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棉花PTS2受体基因(GhPex7)的克隆及表达分析

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Acta Genetica Sinica 2003年第9期30卷 823-829页

作者：李德谋肖月华罗明侯磊罗小英罗克明裴炎农业部生物技术与作物品质改良重点开放实验室西南农业大学生物技术中心重庆400716

利用cDNA AFLP差异片段F0 10 ,通过RACE延伸、EST检索等方法获得了一个棉花过氧化物酶体定位信号2受体蛋白基因 (peroxisomaltargetingsignaltype 2receptor,GhPex7p)的编码序列。该cDNA包含一个 95 4bp的开放阅读框 ,编码 317个氨基酸 ... 详细信息

利用cDNA AFLP差异片段F0 10 ,通过RACE延伸、EST检索等方法获得了一个棉花过氧化物酶体定位信号2受体蛋白基因 (peroxisomaltargetingsignaltype 2receptor,GhPex7p)的编码序列。该cDNA包含一个 95 4bp的开放阅读框 ,编码 317个氨基酸 ,推测其等电点为 5 6 0 3。同源性分析表明 :推测GhPex7与拟南芥、酵母、果蝇、小鼠和人的Pex7p基因存在序列相似性 ,其中与拟南芥的同源性最高 ,为 83% ,并具有 3段WD 4 0蛋白家族的保守域 ,与拟南芥AtPex7的编码蛋白同类。Southern杂交结果表明该基因在陆地棉基因组中存在两个拷贝。Northernblotting和RT PCR分析表明该基因在棉花根、茎、叶、花、胚珠和纤维中均表达 ,但茎、叶组织中的表达水平明显高于胚珠和纤维。

关键词：棉花过氧化物酶体定位信号2 受体蛋白基因 RACE

棉花GhHMGR基因在胚珠生长发育过程中的功能

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作物学报 2016年第2期42卷 222-229页

作者：马富磊李德谋李志杨卫娟周雪游宇罗小英西南大学生物技术中心/农业部生物技术与作物品质改良重点开放实验室/重庆市农业生物技术重点实验室重庆400716

采用植物基因工程技术,选用CaMV35S组成型启动子驱动棉花3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A还原酶基因GhHMGR在棉花中表达,检测10 DPA(days post anthesis)棉花胚珠内HMGR(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase)酶及可溶性糖、脂质及蛋白质含量,同时进行了胚珠离体培养。结果显示,Gh HMGR在棉花光照部位(叶柄和铃壳)表达量相对较高,非光照部位(根及胚珠)表达量低;超量表达GhHMGR可部分恢复拟南芥hmgr突变体性状;相较野生型,超量表达株系10 DPA胚珠的HMGR含量升高,反义株系则降低;且超量表达株系总脂质及蛋白含量升高,可溶性总糖含量降低,反义株系则出现相反结果;HMGR竞争性抑制剂洛伐他汀处理会导致胚珠发育畸形。以上结果表明,GhHMGR基因在棉花胚珠生长发育过程中扮演重要角色。

关键词：棉花 GhHMGR 胚珠 HMGR

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小麦穗发芽抗性机制及抗性育种研究

中国农业科学 2024年第7期57卷 1237-1254页

作者：董慧雪陈倩郭晓江王际睿四川农业大学西南作物基因资源发掘与利用国家重点实验室四川农业大学小麦研究所四川农业大学农学院四川农业大学西南作物基因资源与遗传改良教育部重点实验室

穗发芽是禾本科作物籽粒在收获前于高湿环境下的穗上发芽现象，严重影响小麦的产量与品质。种子休眠水平是影响小麦穗发芽抗性的主要因素，而往往驯化作物的籽粒休眠水平低，导致栽培小麦普遍比其野生祖先种更易发生穗发芽。小麦穗发芽... 详细信息

穗发芽是禾本科作物籽粒在收获前于高湿环境下的穗上发芽现象，严重影响小麦的产量与品质。种子休眠水平是影响小麦穗发芽抗性的主要因素，而往往驯化作物的籽粒休眠水平低，导致栽培小麦普遍比其野生祖先种更易发生穗发芽。小麦穗发芽主要受外源环境（温度、湿度等）和内源植物激素（GAs、ABA、IAA、MeJA、ET、BR）的调控。已鉴定出一批抗穗发芽材料，并克隆了一系列调控穗发芽抗性的关键基因，如PM19、MFT、MKK3、Myb10-3D、Vp1等。通过分子标记辅助选择、人工合成小麦和CRISPR/Cas9基因编辑技术，已成功创制了抗穗发芽小麦新材料。本文综述了小麦穗发芽抗性的遗传机制及抗性育种研究的最新进展，未来仍需继续挖掘关键穗发芽抗性基因，以生物育种的方法培育抗穗发芽小麦新品种。

关键词：小麦穗发芽种子休眠激素育种改良

腰果CBF基因家族的鉴定及响应冷胁迫的表达模式

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热带作物学报 2024年第3期45卷 473-480页

作者：崔恒久曾教科李雯黄海杰彭世清郭冬蒲金基周永凯李辉亮海南大学园艺学院海南海口570228 海南热带农业资源研究院海南海口571101 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101 海南大学海南省热带园艺作物品质调控重点实验室海南海口570228 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海南海口571101 国家热带果树品种改良中心海南海口571101

