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植物甾醇生理功能的线粒体调控机制

生物化学与生物物理进展 2018年第12期45卷 1240-1249页

作者：楼静崔亚娟刘健康赵琳西安交通大学生命科学与技术学院线粒体生物医学研究所生物医学信息工程教育部重点实验室西安710049

植物甾醇是一类在植物中广泛存在的生物活性物质,在食品、医药、化妆品等领域具有广阔应用前景.植物甾醇作为胆固醇类似物可抑制胆固醇肠道吸收进而降低血液中胆固醇水平、降低心血管疾病风险;此外,植物甾醇还具有抑癌、抗炎退热、抗氧... 详细信息

植物甾醇是一类在植物中广泛存在的生物活性物质,在食品、医药、化妆品等领域具有广阔应用前景.植物甾醇作为胆固醇类似物可抑制胆固醇肠道吸收进而降低血液中胆固醇水平、降低心血管疾病风险;此外,植物甾醇还具有抑癌、抗炎退热、抗氧化和类激素等多种功能.从亚细胞及分子水平深入探究植物甾醇的生物作用机制有助于充分开发植物甾醇的应用价值.线粒体是细胞能量物质代谢最重要的场所,胆固醇代谢、癌细胞增殖与凋亡、氧化应激和炎症反应等都与线粒体功能密切相关.近年来研究提示植物甾醇可在多种模型中调控线粒体功能,这可能是植物甾醇发挥各种生物学功能的重要潜在机制.本文将首先整理归纳植物甾醇生物学功能,并在此基础上详细讨论其线粒体相关调控机制,以期为领域内基础研究者提供前沿思路和进展报告,并为植物甾醇的应用提供参考依据.

关键词： β-谷甾醇胆固醇抗癌线粒体膜电位抗氧化酶

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酮体代谢与阿尔茨海默病

生物化学与生物物理进展 2015年第4期42卷 323-328页

作者：时乐龙建纲刘健康西安交通大学生命科学与技术学院线粒体生物医学研究所生物医学信息工程教育部重点实验室西安710049

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是老年痴呆症的一种主要类型,也是神经退行性疾病中发病率最高的一种疾病.随着我国老龄人口的持续上升,AD患者人数也呈增长趋势.研究表明,脑内葡萄糖代谢的降低远早于β淀粉样沉淀发生,而酮体是脑... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是老年痴呆症的一种主要类型,也是神经退行性疾病中发病率最高的一种疾病.随着我国老龄人口的持续上升,AD患者人数也呈增长趋势.研究表明,脑内葡萄糖代谢的降低远早于β淀粉样沉淀发生,而酮体是脑内替代葡萄糖的主要能量来源.因此,脑中能量代谢底物转换为酮体是AD早期代谢特征.目前,AD病理进程中酮体调控的机制还不清楚.深入了解AD发生、发展过程中酮体代谢的分子机制,对于寻找AD早期诊断标志物、探索AD的防治方法具有重要意义.本文就酮体代谢及其在AD中的研究进展进行综述.

关键词：酮体线粒体阿尔茨海默病

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葛根素对内皮细胞增殖及粘附分子表达的影响

陕西中医 2002年第2期23卷 148-149页

作者：李敏杰刘勇马琳丁海燕吕海侠西安交通大学医学院神经生物研究中心 710061

研究葛根素对脑微血管内皮细胞增殖及粘附分子 ICAM- 1表达的影响 ,为脑血管疾病的病理过程提供理论依据。不同浓度的葛根素与内皮细胞孵育 2 4 h后 ,采用 MTT法检测细胞的活度 ;用 TNF- α和 IL- 1 β诱导培养的 SD大鼠脑微血管内皮细... 详细信息

研究葛根素对脑微血管内皮细胞增殖及粘附分子 ICAM- 1表达的影响 ,为脑血管疾病的病理过程提供理论依据。不同浓度的葛根素与内皮细胞孵育 2 4 h后 ,采用 MTT法检测细胞的活度 ;用 TNF- α和 IL- 1 β诱导培养的 SD大鼠脑微血管内皮细胞 ,和以葛根素处理后的内皮细胞 ,再用 TNF- α和 IL- 1 β诱导 ,采用 CEL L- EL ISA法检测粘附分子 ICAM- 1的表达。结果表明 ,TNF-α和 IL- 1 β可提高 ICAM- 1的表达 ;葛根素促进内皮细胞增殖且可抑制TNF- α和 IL- 1 β诱导的粘附分子表达。

