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大黄酸对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响

中国药学杂志 2007年第15期42卷 1148-1151页

作者：杨永青杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室

目的研究大黄酸（rhein，Rh）对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法采用噻唑蓝（MTT）比色法和流式细胞术测定RH对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响。采用油红O染色提取法，检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化；采用形态学观察，检... 详细信息

目的研究大黄酸（rhein，Rh）对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法采用噻唑蓝（MTT）比色法和流式细胞术测定RH对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响。采用油红O染色提取法，检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化；采用形态学观察，检测前体脂肪细胞充脂率、充脂程度及形态变化。结果 RH在5-160μmol·L^-1内，对前体脂肪细胞增殖与分化的抑制作用呈剂量和时间依赖性变化，并可在一定程度上诱发脂肪细胞凋亡。结论 Rh可抑制前体脂肪细胞的增殖与分化，具有潜在的减肥降脂作用。

关键词：大黄酸前体脂肪细胞增殖与分化凋亡

SOCS3基因重组腺病毒的构建及其在猪脂肪细胞中的表达

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生物工程学报 2010年第4期26卷 462-469页

作者：杨双娟徐成权吴江维杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

本研究旨在构建细胞因子信号转导抑制因子3(Suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)的重组腺病毒表达载体,获得有感染性的病毒颗粒。以pcDNA3-SOCS3质粒为模板扩增SOCS3基因,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,经测序验证后,... 详细信息

本研究旨在构建细胞因子信号转导抑制因子3(Suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)的重组腺病毒表达载体,获得有感染性的病毒颗粒。以pcDNA3-SOCS3质粒为模板扩增SOCS3基因,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,经测序验证后,重组的穿梭质粒用PmeI酶切线性化后转化到BJ5183感受态细菌中与其内的骨架载体pAdEasy-1进行同源重组,获得的重组质粒pAd-SOCS3,经PacI线性化后转染至HEK293细胞中进行包装和扩增,纯化后用TCID50法测定病毒滴度。以重组的病毒感染原代培养的猪脂肪细胞后,荧光显微镜下观察报告基因GFP的表达,RT-PCR和Western blotting检测细胞内SOCS3 mRNA和蛋白的表达。重组腺病毒载体pAd-SOCS3经酶切及PCR鉴定正确,病毒滴度为1.2×109PFU/mL;感染原代培养的猪脂肪细胞后,荧光显微镜观察可见报告基因GFP的表达;RT-PCR和Western blotting检测到细胞中SOCS3 mRNA和蛋白的表达显著提高。本研究成功构建了SOCS3基因的重组腺病毒,感染原代培养的猪脂肪细胞可稳定表达SOCS3蛋白,为深入研究SOCS3的功能奠定了基础。

关键词： SOCS3 重组腺病毒猪脂肪细胞

9-顺式维甲酸在原代培养猪前体脂肪细胞分化中的调控作用

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分子细胞生物学报 2007年第3期40卷 211-216页

作者：林亚秋庄合林杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

采用RT-PCR、油红O染色法、油红O染色提取法和分光光度计法,探讨不同浓度9-顺式维甲酸(9-cisRA)(0-10$mol/L)对体外原代培养猪前体脂肪细胞分化的影响及其可能机制。结果表明,9-cisRA在脂肪细胞分化中因浓度不同而发挥不同作用。低浓度9... 详细信息

采用RT-PCR、油红O染色法、油红O染色提取法和分光光度计法,探讨不同浓度9-顺式维甲酸(9-cisRA)(0-10$mol/L)对体外原代培养猪前体脂肪细胞分化的影响及其可能机制。结果表明,9-cisRA在脂肪细胞分化中因浓度不同而发挥不同作用。低浓度9-cisRA(0-10nmol/L)促进前体脂肪细胞分化,并上调RXRα、PPARγmRNA表达,增加前体脂肪细胞分化标志酶3-磷酸甘油脱氢酶(glyc-erol-3-phosphate dehydrogenase,GPDH)的活性;高浓度9-cisRA(100nmol/L-10$mol/L)则抑制前体脂肪细胞分化,并下调RXRα、PPARγmRNA表达,减少GPDH的活性。结果提示9-cisRA在猪前体脂肪细胞分化中,可能通过调控RXRα和PPARγ基因表达变化来发挥其促进或抑制作用。

