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基于多元统计分析研究地菍氯仿提取物抗炎作用的谱效关系

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中药材 2024年 1454-1460页

作者：方成维麻秀萍刘静刘林莉班积变杨菁贵州中医药大学药学院国家苗药工程技术研究中心/贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心贵州中医药大学茶+大健康食品开发研究中心

目的:研究地菍氯仿提取物HPLC指纹图谱与抗炎活性之间的关系,初步确定地菍抗炎的物质基础。方法:利用UHPLC-QTOF-MS技术分析地菍氯仿提取物化学成分;采用HPLC法建立20批地菍氯仿提取物指纹图谱;以LPS诱导的RAW264.7细胞上清液中NO、TNF... 详细信息

目的:研究地菍氯仿提取物HPLC指纹图谱与抗炎活性之间的关系,初步确定地菍抗炎的物质基础。方法:利用UHPLC-QTOF-MS技术分析地菍氯仿提取物化学成分;采用HPLC法建立20批地菍氯仿提取物指纹图谱;以LPS诱导的RAW264.7细胞上清液中NO、TNF-α抑制率为指标,运用灰色关联度及偏最小二乘回归分析(PLSR)构建谱效关系。结果:UHPLC-QTOF-MS鉴定出40个成分;HPLC指纹图谱共确定21个共有峰,指认出没食子酸、原儿茶酸、阿魏酸、牡荆素、异牡荆素、槲皮素及山柰素7个成分;谱效研究结果表明没食子酸、阿魏酸、槲皮素及17、19、21号色谱峰可能是地菍发挥抗炎活性的重要物质基础。结论:该研究初步阐明了地菍抗炎的物质基础,可为其质量标准提升及临床运用提供参考。

关键词：地菍氯仿提取物指纹图谱抗炎活性谱效关系

百合地黄汤基准样品HPLC特征图谱建立及其指标成分含量测定

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中成药 2024年第4期46卷 1279-1283页

作者：但济修李淞明詹常森上海和黄药业有限公司上海中药固体制剂创新工程技术研究中心上海201401

目的建立百合地黄汤基准样品HPLC特征图谱,并测定梓醇、地黄苷D、王百合苷B的含量。方法分析采用Waters XSelect■HSS T3色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长194 nm(含... 详细信息

目的建立百合地黄汤基准样品HPLC特征图谱,并测定梓醇、地黄苷D、王百合苷B的含量。方法分析采用Waters XSelect■HSS T3色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长194 nm(含量测定时再增加312 nm)。结果 16批基准样品特征图谱中有8个特征峰,相似度均大于0.984。3种指标成分在各自范围内线性关系良好(r>0.999 5),平均加样回收率88.8%~101.1%,RSD 2.09%~3.99%。结论 HPLC特征图谱结合指标成分含量测定可为百合地黄汤后续相关制剂开发及质量控制提供参考。

关键词：百合地黄汤基准样品 HPLC特征图谱梓醇地黄苷D 王百合苷B 含量测定

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参茸片(薄膜衣片)质量标准提升研究

中成药 2024年第5期46卷 1627-1630页

作者：但济修陆秋涛詹常森上海和黄药业有限公司上海中药固体制剂创新工程技术研究中心上海201401

目的提升参茸片(薄膜衣片)质量标准。方法采用显微鉴别法对人参和鹿茸进行定性鉴别,HPLC法同时测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量。结果参茸片(薄膜衣片)粉末具有与人参和鹿茸相对应的显微特征。3种人参皂苷分别在25.51~8... 详细信息

目的提升参茸片(薄膜衣片)质量标准。方法采用显微鉴别法对人参和鹿茸进行定性鉴别,HPLC法同时测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量。结果参茸片(薄膜衣片)粉末具有与人参和鹿茸相对应的显微特征。3种人参皂苷分别在25.51~816.19μg/mL(r=0.9999)、23.01~736.34μg/mL(r=0.9999)、23.75~760.03μg/mL(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为101.3%、101.7%、104.0%,RSD分别为1.13%、1.17%、2.85%。结论该方法科学准确、重复性好、稳定可靠,可有效控制参茸片(薄膜衣片)质量。

