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肠道菌群在急性肾损伤中作用的研究进展

中南大学学报（医学版） 2024年第3期49卷 385-391页

作者：陈天笑常畅侯豹邱丽颖孙海建朱雪雪江南大学无锡医学院基础医学系江苏无锡214122

急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是一个全球性的公共卫生问题,其发病率和病死率高、医疗费用昂贵且治疗手段有限。AKI可进一步转变为慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD),最终进展为终末期肾病(endstage renal disease,ESRD)... 详细信息

急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是一个全球性的公共卫生问题,其发病率和病死率高、医疗费用昂贵且治疗手段有限。AKI可进一步转变为慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD),最终进展为终末期肾病(endstage renal disease,ESRD)。既往研究表明,创伤、药物的不良反应、手术等与AKI密切相关。随着进一步的深入探索,肠道菌群在AKI中的作用逐渐被揭示。AKI发生后,肠道菌群组成改变,肠道屏障破坏引发肠道免疫以及肠道细菌易位。同时,肠道菌群的代谢产物又可以加剧AKI的进展。因此,阐述肠道菌群参与AKI发生和发展的具体机制,有助于从肠道微生物角度为AKI的防治提供新思路。

关键词：急性肾损伤肠道菌群炎症毒素短链脂肪酸益生菌后生元中药

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单纯高脂饮食诱导2型糖尿病小鼠模型的构建及病理改变的评价

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生理学报 2024年第3期76卷 385-393页

作者：余晨歌黄晶席艳赖蒽茵陈苏徐楠河南大学基础医学院浙江大学基础医学院

本文旨在研究单纯高脂饮食(high fat diet, HFD)诱导2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)小鼠模型的成模时间以及HFD对糖脂代谢相关器官的病理和功能影响。给予C57BL/6小鼠正常饮食(NC组)或HFD (HFD组) 0、4、8、12、16和20周，... 详细信息

本文旨在研究单纯高脂饮食(high fat diet, HFD)诱导2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)小鼠模型的成模时间以及HFD对糖脂代谢相关器官的病理和功能影响。给予C57BL/6小鼠正常饮食(NC组)或HFD (HFD组) 0、4、8、12、16和20周，通过检测体重、空腹血糖和葡萄糖耐量，评估T2DM建模成功的时间；通过胰岛素耐量、血脂、血管功能检测以及胰腺、肝脏HE染色评估糖脂代谢相关器官的功能和病理改变。结果显示，与NC组相比，HFD组在HFD 8周后体重开始显著升高；在HFD 16周时，HFD组出现空腹糖耐量受损；在HFD 20周时，HFD组小鼠达到糖尿病状态，出现葡萄糖耐量受损和胰岛素抵抗，胰岛体积缩小、胰岛发生空泡变性等病理改变，肝细胞出现大量脂滴，肝脏组织AMPK磷酸化水平显著升高，胸主动脉存在内皮依赖性舒张功能障碍；和NC组相比，HFD组小鼠尿蛋白水平显著增加。上述结果提示，单纯HFD诱导20周可成功建立T2DM小鼠模型，该模型的特征为胰岛素抵抗、脂肪肝、高脂血症、血管功能异常、肾功能损害以及胰岛和肝细胞的病理改变等，与T2DM患者相似，可作为理想的T2DM动物研究模型。

关键词： 2型糖尿病高脂饮食胰岛素抵抗脂肪肝

尿路致病性大肠埃希菌毒力因子TcpC在其免疫逃逸中的作用及致病机制研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第3期44卷 198-204页

作者：蒋委余范佳颖樊力铭王家栋江子妍管子瑜欧茜方佳琪浙大城市学院医学院临床医学系杭州310015 浙江大学医学院基础医学系杭州310058

目的探究尿路致病性大肠埃希菌(uropathogenicEscherichia coli,UPEC)毒力因子TcpC在其免疫逃逸中的作用,并初步了解其相关致病机制。方法从C57BL/6小鼠的尿道插管至膀胱,滴注分泌TcpC的UPEC CFT073野生株(CFT073wt)或tcpc基因敲除株(CF... 详细信息