腰果(Anacardium occidentalie Linn)属于典型的热带果树,主要在我国的云南省、海南省等地种植。腰果具有重要的经济价值、社会价值、生态价值,为农民增产创收,实现共同富裕和乡村振兴战略具有重要价值。腰果对于低温十分敏感,在8℃时... 详细信息

腰果(Anacardium occidentalie Linn)属于典型的热带果树,主要在我国的云南省、海南省等地种植。腰果具有重要的经济价值、社会价值、生态价值,为农民增产创收,实现共同富裕和乡村振兴战略具有重要价值。腰果对于低温十分敏感,在8℃时就会受到严重伤害,生长停止。所以低温胁迫是制约腰果生长的重要非生物胁迫。CBF转录因子是植物在应对低温、干旱、盐等非生物胁迫下中发挥重要作用的转录因子。然而CBF基因家族在腰果中的作用尚未阐明,该家族在低温胁迫下的表达模式尚不清楚。本研究对腰果AoCBF基因家族的基本特性进行探究,通过生物信息学方法,在腰果转录组中鉴定并获得6个AoCBF基因家族成员,分别对其系统发育、理化性质、蛋白结构、低温诱导下表达模式和启动子作用元件进行分析。理化性质分析结果表明:6个AoCBF蛋白长度为189~334 aa,蛋白分子量为21.31~37.89 kDa,等电点均小于7,表明该蛋白呈酸性,且均包含AP2/ERF结构域。基序分析表明:AoCBF基因存在5个基序,不同AoCBF基因Motif的缺失暗示着相关功能的缺失性。系统发育树分析表明:6个AoCBFs可分为A、B两个亚组,其中A组包含1个基因,B组仅包含5个基因。启动子顺势作用元件分析得出,AoCBF可能参与激素响应及非生物胁迫响应过程。荧光定量表达分析显示,AoCBFs对低温冷胁迫均有不同程度的响应,表明AoCBF在响应低温胁迫生物学过程中发挥着一定的作用。本研究分析了AoCBF基因家族的基本特性,为后续AoCBF的深入研究和应用积累基础数据。

关键词：腰果低温响应 CBF转录因子基因家族 qRT-PCR

一个具有棉花纤维细胞特异性的启动子SCFP

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科学通报 2008年第14期53卷 1650-1656页

作者：侯磊刘灏李家宝杨霞肖月华罗明宋水清杨光伟裴炎西南大学生物技术中心农业部生物技术与作物品质改良重点开放实验室重庆400716

为了获得棉花纤维特异启动子,克隆了棉花纤维细胞中表达基因GhSCFP的5′端上游序列,将其分别与GUS和GFP报告基因融合.在转基因烟草中,仅在种皮的最外层细胞中检测到GUS和GFP活性;在转基因陆地棉中,根、叶片、幼茎、花冠、花药和柱头中... 详细信息

为了获得棉花纤维特异启动子,克隆了棉花纤维细胞中表达基因GhSCFP的5′端上游序列,将其分别与GUS和GFP报告基因融合.在转基因烟草中,仅在种皮的最外层细胞中检测到GUS和GFP活性;在转基因陆地棉中,根、叶片、幼茎、花冠、花药和柱头中均未观察到GUS信号,而在开花当天胚珠表面突起的纤维细胞中有明显的GUS活性,直到开花后36d,纤维上仍可观察到GUS信号.本研究结果显示,SCFP启动子具有明显的棉花纤维表达特异性和植物种皮特异性,而且表达强度高.该启动子在棉花纤维发育相关基因的功能研究和棉花基因工程改良中将有重要的应用价值.

关键词：启动子纤维特异种皮特异棉花烟草

棉花赤霉素氧化酶同源基因GhGA20ox1在烟草中的功能表达(英文)

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植物生理与分子生物学学报 2006年第5期32卷 563-569页

作者：肖月华叶应福冯怡李先碧罗明侯磊罗小英李德谋裴炎西南大学生物技术中心农业部生物技术和作物品质改良重点实验室重庆400716

为研究棉花GA20-氧化酶同源基因GhGA20ox1的功能,将该基因转入本明烟(***)中进行超量表达。RT-PCR分析表明GhGA20ox1基因在转基因植株中得到了不同水平的表达。GhGA20ox1基因的超量表达促进了本明烟中的GA4+7合成,并导致赤霉素过量的表... 详细信息

为研究棉花GA20-氧化酶同源基因GhGA20ox1的功能,将该基因转入本明烟(***)中进行超量表达。RT-PCR分析表明GhGA20ox1基因在转基因植株中得到了不同水平的表达。GhGA20ox1基因的超量表达促进了本明烟中的GA4+7合成,并导致赤霉素过量的表型出现。转基因本明烟的表型变化程度与GhGA20ox1基因的表达水平和GA4+7的含量一致。这些结果表明,GhGA20ox1基因编码一个有功能的GA20-氧化酶,能够在转基因烟草中促进活性GA(GA4+7)的合成。

