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真菌毒素对软骨蛋白聚糖硫酸化修饰的影响

真菌毒素对软骨蛋白聚糖硫酸化修饰的影响

胰岛素样生长因子-1受体下调表达与大骨节病发病的关系研究

第十一届中国生物毒素研究及医药应用年会

作者：曹峻岭罗明秀陈静宏付强张增铁王加丽李锦西安交通大学医学院地方病研究所

研究背景和目的:大骨节病（KBD）是以关节透明软骨变性坏死为主的地方性骨关节病,至今病因和发病机理均未明了,本实验以KBD软骨和体外培养的C28/I2人软骨细胞系为研究对象,观测软骨蛋白聚糖硫酸化修饰与软骨变性坏死的关系,探寻和推测... 详细信息

研究背景和目的:大骨节病（KBD）是以关节透明软骨变性坏死为主的地方性骨关节病,至今病因和发病机理均未明了,本实验以KBD软骨和体外培养的C28/I2人软骨细胞系为研究对象,观测软骨蛋白聚糖硫酸化修饰与软骨变性坏死的关系,探寻和推测可疑致病因素在KBD发病中的作用,为:KBD的病因发病机制和采取防治措施提供实验依据。材料与方法:关节软骨标本分为2组:对照组儿童（5例）,和大骨节病儿童（5例）。通过光镜观测软骨病理形态;组织化学或免疫组织化学染色,定位检测聚集蛋白聚糖、PAPS合成酶（PAPSS2）、PAPS转运蛋白（PAPST1）、糖类磺基转移酶（CHST15）、芳基硫酸酯酶（ARSB）和硫酸乙酰半乳糖按硫酸酯酶（GALNS）等蛋白聚糖硫酸化修饰相关酶在软骨组织的表达。模拟KBD病区可疑致病环境,用真菌毒素和低硒/补硒作用于体外培养的C28/I2人软骨细胞;采用MTT法评价不同浓度的真菌毒素对软骨细胞增殖的影响,运用实时定量PCR和Western blot方法分别检测蛋白聚糖、PAPSS2、PAPST1、CHST15和ARSB等mRNA和蛋白的表达。结果:大骨节病患者关节软骨样本中上区域蛋白聚糖合成代谢硫酸化修饰相关酶类PAPSS2,PAPST1和CHST15染色阳性细胞的百分比率显著低于对照组（P＜0.05）;上部区域分别为:44.61±5.65%:18.38±3.22%:52.21±9.12%:16.79±3.42%和61.87±13.38%:13.14±1.17%;中间层分别为21.53±6.24%:12.47±1.47%;23.49±6.07%:7.35±1.42%和33.47±4.74%:6.75±0.61%。蛋白聚糖分解代谢硫酸化修饰相关酶类ARSB和GA工NS的染色阳性细胞百分比率明显高于对照组（P＜0.05）;关节软骨上层分别为:O±0%:43.79±11.05%和0±O%:35.53±4.24%;中间层分别为:0±0%:27.12±3.45%和0±0%:14.45±1.53%)。真菌毒素干预实验研究显示:不同水平的毒素能够抑制软骨细胞增殖,并影响蛋白聚糖硫酸化修饰相关酶的表达;合成相关酶PAPSS2,PAPST1和CHST15的表达下降,分解代谢相关酶ARSB表达增加;补充生理量的硒可以部分抑制真菌毒素的作用。结论:研究结果表明,蛋白聚糖硫酸修饰在大骨节病发病机制中具重要作用;真菌毒素能明显抑制细胞的生长,并通过改变相关酶的表达影响软骨蛋白聚糖硫酸修饰及代谢平衡;补充生理量的硒能部分对抗真菌毒素的作用。实验结果提示这些因素可能与KBD的发生发展有一定联系,为KBD病区暴露因素可能为各病区存在的真菌毒素与环境低硒共同作用的病因假说和可能的发病机制提供了实验依据,并为采取有力防治措施提供了一定的线索。

关键词：大骨节病真菌毒素软骨损伤硒蛋白聚糖硫酸化修饰

来源： cnki会议评论

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中华地方病学杂志 2019年第8期38卷 609-614页

