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小鼠卵母细胞和早期胚胎端粒酶活性的测定

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2005年第6期33卷 27-30,34页

作者：敬晓棋雷安民王晗杨学义窦忠英西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心陕西杨凌712100

　为了解小鼠早期发育过程中端粒酶的活性变化,本研究利用端粒重复序列扩增法(TRAP)进行了小鼠卵母细胞和附植前胚胎端粒酶活性的测定。结果表明,小鼠卵母细胞、桑椹胚和囊胚为端粒酶阳性,而2-细胞和8-细胞为阴性。依据电泳条带在成像... 详细信息

　为了解小鼠早期发育过程中端粒酶的活性变化,本研究利用端粒重复序列扩增法(TRAP)进行了小鼠卵母细胞和附植前胚胎端粒酶活性的测定。结果表明,小鼠卵母细胞、桑椹胚和囊胚为端粒酶阳性,而2-细胞和8-细胞为阴性。依据电泳条带在成像系统下的光密度,计算相对总产品产量(TPG)的定量比较发现,囊胚端粒酶活性最高,为269.331;桑椹胚次之,为96.231;卵母细胞最低,为85.782。小鼠桑椹胚和囊胚胚胎记数及单细胞端粒酶活性比较结果显示,囊胚单细胞TPG最低,为3.45;桑椹胚单细胞略高于囊胚,为4.00;而卵母细胞最高,为85.782,大约是囊胚细胞的25倍。

关键词：小鼠卵母细胞早期胚胎端粒酶活性

异体颗粒细胞线粒体移植对牛孤雌激活胚胎发育的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2007年第3期35卷 25-28页

作者：王晓磊雷安民窦忠英西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心陕西杨凌712100

为了探讨线粒体对孤雌激活胚胎发育潜能的影响,比较了异体颗粒细胞线粒体移植的牛孤雌激活胚胎、胚胎培养液移植的孤雌激活胚胎和正常孤雌激活胚胎的发育情况。结果表明,异体颗粒细胞线粒体移植组和胚胎培养液移植组的牛孤雌激活胚胎的... 详细信息

为了探讨线粒体对孤雌激活胚胎发育潜能的影响,比较了异体颗粒细胞线粒体移植的牛孤雌激活胚胎、胚胎培养液移植的孤雌激活胚胎和正常孤雌激活胚胎的发育情况。结果表明,异体颗粒细胞线粒体移植组和胚胎培养液移植组的牛孤雌激活胚胎的激活率差异不显著(P>0.05),但均显著低于正常激活组(P细胞线粒体移植组与正常激活组的孤雌激活胚胎卵裂率差异不显著(P>0.05),但均明显高于胚胎培养液移植组(P细胞线粒体移植组的孤雌激活胚胎桑椹胚率极显著高于胚胎培养液移植组和正常激活组(P细胞线粒体移植可改善牛孤雌激活胚的发育。

关键词：线粒体颗粒细胞牛孤雌胚胎

应用Spindle-view观察哺乳动物成熟卵的纺缍体

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农业生物技术学报 2005年第3期13卷 335-340页

作者：雷安民林少青窦忠英西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心杨凌712100 西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心

应用Spindle-view对体外成熟培养20、22、24和26h的牛卵母细胞减数分裂纺锤体进行了观察;同时也对小鼠、家兔、山羊和猪等动物成熟卵母细胞的减数分裂纺缍体进行了观察。结果表明①在20～26h之间利用Spindle-view得到的牛卵纺锤体影像... 详细信息

应用Spindle-view对体外成熟培养20、22、24和26h的牛卵母细胞减数分裂纺锤体进行了观察;同时也对小鼠、家兔、山羊和猪等动物成熟卵母细胞的减数分裂纺缍体进行了观察。结果表明①在20～26h之间利用Spindle-view得到的牛卵纺锤体影像与极体的相对位置没有明显的变化;②纺锤体成像是否清晰可用于牛卵母细胞的质量监控;③Spindle-view适合于牛、家兔、小鼠和山羊成熟卵母细胞减数分裂纺缍体的观察。

关键词： spindle-view 成熟卵母细胞减数分裂纺缍体

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大鼠胎儿神经干细胞的分离、培养及诱导分化

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2007年第3期35卷 20-24页

作者：李勇沈文正杨春荣窦忠英西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心陕西杨凌712100

为了探讨神经干细胞（Neural stem cells，NSCs）在体外培养中的生物学特性，研究不同细胞因子对NSCs分化的影响，试验对大鼠胎儿神经干细胞进行了分离培养，并研究了10，50和100ng／mL的神经生长因子（nerve growth factor，NGF）、脑... 详细信息

为了探讨神经干细胞（Neural stem cells，NSCs）在体外培养中的生物学特性，研究不同细胞因子对NSCs分化的影响，试验对大鼠胎儿神经干细胞进行了分离培养，并研究了10，50和100ng／mL的神经生长因子（nerve growth factor，NGF）、脑源性神经营养因子（brain derived neruotrophic factor，BDNF）和胶质源性神经生长因子（glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF）对NSCs的定向诱导分化作用。结果表明，大鼠胎儿NSCs可在体外增殖并形成典型的神经球，指数增长期在传代后的第4～5天；10和50ng／mL的NGF、BDNF和GDNF对NSCs的诱导分化作用不明显，100ng／mL的NGF、BDNF和GDNF可诱导NSCs分化为神经元或胶质细胞。说明NGF和BDNF可诱导NSCs向神经元方向分化，GDNF诱导其向胶质细胞分化。

