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三种内固定方式在青少年胫骨结节撕脱骨折治疗中的疗效分析

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中国修复重建外科杂志 2025年

作者：段克友王照东刘亚军徐陈朱仲廉官建中蚌埠医科大学第一附属医院骨科组织移植安徽省重点实验室

目的分析空心螺钉联合克氏针张力带、空心螺钉联合锚钉、改良1/3管型钢板3种内固定方式在青少年胫骨结节撕脱骨折（avulsion fracture of tibial tubercle,AFTT）治疗中的疗效。方法回顾分析2018年1月—2023年9月收治且符合选择标准... 详细信息

目的分析空心螺钉联合克氏针张力带、空心螺钉联合锚钉、改良1/3管型钢板3种内固定方式在青少年胫骨结节撕脱骨折（avulsion fracture of tibial tubercle,AFTT）治疗中的疗效。方法回顾分析2018年1月—2023年9月收治且符合选择标准的19例青少年AFTT患者临床资料。根据内固定方式不同，将患者分为A组（8例，空心螺钉联合克氏针张力带）、B组（6例，空心螺钉联合锚钉）、C组（5例，改良1/3管型钢板）。3组患者年龄、性别、侧别、致伤原因、Ogden分型及伤后至手术时间等基线资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。记录并比较3组术后1个月膝关节活动度、膝关节负重时间、膝关节正常活动时间、末次随访时美国特种外科医院（HSS）评分；记录骨折有无移位、术后1个月骨折线是否模糊、有无骨骺发育异常，以及有无切口感染等并发症。结果 3组患者住院时间比较差异无统计学意义（P>0.05）。所有患者均获随访，随访时间10～24个月，平均14.3个月；3组间随访时间比较差异无统计学意义（P>0.05）。患者手术切口均愈合良好，无软组织激惹及骨折不愈合发生，随访期间未见患肢短缩畸形，无骨骺发育异常。A组术后1个月膝关节活动度及住院费用均优于B、C组，骨折愈合时间、膝关节负重时间、膝关节正常活动时间优于C组，C组住院费用优于B组，差异均有统计学意义（P0.05）。A组术后1个月骨折线均模糊，骨折端接触紧密，无骨折移位发生；B、C组各有2例术后1个月骨折线清晰，C组1例出现骨折端轻度移位；除B组1例术中出现骨折块劈裂外，其余两组术中骨折块均无劈裂。3组间术后1个月骨折线模糊情况、骨折移位情况及术中骨块劈裂情况比较差异均无统计学意义（P>0.05）。末次随访时3组患者膝关节HSS评分均获优、良，3组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论空心螺钉联合克氏针张力带技术治疗青少年AFTT疗效可靠，具有稳定骨折端、加速骨折愈合康复、早期可行膝关节功能锻炼、降低住院费用等优点。

关键词：胫骨结节撕脱骨折克氏针张力带空心螺钉钢板锚钉内固定

PD-L1抑制促肝源性CD8+IFN-γ+ T细胞损伤肝脏功能参与动脉粥样硬化

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中国药理学通报 2025年

作者：刘逍武欣甄子怡张嘉滢李琦陈畅哈尔滨医科大学药学院药理学教研室哈尔滨医科大学附属肿瘤医院生物治疗中心

目的研究细胞程序性死亡配体-1（programmed cell death protein ligand-1，PD-L1）功能抑制调控免疫活化影响ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化发生发展的机制。方法将24只ApoE-/-小鼠随机分为正常组，高脂组和高脂+抗PD-L1单抗组，通过高胆... 详细信息

目的研究细胞程序性死亡配体-1（programmed cell death protein ligand-1，PD-L1）功能抑制调控免疫活化影响ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化发生发展的机制。方法将24只ApoE-/-小鼠随机分为正常组，高脂组和高脂+抗PD-L1单抗组，通过高胆固醇饲料喂养建立动脉粥样硬化（atherosclerosis）模型。实验动物饲养70 d后，分离各组实验动物血管（主动脉根部至腹主动脉）及肝脏组织，进行油红O染色；HE染色检测肝组织病理改变；ELISA检测血清中总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-c）、低密度脂蛋白（LDL-c）和炎症因子（IFN-γ、TNF-α、IL-1β）含量。流式细胞计数检测肝脏淋巴细胞(CD4+、CD8+、CD4+IFN-γ+和CD8+IFN-γ+T细胞)。RT-PCR检测肝脏组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β、CD4和CD8表达。结果与高脂组比较，给予抗PD-L1单抗后促血管壁及肝脏脂质累积并上调血清及肝组织CHO、TG、LDL-c和HDL-c含量。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗促血清和肝组织谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）含量升高，但是对碱性磷酸酶（AKP）含量没有影响。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗促血清和肝脏组织IFN-γ、TNF-α和IL-1β含量升高。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗抑制CD4表达及促CD8表达。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗促肝脏CD8+T和CD8+IFN-γ+T细胞活化，但是对CD4+IFN-γ+T细胞活化没有影响。结论高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗通过活化肝脏CD8+IFN-γ+T细胞损伤肝脏功能加重动脉粥样硬化。