作者：王文君冯依萍李正正王会方倩张萌王梦莹何颖张迎陈静宏西安交通大学医学部公共卫生学院地方病研究所国家卫生健康委微量元素与地方病重点实验室710061

目的观察胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)在大骨节病(KBD)儿童和低硒条件下T-2毒素染毒大鼠软骨组织中的表达,以及IGF-1R抑制剂对人正常软骨细胞(C28/I2细胞)凋亡的影响,探讨IGF-1R在KBD发病中的作用.方法收集陕西省KBD病区病死儿童(5例... 详细信息

目的观察胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)在大骨节病(KBD)儿童和低硒条件下T-2毒素染毒大鼠软骨组织中的表达,以及IGF-1R抑制剂对人正常软骨细胞(C28/I2细胞)凋亡的影响,探讨IGF-1R在KBD发病中的作用.方法收集陕西省KBD病区病死儿童(5例)和非KBD病区车祸死亡及先天6指畸形手术儿童(5例)指关节,取指关节软骨经免疫组织化学法(免疫组化)检测IGF-1R表达情况.选择32只雄性SD大鼠,体质量为60~80g,按体质量采用随机数字表法分为常规饲料(硒含量101.5μg/kg)和低硒饲料(硒含量1.1μg/kg)组,每组16只;饲养30d后,将常规饲料组分为对照组和T-2毒素组(100ng·kg^-1·d^-1),低硒饲料组分为低硒组和低硒+T-2毒素组,每组8只,饲养30d后取大鼠左侧膝关节经免疫组化检测软骨组织IGF-1R表达情况.体外培养C28/I2细胞,以T-2毒素0(对照)、6、12、24μg/L及分别加亚硒酸钠(+0.1mg/L)处理72h;同时,以IGF-1R抑制剂0(对照)、250、500、1000μg/L处理48h,采用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)和免疫印迹法(WesternBlot)检测软骨细胞IGF-1RmRNA和蛋白表达水平,采用流式细胞术检测软骨细胞凋亡情况.结果与对照组[(100.00±0.00)%、(100.00±0.00)%]比较,KBD组儿童关节软骨表、中层IGF-1R阳性细胞表达率[(72.71±4.75)%、(36.33±4.32)%]显著降低(t=12.852、32.650,P均关节软骨中层[(20.83±2.69)%、(26.45±2.84)%、(20.34±1.82)%],深层[(33.55±5.66)%、(48.89±8.39)%、(25.51±7.50)%],及骺板软骨肥大层[(47.50±1.47)%、(28.66±3.58)%、(40.52±6.78)%]IGF-1R阳性细胞表达率显著降低(P均<0.01).与对照组比较,各T-2毒素组C28/I2细胞IGF-1RmRNA和蛋白表达水平均明显降低(P均<0.05).6、12、24μg/LT-2毒素+0.1mg/L硒组C28/I2细胞IGF-1RmRNA表达水平(1.95±0.35、2.44±0.17、2.40±0.15)显著高于相同浓度T-2毒素组(0.80±0.08、0.63±0.08、0.61±0.11,t=-12.259、-11.279、-13.371,P均<0.05);6、12μgg/LT-2毒素+0.1mg/L硒组C28/I2细胞IGF-1R蛋白表达水平(1.67±0.70、1.07±0.26)显著高于相同浓度T-2毒素组(0.52±0.05、0.72±0.05,t=-25.977、-10.776,P均<0.05).与对照组[(5.33±0.85)%、(4.03±1.15)%]比较,各IGF-1R抑制剂组C28/I2细胞早期凋亡率[(8.26±1.51)%、(13.00±0.72)%、(13.19±1.05)%],及500、1000μg/LIGF-1R抑制剂组晚期凋亡率[(8.50±0.71)%、(14.21±1.10)%]明显升高(P均<0.05).结论KBD儿童和低硒条件下T-2毒素染毒大鼠软骨组织中IGF-1R表达均减少.T-2毒素下调软骨细胞IGF-1R表达,加硒可以部分对抗T-2毒素对IGF-1R的合成抑制作用.IGF-1R下调可引起软骨细胞凋亡,对KBD软骨细胞凋亡可能具有重要作用.

