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鸡SLC基因超家族分析及其在蛋壳形成不同时期的表达特征

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南方农业学报 2023年第7期54卷 2101-2114页

作者：高志群虞霖田陆阳清广西大学动物科学技术学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530004

【目的】鉴定出在蛋壳形成过程中可能参与钙转运的溶质载体(SLC)基因超家族成员,并分析SLC基因在蛋壳形成不同时期的表达特征,为进一步探究SLC基因与蛋壳形成的相关性及揭示钙转运调控机制打下基础。【方法】基于NCBI和Ensembl数据库,... 详细信息

【目的】鉴定出在蛋壳形成过程中可能参与钙转运的溶质载体(SLC)基因超家族成员,并分析SLC基因在蛋壳形成不同时期的表达特征,为进一步探究SLC基因与蛋壳形成的相关性及揭示钙转运调控机制打下基础。【方法】基于NCBI和Ensembl数据库,检索并整理鸡SLC基因超家族全基因信息,通过ProtParam、Pfam、TBtool、NPS@:SOPMA、Euk-mPLoc 2.0及MEGA 11.0等在线软件进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR分析钙转运相关SLC基因在蛋壳形成不同时期的表达特征。【结果】鸡SLC基因超家族包括56个亚家族,分布在包括Z染色体在内的32条染色体上,其编码蛋白主要分布在内质网和细胞膜上,大多数为疏水的碱性蛋白,涵盖81种结构域,主要参与核苷酸、糖类、氨基酸、神经递质、无机离子及有机离子等物质的运输,其中与钙离子(Ca^(2+))相关的SLC亚家族基因有SLC4、SLC8、SLC9、SLC24和SLC30。SLC8和SLC24亚家族基因在进化分支上的亲缘关系很近,存在直接与Ca^(2+)转运的结构域,主要定位在细胞膜和内质网上。实时荧光定量PCR检测结果表明,控制Ca^(2+)的SLC8和SLC24基因在产蛋鸡子宫部的表达显著高于未产蛋鸡(P<0.05,下同),进一步说明二者确实参与调控Ca^(2+)跨膜运输,但各成员间分工有所不同。【结论】鸡SLC基因超家族编码产物多为疏水的碱性蛋白,含有结合多种物质的结构域,定位于细胞或多种亚细胞结构膜上,表明SLC家族蛋白成员参与多种物质的跨膜转运过程。其中,SLC8和SLC24亚家族基因在蛋壳形成过程中协同调控Ca^(2+)从内质网释放并完成跨膜运输,分泌到输卵管子宫部而参与蛋壳的形成。

关键词：鸡 SLC基因超家族蛋壳形成钙转运表达特征

鼠源Desmin基因克隆表达及其生物信息学分析

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南方农业学报 2023年第2期54卷 609-617页

作者：张文李梦茹王菁张传亮段辰星宋丹丹黄茂发罗廷荣梁晶晶李晓宁广西大学动物科学技术学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530004

【目的】构建鼠源III型中间丝蛋白Desmin真核/原核表达载体,明确鼠源Desmin蛋白生物学功能,为在体外及细胞内表达系统中鉴定Desmin互作蛋白及探索其作用网络提供理论依据。【方法】通过RT-PCR克隆Desmin基因,分别构建原核表达载体pGEX-4... 详细信息

