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异种动物细胞核移植研究现状及相关问题的探讨

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2003年第4期31卷 200-204页

作者：冯秀亮雷安民杨春荣窦忠英西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心陕西杨陵712100

随着体细胞核移植相继在多种动物中取得成功 ,异种细胞核移植技术在拯救濒危野生动物、人类干细胞克隆和细胞核质互作研究等方面具有特殊意义 ,受到广泛重视并取得了很大进展。文章对异种细胞核移植技术研究现状进行了综述 ,并对其应用... 详细信息

随着体细胞核移植相继在多种动物中取得成功 ,异种细胞核移植技术在拯救濒危野生动物、人类干细胞克隆和细胞核质互作研究等方面具有特殊意义 ,受到广泛重视并取得了很大进展。文章对异种细胞核移植技术研究现状进行了综述 ,并对其应用前景和存在的问题进行了探讨。

关键词：异种动物细胞核移植研究现状问题濒危野生动物细胞克隆细胞核质互作

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牛胚胎干细胞建系研究进展及存在问题

农业生物技术学报 2003年第5期11卷 439-443页

作者：窦忠英徐小明华进联杨凌712100 国家干细胞工程技术研究分中心国家干细胞工程技术研究分中心西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心

牛胚胎干细胞具有重要的生物学意义和广阔的应用前景。回顾了牛胚胎干细胞的研究进展,阐述了牛胚胎干细胞生物学特征与表面抗原标志、建系方法和技术路线,系统分析了影响牛胚胎干细胞分离克隆的各种重要因素,并对目前建系中所面临的主... 详细信息

牛胚胎干细胞具有重要的生物学意义和广阔的应用前景。回顾了牛胚胎干细胞的研究进展,阐述了牛胚胎干细胞生物学特征与表面抗原标志、建系方法和技术路线,系统分析了影响牛胚胎干细胞分离克隆的各种重要因素,并对目前建系中所面临的主要问题进行了探讨。

关键词：胚胎干细胞胚胎生殖细胞牛

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成体干细胞可塑性研究

中国科学基金 2003年第4期17卷 211-215页

作者：杨学义马勇江屈雷效梅窦忠英西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心陕西杨凌712100

传统发育生物学认为成体干细胞只能向所属胚层几种细胞分化。但近来,许多研究表明成体干细胞可横向分化或跨系分化,即成体干细胞具有可塑性,这已成为当今干细胞研究热点之一。作者概述了当前成体干细胞可塑性研究进展和特点,并对成体干... 详细信息

传统发育生物学认为成体干细胞只能向所属胚层几种细胞分化。但近来,许多研究表明成体干细胞可横向分化或跨系分化,即成体干细胞具有可塑性,这已成为当今干细胞研究热点之一。作者概述了当前成体干细胞可塑性研究进展和特点,并对成体干细胞可塑性理论进行了探讨。

关键词：成体干细胞可塑性发育生物学横向分化跨系分化评价标准

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影响人类胚胎生殖细胞分离克隆的因素

农业生物技术学报 2004年第3期12卷 294-299页

作者：华进联窦忠英徐小明李松杨玉艾雷安民西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心陕西杨凌712100 西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心

探讨胚龄培养液、细胞因子、饲养层细胞等因素对人类胚胎生殖细胞分离克隆的影响。以4~13周龄流产胎儿生殖嵴或性腺为材料,小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)、人胎儿成纤维细胞(hEF)、STO细胞和牛胎儿成纤维细胞(bEF)作饲养层,高糖DMEM(Dulbecco... 详细信息

探讨胚龄培养液、细胞因子、饲养层细胞等因素对人类胚胎生殖细胞分离克隆的影响。以4~13周龄流产胎儿生殖嵴或性腺为材料,小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)、人胎儿成纤维细胞(hEF)、STO细胞和牛胎儿成纤维细胞(bEF)作饲养层,高糖DMEM(Dulbecco’sminimumEagle’smedium)为基础培养液,添加10-4mol/L2Me(2-巯基乙醇)、胎牛血清(FBS)或新生牛血清(NBS)、白血病抑制因子(LIF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、干细胞因子(SCF)等为培养液,探讨影响人类胚胎生殖细胞分离克隆的因素。结果表明7～12周流产儿适于人类胚胎生殖细胞的分离克隆;人类胚胎生殖细胞体外培养以添加15%FBS为宜;添加4ng/mLLIF+4ng/mLbFGF+20ng/mLSCF能明显改善人类胚胎生殖细胞的分离克隆;MEF、STO、bEF和hEF可提高人原始生殖细胞(PGCs)的贴壁率,能促进PGCs源的人类胚胎干细胞(ES)的分离效率;以MEF作为饲养层效果较好。