关键词：大骨节病胰岛素样生长因子-1受体软骨细胞细胞凋亡

CT与MRI扫描三维重建在四肢骨关节隐匿性骨折诊断中的应用

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现代生物医学进展 2020年第22期20卷 4344-4347,4278页

作者：朱亚敏殷向辉朱昕怡刘学敏张咪空军军医大学第一附属医院医学影像科陕西西安710054 延安市中医医院骨科陕西延安716000 西安交通大学第一附属医院影像科陕西西安710061

目的:探讨电子计算机断层扫描(Computed Tomography,CT)与磁共振成像(Magnetic resonance imaging,MRI)扫描三维重建在四肢骨关节隐匿性骨折诊断中的应用。方法:2016年9月到2019年10月选择在本院诊治的下拟诊为四肢骨关节隐匿性骨折118... 详细信息

目的:探讨电子计算机断层扫描(Computed Tomography,CT)与磁共振成像(Magnetic resonance imaging,MRI)扫描三维重建在四肢骨关节隐匿性骨折诊断中的应用。方法:2016年9月到2019年10月选择在本院诊治的下拟诊为四肢骨关节隐匿性骨折118例,所有患者都给予CT与MRI扫描三维重建诊断,记录影像学特征与判断诊断价值。结果:在118例患者中,最终确诊为四肢骨关节隐匿性骨折98例,无骨折20例,其中腕关节骨折34例,踝关节骨折22例,膝关节骨折15例,肘关节骨折15例,肩关节骨折8例,髋关节骨折4例。在98例确诊的四肢骨关节隐匿性骨折中,MRI三维重建显示双边征、骨质破坏、充气征、软组织影等比例显著都高于CT (P重建诊断四肢骨关节隐匿性骨折的敏感性为89.8%和99.0%,特异性为95.0%和100.0%,误诊率分别为9.3%和0.8%,MRI三维重建诊断的敏感性高于CT,漏诊率低于CT。结论:CT与MRI扫描三维重建在四肢骨关节隐匿性骨折诊断中的应用都有很好的价值,特别是MRI三维重建能清晰显示骨折特征,具有更高的诊断敏感性,能减少漏诊率,可作为四肢骨关节隐匿性骨折的首选检查方法。

关键词： CT 磁共振成像三维重建四肢骨关节隐匿性骨折

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青少年大骨节病诊断指标筛选和模型的构建

中国地方病学杂志 2011年第6期30卷 687-690页

作者：曹春霞郭雄张永忠西安交通大学医学院公共卫生系地方病研究所教育部环境与疾病相关基因重点实验室 710061 武警医学院卫生事业管理教研室

目的了解青少年大骨节病临床指标与大骨节病关系及在临床诊断中的意义，构建青少年大骨节病诊断模型。方法在陕西省采取整群随机抽样的方法抽取6个病区县和1个非病区县的青少年，共计2248人。分析指标包括性别、年龄、大骨节病临床和影... 详细信息

目的了解青少年大骨节病临床指标与大骨节病关系及在临床诊断中的意义，构建青少年大骨节病诊断模型。方法在陕西省采取整群随机抽样的方法抽取6个病区县和1个非病区县的青少年，共计2248人。分析指标包括性别、年龄、大骨节病临床和影像指标共计32项。指标组间分布计量资料用t检验和方差分析，计数资料用χ^2检验，采用多分类有序反应变量Logistic逐步回归分析进行模型构建。结果青少年大骨节病患病率随年龄变化有增高趋势，组间比较除年龄因素（P〉0．05）外，踝关节疼痛、膝关节疼痛、腕关节活动障碍等5项（P〈0．05）和指末弯、肘关节活动障碍、指畸形等9项（P〈0．01）比较差异有统计学意义。指标中16项与大骨节病严重程度显著相关（P〈0．01），构建4个具有统计学意义的累积logit模型（-2logL、Score、Wald、χ^2检验，P〈0．01）。结论建立了以全身受累关节为表现的指标诊断模型，依据指标贡献大小，对于临床诊断具有重要的辅助作用。