关键词：脑血意外中医药疗法脑血管疾病内皮细胞增殖粘附分子葛根素 ICAM-1 表达

白介素2在小鼠分支选择损伤神经源性疼痛模型中的镇痛作用

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南方医科大学学报 2007年第8期27卷 1180-1182页

作者：刘珊史霖王军阳范桂香袁育康西安交通大学医学院免疫与病原生物学系

目的研究白介素2(IL-2)在小鼠分支选择损伤(SNI)神经痛模型中的镇痛作用。方法制作小鼠SNI模型成功后,用Von Frey Filaments刺激法和冷盘法测定腹腔给予IL-2的镇痛作用,并测定阿片肽受体拮抗剂纳洛酮对其镇痛作用的阻断。结果(1)IL-2的... 详细信息

目的研究白介素2(IL-2)在小鼠分支选择损伤(SNI)神经痛模型中的镇痛作用。方法制作小鼠SNI模型成功后,用Von Frey Filaments刺激法和冷盘法测定腹腔给予IL-2的镇痛作用,并测定阿片肽受体拮抗剂纳洛酮对其镇痛作用的阻断。结果(1)IL-2的镇痛作用在给药后30min出现,75min时消失,105min后又再次出现,可维持24h以上。(2)纳洛酮可以完全阻断IL-2的镇痛作用。结论(1)IL-2在小鼠SNI模型中具有镇痛作用,且镇痛作用呈双峰现象,持续时间较长。(2)IL-2的镇痛作用可能通过阿片受体传导。

关键词：白介素2 SNI模型神经源性疼痛镇痛

Koch三角心肌细胞瞬间外向钾电流电生理学特征研究

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四川大学学报（医学版） 2009年第6期40卷 988-993页

作者：任付先牛小麟韩振华欧研凌凤东周仕胜李雅杰河南省濮阳市油田总医院心内科濮阳457001 西安交通大学医学院附属第二医院心内科西安交通大学医学院解剖学教研室大连大学医学研究中心

目的探讨Koch三角区心肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)电生理学特征。方法采用单细胞膜片钳技术研究家兔Koch三角区心肌细胞Ito电流-电压及电流密度-电压关系曲线、稳态激活以及稳态失活特征。结果①起搏细胞(PC)、过渡细胞α(TCα)、过渡细... 详细信息

目的探讨Koch三角区心肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)电生理学特征。方法采用单细胞膜片钳技术研究家兔Koch三角区心肌细胞Ito电流-电压及电流密度-电压关系曲线、稳态激活以及稳态失活特征。结果①起搏细胞(PC)、过渡细胞α(TCα)、过渡细胞β(TCβ)、心房肌细胞(AC)和浦肯野样细胞(PL)+20 mV时的最大峰值电流(pA)幅值及峰值电流密度(pA/pF)任意两类细胞间差异均有统计学意义(P0.05),各类细胞两两比较电流密度(pA/pF)差异均有统计学意义(P0.05)。③五种细胞稳态失活曲线之半数失活电压(VhIto1/2,mV)TCα、TCβ与PC和PL分别相比以及PC、AC、PL间相比差异均有统计学意义(P0.05)。结论家兔Koch三角区各种心肌细胞之Ito存在异质性;不同心肌细胞间又具有相对特殊性及Ito梯度。

关键词：心律失常 Ito 膜片钳离子通道动力学

单分子生物物理技术在神经递质释放研究中的应用

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生物化学与生物物理进展 2016年第10期43卷 946-951页

作者：田芷淇胡亚冲龙建纲刘健康刁佳杰西安交通大学生命科学与技术学院线粒体生物医学研究所生物医学信息工程教育部重点实验室西安710049

神经递质的释放在神经信号传导中起着至关重要的作用.神经递质释放严格依赖SNARE蛋白的动态组装和钙离子触发的膜融合过程.最新研究发现,神经递质释放还受到神经退行性疾病中关键的标志蛋白分子的影响.当前研究者以体外膜融合重组体系... 详细信息

神经递质的释放在神经信号传导中起着至关重要的作用.神经递质释放严格依赖SNARE蛋白的动态组装和钙离子触发的膜融合过程.最新研究发现,神经递质释放还受到神经退行性疾病中关键的标志蛋白分子的影响.当前研究者以体外膜融合重组体系为基础,发展了多种单分子生物物理技术,为进一步阐明神经递质释放的分子机制和神经退行性疾病的发病机理提供了新的视角和手段.

