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褪黑素对卵巢摘除大鼠体内炎症状态及BMSCs成骨能力影响的研究

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中国修复重建外科杂志 2023年第8期37卷 1011-1020页

作者：关焕帅曹若木赵奕威张杰闻李恒段续东李沂阳孔宁田润王坤正杨佩西安交通大学第二附属医院骨关节外科西安710004

目的探讨褪黑素(melatonin,MT)对卵巢摘除(ovariectomy,OVX)大鼠骨量、血清炎症因子水平和对脂多糖刺激下BMSCs培养液中炎症因子水平和成骨能力的影响。方法将15只12周龄SD大鼠随机分为3组,假手术组大鼠仅接受双侧侧腹部切开缝合,OVX组... 详细信息

目的探讨褪黑素(melatonin,MT)对卵巢摘除(ovariectomy,OVX)大鼠骨量、血清炎症因子水平和对脂多糖刺激下BMSCs培养液中炎症因子水平和成骨能力的影响。方法将15只12周龄SD大鼠随机分为3组,假手术组大鼠仅接受双侧侧腹部切开缝合,OVX组行双侧OVX,OVX+MT组在双侧OVX术后行100 mg/(kg·d)MT口服干预。8周后采用ELISA法检测大鼠血液样本中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平;用Micro-CT检测股骨远端,观察骨量及骨微结构变化并对骨体积分数、骨小梁厚度和骨小梁数量进行定量检测。取3只3周龄SD大鼠,采用全骨髓培养法提取股骨骨髓中的BMSCs并传代培养。经鉴定后取第3~5代细胞,用不同浓度(0、1、10、100、1000μmol/L)MT干预并行细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测细胞活力,筛选最佳浓度MT用于后续实验。将细胞分为成骨诱导组(A组)及成骨诱导+1/5/10μg/mL脂多糖组(B~D组),进行相应干预后用ELISA法检测细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平;根据CCK-8法和ELISA检测结果,用刺激炎症效果最显著浓度的脂多糖以及最佳药物浓度的MT加成骨诱导培养基对细胞进行干预,并设为E组,同样采用ELISA法检测各炎症因子表达水平;之后分别对A、D、E组行ALP染色和茜素红染色,并用实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)法检测成骨相关基因Ⅰ型胶原α1链(collagen typeⅠalpha 1 chain,Col1a1)、RUNX家族转录因子2(RUNX family transcription factor 2,Runx2)表达水平。结果ELISA和Micro-CT检测示,与假手术组比较,OVX组大鼠骨量减少,血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平升高(P<0.05);经MT治疗后,OVX+MT组上述指标均得到改善(P<0.05)。成功提取大鼠BMSCs,CCK-8法检测示100μmol/L是不影响细胞活性的最大MT浓度,将其用于后续实验。ELISA检测示,加入脂多糖刺激后,B~D组细胞培养液中的炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平明显升高,与A组比较差异均有统计学意义(P<0.05);并且呈浓度依赖性,D组各炎症因子表达水平明显高于B、C组(P<0.05);E组加入MT干预后,各炎症因子表达水平较D组显著降低(P<0.05)。ALP染色、茜素红染色及RT-qPCR检测示,与A组比较,D组ALP和茜素红阳性面积百分比以及Col1a1、Runx2 mRNA相对表达量均显著降低,经MT干预后E组上述指标均显著提升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论MT可能通过降低大鼠体内炎症对绝经后骨质疏松症的骨量产生影响;MT能降低脂多糖刺激引起的BMSCs炎症,并减弱其对BMSCs成骨分化的抑制。

关键词：褪黑素骨质疏松症炎症因子脂多糖成骨能力

形状记忆合金环抱器治疗Vancouver B2型股骨假体周围骨折

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中国修复重建外科杂志 2022年第10期36卷 1244-1248页

作者：李沂阳陈阳孔宁田润王坤正杨佩西安交通大学第二附属医院骨关节外科西安710004

目的探讨应用形状记忆合金环抱器治疗初次人工髋关节置换术后Vancouver B2型股骨假体周围骨折的疗效。方法回顾分析2019年1月—2021年1月收治且符合选择标准的30例(30髋)初次人工髋关节置换术后Vancouver B2型股骨假体周围骨折患者的临... 详细信息