关键词：大骨节病诊断症状体征

股骨柄髓外设计对髋关节接触力影响的骨肌多体动力学研究

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医用生物力学 2023年第1期38卷 90-96页

作者：张志伟张志峰陈瑱贤王彩梅靳忠民西安交通大学国际机械中心西安710049 内蒙古医科大学第二附属医院关节外科中心呼和浩特010050 长安大学工程机械学院西安710064 北京爱康宜诚医疗器材有限公司北京102299 西南交通大学机械工程学院成都610031

目的探讨全髋关节置换(total hip arthroplasty,THA)假体股骨柄颈干角、偏心距和前倾角等设计参数对髋关节接触力的影响。方法基于AnyBody软件建立THA骨肌多体动力学模型,参数研究股骨柄颈干角在±10°、偏心距在±20 mm和前倾角在±1... 详细信息

目的探讨全髋关节置换(total hip arthroplasty,THA)假体股骨柄颈干角、偏心距和前倾角等设计参数对髋关节接触力的影响。方法基于AnyBody软件建立THA骨肌多体动力学模型,参数研究股骨柄颈干角在±10°、偏心距在±20 mm和前倾角在±10°内变化时单因素或多因素对髋关节接触力的影响规律。结果偏心距减小20 mm,最大髋关节接触力增加26.08%。颈干角增加10°,最大髋关节接触力增加5.99%。前倾角增加10°,会减小步态周期0%~24%时髋关节接触力,峰值减小19.16%;但会显著增加步态周期38%~70%时髋关节接触力,峰值增加67.78%。结论在进行股骨柄髓外个性化设计时,在重建患者解剖参数的基础上,可以适当增加股骨柄的偏置距离,减小颈干角和前倾角,以避免增加髋关节受力。

关键词：全髋关节置换股骨柄髓外设计骨肌多体动力学髋关节接触力

西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数量表应用于大骨节病的信度和效度评价

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中华地方病学杂志 2015年第4期34卷 274-277页

作者：夏传涛余方方方华郭雄西安交通大学医学部公共卫生学院地方病研究所教育部环境与疾病相关基因重点实验室、国家卫计委微量元素与地方病重点实验室 710061

目的评价西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数（WOMAC）量表对我国大骨节病患者的适用性.方法选择陕西省永寿县和麟游县两个历史大骨节病重病区,依据病区历史诊断资料,排除其他慢性病,并结合《大骨节病诊断标准》（GB 16003-1995）... 详细信息

目的评价西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数（WOMAC）量表对我国大骨节病患者的适用性.方法选择陕西省永寿县和麟游县两个历史大骨节病重病区,依据病区历史诊断资料,排除其他慢性病,并结合《大骨节病诊断标准》（GB 16003-1995）,抽取临床Ⅰ度及以上成人大骨节病患者.运用中文版WOMAC量表,采用重测信度、分半系数和克朗巴赫系数α（Cronbach＇α）分析WOMAC的信度;采用主成分因子分析和相关分析等方法分析量表的效度.结果共调查大骨节病患者200人,收回有效问卷177份（88.5％）.其中重测信度为0.754～0.853,分半系数为0.886～0.971,Cronbach＇α信度系数为0.878～0.956;主成分因子分析WOMAC量表的3个维度（疼痛、僵硬、关节功能）,提取1个公因子,累计方差贡献率为81.238％;WOMAC量表的所有条目得分与其所属领域得分及总得分之间的Pearson相关系数均大于0.600.不同年龄、不同分级的成人大骨节病患者WOMAC量表得分比较差异均无统计学意义（P均＞0.05）.结论 WOMAC量表应用于大骨节病具有较好的效度和信度,但是其区分度不高.

关键词：信度效度大骨节病

Sox9诱导人脐血干细胞向软骨细胞分化的实验研究

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组织工程与重建外科杂志 2015年第4期11卷 221-224页

作者：张军张耀明王正辉张青罗花南郑国玺侯瑾王波涛杨叶叶赵小燕史艳霞延安大学附属医院耳鼻喉科二病区陕西省延安市717100 延长县人民医院耳鼻喉科陕西省延安市717100 西安交通大学第二附属医院耳鼻咽喉-头颈外科陕西省西安市710004

目的探讨Sox9基因对脐血干细胞向软骨细胞分化的影响。方法体外分离培养人脐血干细胞,采用脂质体转染Sox9载体质粒,观察转染后细胞形态的变化,免疫组化染色观察collagenⅡ、aggrecan的表达,RT-PCR检测collagenⅠ、collagenⅡ、aggrecan... 详细信息