【目的】构建鼠源III型中间丝蛋白Desmin真核/原核表达载体,明确鼠源Desmin蛋白生物学功能,为在体外及细胞内表达系统中鉴定Desmin互作蛋白及探索其作用网络提供理论依据。【方法】通过RT-PCR克隆Desmin基因,分别构建原核表达载体pGEX-4T-1-Desmin-Flag和真核表达载体pcDNA3.0-Desmin-Flag,以IPTG对原核表达载体进行诱导表达,并通过ProtParam、ProtScale、TMHMM-2.0、SignalP-5.0、SOPMA和SWISS-MODEL等在线软件对Desmin蛋白进行生物信息学分析。【结果】鼠源Desmin基因长1410 bp,选用pGEX-4T-1载体和pcDNA3.0载体分别成功构建了原核表达载体pGEX-4T-1-Desmin-Flag和真核表达载体pcDNA3.0-Desmin-Flag。原核表达载体pGEX-4T-1-Desmin-Flag转化大肠杆菌后经IPTG诱导,成功表达出70 kD的融合蛋白Desmin-Flag;真核表达载体pcDNA3.0-Desmin-Flag转染BHK-21细胞,通过Western blotting在56 kD处检测到Flag标签,即Desmin蛋白能在真核细胞成功表达,且主要定位在细胞质。Desmin蛋白由470个氨基酸残基组成,分子量为54 kD,分子式为C2299H3722N688O755S13,理论等电点(pI)为5.21,属于不稳定蛋白;蛋白脂溶系数为79.94,平均亲水系数(GRAVY)为-0.721,推测为亲水性蛋白;无跨膜结构域和信号肽;其二级结构由α-螺旋(占67.59%)、无规则卷曲(占22.39%)、β-转角(占1.92%)和延伸链(占8.10%)构成。【结论】鼠源Desmin蛋白在原核表达体系中主要以包涵体形式进行表达,在真核细胞中表达主要定位于细胞质,呈骨架结构分布,其理化性质不稳定,属亲水性蛋白,无跨膜结构域和信号肽。Desmin作为一种重要的III型中间丝蛋白,在神经肌肉组织信号转导及与相关蛋白发生相互作用方面发挥重要作用。

关键词：鼠源 Desmin基因原核表达真核表达生物信息学分析

罗汉果甜苷V对持续光照小鼠脂肪积累的缓解作用

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南方农业学报 2022年第9期53卷 2624-2633页

作者：刘嘉昊王金兴胡俊杰冯明蒋慧敏李孟琪卢克焕杨小淦梁兴伟广西大学动物科学技术学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530004

【目的】探究罗汉果甜苷V(MV)缓解持续光照导致小鼠脂肪积累的作用,为罗汉果在畜禽健康养殖中的应用提供参考依据。【方法】以15周龄雄性C57BL/6小鼠为研究对象,随机分为对照组(12 h光照∶12 h黑暗)、持续光照组(24 h光照)及持续光照添... 详细信息

【目的】探究罗汉果甜苷V(MV)缓解持续光照导致小鼠脂肪积累的作用,为罗汉果在畜禽健康养殖中的应用提供参考依据。【方法】以15周龄雄性C57BL/6小鼠为研究对象,随机分为对照组(12 h光照∶12 h黑暗)、持续光照组(24 h光照)及持续光照添加MV处理组(每日灌胃100 mg/kg的MV),试验周期为5周。试验期间监测小鼠体质量和采食量,并检测其体脂率和能量代谢水平;试验结束后处死小鼠,采集腹股沟白色脂肪(iWAT)和附睾白色脂肪(e WAT)进行称重,通过苏木精—伊红(H-E)染色观察脂肪细胞形态学特征,并以实时荧光定量PCR检测脂肪组织中脂肪代谢及能量代谢相关基因的表达情况。【结果】在整个试验过程中,各处理组小鼠的体质量与采食量均无显著差异(P>0.05),但持续光照能导致小鼠体脂率极显著升高(P<0.01,下同),而氧气消耗量、二氧化碳排出量及产热量等基础代谢参数均极显著降低,iWAT和eWAT的百分比及细胞直径均极显著增大;iWAT和eWAT中的脂肪合成相关基因(Fabp4、Pparg2和Zfp423)相对表达量极显著上调,脂肪分解相关基因Lpl相对表达量极显著下调,能量代谢基因(Sirt1和Ppargc1a)相对表达量显著(P<0.05)或极显著下调,炎症反应相关基因Nfkb1相对表达量极显著上调。经MV处理后能使持续光照小鼠上述变化指标均恢复至正常水平,即MV能有效改善持续光照导致的小鼠能量代谢紊乱、缓解脂肪累积,以及缓解脂肪代谢、能量代谢及炎症反应相关基因的异常表达。【结论】持续光照会在不改变能量摄入的情况下导致机体脂肪积累,影响机体的正常代谢和健康。MV通过调控Sirt1、Ppargc1a等重要代谢相关基因表达,改善机体代谢紊乱,并通过促进脂肪分解和抑制脂肪合成相关基因表达,有效缓解持续光照导致的小鼠脂肪积累。