目的探讨应用形状记忆合金环抱器治疗初次人工髋关节置换术后Vancouver B2型股骨假体周围骨折的疗效。方法回顾分析2019年1月—2021年1月收治且符合选择标准的30例(30髋)初次人工髋关节置换术后Vancouver B2型股骨假体周围骨折患者的临床资料。其中15例采用形状记忆合金环抱器固定骨折(A组),15例采用钛缆环扎固定骨折(B组)。两组患者性别、年龄、身体质量指数、初次置换原因及术式、假体类型、股骨假体周围骨折原因、骨折侧别、受伤至手术时间以及合并症等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。记录两组手术时间、术中出血量以及住院时间,X线片复查骨折愈合情况,采用Harris评分评价髋关节功能。结果两组手术均顺利完成;术后切口均Ⅰ期愈合,无血管、神经损伤等并发症发生。A组手术时间及住院时间均较B组缩短,差异有统计学意义(P<0.05);两组术中出血量比较,差异无统计学意义(t=-0.518,P=0.609)。两组患者均获随访,A组随访时间12~20个月,平均16.3个月;B组随访时间12~22个月,平均16.7个月。X线片复查示骨折均愈合,A组愈合时间为(14.73±2.05)周,B组为(17.27±2.60)周,组间差异有统计学意义(t=-2.960,P=0.006);随访期间均无假体松动、假体周围感染、关节僵硬以及内固定物松动等并发症发生。A组术后3、6、12个月时Harris评分均优于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论与钛缆环扎固定相比,采用形状记忆合金环抱器固定Vancouver B2型假体周围骨折可缩短手术时间、减少术中出血量并加速骨折愈合,术后患者可以及早进行功能锻炼,关节功能恢复更好。

关键词：股骨假体周围骨折形状记忆合金环抱器人工髋关节置换术并发症内固定

短链脂肪酸对先天性巨结肠模型小鼠的神经再生/保护效应

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中华小儿外科杂志 2023年第8期44卷 742-748页

作者：许文耀田东浩贾婉莹闫寒蕾黄晶晶刘威余辉高亚西安交通大学第二附属医院小儿外科西安710004

目的探讨短链脂肪酸对先天性巨结肠模型小鼠神经再生及保护效应。方法采用随机数字表法将18只Ednrb^(-/-)HSCR模型小鼠,分为空白组、正常对照组和短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)治疗组,每组6只;SCFAs治疗组Ednrb^(-/-)小鼠... 详细信息

目的探讨短链脂肪酸对先天性巨结肠模型小鼠神经再生及保护效应。方法采用随机数字表法将18只Ednrb^(-/-)HSCR模型小鼠,分为空白组、正常对照组和短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)治疗组,每组6只;SCFAs治疗组Ednrb^(-/-)小鼠生后第5天起每天给予0.1 ml SCFAs灌肠,持续1周。常规原代培养肠神经嵴前体细胞,SCFAs干预后采用细胞划痕愈合实验检测细胞迁移情况;建立肠神经嵴前体细胞氧化应激模型,结合CCK-8法检测其细胞增殖/活力;Ednrb^(-/-)免疫组化评估远端结肠神经节细胞分布情况。使用Graphpad Prism 8.0进行统计学分析。结果处理48 h后SCFAs组、正常对照组中肠神经嵴前体细胞来源神经球直径分别为(85.7±22.0)μm、(61.4±18.6)μm,SCFAs组神经球直径在100~150μm的神经球比例为28.3%,而正常对照组未出现直径在100~150μm的神经球;细胞划痕愈合实验中,SCFAs组愈合率为(35.4±4.5)%,正常对照组愈合率(20.2±1.7)%,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞氧化应激模型中正常对照组、氧化应激组以及氧化应激+SCFAs组中CCK-8 OD值分别为(0.55±0.02)、(0.44±0.01)、(0.61±0.03),差异有统计学意义(P<0.01)。SCFAs干预后,SCFAs组中位存活时间为21 d,正常对照组小鼠为10.5 d,差异具有统计学意义(P<0.01);正常对照组、Ednrb^(-/-)+SCFAs组小鼠Hu c/d阳性细胞密度分别为(950.3±72.1)、(205.7±11.0)个/mm2,空白组无阳性细胞,差异具有统计学意义(P<0.01);Tuj1阳性神经纤维密度分别是(32.9±1.4)%、(1.7±0.3)%、(8.4±0.4)%,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论SCFAs组的肠神经嵴前体细胞在增殖、迁移、氧化应激方面具有统计学意义;Ednrb^(-/-)+SCFAs组小鼠在存活时间、Hu c/d阳性细胞数量、神经纤维密度具有统计学意义,提示SCFAs对先天性巨结肠模型小鼠神经具有再生及保护效应。