关键词：脂肪细胞分化 9-顺式维甲酸猪

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大黄素对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响

中国中药杂志 2007年第5期32卷 424-427页

作者：杨永青杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室

目的：研究大黄素（emodin，EMO）对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法：分离培养大鼠前体脂肪细胞，按照EMO添加剂量不同，把培养板中接种细胞的培养孔随机分为0，5，10，20，40，80，160μmol·L^-1处理组；采用MTT比色法和流... 详细信息

目的：研究大黄素（emodin，EMO）对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法：分离培养大鼠前体脂肪细胞，按照EMO添加剂量不同，把培养板中接种细胞的培养孔随机分为0，5，10，20，40，80，160μmol·L^-1处理组；采用MTT比色法和流式细胞术测定EMO对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响；采用油红O染色提取法，检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化；采用形态学观察，检测前体脂肪细胞分化的形态学变化。结果：20～160μmol·L^-1的EMO对大鼠前体脂肪细胞的增殖与分化呈剂量和时间依赖性地抑制作用，并可在一定程度上诱发前体脂肪细胞凋亡。结论：EMO具有潜在的减肥降脂作用。

关键词：大黄素大鼠前体脂肪细胞增殖分化

地塞米松和胰岛素调节猪脂肪细胞SOCS-3、OB、GLUT4和PPARγ基因的表达

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生物工程学报 2008年第8期24卷 1354-1360页

作者：张浩卫吴江维王博吕真杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨陵712100

猪是研究糖尿病最理想的模型动物,研究胰岛素和胰岛素抵抗是研究糖尿病的重要环节。为明确SOCS-3在胰岛素抵抗中的作用,分别用100nmol/L的胰岛素,300nmol/L的地塞米松处理原代培养的猪脂肪细胞诱导胰岛素抵抗;利用半定量RT-PCR技术分别... 详细信息

猪是研究糖尿病最理想的模型动物,研究胰岛素和胰岛素抵抗是研究糖尿病的重要环节。为明确SOCS-3在胰岛素抵抗中的作用,分别用100nmol/L的胰岛素,300nmol/L的地塞米松处理原代培养的猪脂肪细胞诱导胰岛素抵抗;利用半定量RT-PCR技术分别检测SOCS-3、OB、GLUT4和PPARγ基因表达变化。结果发现,胰岛素增加了GLUT4、SOCS-3和PPARγ基因的表达,对OB基因表达变化没有显著性影响;地塞米松诱导的胰岛素抵抗状态下OB和SOCS-3基因表达水平升高,而GLUT4和PPARγ基因表达水平显著下调。研究结果表明,GLUT4基因表达量水平的升高可能是由于PPARγ的高表达引起,SOCS-3基因的不同表达水平对胰岛素信号的抑制效果不同。地塞米松诱导的胰岛素抵抗不仅表现在对葡萄糖转运的抑制,也反映在抑制了胰岛素信号;而SOCS-3基因可能是消除胰岛素抵抗的一个有效靶基因。

关键词： SOCS-3 GLUT4 PPARγ OB 胰岛素抵抗地塞米松

猪脂肪组织发育过程中Wnt/β-catenin信号通路相关基因及脂肪转录因子的时序表达

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生物工程学报 2008年第5期24卷 746-753页

作者：罗肖李惠侠杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪脂肪组织发育的影响,并探讨其可能的作用机制,以1-120日龄长白猪脂肪组织为试验材料,采用SQRT-PCR法检测Wnt信号通路中相关基因β-catenin、GSK3β、Fz1及主要的脂肪转录因子PPARγ、C/EBPα和分化早... 详细信息