关键词：动脉粥样硬化 PD-L1 CD8 IFN-γ T细胞免疫活化炎症因子炎症反应

NLRP6过表达通过AMPK/CPT1A/PGC1A通路促进肝细胞脂肪氧化分解改善非酒精性脂肪肝

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南方医科大学学报 2025年

作者：石情冉苏叶宋铃榆杨红王文娟刘晗琳刘琦贵州医科大学附属医院消化内科

目的研究核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6(NLRP6)在肝脏脂代谢及非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发展过程中的作用及机制。方法构建高脂饲料喂养（HFD）模型小鼠，分为对照组正常喂养、模型组高脂（脂质含量60%饮食）喂... 详细信息

目的研究核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6(NLRP6)在肝脏脂代谢及非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发展过程中的作用及机制。方法构建高脂饲料喂养（HFD）模型小鼠，分为对照组正常喂养、模型组高脂（脂质含量60%饮食）喂养，6只/组，持续喂养16周。构建蛋氨酸-胆碱缺乏饮食（MCD）小鼠模型，分为对照组[喂养蛋氨酸-胆碱充足（MCS）饮食]和模型组（喂养蛋氨酸-MCD饮食）]，每组6只，持续喂养8周。使用HE染色及油红O染色鉴定模型是否造模成功，免疫组化染色（IHC）检测两种小鼠模型肝脏中NLRP6的表达。在正常人肝细胞系LO2细胞中使用腺病毒过表达NLRP6，或siRNA敲低NLRP6，使用棕榈酸（PA）构建NAFLD细胞模型，NLRP6过表达处理分组Ad-Vec组、Ad-NLRP6组、Ad-Vec+PA组、Ad-NLRP6+PA组；NLRP6敲低处理分组阴性对照（NC）组、sh-NLRP6组、NC+PA组、sh-NLRP6+PA组。采用甘油三酯（TG）试剂盒、油红染色、qPCR、Western blotting、ATP试剂盒和β-羟基丁酸试剂盒检测NLRP6对脂质代谢的影响及NLRP6对AMPK通路及使用AMPK抑制剂Compound C后AMPK通路的变化。结果在HFD、MCD饮食诱导NAFLD小鼠模型小鼠肝脏中NLRP6表达降低（P<0.001）。在细胞实验中LO2细胞过表达NLRP6后，与Ad-Vec+PA组相比，Ad-NLRP6+PA组细胞内TG含量降低（P<0.0001），且脂质沉积减少；敲低NLRP6，与NC+PA组相比，sh-NLRP6+PA组细胞内TG含量增加（P<0.05），并且脂质沉积加重；与Ad-Vec+PA组相比，Ad-NLRP6+PA组PGC1A、CPT1A mRNA及蛋白表达水平增加（P<0.01）。脂质氧化分解代谢产物ATP、β-羟丁酸含量升高（P<0.05）。与Ad-Vec+PA组相比，Ad-NLRP6+PA组肝细胞中AMPK通路磷酸化水平升高（P<0.05）；使用AMPK抑制剂后，Ad-NLRP6引起的脂质氧化分解作用被抑制关。结论 NLRP6通过AMPK/CPT1A/PGC1A促进肝细胞脂肪氧化分解，改善脂质沉积。

关键词：非酒精性脂肪肝 NLRP6 AMPK 脂肪酸氧化

肉苁蓉苯乙醇苷-光甘草定协同抗皮肤色素沉着功效

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精细化工 2025年

作者：刘璐瑶王宝娟李明杰胡君萍杨建华新疆医科大学药学院新疆医科大学第一附属医院药学部新疆药物临床研究重点实验室沙雅县人民医院药学科

为探究肉苁蓉苯乙醇苷（PhGs）和光甘草定（Gla）协同抑制皮肤色素沉着作用，通过体外酪氨酸酶活性抑制实验、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和2，2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐阳离子(ABTS+)自由基清除实验，初步筛选... 详细信息