关键词：单分子生物物理技术神经递质释放膜融合神经退行性疾病

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心脏搏血的生物力学和心电变化

医用生物力学 2012年第4期27卷 470-474页

作者：康甲顺西安交通大学医学院附属高新医院心内科西安710075

心电学和心脏力学虽然经历了巨大进展,但有关基本理论却长期止步不前,心电变化的相关研究仍存在诸多难点。鉴于实验医学对微观量化方法存在过分依赖,同时心电变化和心脏机械运动长期被视为两个独立的过程,本文首先从宏观角度探讨心脏收... 详细信息

心电学和心脏力学虽然经历了巨大进展,但有关基本理论却长期止步不前,心电变化的相关研究仍存在诸多难点。鉴于实验医学对微观量化方法存在过分依赖,同时心电变化和心脏机械运动长期被视为两个独立的过程,本文首先从宏观角度探讨心脏收缩舒张时存在于整个弹性负荷系统中各种作用力的动态特征,然后通过在启动"兴奋-收缩偶联"之后心脏机械运动和心电变化始终存在前后定位关系这一事实,指出两个并存的过程实际上是一个完整事物的不同侧面。最后,对调控膜离子通道所涉及的各种电及力学因素综合加以考虑,整个心电变化过程即可被区分为3个不同性质的阶段;前驱性的兴奋形成及传导,收缩过程伴发的肌源性心电变化及最后由心脏快速弹性舒张促成的全面恢复。

关键词：心脏力学心电学弹力负荷系统心电变化机械运动

EGFRvIII/PEP-3 cDNA与HBcAg重组基因原核表达载体的构建、表达与免疫分析

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第1期23卷 21-24页

作者：段小艺王健生郭佑民韩俊丽王全颖杨广笑西安交通大学医学院第一附属医院核医学科陕西西安710061 西安交通大学医学院第二附属医院影像中心陕西西安710004 西安交通大学医学院西安华广生物工程公司陕西西安710025

目的:构建EGFRvIII与HBcAg重组基因的原核表达质粒,进行原核表达、纯化,观察表达蛋白的免疫原性和抗原性。方法:通过双酶切从pGEM-TEasy/PEP-3载体获得编码EGFRvIII突变区的cDNA片段,插入去除了主要免疫优势区的重组质粒pGEMEX/HBcAg中... 详细信息

目的:构建EGFRvIII与HBcAg重组基因的原核表达质粒,进行原核表达、纯化,观察表达蛋白的免疫原性和抗原性。方法:通过双酶切从pGEM-TEasy/PEP-3载体获得编码EGFRvIII突变区的cDNA片段,插入去除了主要免疫优势区的重组质粒pGEMEX/HBcAg中,获得重组质粒pGEMEX/c-PEP-3-c,将重组基因亚克隆于原核表达载体pET28a(+)中,通过IPTG诱导蛋白表达,利用Ni2+-NTA亲和层析法对融合蛋白进行纯化;用融合蛋白常规免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA检测小鼠血清中抗体的滴度。结果:经酶切鉴定、序列测定证实融合基因已插入pET28a(+)载体中,融合基因序列与设计序列完全一致。原核表达后表达量占沉淀全菌蛋白的56%,纯化产物占总蛋白的92%,浓度约8g/L。BALB/c小鼠经4次免疫后,其血清中中和抗体的滴度可达1∶16000,第6次免疫后血清中中和抗体的滴度达到1∶2.56×105,抗PEP-3抗体滴度达到1∶1.28×105,抗HBcAg抗体滴度小于1∶4×103。结论:融合基因PEP-3-HBcAg在大肠杆菌中可获得高效表达,表达的融合蛋白可以诱导小鼠产生高滴度和高特异性中和抗体,从而为高表达EGFRvIII恶性肿瘤基因工程疫苗的研究奠定基础。