关键词：短链脂肪酸先天性巨结肠肠神经系统神经再生/保护

先天性巨结肠肠道微环境异常及其临床转化潜能

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中华小儿外科杂志 2023年第8期44卷 752-758页

作者：余辉潘伟康高亚西安交通大学第二附属医院小儿外科西安710004

细胞移植是根治先天性巨结肠的潜在策略,但目前遭遇多种瓶颈,迫切需要"追根溯源"提高再认识水平。除神经节缺失、外源性神经纤维代偿性肥大增粗之外,先天性巨结肠还存在多种肠道微环境的异常。本综述拟从先天性巨结肠存在的多种肠道微... 详细信息

细胞移植是根治先天性巨结肠的潜在策略,但目前遭遇多种瓶颈,迫切需要"追根溯源"提高再认识水平。除神经节缺失、外源性神经纤维代偿性肥大增粗之外,先天性巨结肠还存在多种肠道微环境的异常。本综述拟从先天性巨结肠存在的多种肠道微环境异常着手,探寻其中"蕴含"具有神经再生潜能的施万前体细胞以及肠道微环境代谢产物短链脂肪酸、胶质细胞源性神经营养因子等,这些多效功能因子能够激发神经再生/保护效应,提高先天性巨结肠的临床转化潜能。

关键词：先天性巨结肠神经再生肠神经嵴前体细胞肠道微环境

白介素-17通过拮抗γ-干扰素的作用促进小鼠肝癌细胞的生长与增殖

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南方医科大学学报 2019年第1期39卷 1-5页

作者：李杰闫堃杨屹李华王志东徐心西安交通大学第二附属医院普外科陕西西安710004

目的探讨白介素(IL-17)与γ-干扰素(IFN-γ)的相互作用对小鼠肝癌细胞Hepa1-6生长的影响。方法 IL-17单独或与IFN-γ联合干预小鼠Hepa1-6细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期分布情况,Western blot检测细胞增殖相关... 详细信息

目的探讨白介素(IL-17)与γ-干扰素(IFN-γ)的相互作用对小鼠肝癌细胞Hepa1-6生长的影响。方法 IL-17单独或与IFN-γ联合干预小鼠Hepa1-6细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期分布情况,Western blot检测细胞增殖相关蛋白PCNA、Cyclin D1、P21及P16的表达,以及胞内信号分子p38MAPK、ERK1/2和Stat1的磷酸化水平。结果 IFN-γ可显著抑制Hepa1-6细胞的生长,明显增加细胞G0/G1期的比例,同时减少PCNA和Cyclin D1蛋白,并增加P21蛋白的表达。IL-17单独应用不影响Hepa1-6细胞的生长,但它可显著拮抗IFN-γ的作用。与IFN-γ单独处理组相比,IL-17与IFN-γ联用可以显著降低细胞G0/G1期的比例;明显增加PCNA和Cyclin D1,同时降低P21蛋白的表达。IL-17不影响细胞Stat1的磷酸化水平,但可以抑制IFN-γ所引发的p38MAPK及ERK1/2的磷酸化。结论 IL-17可与IFN-γ的作用相拮抗从而显著促进肝癌细胞的生长。