为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪脂肪组织发育的影响,并探讨其可能的作用机制,以1-120日龄长白猪脂肪组织为试验材料,采用SQRT-PCR法检测Wnt信号通路中相关基因β-catenin、GSK3β、Fz1及主要的脂肪转录因子PPARγ、C/EBPα和分化早期标志基因LPL mRNA的表达变化;石蜡切片免疫组化方法定性检测β-catenin在脂肪组织发育中的时序表达变化。SQRT-PCR结果显示,β-catenin mRNA在猪出生第1天有高水平表达,随着个体日龄的增长,其表达量逐渐降低,60日龄后维持在一个较低水平。GSK3β和Fz1mRNA的表达量也伴随脂肪组织的发育而逐渐降低。而LPL、PPARγ和C/EBPα的mRNA表达量随着个体日龄的增长而逐渐升高,60日龄后仍保持高水平的表达。石蜡切片免疫组化结果显示,随着脂肪组织的发育,β-catenin蛋白的表达也随之降低,并且β-catenin蛋白的表达部位逐渐由细胞核和细胞质共表达变为只在细胞质中表达。上述基因表达的时序变化规律提示,β-catenin在维持前体脂肪细胞的未分化状态,抑制脂肪组织发育中具有重要作用,其作用机制可能是通过对脂肪细胞转录因子PPARγ、C/EBPα及分化早期标志基因LPL mRNA的调控来进行的。

关键词： Wnt/β-catenin 猪脂肪发育时序表达

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白藜芦醇对猪前体脂肪细胞凋亡的作用及机理

生物工程学报 2010年第8期26卷 1042-1049页

作者：张朝杨扬庞卫军孙超杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

旨在研究白藜芦醇对猪前体脂肪细胞凋亡的作用,探讨其分子机制。以50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L白藜芦醇处理猪前体脂肪细胞,采用Hoechst33258染色剂染色,光学和荧光显微镜分别观察细胞的形态学变化。semi-qRT-PCR和W... 详细信息

旨在研究白藜芦醇对猪前体脂肪细胞凋亡的作用,探讨其分子机制。以50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L白藜芦醇处理猪前体脂肪细胞,采用Hoechst33258染色剂染色,光学和荧光显微镜分别观察细胞的形态学变化。semi-qRT-PCR和Westernblotting方法检测凋亡相关基因sirt1、caspase-3、bcl-2、bax、p53、NF-κB的mRNA和蛋白的表达变化。结果表明,白藜芦醇处理后,前体脂肪细胞出现明显的细胞凋亡,伴随细胞体积缩小,染色质凝集,核质固缩等特征显现,与对照组相比200μmol/L处理组细胞的凋亡率显著升高(P脂肪细胞凋亡的关键原因。

关键词：白藜芦醇猪前体脂肪细胞 sirtl caspase-3

白藜芦醇对猪原代前体脂肪细胞的增殖与分化及Sirt1基因转录表达时序的影响

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生物工程学报 2006年第5期22卷 850-855页

作者：庞卫军孙世铎白亮杨燕军杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

分别以0μmol／L（对照组）、10μmol／L（低剂量组），20μmol／L（中等剂量组），513μmol／L，100μmol／L（高剂量组）的白藜芦醇（Resveratrol，RES）处理体外培养1～3日龄健康仔猪前体脂肪细胞，采用MTT比色法检测细胞活性及增殖... 详细信息