关键词：重组基因 EGFRvⅢ HBcAg 原核表达免疫原性

基质金属蛋白酶2靶向穿膜肽表征分析及体外显像研究

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中华医学杂志 2007年第4期87卷 233-239页

作者：刘敏郭佑民王鹏郭晓娟杨军乐王嗣岑段小艺徐贵平西安交通大学医学院第二附属医院影像中心 710004 西安交通大学药学系

目的构建以基质金属蛋白酶2为靶点的穿膜肽,标记荧光素及顺磁性粒子,初步探讨体外成像价值。方法固相合成基质金属蛋白酶2(MMP-2)为靶点的可活化穿膜肽(CPPs),标记荧光素 FITC,构建荧光素分子探针 A;标记磁共振对比剂二亚乙基三胺五乙酸... 详细信息

目的构建以基质金属蛋白酶2为靶点的穿膜肽,标记荧光素及顺磁性粒子,初步探讨体外成像价值。方法固相合成基质金属蛋白酶2(MMP-2)为靶点的可活化穿膜肽(CPPs),标记荧光素 FITC,构建荧光素分子探针 A;标记磁共振对比剂二亚乙基三胺五乙酸钆(Gd-DTPA),构建磁共振分析探针 B。高效液相色谱纯化探针及质谱测定分子量。聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测定可活化穿膜肽的等电点。400 MHz 磁共振谱仪翻转恢复序列测定磁共振探针 B 的自旋-点阵弛缓时间(T_1);制备人肺癌细胞株 A549爬片,FITC 和荧光素分子探针 A 分别孵育细胞爬片30 min 倒置荧光显微镜观察细胞内荧光分布;抗 MMP-2单克隆抗体孵育细胞后,荧光素分子探针 A 孵育细胞后荧光显像及流式细胞分析细胞摄取的状况。明胶酶谱分析细胞表达 MMP-2的情况;以 A549为对象,120nmol/ml 磁共振探针 B 和常规磁共振对比剂分别作用于细胞10、30、60、90 min 后,1.5T MRI T_1WI 视觉评价法分析细胞内磁共振信号,并与空白细胞组比较,方差分析各组细胞信号变化特征。透射电镜分析磁共振探针 B 细胞内分布。结果采用标准的芴甲氧羰基合成方案,质谱鉴定荧光素分子探针A分子量3789.74;磁共振分子探针 B 分子量3911.93。测定聚丙烯酰胺等电聚焦电泳目的条带 pH值为11.005,即为可活化穿膜肽的等电点。17℃400 MHz 磁共振谱仪测定浓度为0.5 mmol/L 的 Gd-DTPA 与磁共振探针 B 去离子水溶液的纵向驰豫时间 T_1分别为0.052 s±0.01 s 和0.050 s±0.001 s,两种配合物自旋-晶格驰豫效能分别为4.998 L·mmol^(-)·s^(-1)及6.452 L·mmol^(-1)·s^(-1)。倒置荧光镜成像显示 FITC 作用细胞组内未见荧光素分布,荧光素探针 A 作用组 A549细胞质和细胞核内出现明显得荧光素分布。抗 MMP-2单克隆抗体孵育 A549后,荧光摄取减少。以明胶酶谱分析细胞无血清培养基中 MMP-2表达显示肿瘤表达酶原和活性酶两种形式。120 nmoL/ml 磁共振探针 B 和常规磁共振对比剂分别作用于 A549 10、30、60、90 min 后,MR FSE T_1WI 显示,磁共振探针 B 作用A549细胞组呈短 T_1高信号,Gd-DPTA 作用组与对照组呈等 T_1信号。各组细胞组感兴趣区信号与背景信号比值的方差分析显示,磁共振分子探针 B 作用五组细胞信号间差异有统计学意义(F=267.569,P0.05)。透射电镜显像示磁共振探针作用的肺癌细胞株 A549胞质及胞核里出现高电子密度的钆颗粒沉积,证实肿瘤细胞摄取磁共振探针 B。结论以 MMP-2为靶点的可活化穿膜肽,能够被活性基质金属蛋白酶激活,能够标记荧光探针和磁共振探针用于肿瘤细胞显像。

关键词：肽类基质金属蛋白酶造影剂