目的探究尿路致病性大肠埃希菌(uropathogenicEscherichia coli,UPEC)毒力因子TcpC在其免疫逃逸中的作用,并初步了解其相关致病机制。方法从C57BL/6小鼠的尿道插管至膀胱,滴注分泌TcpC的UPEC CFT073野生株(CFT073wt)或tcpc基因敲除株(CFT073Δtcpc)悬液109菌落形成单位,构建肾盂肾炎小鼠模型。5 d后处死小鼠取肾脏,观察大体形态变化。HE染色观察肾脏组织病理变化,免疫组织化学法对肾组织中TcpC进行定位。采集感染后的小鼠尿液,十倍稀释法计数尿液中细菌载量,PCR检测小鼠肾脏组织和尿液细菌基因组DNA中的tcpc基因。实时荧光定量PCR检测CFT073wt菌株感染树突状细胞后胞内TcpC mRNA水平。Western blot和ELISA分别检测CFT073wt和CFT073Δtcpc菌株对树突状细胞NF-κB活化和促炎因子水平的影响,激光共聚焦显微镜观察UPEC菌株感染树突状细胞后的细菌活力。结果与CFT073Δtcpc组相比,CFT073wt组小鼠肾脏有明显脓肿产生,肾脏组织中有大量中性粒细胞浸润和TcpC。CFT073wt组小鼠尿液中的细菌载量显著高于CFT073Δtcpc组;PCR结果显示,肾脏组织和尿液中细菌均能扩增出tcpc基因。在CFT073wt菌株感染树突状细胞过程中,胞内TcpC的mRNA和蛋白质水平显著升高。CFT073wt抑制树突状细胞NF-κB信号通路p50的磷酸化水平和促炎因子的产生。TcpC有利于CFT073wt在树突状细胞内的存活。结论TcpC在CFT073wt感染及引发小鼠肾盂肾炎过程中表达水平显著升高,并通过抑制树突状细胞NF-κB信号通路的活化和促炎因子的产生有利于CFT073wt在树突状细胞内的存活,与UPEC致病及抗树突状细胞免疫密切相关。

关键词：免疫逃逸 TcpC 尿路致病性大肠埃希菌肾盂肾炎树突状细胞

茶多酚激活Nrf2/HO-1通路减轻阿司匹林诱导的GES-1细胞损伤的机制研究

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中国药学杂志 2024年第1期59卷 45-51页

作者：付凯王永辉贠洁郑栓孔永红驻马店市中心医院药学部河南驻马店463000 驻马店市中心医院肾脏内科河南驻马店463000 西安培华学院医学院基础医学系西安710000

目的探讨茶多酚(tea polyphenols,TP)对阿司匹林诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响及分子机制。方法采用阿司匹林(19.27 mmol·L^(-1))和不同浓度的茶多酚(50、100、200μmol·L^(-1))处理GES-1细胞24 h,将GES-1细胞随机分为对照... 详细信息

目的探讨茶多酚(tea polyphenols,TP)对阿司匹林诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响及分子机制。方法采用阿司匹林(19.27 mmol·L^(-1))和不同浓度的茶多酚(50、100、200μmol·L^(-1))处理GES-1细胞24 h,将GES-1细胞随机分为对照组、阿司匹林组(19.27 mmol·L^(-1))、阿司匹林19.27 mmol·L^(-1)+茶多酚50μmol·L^(-1)组、阿司匹林19.27 mmol·L^(-1)+茶多酚100μmol·L^(-1)组、阿司匹林19.27 mmol·L^(-1)+茶多酚200μmol·L^(-1)组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测GES-1细胞增殖水平,采用流式细胞术和TUNEL实验检测GES-1细胞凋亡水平。采用二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测GES-1细胞活性氧(ROS)水平。采用试剂盒检测GES-1细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平。采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测GES-1细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素单加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平。结果与对照组比较,阿司匹林组GES-1细胞凋亡率、凋亡指数、ROS、MDA水平、细胞核Nrf2/细胞质Nrf2比值、Bax、HO-1蛋白表达水平显著增加,细胞存活率、Bcl-2蛋白表达水平、SOD、CAT水平显著降低(P<0.05);与阿司匹林组比较,阿司匹林19.27 mmol·L^(-1)+茶多酚(50、100、200μmol·L^(-1))组GES-1细胞亡率、凋亡指数、ROS、MDA水平、Bax蛋白表达水平显著降低,细胞存活率、细胞核Nrf2/细胞质Nrf2比值、Bcl-2、HO-1蛋白表达水平、SOD、CAT水平显著增加(P<0.05)。结论茶多酚可减轻阿司匹林诱导的GES-1细胞损伤,其机制可能与茶多酚激活Nrf2/HO-1抗氧化通路、抑制线粒体通路介导的细胞凋亡有关。