关键词：参茸片(薄膜衣片) 质量标准人参鹿茸显微鉴别人参皂苷 HPLC

老鼠簕生物碱A对胰腺癌L3.6细胞增殖和凋亡的影响

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中国中药杂志 2024年第9期49卷 2355-2363页

作者：梁嘉敏杨思淇胡文浩李旭艳王锂韫粤西特色生物医药工程技术研究中心广东湛江524048 广东省粤西蓝碳资源保护与利用工程技术研究中心广东湛江524048 岭南师范学院红树林研究院广东湛江524048 岭南师范学院生命科学与技术学院广东湛江524048 广东省粤西海鲜资源可持续利用工程技术研究中心广东湛江524048

探讨老鼠簕生物碱A[4-hydroxy-2(3H)-benzoxazolone,HBOA]对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。0~1.0 mmol·L^(-1) HBOA处理体外培养的胰腺癌L3.6细胞,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法测定细胞活力并计算半数抑制浓度IC50,筛选药物作用浓度和时间。利用倒置显微镜、吖啶橙(acridine orange,AO)染色观察细胞形态,活细胞计数、细胞集落形成实验检测细胞增殖、自我更新能力,流式细胞术检测细胞周期进程和细胞凋亡比率,扫描电镜观察细胞凋亡形态,qPCR检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、细胞周期蛋白A(cyclinA1、cyclinA2)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin dependent kinase 2,CDK2)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A(cyclin dependent kinase inhibitor 1A,P21)mRNA表达,流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)、脂质过氧化物、线粒体膜电位水平,Western blot检测蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路活性。与对照组相比,HBOA处理组细胞活力显著下降,筛选出0.4、0.6 mmol·L^(-1) HBOA干预48 h为后续实验剂量与时间;与对照组相比,0.4、0.6 mmol·L^(-1) HBOA处理组细胞增殖和集落形成能力被抑制,PCNA、cyclinA1、cyclinA2、CDK2 mRNA表达水平显著降低,P21 mRNA表达水平显著升高,细胞周期阻滞于S期,细胞凋亡率显著增加、出现凋亡小体,ROS水平显著升高,脂质过氧化物水平显著升高,线粒体膜电位降低,其中0.6 mmol·L^(-1)处理组显著降低,p-Akt、p-mTOR蛋白水平显著降低。该研究表明HBOA抑制胰腺癌L3.6细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与ROS增加、Akt/mTOR通路活性抑制有关。

关键词：老鼠簕生物碱A 胰腺癌细胞细胞增殖细胞凋亡

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杜仲补天素丸对肾阴虚小鼠的影响

中成药 2024年第4期46卷 1347-1351页

作者：曹国琼舒淇琳王梅葛秋平吴金华吴劲勇徐剑张永萍贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025 国家苗药工程技术研究中心贵州贵阳550025 贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心贵州贵阳550025 贵阳德昌祥药业有限公司贵州贵阳550002

目的研究杜仲补天素丸对肾阴虚小鼠的影响。方法采用灌胃复方利血平片和甲状腺片的方法制备肾阴虚模型,测定小鼠体温,痛阈值,力竭游泳时间,血清甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、环磷酸鸟苷(cGMP)、环磷酸腺苷(cAMP)、促肾上腺皮质激素(... 详细信息