为探究肉苁蓉苯乙醇苷（PhGs）和光甘草定（Gla）协同抑制皮肤色素沉着作用，通过体外酪氨酸酶活性抑制实验、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和2，2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐阳离子(ABTS+)自由基清除实验，初步筛选了PhGs和Gla的复配质量比。进一步构建了UVB诱导B16F10细胞色素沉着模型，以酪氨酸酶活性、黑色素含量为指标，评价了药物抑制黑色素的生成作用；构建了脂多糖（LPS）诱导HaCaT细胞炎症模型，以抑制白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）释放效果为指标，评价了药物的抗炎作用；构建偶氮二异丁脒盐酸盐（AAPH）诱导HaCaT细胞氧化应激模型，以提升超氧化物歧化酶（SOD）活力、过氧化氢酶（CAT）活力为指标，评价了药物的抗氧化作用。通过上述3种细胞模型综合筛选出最佳的PhGs和Gla复配质量比。结果表明，以m（PhGs）∶m（Gla）＝1∶1、5∶1、10∶1制备的PhGs/Gla（1∶1）、PhGs/Gla（5∶1）、PhGs/Gla（10∶1）磷酸盐缓冲溶液（PBS，pH=6.8）在抑制酪氨酸酶活性、抗氧化方面具有较好的抑制作用和协同效应。PhGs/Gla（5∶1）、PhGs/Gla（1∶1）和PhGs/Gla（10∶1）PBS溶液对酪氨酸酶抑制率（92.93%、94.37%和88.06%）；对DPPH自由基清除率分别为89.44%、88.72%和88.10%；对ABTS+自由基清除率分别为100.13%、100.01%和99.87%。当PhGs/Gla DMEM溶液质量浓度为25 μg/mL时，PhGs/Gla（1∶1）、PhGs/Gla（5∶1）、PhGs/Gla（10∶1） DMEM溶液未对B16F10和HaCaT细胞表现出细胞毒性；PhGs/Gla（1∶1） DMEM溶液的酪氨酸酶活性抑制能力更强（酪氨酸酶活性23.80%），黑色素含量（30.90%）显著降低；PhGs/Gla（1∶1） DMEM溶液抑制IL-6、TNF-α释放效果，以及增强SOD、CAT活力的能力最佳，表现出良好的PhGs和Gla复配协同性能，均优于单一用药，也高于PhGs/Gla（5∶1）、PhGs/Gla（10∶1） DMEM溶液。PhGs和Gla复配通过抑制黑色素生成、抗炎及抗氧化作用，协同发挥改善皮肤色素沉着药效。

关键词：肉苁蓉苯乙醇苷光甘草定协同作用抗皮肤色素沉着抗氧化抗炎医药原料

新型生物可降解锌合金植入材料在大鼠骨修复模型中的应用

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中国医科大学学报 2025年

作者：高质涵高铭泽陈培剑付高洁刘洁婷肖阳牡丹江医科大学生命科学学院生物医学工程教研室牡丹江医科大学医学影像学院电工电子教研室牡丹江医科大学附属第二医院普外科

目的比较新型生物可降解植入材料Zn-2Cu-x Sr (x=0、0.5和1 wt.%)合金的体外降解率、细胞毒性、体内促成骨能力和体内生物毒性，评价其在骨科领域的应用前景。方法通过pH值监测和材料降解率评价Zn、Zn-2Cu、Zn-2Cu-0.5Sr、Zn-2Cu-1Sr... 详细信息