关键词：白介素-17 干扰素-γ 原发性肝癌

机器人辅助髓芯减压联合植骨治疗早期股骨头坏死

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中华骨科杂志 2023年第1期43卷 16-22页

作者：田润杨佩王春生王坤正西安交通大学第二附属医院骨关节外科西安710004

目的探讨骨科机器人辅助髓芯减压联合植骨治疗早期股骨头坏死的临床疗效。方法回顾性分析2019年8月至2021年2月于西安交通大学第二附属医院骨关节外科就诊的49例(84髋)国际骨循环研究会(Association Research Circulation Osseous,ARCO... 详细信息

目的探讨骨科机器人辅助髓芯减压联合植骨治疗早期股骨头坏死的临床疗效。方法回顾性分析2019年8月至2021年2月于西安交通大学第二附属医院骨关节外科就诊的49例(84髋)国际骨循环研究会(Association Research Circulation Osseous,ARCO)Ⅱ期股骨头坏死接受髓芯减压联合植骨术的患者资料,其中采用常规髓芯减压植骨术(常规手术组)30例(54髋),男19例、女11例,年龄(44.3±5.4)岁(范围21~59岁);采用骨科机器人导航系统辅助手术(机器人辅助组)的患者19例(30髋),男12例、女7例,年龄(41.4±7.2)岁(范围20~58岁)。所有患者入院时术者告知患者常规手术及机器人手术方案,由患者自主选择,所有操作由同一组医生完成。统计两组患者的基线资料、单侧手术时间、单侧X线透视次数、术后及末次随访时的Harris髋关节功能评分、疼痛视觉模拟评分(visual analog score,VAS)、末次随访时的股骨头塌陷率。结果共41例患者(70髋)获得随访,随访时间为(14.6±4.8)个月(范围3~21个月),其中常规手术组24例(42髋)、机器人辅助组17例(28髋)。至末次随访时,共13例(13髋)出现了股骨头表面塌陷,其中常规手术组11例、机器人辅助组2例,两组股骨头塌陷率的差异有统计学意义(P=0.045)。常规手术组单侧髋关节手术时间为(21.3±5.4)min,大于机器人辅助组的(16.8±3.3)min,差异有统计学意义(t=3.94,P<0.001)。常规手术组单侧髋关节X线透视次数为(14.4±3.8)次,大于机器人辅助组的(9.6±2.1)次,差异有统计学意义(t=6.08,P<0.001)。常规手术组术前Harris髋关节功能评分为(68.4±4.5)分,末次随访时升高至(85.1±3.8)分;机器人辅助组术前Harris髋关节功能评分为(67.2±3.9)分,末次随访时升高至(86.5±4.4)分。两组患者末次随访时Harris髋关节功能评分均较术前改善,但组间差异无统计学意义(t=1.09,P=0.283);常规手术组术前髋关节VAS为(4.8±1.7)分,末次随访时降低至(1.7±0.8)分;机器人辅助组术前髋关节VAS为(5.1±1.5)分,末次随访时降低至(0.9±0.3)分。两组末次随访时VAS较术前降低,且组间差异有统计学意义(t=3.92,P<0.001)。结论髓芯减压联合植骨治疗ARCOⅡ期股骨头坏死疗效确切。与常规手术相比,骨科机器人辅助手术可以获得更满意的短期疗效和保头率。

关键词：股骨头坏死机器人手术骨移植减压术,外科

糖酵解产物乳酸对M_(2)-肿瘤相关巨噬细胞亚群重塑作用的研究

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现代肿瘤医学 2022年第14期30卷 2504-2508页

作者：崔熙娟乔莉娜单涛陈硕杨屹张迪西安交通大学第一附属医院普外科陕西西安710061 西安交通大学第二附属医院普外科陕西西安710004

目的:研究糖酵解产物乳酸对巨噬细胞表型极化的影响。方法:我们选取人单核/巨噬细胞系THP-1,乳酸处理后采用RT-PCR、Western blot、免疫荧光染色激光共聚焦、ELISA等手段,观察指标:CD68、CD163变化;分泌因子:TNF-α、IFN-γ、IL-12、IL... 详细信息