目的探讨Sox9基因对脐血干细胞向软骨细胞分化的影响。方法体外分离培养人脐血干细胞,采用脂质体转染Sox9载体质粒,观察转染后细胞形态的变化,免疫组化染色观察collagenⅡ、aggrecan的表达,RT-PCR检测collagenⅠ、collagenⅡ、aggrecan的m RNA水平变化,Western blot检测collagenⅡ的表达变化。结果 Sox9对脐血干细胞形态无明显影响,与传统方法诱导组相比,Sox9转染后可明显促进脐血干细胞向软骨细胞分化。结论 Sox9对脐血干细胞的软骨分化有很强的调控作用,脐血干细胞可作为组织工程软骨一种良好的种子细胞。

关键词：脐血干细胞分化 Sox9基因

关节镜下多种移植物联合重建膝关节前、后交叉韧带

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现代生物医学进展 2011年第13期11卷 2458-2460页

作者：丁勇王育才吕科孙嗣国廖博李钊单乐群胡运生陈艳孙宏慧第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所陕西西安710038 西安交通大学医学院陕西西安710068

目的:评估关节镜下膝关节前交叉韧带(ACL)与后交叉韧带(PCL)同时重建的技术和临床效果。方法:自2003年6月～2009年10月,27例病人(28膝)经MRI检查及关节镜检查证实ACL和PCL均断裂,其中9膝伴内侧副韧带损伤(MCL),8膝伴后外侧角损伤(PLC),... 详细信息

目的:评估关节镜下膝关节前交叉韧带(ACL)与后交叉韧带(PCL)同时重建的技术和临床效果。方法:自2003年6月～2009年10月,27例病人(28膝)经MRI检查及关节镜检查证实ACL和PCL均断裂,其中9膝伴内侧副韧带损伤(MCL),8膝伴后外侧角损伤(PLC),5膝伴内侧半月板破裂,4膝伴外侧半月板损伤。27例患者于伤后3～10周在关节镜下行膝关节前、后交叉韧带联合重建。结果:本组术后早期均未发生严重并发症。术后随访12～88个月,平均(42.67±3.34)个月,Lysholm膝关节功能评分为78～93分,平均(86.67±5.21)分。国际膝关节文件编制委员会(IKDC)综合评定由术前显著异常(D级)28膝,改进为随访时正常(A级)9膝、接近正常(B级)16膝、异常(C级)3膝。结论:关节镜下膝关节前交叉韧带(ACL)与后交叉韧带(PCL)同时重建创伤小、手术操作精细,术后膝关节功能恢复满意。

关键词：膝关节韧带损伤前交叉韧带后交叉韧带关节镜

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后内侧松解足背皮瓣旋转治疗马蹄内翻足

中华小儿外科杂志 1996年第5期17卷 296-298,F003页

作者：胡月光陈永军王祖耀张国波蒋映兰雷敏褚先秋遵义医学院附属第一医院贵州省遵义市563003 西安公路交通大学医院外科

为了提高先天性马蹄内翻足的治疗效果，减少其并有症和复发率，对手术法进行改进。经后内侧松解足背皮瓣旋转治疗先天性马蹄内翻足２１例（３５足），其中８例（１３足）行内侧韧带重建。手术年龄５个月～３岁。随访１８例（３２足），... 详细信息

为了提高先天性马蹄内翻足的治疗效果，减少其并有症和复发率，对手术法进行改进。经后内侧松解足背皮瓣旋转治疗先天性马蹄内翻足２１例（３５足），其中８例（１３足）行内侧韧带重建。手术年龄５个月～３岁。随访１８例（３２足），根据足外形、踝关节活动度、步态、行走时疼痛和Ｘ线表现，并参照Ｊｅｒｒｙ等评估方法进行疗效评定。结果优２６足（８１％），良５足（１６％），差１足（３％）。改进后的手术方法使足内侧软组织松解满意，可在无张力下缝合内侧切口，跗骨关节能完全复位，增加了足内侧稳定性，减少了远期并发症和降低了复发率。

关键词：足畸形外科皮瓣跗关节内翻足外科手术儿童