关键词：茶多酚核因子E2相关因子2/血红素单加氧酶1通路阿司匹林 GES-1细胞氧化应激

过表达LncRNAMEG3通过促进铁死亡增强肝癌细胞对顺铂的化疗敏感性

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南方医科大学学报 2024年第1期44卷 17-24页

作者：朱权黄柏胜位磊艳罗奇志中南大学基础医学院免疫学系湖南长沙410008 中南大学基础医学院生理学系湖南长沙410008

目的探讨过表达LncRNAMEG3对肝癌细胞HepG2和LM3增殖、迁移和顺铂化疗敏感性的影响及机制。方法生物信息学在线网站分析MEG3在健康人群与肝细胞癌(HCC)患者的表达情况;将HepG2和LM3细胞各自分成2组,NC组:转染pcDNA3.1(+)空载体的细胞;ME... 详细信息

目的探讨过表达LncRNAMEG3对肝癌细胞HepG2和LM3增殖、迁移和顺铂化疗敏感性的影响及机制。方法生物信息学在线网站分析MEG3在健康人群与肝细胞癌(HCC)患者的表达情况;将HepG2和LM3细胞各自分成2组,NC组:转染pcDNA3.1(+)空载体的细胞;MEG3-OE组:转染pcDNA3.1(+)-MEG3质粒的细胞。另外在检测活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)实验中,将上述两组细胞分别各自给予顺铂(DDP)或铁死亡抑制剂Fer-1处理,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中MEG3的表达;CCK8和划痕实验检测肝癌细胞的增殖和迁移;另外采用CCK8实验检测DDP对肝癌细胞的抑制率;活性氧荧光探针(DCFH-DA)检测肝癌细胞中ROS的表达,MDA试剂盒检测肝癌细胞中MDA的浓度;Westernblotting实验检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和铁蛋白重链1(FTH1)的蛋白表达水平。结果MEG3在肝癌细胞中的表达显著低于LO2细胞,与生物信息学分析结果一致(P<0.05);与阴性对照组相比,MEG3-OE组肝癌细胞增殖迁移能力降低(P<0.05)、DDP的抑制率增高(P<0.05)、ROS水平升高、MDA表达水平升高(P<0.05);MEG3-OE组肝癌细胞GPX4和FTH1蛋白表达均显著降低。结论肝癌细胞中LncRNA-MEG3表达降低,过表达MEG3可抑制肝癌细胞增殖与迁移,增强DDP的化疗敏感性,其机制与促进肝癌细胞铁死亡有关。

关键词：肝细胞癌 LncRNAMEG3 顺铂化疗敏感性铁死亡

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胡椒碱逆转氟西汀所致骨破坏作用的实验研究

中国药理学通报 2024年第5期40卷 920-928页

作者：潘凤好王俊如李瑜张光伟李晨睿西北工业大学生命学院陕西西安710072 西安培华学院医学院中心实验室陕西西安710199 西安医学院基础医学部陕西西安710021

目的针对氟西汀的骨破坏作用,研究胡椒碱与其联用的骨保护作用并探讨作用机制。方法建立SD大鼠去卵巢模型,分别灌胃给予雌二醇、氟西汀、胡椒碱及氟西汀与胡椒碱联用处理共8周。双能X射线吸收法测量骨密度;microCT检测骨微观结构;三点... 详细信息

目的针对氟西汀的骨破坏作用,研究胡椒碱与其联用的骨保护作用并探讨作用机制。方法建立SD大鼠去卵巢模型,分别灌胃给予雌二醇、氟西汀、胡椒碱及氟西汀与胡椒碱联用处理共8周。双能X射线吸收法测量骨密度;microCT检测骨微观结构;三点弯曲检测骨生物力学性能;ELISA法检测血清骨转换生化指标。培养大鼠原代成骨细胞,检测药物处理对细胞成骨分化及矿化的影响。结果与去卵巢组比,雌二醇及胡椒碱明显提高骨密度和生物力学性能,并改善骨小梁微观结构;给予氟西汀后,骨密度、骨生物力学性能和骨小梁微观结构进一步恶化,并加速骨转换;胡椒碱与氟西汀联用后,能明显减少氟西汀对骨的破坏作用。氟西汀明显降低原代成骨细胞的分化和矿化能力;胡椒碱明显提高其成骨分化。结论氟西汀引起去卵巢大鼠骨质进一步流失,其机制可能与抑制成骨细胞分化及矿化相关,氟西汀与胡椒碱联用可逆转氟西汀对骨的破坏作用。