关键词：人胚胎生殖细胞原始生殖细胞胚胎干细胞细胞因子饲养层

不同浓度1-甲基环丙烯处理对蓝莓贮藏品质的影响

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保鲜与加工 2024年第5期24卷 7-13页

作者：张鹏胡瑾周斌赵娟李永青曹玲李江阔姜爱丽天津市农业科学院农产品保鲜与加工技术研究所/国家农产品保鲜工程技术研究中心(天津) 农业农村部农产品贮藏保鲜重点实验室天津市农产品采后生理与贮藏保鲜重点实验室天津300384 西北农林科技大学陕西杨凌712100 浙江新银象生物工程有限公司浙江天台317200 陕西兄弟供应链管理有限公司陕西咸阳712299 陕西华圣现代农业集团有限公司陕西西安710021 大连民族大学生命科学学院大连市蓝莓、甜樱桃等浆果深加工与保鲜工程实验室辽宁大连116600

为探究不同浓度1-甲基环丙烯(1-MCP)结合自发气调包装(MAP)对蓝莓冷藏期间保鲜效果的影响,以‘莱克西’蓝莓为试材,采后2 h内入预冷库,装入气调箱并对其进行0.5、1.0、1.5μL/L 1-MCP处理,冷链车运输96 h后入冰温库((-0.5±0.3)℃)贮藏,... 详细信息

为探究不同浓度1-甲基环丙烯(1-MCP)结合自发气调包装(MAP)对蓝莓冷藏期间保鲜效果的影响,以‘莱克西’蓝莓为试材,采后2 h内入预冷库,装入气调箱并对其进行0.5、1.0、1.5μL/L 1-MCP处理,冷链车运输96 h后入冰温库((-0.5±0.3)℃)贮藏,每10 d测定蓝莓的品质指标、生理指标和挥发性成分。结果表明:MAP结合3种浓度1-MCP处理均能延缓蓝莓果实硬度的下降,保持相对较高的花色苷、VC、可溶性固形物、可滴定酸含量,抑制呼吸峰值和乙烯生成速率。利用SPSS主成分分析得出各处理的保鲜效果排序为:MAP+1.0μL/L 1-MCP>MAP+1.5μL/L 1-MCP>MAP+0.5μL/L 1-MCP>MAP。在蓝莓贮藏过程中醛类(52.34%~86.13%)和萜类(7.26%~32.44%)是其主要挥发性成分,MAP+1.0μL/L 1-MCP处理的蓝莓果实能保持较高的醛类物质和萜类物质相对含量。综上,MAP结合1.0μL/L 1-MCP处理对蓝莓的保鲜效果最佳。

关键词：蓝莓 1-MCP 自发气调挥发性成分贮藏品质

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牛原始生殖细胞的分离与培养

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2004年第1期32卷 77-80页

作者：徐小明华进联冯秀亮窦忠英西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心陕西杨凌712100

　从4～15周龄的牛胎儿生殖嵴中分离得到牛原始生殖细胞,以STO(一种建系的小鼠胎儿成纤维细胞)及MEF(小鼠胎儿成纤维细胞)为饲养层抑制分化培养,其中1个细胞系传至4代。研究发现,STO较MEF更有利于牛类EG细胞的分离与培养,体长小于5cm的... 详细信息

　从4～15周龄的牛胎儿生殖嵴中分离得到牛原始生殖细胞,以STO(一种建系的小鼠胎儿成纤维细胞)及MEF(小鼠胎儿成纤维细胞)为饲养层抑制分化培养,其中1个细胞系传至4代。研究发现,STO较MEF更有利于牛类EG细胞的分离与培养,体长小于5cm的胎儿适合牛EG细胞分离与克隆。同时观察到这些细胞在体外进行自发性分化,可形成上皮样细胞、神经样细胞和成纤维样细胞。

关键词：牛原始生殖细胞分离培养胚胎干细胞胚胎生殖细胞

利用成年母兔耳部皮肤上皮细胞生产克隆胚胎的研究

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2005年第8期33卷 7-11页

作者：杨春荣马霄飞董书伟刘淑娟窦忠英西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心陕西杨凌712100