目的比较新型生物可降解植入材料Zn-2Cu-x Sr (x=0、0.5和1 wt.%)合金的体外降解率、细胞毒性、体内促成骨能力和体内生物毒性，评价其在骨科领域的应用前景。方法通过pH值监测和材料降解率评价Zn、Zn-2Cu、Zn-2Cu-0.5Sr、Zn-2Cu-1Sr和Ti的体外降解能力。通过细胞增殖实验和细胞骨架荧光染色法比较Zn、Zn-2Cu、Zn-2Cu-0.5Sr、Zn-2Cu-1Sr和空白对照的体外细胞相容性。通过micro-CT扫描、骨矿物质密度检测评价Zn、Zn-2Cu、Zn-2Cu-0.5Sr和Zn-2Cu-1Sr的体内促成骨作用。通过HE染色比较Zn-2Cu-1Sr和空白对照的生物相容性。结果 Zn组、Zn-2Cu组、Zn-2Cu-0.5Sr组、Zn-2Cu-1Sr组与Ti组比较，pH值均无统计学差异（P> 0.05）。Zn-2Cu-0.5Sr组材料降解率显著低于Zn-2Cu-1Sr组和Zn-2Cu组（P <0.05）。体外细胞相容性结果显示，空白对照组细胞增殖率低于Zn-2Cu-0.5Sr组和Zn-2Cu-1Sr组（P <0.05）。micro-CT结果显示，Zn-2Cu-1Sr组骨矿物质密度显著高于Zn-2Cu组和Zn-2Cu-0.5Sr组（P <0.05）。HE染色结果显示，Zn-2Cu-1Sr组大鼠心脏、肝、肺和肾组织未见异常或病理形态。结论将微量的铜和锶加入锌中，可以有效降低材料的降解率并提高材料的生物相容性和促成骨能力。

关键词：锌铜锶促成骨能力生物降解骨科植入物

氟暴露对原代神经细胞内质网-线粒体钙转移及细胞凋亡的影响

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中国组织工程研究 2025年

作者：卢永恒朱双赵飞艳艾福军刘艳洁董阳婷官志忠魏娜贵州医科大学临床医学院病理学教研室贵州医科大学附属医院病理科地方病与少数民族疾病(贵州医科大学)教育部重点实验室

背景：前期研究发现持续过量氟暴露导致的神经细胞受损与Ca2+超载有关，但Ca2+在细胞内各钙库之间的流动转换和细胞凋亡损伤的作用机制尚不明确。目的：探讨氟暴露对原代神经细胞线粒体相关内质网膜内Ca2+转运通道蛋白及细胞凋亡水平的... 详细信息

背景：前期研究发现持续过量氟暴露导致的神经细胞受损与Ca2+超载有关，但Ca2+在细胞内各钙库之间的流动转换和细胞凋亡损伤的作用机制尚不明确。目的：探讨氟暴露对原代神经细胞线粒体相关内质网膜内Ca2+转运通道蛋白及细胞凋亡水平的影响。方法：体外培养新生SD大鼠原代神经细胞，培养至第7天采用神经元核特异性抗体NeuN行免疫荧光染色鉴定。神经细胞按照加氟浓度分为对照组（含0 mmol/L氟化钠）、低氟组（含0.5 mmol/L氟化钠）、高氟组（含1 mmol/L氟化钠），氟暴露24 h后光镜下观察细胞形态变化；蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白BAX/BCL-2和钙转移相关通路VDAC1、GRP75、IP3R蛋白表达；RT-PCR检测钙转移相关通路VDAC1、GRP75、IP3R mRNA表达；线粒体Ca2+探针Rhod-2AM检测Ca2+水平；线粒体膜电位试剂盒检测线粒体膜电位变化；流式细胞术、TUNEL染色法检测细胞凋亡水平。结果与结论：（1）培养至第7天的神经细胞经鉴定纯度可达90%以上，杂质少，生长状态良好，细胞网络连接紧密，达到后续实验要求；（2）与对照组相比，低氟组和高氟组神经细胞聚团生长增多，突起断裂，胞体圆缩，细胞之间连接网络被破坏；与低氟组相比，高氟组细胞损伤变化更为明显；（3）与对照组比较，低氟组和高氟组VDAC1、GRP75、IP3R蛋白表达上调（P <0.05），凋亡相关蛋白BAX/BCL-2比值升高（P<0.05）；与对照组相比，低氟组VDAC1、GRP75mRNA表达明显上调（P<0.05），高氟组VDAC1、GRP75、IP3RmRNA表达显著上调（P<0.01）；（4）氟暴露处理后细胞凋亡水平明显上升，且高氟组显著高于对照组和低氟组（P <0.01）；（5）氟暴露处理后神经细胞线粒体Ca2+浓度明显增加（P <0.05），线粒体膜电位下降（P <0.01），且高氟组损伤程度更为明显（P <0.05）。结果表明，氟暴露会损害原代神经细胞的形态结构，导致细胞内质网-线粒体间Ca2+转移通路蛋白表达上调，线粒体Ca2+超载，线粒体损伤，细胞凋亡水平升高。