关键词：骨质疏松氟西汀胡椒碱去卵巢大鼠成骨细胞成骨分化

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miR-375靶向MMP13抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭

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生物化学与生物物理进展 2024年第5期51卷 1203-1214页

作者：刘中何磊肖剑朱青梅肖君杨勇明罗勇健莫中成张轶群李明邵阳学院附属第一医院骨科邵阳422000 湖南医药学院基础医学院怀化418000 桂林医学院基础医学院桂林541199

目的为了探究miR-375是否通过影响基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达来调控骨肉瘤(osteosarcoma,OS)恶性特征。方法用Lipofectamine 3000试剂盒将质粒、miRNA转染至骨肉瘤细胞和HEK293细胞中。实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative... 详细信息

目的为了探究miR-375是否通过影响基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达来调控骨肉瘤(osteosarcoma,OS)恶性特征。方法用Lipofectamine 3000试剂盒将质粒、miRNA转染至骨肉瘤细胞和HEK293细胞中。实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测OS患者和OS细胞中miR-375和MMP13的表达。蛋白质印迹法(Western blot)分析OS患者和OS细胞中MMP13蛋白的表达。双荧光素酶法分析miR-375与MMP13的靶向关系。伤口愈合和transwell实验分别分析OS细胞的迁移和侵袭。结果OS组织中miR-375的表达低于正常组织。MMP13在OS组织中表达上调。在OS患者中,MMP13的表达与miR-375呈负相关。与转染miRNA对照的OS细胞相比,转染miR-375模拟物OS细胞的迁移和侵袭明显被抑制。MMP13能部分逆转miR-375对OS细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论在OS细胞中,过表达miR-375通过调控MMP13的表达抑制细胞的迁移和侵袭。

关键词：骨肉瘤 miR-375 基质金属蛋白酶13 细胞迁移细胞侵袭

“三导三测”对医学免疫学国家级混合式一流课程教学效果的影响

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中国免疫学杂志 2024年

作者：孙爱平杨子善骞少举解博红宋向凤新乡医学院基础医学院免疫学系

近几年，在国家政策引导下，加之“新冠疫情”影响，我国线上线下混合式教学在短时间内取得了较大发展。但是，混合式教学效果影响因素较多，尤其是学生学习动力和学习态度，直接影响着混合式教学的效果。本教研团队将“三导三测”应用... 详细信息

近几年，在国家政策引导下，加之“新冠疫情”影响，我国线上线下混合式教学在短时间内取得了较大发展。但是，混合式教学效果影响因素较多，尤其是学生学习动力和学习态度，直接影响着混合式教学的效果。本教研团队将“三导三测”应用到混合式教学过程中，以“三测”增加学生学习动力，同时，辅以“三导”引导学生进行高效课前学习和精准学习，对线上线下混合式教学效果产生了积极的影响。

关键词：三导三测混合式教学教学效果的影响

靶向瞬时受体电位香草酸亚型1离子通道的Nplus-RhTx多肽抑制剂理性设计及功能验证

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浙江大学学报（医学版） 2024年第2期53卷 201-206页

作者：张恒王嘉薇杨帆浙江大学医学院基础医学院生物物理系浙江杭州310058

目的:获得靶向瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)通道的多肽抑制剂。方法:基于已有的靶向TRPV1通道的多肽激动剂红头蜈蚣毒素(RhTx)进行理性设计,在其氨基末端增加带正电荷的氨基酸,并在细胞上使用膜片钳电生理验证设计的多肽对TRPV1通道... 详细信息

目的:获得靶向瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)通道的多肽抑制剂。方法:基于已有的靶向TRPV1通道的多肽激动剂红头蜈蚣毒素(RhTx)进行理性设计,在其氨基末端增加带正电荷的氨基酸,并在细胞上使用膜片钳电生理验证设计的多肽对TRPV1通道的抑制作用。结果:理性设计了8条Nplus-RhTx多肽,在膜片钳电生理记录中发现其中4条可以抑制TRPV1的辣椒素激活,4条Nplus-RhTx多肽的半数有效抑制浓度分别为(188.3±4.7)、(193.6±18.0)、(282.8±11.9)和(299.5±6.4)µmol/L。结论:通过对RhTx多肽的氨基端进行理性设计改变其性质,可获得靶向TRPV1的多肽抑制剂。

关键词：瞬时受体电位香草酸亚型1 离子通道多肽理性设计电生理