分别以0μmol／L（对照组）、10μmol／L（低剂量组），20μmol／L（中等剂量组），513μmol／L，100μmol／L（高剂量组）的白藜芦醇（Resveratrol，RES）处理体外培养1～3日龄健康仔猪前体脂肪细胞，采用MTT比色法检测细胞活性及增殖状况：油红O染色化学比色法定量分析细胞内脂肪生成及细胞分化程度；RT-PCR法分析Sirt1（sirtuin1）mRNA表达情况，探讨Sirt1对猪前体脂肪细胞增殖分化的影响及其分子机制。结果表明，脂肪细胞经RES处理后，各组MTT和油红O染色测得的光密度值（OD值）均低于对照组，50μmol／L，100／μmol／L组在96～120h作用极显著（P〈0．01），与中低剂量组差异显著（P〈0．05）；以20μmol／L，100μmol／LRES处理细胞后，Sirt1 mRNA表达量随细胞分化的进行而逐渐升高，100／μmol／L组均显著高于对照组和20μmol／L组（P〈0．05）。RES对猪前体脂肪细胞增殖分化均有一定抑制作用，高剂量RES（513μmol／L和100μmol／L）可显著减少细胞内脂肪的合成、抑制脂肪细胞增殖与分化，Sirt1 mRNA表达量显著升高可能是RES抑制细胞分化的重要原因之一。

关键词：白藜芦醇猪前体脂肪细胞增殖分化 Sirt1

运用计算机断层扫描技术活体评估种公猪瘦肉率、脂肪率和肌内脂肪含量

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中国农业科学 2023年第9期56卷 1787-1799页

作者：任志强王晨阳寇忠云蔡瑞杨公社庞卫军西北农林科技大学动物科技学院/动物脂肪沉积与肌肉发育实验室

【目的】通过研究计算机断层扫描(computed tomography,CT)技术在活体评估种公猪胴体与肉质性状中的准确性，实现对表型组进行智能测定，为种猪的选育和精细化饲养管理提供技术参数。【方法】选择体重相近((42.02±1.05)kg)、健康状况... 详细信息

【目的】通过研究计算机断层扫描(computed tomography,CT)技术在活体评估种公猪胴体与肉质性状中的准确性，实现对表型组进行智能测定，为种猪的选育和精细化饲养管理提供技术参数。【方法】选择体重相近((42.02±1.05)kg)、健康状况良好的杜洛克公猪40头，饥饿处理24 h后，采取耳缘静脉注射麻醉剂，实行全身性麻醉。将猪只按照头前尾后俯卧姿势置于CT扫描床上，通过16排螺旋CT平扫获取原始图像序列。利用图像处理技术对获取的图像进行图像薄层重建与去噪、图像多平面重建和图像分割，进而对图像进行定量分析，并结合B超活体测定和屠宰测定评估了种公猪的胴体组成、背膘厚、眼肌深度、眼肌面积、胴体直长和胴体斜长等胴体性状；以屠宰测定瘦肉率为因变量，CT活体测定背膘厚、眼肌深度、眼肌面积、胴体直长和胴体斜长为自变量，运用偏最小二乘回归分析构建种猪胴体瘦肉率的预测模型；采用索氏提取法测定背最长肌、臀中肌和半膜肌样品中肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量，并与CT活体评估对应部位肌内脂肪含量进行相关性分析。【结果】在对CT活体评估与屠宰测定瘦肉率、脂肪率、骨率、皮率进行相关性分析时发现，两者之间的相关系数(r)均达到0.85以上，呈强相关(P0.05)；在胸腰椎结合处(P2点)测量背膘厚时，B超活体测定与屠宰测定差异显著(P0.05)。采用偏最小二乘法建立了预测种公猪胴体瘦肉率的回归模型，其预测均方根误差(root mean square error of prediction,RMSEP)和决定系数(R2)分别为0.1472、0.983。进一步通过CT评估肌内脂肪含量，CT活体评估和屠宰测定背最长肌、臀中肌、半膜肌肌内脂肪含量呈强相关(P脂肪含量间存在极显著的线性正相关(P脂肪率、骨率、背膘厚和眼肌深度等胴体性状，以及肉质指标肌内脂肪含量，为实现种猪性能的持续改良提供了技术支撑，从而更准确地选择相关性状。

关键词：计算机断层扫描种公猪活体评估胴体性状肉质性状