目的研究杜仲补天素丸对肾阴虚小鼠的影响。方法采用灌胃复方利血平片和甲状腺片的方法制备肾阴虚模型,测定小鼠体温,痛阈值,力竭游泳时间,血清甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、环磷酸鸟苷(cGMP)、环磷酸腺苷(cAMP)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质素释放激素(CRH)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素6(IL-6)、还原性谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,肝组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg2+-ATP酶活性。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、胸腺指数、脾脏指数、痛阈值、力竭游泳时间、血清cGMP、GSH水平和LDH、SOD活性降低(P<0.05,P<0.01),血清T3、T4、cAMP、ACTH、CRH、IFN-γ、IL-6、MDA水平升高(P<0.05,P<0.01),肝组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,杜仲补天素丸组小鼠胸腺指数、脾脏指数、痛阈值、力竭游泳时间增加(P<0.05,P<0.01),血清cGMP、GSH水平和LDH、SOD活性升高(P<0.05,P<0.01),血清T3、T4、cAMP、ACTH、CRH、IFN-γ、IL-6、MDA水平(P<0.05,P<0.01)及肝组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性降低(P<0.05,P<0.01)。结论杜仲补天素丸能够改善肾阴虚小鼠的基础代谢起到抗疲劳作用,调节甲亢型肾阴虚小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴和下丘脑-垂体-甲状腺轴功能,改善免疫功能。

关键词：杜仲补天素丸肾阴虚能量代谢抗疲劳内分泌

金岗清瘟颗粒化学成分在制备过程中的传递研究

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中药材 2024年 685-691页

作者：朱素梅黎芳梁健钦莫钧茹李泊村奉建芳苏军峰广西优势中成药与民族药开发工程技术研究中心广西中医药大学广西恒拓医药集团有限公司广西高校中药制剂共性技术研发重点实验室

目的:研究金岗清瘟颗粒化学成分在生产过程中的稳定性、传递规律。方法:采用高效液相色谱技术建立金岗清瘟颗粒的特征图谱,分析色谱峰的变化。通过高效液相色谱法检测清膏、喷干粉、颗粒中黄芩苷、连翘苷的含量并计算转移率,验证关键成... 详细信息

目的:研究金岗清瘟颗粒化学成分在生产过程中的稳定性、传递规律。方法:采用高效液相色谱技术建立金岗清瘟颗粒的特征图谱,分析色谱峰的变化。通过高效液相色谱法检测清膏、喷干粉、颗粒中黄芩苷、连翘苷的含量并计算转移率,验证关键成分的变化规律。结果:清膏、喷干粉、颗粒的高效液相图谱相似度>0.980,通过对照品指认了15个化学成分,并建立颗粒的高效液相色谱特征图谱。咖啡酸、连翘酯苷A、黄芩素、黄杞苷等21个峰的含量在“清膏→喷干粉→颗粒”过程显著升高(P研究初步明确金岗清瘟颗粒不同化学成分从中间体转移至颗粒的规律,为本品中间体和制剂的定性、定量提供参考。

关键词：金岗清瘟颗粒特征图谱成分传递黄芩苷连翘苷

勒哲多糖粗提物体外抑制H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞氧化损伤的作用及机制研究

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中国新药杂志 2024年第8期33卷 810-817页

作者：樊慧芳李国峰陈海芳张武岗江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330004 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004

目的:基于体外活性氧(reactive oxygen species,ROS)清除体系和H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞氧化损伤模型探讨勒哲多糖粗提物(LZC)的体外抗氧化作用和机制。方法:测定LZC对羟基自由基、超氧阴离子、DPPH自由基、亚硝酸根离子的清除作用;试... 详细信息

目的:基于体外活性氧(reactive oxygen species,ROS)清除体系和H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞氧化损伤模型探讨勒哲多糖粗提物(LZC)的体外抗氧化作用和机制。方法:测定LZC对羟基自由基、超氧阴离子、DPPH自由基、亚硝酸根离子的清除作用;试剂盒检测H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞氧化损伤模型中细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(2’,7’-dichlorofluorescein diacetate,DCFH2-DA)荧光探针检测细胞内ROS水平和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,Western blot检测核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)、肿瘤蛋白53(p53)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的蛋白表达。结果:LZC表现出强ROS清除活性,显著提升H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞氧化损伤模型中细胞的GSH-Px活性,抑制MDA水平、ROS释放和细胞凋亡。Western blot结果表明LZC能上调Nrf2和HO-1的蛋白表达,下调p53,Bax和Caspase-3表达。结论:LZC具有较强的体外抗氧化作用,其作用与激活Nrf2/HO-1信号通路进而抑制细胞凋亡有关。