关键词：罗汉果甜苷V(MV) 持续光照小鼠脂肪积累代谢紊乱

低氧对水牛卵泡内膜细胞雄激素合成能力的影响

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中国兽医学报 2022年第2期42卷 349-354页

作者：张俊陈梦佳闫茜陈莫斯楠李政达卢嘉卡石德顺陆凤花广西大学动物科学技术学院亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530004

本研究采用低氧(5%O_(2))条件培养水牛内膜细胞,探讨低氧对水牛内膜细胞雄激素合成的影响。结果显示,低氧能显著提高水牛内膜细胞雄激素合成相关基因(CYP11A1、CYP17A1和3β-HSD)表达和睾酮分泌水平(P<0.05);低氧能显著增强水牛内膜细... 详细信息

本研究采用低氧(5%O_(2))条件培养水牛内膜细胞,探讨低氧对水牛内膜细胞雄激素合成的影响。结果显示,低氧能显著提高水牛内膜细胞雄激素合成相关基因(CYP11A1、CYP17A1和3β-HSD)表达和睾酮分泌水平(P研究为进一步探讨水牛卵泡发育类固醇激素分泌机制提供一定理论依据。

关键词：低氧水牛内膜细胞雄激素合成

融合课程思政的动物繁殖学混合式教学探索与实践

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黑龙江畜牧兽医 2021年第19期 140-144页

作者：伏彭辉韩燕国罗宗刚刘安芳周沛西南大学动物科学技术学院重庆402460

在当今人工智能和信息化技术发展的推动下,高等教育改革也不断向着更智慧的方向发展。线上线下混合式教学法既保留了传统课堂教学的优点,又将课堂延伸到课外线上,充分调动了学生的自主学习积极性。文章就动物繁殖学课程运用雨课堂平台,... 详细信息

在当今人工智能和信息化技术发展的推动下,高等教育改革也不断向着更智慧的方向发展。线上线下混合式教学法既保留了传统课堂教学的优点,又将课堂延伸到课外线上,充分调动了学生的自主学习积极性。文章就动物繁殖学课程运用雨课堂平台,结合优质慕课资源,融合课程思政,实现线上线下混合式教学模式的探索进行了阐述,并以人工授精技术章节为例详细展示了混合式教学的课前、课中、课后的设计与实施过程,希望以此抛砖引玉为推动本科教学改革作出初步探索。

关键词：混合式教学慕课雨课堂课程思政课程考核

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转基因猪研究新进展

安徽农业科学 2014年第15期42卷 4650-4652,4655页

作者：孙武娜日苏西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室/重庆市草食动物资源保护与利用工程技术研究中心重庆400716

由于猪既是重要的经济动物,又是常用的实验动物,并且因为其解剖、组织、生理和营养代谢等方面与人类相似,因此转基因猪的研究意义重大。纵观转基因猪的发展历史,关键核心技术包括显微注射技术、体细胞核移植技术、精子载体技术、胚胎干... 详细信息

由于猪既是重要的经济动物,又是常用的实验动物,并且因为其解剖、组织、生理和营养代谢等方面与人类相似,因此转基因猪的研究意义重大。纵观转基因猪的发展历史,关键核心技术包括显微注射技术、体细胞核移植技术、精子载体技术、胚胎干细胞介导技术、病毒转染技术、基因打靶、ZFN技术和TALENS技术。科学家们通过这些技术对猪进行了大量研究,已经在生命科学领域取得了令人欣慰的成就。

关键词：转基因猪基因打靶锌指核酸酶 RNA干扰转录激活因子效应物核酸酶

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中国南方养羊业的发展现状、潜力和建议

中国草食动物科学 2016年第4期36卷 58-62页

作者：熊小燕徐恢仲张继攀谭晓山赵永聚西南大学动物科技学院重庆400715 重庆市牧草与草食家畜重点实验室重庆400715 重庆市草食动物资源保护与利用工程技术研究中心重庆400715