目的:研究糖酵解产物乳酸对巨噬细胞表型极化的影响。方法:我们选取人单核/巨噬细胞系THP-1,乳酸处理后采用RT-PCR、Western blot、免疫荧光染色激光共聚焦、ELISA等手段,观察指标:CD68、CD163变化;分泌因子:TNF-α、IFN-γ、IL-12、IL-10变化。结果:15 mmol/L浓度的乳酸可显著上调巨噬细胞M_(2)型标志分子CD163的表达(P<0.05),上调M_(2)-TAM分泌因子IFN-γ和IL-10的表达(P<0.05),下调M_(1)-TAM分泌因子TNF-α和IL-12的表达(P<0.05)。结论:乳酸可重塑巨噬细胞向M_(2)-TAM亚群分布,揭示肿瘤细胞糖酵解产生乳酸可能通过重塑巨噬细胞表型发挥重要的促瘤作用。

关键词：巨噬细胞肿瘤微环境乳酸

胸腔镜联合3D打印生物可降解气管外支架治疗复发性气管食管瘘

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中华小儿外科杂志 2023年第11期44卷 980-985页

作者：刘瑶余强郭询吉祥苗春林贺健康李鹏西安交通大学第二附属医院小儿外科西安710004 西安交通大学第二附属医院胸外科西安710004 西安交通大学机械制造系统工程国家重点实验室西安710054

目的探讨胸腔镜联合个体化3D打印生物可降解气管外支架治疗复杂的复发性气管食管瘘的可行性和安全性。方法收集2022年1月至2022年8月在西安交通大学第二附属医院小儿外科治疗的7例复发性气管食管瘘(recurrent tracheoesophageal fistula... 详细信息

目的探讨胸腔镜联合个体化3D打印生物可降解气管外支架治疗复杂的复发性气管食管瘘的可行性和安全性。方法收集2022年1月至2022年8月在西安交通大学第二附属医院小儿外科治疗的7例复发性气管食管瘘(recurrent tracheoesophageal fistula,rTEF)患儿的临床资料,其中女2例,男5例,年龄在4个月至10岁。依据术前胸部薄层CT(0.5 mm)进行气道三维重建并设计个体化支气管外支架,于西安交通大学机械制造系统工程国家重点实验室3D打印制作。所有患儿均接受胸腔镜气管食管瘘修补术联合3D打印生物可降解气管外支架置入术,支架于瘘管水平包绕气管并固定于气管软骨。结果7例患儿均成功完成胸腔镜气管食管瘘修补术及个体化3D打印生物可降解气管外支架置入术。手术时间为120~200 min,术后机械通气时间为5~11 d,监护病房住院日6~13 d,总住院日14~37 d。2例术后出现吻合口瘘,经保守治疗后痊愈。随访10~15个月时,7名患儿均未见气管食管瘘复发。结论胸腔镜气管食管瘘修补术联合3D打印可降解气管外支架可阻止rTEF黏膜管道的再通,可预防rTEF的复发,安全可行。

关键词：气管食管瘘胸腔镜三维打印生物可降解支架

国产人工智能与骨科机器人在关节置换手术中的应用现状与前景

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中华骨科杂志 2023年第1期43卷 1-4页

作者：王坤正西安交通大学第二附属医院骨关节外科西安710004

近年来,人工智能与骨科机器人作为医疗领域的研究热点以及重要发展方向,为骨科手术提供了精确的术前规划以及手术导航。人工智能与骨科机器人可以真正实现关节置换手术精准化。人工智能在关节疾病影像诊断、图像分割、术前规划等方面具... 详细信息

近年来,人工智能与骨科机器人作为医疗领域的研究热点以及重要发展方向,为骨科手术提供了精确的术前规划以及手术导航。人工智能与骨科机器人可以真正实现关节置换手术精准化。人工智能在关节疾病影像诊断、图像分割、术前规划等方面具有巨大的优势,通过更加精确的智能图像分割、更加快捷准确的术前规划可有效降低复杂初次关节置换及翻修术的手术难度,降低临床医生与工程师的沟通成本,理论上可以提高假体选择的准确性。骨科机器人基于X线片或CT扫描信息,在精准术前规划的基础上进行术中的精准骨骼操作,避免术者经验及操作带来的偏差,实现不同级别医生手术水平的同质化,降低关节置换手术的学习曲线,在复杂手术中具有理论上的优势。

关键词：人工智能机器人手术关节成形术,置换