关键词：勒哲多糖粗提物抗氧化核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1信号通路细胞凋亡

基于临床代谢组学与蛋白质组学研究粉葛治疗轻度血脂异常的作用机制

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2818-2827页

作者：易建云朱卫丰管咏梅周旭陈晓凡杨世林冯育林欧阳辉江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心江西南昌330006 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室江西南昌330004 江西中医药大学循证医学研究中心江西南昌330004

研究粉葛临床上治疗轻度血脂异常潜在的代谢途径和作用靶点。采用UPLC-Q-TOF-MS和EASY-nLC-timsTOF-Pro2技术对轻度血脂异常患者在基线和服药12周后的血浆样品展开代谢组学和蛋白质组学研究。通过多元统计分析比较组间差异,并对轻度血... 详细信息

研究粉葛临床上治疗轻度血脂异常潜在的代谢途径和作用靶点。采用UPLC-Q-TOF-MS和EASY-nLC-timsTOF-Pro2技术对轻度血脂异常患者在基线和服药12周后的血浆样品展开代谢组学和蛋白质组学研究。通过多元统计分析比较组间差异,并对轻度血脂异常密切相关的代谢物和蛋白与临床血脂指标分别进行相关性分析,结合基因本体(Gene Ontology,GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析结果,绘制粉葛治疗轻度血脂异常可能的作用途径和靶点。结果显示,粉葛治疗后患者血浆中共有56个差异代谢物和78个差异蛋白产生回调效应,包括脂质和糖代谢相关的蛋白或代谢物(ApoB-100、9,10-DHOME、GAPDH、PGK1、PGAM1、ENO1等)、炎症与氧化应激相关的蛋白或代谢物(氧化磷脂、PLA2G7、LTA4H等)。结果表明,粉葛治疗轻度血脂异常的作用机制可能与下调ApoB-100的过表达、激活PPARα/γ、促进脂肪和甘油的分解、缓解LTB4与氧化磷脂介导的氧化应激密切相关。

关键词：粉葛轻度血脂异常代谢组学蛋白质组学脂质代谢氧化应激

基于基准关联度与信息熵权法优选桂枝配方颗粒中挥发性成分的β-环糊精包合工艺

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南京中医药大学学报 2024年 474-480页

作者：陈雅茜李卓远陶琳陈娜娜柯益鑫沈雯谢薇张雯李俊松南京中医药大学药学院江苏省中药高效给药系统工程技术研究中心

目的结合基准关联度与信息熵权法，采用正交试验对β-环糊精（β-Cyclodextrin,β-CD）与桂枝配方颗粒中挥发性成分的包合工艺进行优化。方法在单因素考察的基础上，选择β-CD与桂枝芳香水的投料比、包合温度、包合时间为主要影响因... 详细信息

目的结合基准关联度与信息熵权法，采用正交试验对β-环糊精（β-Cyclodextrin,β-CD）与桂枝配方颗粒中挥发性成分的包合工艺进行优化。方法在单因素考察的基础上，选择β-CD与桂枝芳香水的投料比、包合温度、包合时间为主要影响因素，以包合物中桂皮醛的包合率、载药量及基准关联度为评价指标，采用信息熵权法计算各评价指标的权重系数，进行综合评价和优化正交试验包合工艺。通过薄层色谱法、紫外可见吸收光谱、傅里叶红外光谱、X射线衍射等方法对包合物进行表征。结果优选的最佳包合工艺为β-CD与芳香水的投料比3∶100(g·mL-1)，包合温度50℃，包合时间1 h。经验证，桂皮醛包合率为80.48%，载药量为8.63%，基准关联度为0.91。薄层、紫外、红外等表征实验表明芳香水中挥发性成分成功进入β-CD空腔，包合物制备成功。结论优选的包合工艺稳定可行，可为桂枝配方颗粒的制剂工艺研究提供参考。

关键词：桂枝配方颗粒芳香水 β-环糊精信息熵权法基准关联度正交试验包合工艺