以成年母兔耳部皮肤上皮细胞为核供体,对家兔体细胞核移植技术中融合、激活以及不同来源受体卵母细胞的选择等环节进行了研究,比较了不同电场强度对重构胚胎融合率、分裂率的影响.结果表明,200 V/mm电场强度时重构胚胎的融合率(82.53%)... 详细信息

以成年母兔耳部皮肤上皮细胞为核供体,对家兔体细胞核移植技术中融合、激活以及不同来源受体卵母细胞的选择等环节进行了研究,比较了不同电场强度对重构胚胎融合率、分裂率的影响.结果表明,200 V/mm电场强度时重构胚胎的融合率(82.53%)显著高于160 V/mm(59.73%),但与240 V/mm(79.56%)无显著差异;200 V/mm时重构胚胎的分裂率(71.43%)显著高于160 V/mm(49.43%)和240 V/mm(57.80%).来源于输卵管卵母细胞组成的重构胚胎的融合率(84.71%)和裂解数与来源于卵巢大卵泡(78.75%)的无显著差异;但来源于输卵管的重构胚胎分裂率(73.68%)显著高于来源于卵巢大卵泡的(56.35%).将646枚2～4细胞期重构胚移植到38只同期化及非同期化的受体后无幼仔出生.

关键词：兔耳部上皮细胞核移植克隆胚胎

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胚胎干细胞与胚胎生殖细胞

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2002年第6期30卷 237-240页

作者：徐小明杨炜峰窦忠英华进联西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心陕西杨陵712100

　胚胎干细胞与胚胎生殖细胞同属于胚胎源的多潜能干细胞。胚胎干细胞是从附置前胚胎内细胞团分离而来的,而胚胎生殖细胞来自胎儿原始生殖细胞。二者在现代生命科学的各个领域都有着广阔的应用前景。对胚胎生殖细胞的特性,胚胎干细胞与... 详细信息

　胚胎干细胞与胚胎生殖细胞同属于胚胎源的多潜能干细胞。胚胎干细胞是从附置前胚胎内细胞团分离而来的,而胚胎生殖细胞来自胎儿原始生殖细胞。二者在现代生命科学的各个领域都有着广阔的应用前景。对胚胎生殖细胞的特性,胚胎干细胞与胚胎生殖细胞的异同以及二者的应用前景作一综述。

关键词：胚胎干细胞胚胎生殖细胞多潜能干细胞特性应用前景

胎儿胰岛样细胞团源上皮样细胞分离、纯化和鉴定

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生物工程学报 2007年第2期23卷 246-251页

作者：乔海赵婷王赟杨春荣效梅窦忠英西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心杨凌7121002 广东海洋大学湛江524088

旨在优化胰腺干细胞分离、鉴定的方法和体系，为糖尿痛研究和治疗提供种子细胞。采用胶原酶消化法，分离培养出胰岛样细胞团（ICCs），对其进行贴壁培养，从中纯化出上皮样细胞。采用MTT法测定其生长情况并绘制生长曲线。采用免疫组织... 详细信息

旨在优化胰腺干细胞分离、鉴定的方法和体系，为糖尿痛研究和治疗提供种子细胞。采用胶原酶消化法，分离培养出胰岛样细胞团（ICCs），对其进行贴壁培养，从中纯化出上皮样细胞。采用MTT法测定其生长情况并绘制生长曲线。采用免疫组织化学染色检测分离得到细胞的PDX-1、PCNA、CK-7、CK-19、Nesfin、Glut2、Vimenfin、Insulin表达情况。应用流式细胞仪检测其表面标志。由分离培养的ICCs成功纯化出上皮样细胞；传40代，每代冻存106～10s个细胞；生长曲线显示其传代第3天进入对数生长期，第5天进入平台期；免疫组织化学染色显示其表达PDX-1、PCNA、CK-7、CK-19、Nestin、Glut2、Vimentin；不表达Insulin；流式细胞仪分析表明其表达CD29、CD44、CD166，不表达CD11a、CD14、CD34、CD45、CD90、CD105、CD117。由胎儿胰腺能分离出具有自我更新能力的上皮样细胞，为导管来源，具干细胞特性。

关键词：胎儿胰腺胰腺干细胞胰岛样细胞团上皮样细胞