关键词：氟暴露原代神经细胞 Ca 转移细胞凋亡线粒体膜电位线粒体损伤线粒体相关内质网膜钙转运通道

重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂可通过调节炎症微环境对“二次打击”脓毒症小鼠发挥治疗作用

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南方医科大学学报 2025年

作者：多文娟王怡祥王家兴许鑫龙李林献杨栋臣申启利杨立春刘晓静金启旺褚亮杨小迪蚌埠医科大学基础医学院安徽省感染与免疫重点实验室南京紫金医院蚌埠医科大学第二附属医院普外科

目的探讨重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂（r Sj-Cystatin）对“二次打击”脓毒症小鼠的干预作用。方法 64只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组（A组）、蛋白组（B组）“、二次打击”造模组（C组）、蛋白干预组（D组），每组16只。... 详细信息

目的探讨重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂（r Sj-Cystatin）对“二次打击”脓毒症小鼠的干预作用。方法 64只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组（A组）、蛋白组（B组）“、二次打击”造模组（C组）、蛋白干预组（D组），每组16只。A组和B组小鼠首先腹腔注射PBS（100μL/只），24 h后开腹探查盲肠，但不进行盲肠结扎和穿刺（CLP），术后30 min，分别腹腔注射PBS（100μL/只）或含25μg r Sj-Cystatin蛋白的PBS（100μL/只）；C组和D组小鼠首先腹腔注射含LPS（5 mg/kg）的PBS（100μL/只），24 h后行CLP手术，术后30 min，分别腹腔注射PBS（100μL/只）或含25μg r Sj-Cystatin蛋白的PBS（100μL/只）。每组随机抽取6只，造模12 h后取小鼠血清、脾、肝、肺和肾组织。肝、肺和肾组织HE染色观察其病理损伤并进行评分；酶联免疫吸附实验（ELISA）检验血清和肝、肺、肾组织匀浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β）水平以及组织中巨噬细胞极化标志物iNOS和Arg-1水平；流式细胞术检测脾脏CD3+CD4+CD25+Foxp3+T的比例变化；剩余小鼠造模后记录72 h生存率并观察小鼠状态。结果与A组和B组（100%）相比，C组（0%）72 h生存率降低，经r Sj-Cystatin蛋白治疗后，D组生存率较C组增高（20%）。与A、B两组相比，C组肝、肺、肾组织切片病理损伤加重，血清和组织匀浆中TNF-α、IL-6水平明显升高（P<0.05）；经蛋白治疗后，病理损伤程度减轻，血清和组织匀浆中TNF-α、IL-6水平降低（P<0.05），调节因子IL-10、TGF-β水平明显升高（P<0.05）同时CD3+CD4+CD25+Foxp3+T比例升高（P<0.05）；与A、B两组相比，C组各器官组织中iNOS水平均升高，而Arg-1水平呈差异性，仅在肾中呈下降趋势（P<0.01）；与C组相比，D组iNOS水平下降（P<0.05）,Arg-1水平升高（P<0.001）。结论 r SjCystatin可通过调节炎症微环境进而对“二次打击”脓毒症起到明显的治疗作用。

关键词：重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂脂多糖盲肠结扎穿刺脓毒症免疫调节因子

去氢骆驼蓬碱联合rad51抑制剂对细粒棘球蚴体外作用及DNA损伤水平的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年

作者：巩月红潘美驰孙佳佳马瑞佳吾斯曼江·艾买提赵一聪赵军王建华新疆医科大学第一附属医院药学部新疆医科大学省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆药物临床研究重点实验室新疆医科大学药学院新疆医科大学临床医学部新疆医科大学第七附属医院药学部新疆喀什地区第二人民医院药学部

目的探讨去氢骆驼蓬碱联合rad51抑制剂（RI-1）对细粒棘球蚴体外作用及DNA损伤水平的影响。方法将细粒棘球蚴分为空白对照组、40μg/ml阳性对照药阿苯达唑亚砜组、40μg/ml去氢骆驼蓬碱组、10μg/ml RI-1组、去氢骆驼蓬碱:RI-1 (40μg... 详细信息