我国南方广大地区,水热条件优越,羊品种资源和饲草料资源丰富,养羊业近年来获得了长足发展。文章统计分析了中国南方15个省(自治区、直辖市)近年的羊存栏量、出栏量、羊肉产量、羊业产值、羊品种资源、草地面积和秸秆资源等情况,深入探... 详细信息

我国南方广大地区,水热条件优越,羊品种资源和饲草料资源丰富,养羊业近年来获得了长足发展。文章统计分析了中国南方15个省(自治区、直辖市)近年的羊存栏量、出栏量、羊肉产量、羊业产值、羊品种资源、草地面积和秸秆资源等情况,深入探讨了养羊业存在的问题,并提出发挥资源优势,逐步实现南方养羊业的品种良种化、草场改良化、生产标准化、管理科学化和经营专业化的发展措施和建议。

关键词：南方羊遗传资源饲草资源发展措施

狂犬病病毒GX074株P-M^(S20F)突变体构建及其生长特性鉴定

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南方农业学报 2024年第1期55卷 253-262页

作者：彭璟李文芳陆丽莹韦显凯李晓宁罗廷荣广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁530004

【目的】明确狂犬病病毒(RABV)强毒株GX074的P蛋白和M蛋白第20位苯丙氨酸(Phe)替换至弱毒株r RC-HL的重组突变体在宿主细胞内的生长特性,为P蛋白和M蛋白转录复制机理研究提供理论依据。【方法】运用反向遗传技术以强毒株GX074的M蛋白第2... 详细信息

【目的】明确狂犬病病毒(RABV)强毒株GX074的P蛋白和M蛋白第20位苯丙氨酸(Phe)替换至弱毒株r RC-HL的重组突变体在宿主细胞内的生长特性,为P蛋白和M蛋白转录复制机理研究提供理论依据。【方法】运用反向遗传技术以强毒株GX074的M蛋白第20位Phe替换弱毒株r RC-HL(GX074P)的M蛋白第20位丝氨酸(Ser),构建r RC-HL(GX074P-M^(S20F))突变体感染性c DNA克隆并拯救病毒。以重组突变体感染BSR/T7-9细胞,进行多步生长曲线测定,比较重组突变体与亲本毒株的生长能力,采用Western blotting检测N蛋白、P蛋白和M蛋白相对表达水平,利用实时荧光定量PCR检测N基因、P基因和M基因的相对表达量。【结果】经RT-PCR和测序鉴定,拯救的突变体r RC-HL(GX074P-M^(S20F))M蛋白第20位Ser成功替换为Phe。多步生长曲线测定结果显示,构建的重组突变体在感染24、48、72和96 h后,病毒滴度均高于亲本弱毒株r RC-HL和对照弱毒株r RC-HL(GX074PM1),平均约为亲本弱毒株r RC-HL的10倍。在蛋白表达水平上,r RC-HL(GX074P-M^(S20F))毒株在感染48 h后,N蛋白和M蛋白相对表达水平均极显著高于亲本弱毒株r RC-HL(P<0.01),说明强毒株GX074的P蛋白联合M蛋白第20位Phe替换至弱毒株r RC-HL后,增加了突变体N蛋白和M蛋白表达。感染24和48 h后,r RC-HL(GX074P-M^(S20F))毒株N基因、P基因和M基因的相对表达量均高于亲本弱毒株r RC-HL和对照弱毒株r RC-HL(GX074PM1)。【结论】强毒株GX074的M蛋白第20位Phe替换可提高病毒的增殖能力,同时增强病毒的复制与转录能力,M蛋白第20位Phe可能是影响病毒复制和转录的关键位点。

关键词：狂犬病病毒(RABV) P蛋白 M蛋白生长特性反向遗传

CRISPR/Cas9技术及其在绵、山羊遗传研究上的应用潜力

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CRISPR/Cas9技术及其在绵、山羊遗传研究上的应用潜力