳酸菌资源。为了从纯培养角度了解不同乳源中乳酸菌的菌群结构并获取其中宝贵的乳酸菌菌种，该研究采用纯培养技术从内蒙古牧区21份样品中分离得到411株乳酸菌，包... 详细信息

鲜乳及其发酵乳是牧民日常饮食中主要的营养物来源之一，其中含有丰富的乳酸菌资源。为了从纯培养角度了解不同乳源中乳酸菌的菌群结构并获取其中宝贵的乳酸菌菌种，该研究采用纯培养技术从内蒙古牧区21份样品中分离得到411株乳酸菌，包括10个属，21个种。其中乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）分离株的数量最多，其次为瑞士乳杆菌（Lactobacillus helveticus）和马乳酒样乳杆菌（Lactobacillus kefiranofaciens）。优势菌群分析发现不同乳源的菌群结构差异较大，酸马乳的菌群多样性最丰富，马乳酒样乳杆菌是其优势菌种之一。根据酸马乳低pH值、低酒精含量的特点，从93株马乳酒样乳杆菌中筛选出4株在低pH值（pH 3.0）和6%（体积分数）乙醇环境下耐受性较好的菌株，然后进一步研究其人工胃肠液耐受性、乙醇耐受性和对3种食品中常见致病菌的抑菌能力。最终筛选出2株马乳酒样乳杆菌分别为：IMAU12331与IMAU12208，具有较好的耐受性和抑菌特性，可作为潜在益生菌开发利用，具有较高的潜在应用价值。

关键词：乳酸菌分离鉴定菌株筛选耐受性抑菌特性

信号芋螺内生真菌Talaromyces ***006次级代谢产物研究

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热带海洋学报 2024年第4期43卷 181-188页

作者：林应婷孙颖胡江南董帅热带生物资源教育部重点实验室药学院海南大学海南海口570228

文章旨在对信号芋螺内生真菌Talaromyces ***006的次级代谢产物进行结构和活性研究。运用多种分离材料和技术,如正反相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶(sephadex LH-20)、聚苯乙烯反相树脂填料(MCI GEL CHP-20/P120)、半制备高效液相等进行分离... 详细信息

文章旨在对信号芋螺内生真菌Talaromyces ***006的次级代谢产物进行结构和活性研究。运用多种分离材料和技术,如正反相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶(sephadex LH-20)、聚苯乙烯反相树脂填料(MCI GEL CHP-20/P120)、半制备高效液相等进行分离纯化,通过核磁共振、质谱等现代波谱技术进行结构鉴定。采用CCK8 (cell counting kit)法研究化合物1—14对脑胶质瘤细胞U87和肺癌细胞A549的抑制作用。从信号芋螺内生真菌Talaromyces ***006的次级代谢产物中分离获得14个化合物,分别是ergosteryl stearate (1)、麦角甾醇(2)、β-谷甾醇(3)、2-hydroxyemodin (4)、(+)-rugulosin (5)、1,1′,3,3′,5,5′-hexahydroxy-7,7-dimethyl[2,2′-bianthracene]-9,9′,10,10′-tetrone (6)、rel-(6R,7R)-5,6,7,8-tetrahydro-6-hydroxy-7-methyl-8-oxo-3-propyl-1H-2-benzopyran (7)、rel-(6R,7R)-5,6,7,8-tetrahydro-7-hydroxy-7-methyl-8-oxo-3-propyl-1H-2-benzopyran (8)、scorpinone (9)、orsellinic acid (10)、6-methyl-1,2,4-benzenetriol (11)、2-methyl-5-isopropyl-phenol (12)、3-methoxy-5-methyl-phenol (13)、5-methyl-benzene-1,3-diol (14)。化合物1—4和7—14为首次从Talaromyces sp.中分离获得。化合物8和12对脑胶质瘤细胞U87的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为21.07μmol·L^(-1)和15.74μmol·L^(-1),同时对肺癌细胞A549的IC50分别为20.88μmol·L^(-1)和22.93μmol·L^(-1)。

关键词：信号芋螺内生菌篮状菌属次级代谢产物生物活性

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