目的探讨去氢骆驼蓬碱联合rad51抑制剂（RI-1）对细粒棘球蚴体外作用及DNA损伤水平的影响。方法将细粒棘球蚴分为空白对照组、40μg/ml阳性对照药阿苯达唑亚砜组、40μg/ml去氢骆驼蓬碱组、10μg/ml RI-1组、去氢骆驼蓬碱:RI-1 (40μg/ml:10μg/ml)组，采用亚甲蓝拒染法检测各组细粒棘球蚴存活率；扫描电镜观察药物干预后细粒棘球蚴表面超微结构变化；DCFH-DA法检测各药物干预后细粒棘球蚴活性氧（ROS）含量；试剂盒检测药物干预后细粒棘球蚴氧化应激水平及Caspase-3含量，以及三磷酸腺苷（ATP）和乳酸脱氢酶（LDH）含量；qRT-PCR反应检测DNA损伤修复相关基因的mRNA表达水平。结果与空白对照组和去氢骆驼蓬碱给药组相比，联合使用去氢骆驼蓬碱与RI-1 （剂量比为去氢骆驼蓬碱:RI-1:40μg/ml:10μg/ml）存活率下降最为明显，存活率降至48.67%，差异显著（F=78.85,P 0.05）；在基因表达方面，与空白对照组对比，去氢骆驼蓬碱:RI-1组细粒棘球蚴h2ax (2.34±0.15)、rad51 (1.19±0.14)基因表达量显著上调（F=23.79,P <0.01;F=8.96,P <0.05）；与去氢骆驼蓬碱给药组相比，去氢骆驼蓬碱:RI-1组干预后细粒棘球蚴brca1 (1.35±0.08)、mre11 (1.41±0.10)的表达量分别下调，差异具有统计学意义（F=10.49,P <0.05;F=16.60,P <0.05）。结论去氢骆驼蓬碱联合rad51抑制剂RI-1可增强去氢骆驼蓬碱体外抗细粒棘球蚴的作用。

关键词：去氢骆驼蓬碱 rad51抑制剂细粒棘球蚴存活率 DNA损伤

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N-甲基小檗胺对细胞内钙稳态的调节作用

中国医科大学学报 2025年

作者：杨东凝周诗李玥霖朱俊蒙郝丽英胡慧媛中国医科大学药学院药物毒理学教研室

目的探讨N-甲基小檗胺（N-MB）对H9c2心肌细胞内钙稳态的调节作用，从而明确N-MB心肌保护作用的可能机制。方法通过MOE软件预测N-MB与CaV1.2通道的结合并判断二者的结合能力与结合模式。通过全细胞膜片钳技术记录稳定表达h CaV1.2的HEK... 详细信息

目的探讨N-甲基小檗胺（N-MB）对H9c2心肌细胞内钙稳态的调节作用，从而明确N-MB心肌保护作用的可能机制。方法通过MOE软件预测N-MB与CaV1.2通道的结合并判断二者的结合能力与结合模式。通过全细胞膜片钳技术记录稳定表达h CaV1.2的HEK293细胞内CaV1.2钙通道电流的变化，观察N-MB （30μmol/L）对CaV1.2钙通道电流的影响。将Fluo 3-AM荧光探针装载至H9c2心肌细胞中，激光共聚焦显微镜检测N-MB （3、30μmol/L）对心肌细胞内Ca2+浓度的影响。实时定量PCR检测N-MB （3、30μmol/L）对H9c2心肌细胞中Ca2+调控相关基因Cacna1c、Cacnb2、Ryr2、Serca2a、Ncx1表达的影响。结果经MOE软件预测，N-MB和CaV1.2通道可以结合，二者相互作用的结合位点主要涉及Phe1191、Thr1420、Asn771等，作用方式有H-donor、pi-pi、pi-H 3种。N-MB（30μmol/L）对CaV1.2钙通道电流可产生明显抑制作用，其抑制率为（76.09±7.41）%。N-MB （3μmol/L、30μmol/L）作用于H9c2心肌细胞后细胞内钙信号的荧光强度明显增强（P 0.05），而Cacnb2表达显著减少（P <0.001）,Ryr2表达显著增加（P <0.05）。结论 N-MB可以与CaV1.2钙通道结合。N-MB可能通过抑制CaV1.2钙通道的表达而抑制钙电流；同时可能通过促进Ryr2表达而升高细胞内Ca2+浓度来参与调节细胞内钙稳态，发挥其心肌保护作用。

关键词： N-甲基小檗胺细胞内钙稳态 CaV1.2钙通道