关键词：赤霉素 GA 20-氧化酶棉花GA 20-氧化酶基因 GA合成基因工程

水稻芽鞘紫线抑制与反抑制现象的遗传及反抑制基因的SSR分析

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Acta Genetica Sinica 2004年第8期31卷 830-835页

作者：张毅沈福成杨光伟何光华张正圣杨正林西南农业大学农业部生物技术与作物品质改良重点开放实验室重庆400716

从芽鞘有紫线和无紫线的杂交组合中发现 6个组合的F2 代紫线有无比例为 13∶3,以无紫线且为不育系的亲本XNA为母本对组合XNA/ 2 1A15 0进行回交 ,BF1代的分离比例符合 1∶1。遗传分析表明 :水稻芽鞘紫线表达受抑制基因I和反抑制基因Ai(... 详细信息

从芽鞘有紫线和无紫线的杂交组合中发现 6个组合的F2 代紫线有无比例为 13∶3,以无紫线且为不育系的亲本XNA为母本对组合XNA/ 2 1A15 0进行回交 ,BF1代的分离比例符合 1∶1。遗传分析表明 :水稻芽鞘紫线表达受抑制基因I和反抑制基因Ai(t) 的影响 ,I抑制芽鞘紫线C_A_P_系统中的P基因 ,Ai(t) 抑制I基因。以BF1构建了Ai(t) 基因的定位群体 ,SSR分析表明 :Ai(t) 基因与RM 335、RM 2 95、RM2 87、RM 2 1连锁 ,其遗传距离分别为2 8cM、10 2cM、13 9cM、2 6 1cM。

关键词：水稻芽鞘紫线抑制和反抑制基因遗传定位 SSR

菥蓂的资源开发利用与脂质代谢工程改良研究进展

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植物遗传资源学报 2024年第8期25卷 1234-1244页

作者：李蓉曹梦李妍逸陈吉丽张红林朱耀顺刘娟刘涛徐笑宇云南农业大学农学与生物技术学院/云南农业大学对外合作交流处

菥蓂（Thlaspi arvense L.）属于十字花科菥蓂属，是一种兼具药食同源功效的草本植物，生态适应能力强，种子富含油脂，具备较高的资源开发利用价值。近年来，随着现代生命科学研究的不断进步，菥蓂的诸多优势得以被发掘，国内外已陆续... 详细信息

菥蓂（Thlaspi arvense L.）属于十字花科菥蓂属，是一种兼具药食同源功效的草本植物，生态适应能力强，种子富含油脂，具备较高的资源开发利用价值。近年来，随着现代生命科学研究的不断进步，菥蓂的诸多优势得以被发掘，国内外已陆续开展了关于菥蓂的基础和应用研究。目前国内的报道多集中于菥蓂的功能活性物质提取及其在临床医疗上的作用，国外研究则偏向于探索菥蓂在农业生产循环中的生态价值与脂质代谢调控机制。大量研究表明，菥蓂具备开发生物柴油和补充油料生产的优异潜质，也是新型药物开发的良好备选原料。同时，得益于菥蓂全基因组信息的公布，对菥蓂开展分子育种改良已成为可能，例如通过基因编辑技术改变其种子脂肪酸构成以获得更符合食用油需求的品质，以及挖掘菥蓂的其他重要功能基因用于提高作物生产和抗逆性。利用代谢工程手段优化菥蓂的脂质特性以制备新型植物油甚至异源生产高价值脂肪酸（神经酸等）将潜力巨大，是菥蓂最具前景的开发方向之一。本文综述并展望了近年来菥蓂在资源开发利用和脂质代谢工程研究等方面的报道，以期为菥蓂在我国的基础研究和推广应用提供参考。

关键词：菥蓂资源开发利用脂质代谢工程

利用多模板Y形接头延伸法进行相邻序列的连续扩增(英文)

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植物生理与分子生物学学报 2007年第1期33卷 85-90页

作者：肖月华彭祎罗明李德谋侯磊裴炎西南大学生物技术中心中国农业部生物技术和作物品质改良重点实验室重庆400716

Y形接头延伸法(Y-shaped adaptor dependent extension,YADE)是一种扩增已知DNA片段相邻序列的方法,但其效率常受到已知序列周围酶切位点数目的限制。在Y形接头延伸中采用由多种酶切和连接产生的DNA作模板,大大提高了该方法扩增相邻序... 详细信息

Y形接头延伸法(Y-shaped adaptor dependent extension,YADE)是一种扩增已知DNA片段相邻序列的方法,但其效率常受到已知序列周围酶切位点数目的限制。在Y形接头延伸中采用由多种酶切和连接产生的DNA作模板,大大提高了该方法扩增相邻序列的效率,实现了相邻序列的连续扩增。利用该方法通过2轮连续的扩增从7种酶切连接产物中成功地获得了1个棉花小GTP酶基因(GhRacB)的2228bp上游序列。结果表明,多模板Y形接头延伸法是一种从复杂基因组中扩增相邻序列的有用方法。

关键词： Y形接头 Y形接头延伸法相邻序列 PCR步行复杂基因组