关键词：大鼠胎儿神经干细胞神经生长因子生长曲线

稀释液中葡萄糖浓度对家畜精子能量代谢的影响及调控机制

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中国畜牧杂志 2024年

作者：原夏萌杨一丁郝旭程佳马海东曾文先陕西理工大学生物科学与工程学院陕西理工大学秦巴生物资源与生态环境省部共建重点实验室(培育) 西北农林科技大学动物科技学院

家畜精液的稀释与体外长期保存是人工授精技术成功的基础。葡萄糖作为精子保存稀释液中重要的营养物质，可为精子提供能量并维持细胞外微环境渗透压，常以较高的浓度添加于家畜精子稀释液中。研究表明，高浓度葡萄糖不利于精子细胞结构... 详细信息

家畜精液的稀释与体外长期保存是人工授精技术成功的基础。葡萄糖作为精子保存稀释液中重要的营养物质，可为精子提供能量并维持细胞外微环境渗透压，常以较高的浓度添加于家畜精子稀释液中。研究表明，高浓度葡萄糖不利于精子细胞结构与功能的维持，降低稀释液葡萄糖浓度会改变精子蛋白质翻译后修饰过程，提高精子质膜及顶体完整率，改变能量代谢相关酶活性，增强线粒体功能，进而影响精子的能量代谢。因此，本文就稀释液中葡萄糖浓度对家畜精子能量代谢的影响调及控机制进行综述，以期为稀释液配方的优化及家畜繁殖效率的提高提供参考。

关键词：葡萄糖精液保存线粒体功能能量代谢蛋白质翻译后修饰

基于YOLOv8-FECA的密集场景下小麦赤霉病孢子目标检测

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农业工程学报 2024年

作者：张东彦高玥程涛胡根生杨雪乔红波郭伟谷春艳西北农林科技大学机械与电子工程学院安徽大学农业生态大数据分析与应用技术国家地方联合工程研究中心安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所河南农业大学信息与管理科学学院

针对小麦赤霉病孢子图像中密集分布小目标的漏检错检问题，该研究设计了一种针对该场景下小目标检测模型YOLOv8-FECA。以YOLOv8为基准模型，先添加新的小目标检测层，以此增强网络对更小目标语义信息的捕捉以及提高其特征描述的准确性... 详细信息

针对小麦赤霉病孢子图像中密集分布小目标的漏检错检问题，该研究设计了一种针对该场景下小目标检测模型YOLOv8-FECA。以YOLOv8为基准模型，先添加新的小目标检测层，以此增强网络对更小目标语义信息的捕捉以及提高其特征描述的准确性；其次，构建融合特征的焦点注意力机制（focal efficient channel attention module,FECA）以实现对小目标和密集分布目标的关注；再次，引入Wise-IoU Loss与DFL Loss结合作为边界框的回归损失，提高模型的收敛能力以及对边界框预测的准确性；最后，在不同密集场景和不同光线环境下验证了模型的鲁棒性。结果表明，优化后模型YOLOv8-FECA相比YOLOv8在孢子数据集中的平均检测精度均值m AP@0.5提高了4.3%，达到96.8%，且改进模型的检测效率也达到实时检测要求。该研究设计的YOLOv8-FECA网络模型在保持高性能的同时能够有效提升密集场景小目标检测的精度，为其他作物病害孢子的检测提供了新思路。

关键词：小麦赤霉病孢子密集场景小目标检测 YOLOv8 显微图像

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组织工程化人工角膜上皮的构建

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2007年第4期35卷 27-31页

作者：赵清梅弥胜利屈雷杨学义窦忠英西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心陕西杨凌712100

在去除上皮细胞的人羊膜基底膜上,分别接种关中奶山羊角膜缘组织块和传至第3代的关中奶山羊角膜缘上皮细胞,体外构建组织工程化人工角膜上皮,并对其进行组织形态学和超微结构观察及免疫组化检测。结果表明,角膜缘组织块和角膜上皮细胞... 详细信息

在去除上皮细胞的人羊膜基底膜上,分别接种关中奶山羊角膜缘组织块和传至第3代的关中奶山羊角膜缘上皮细胞,体外构建组织工程化人工角膜上皮,并对其进行组织形态学和超微结构观察及免疫组化检测。结果表明,角膜缘组织块和角膜上皮细胞在羊膜上培养15 d均可形成6～7层上皮细胞结构,细胞内含丰富的细胞器和糖原颗粒,细胞间有大量的桥粒连接,细胞与羊膜间形成半桥粒连接,构建的复合角膜上皮P63染色阳性,与正常的角膜相似。说明羊膜可负载培养山羊角膜缘细胞体外构建组织工程化人工角膜上皮,构建的复合角膜上皮含角膜缘干细胞。

关键词：组织工程奶山羊羊膜角膜缘干细胞

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动物细胞分化与克隆

农业生物技术学报 2005年第2期13卷 247-253页

作者：雷安民窦忠英西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心杨凌712100 西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心

细胞分化是细胞行使功能的前提条件,是特定基因表达的结果。细胞分化状态的维持需要细胞外环境、细胞与细胞之间信息交流及其细胞内环境等共同作用,从而保证分化细胞染色体的特定空间结构。细胞内环境中细胞核因素的影响可以归结为后生... 详细信息

细胞分化是细胞行使功能的前提条件,是特定基因表达的结果。细胞分化状态的维持需要细胞外环境、细胞与细胞之间信息交流及其细胞内环境等共同作用,从而保证分化细胞染色体的特定空间结构。细胞内环境中细胞核因素的影响可以归结为后生性遗传作用,细胞质因素主要有转录后基因沉默(RNAi)和蛋白质磷酸化作用等。克隆动物的实质是细胞分化过程的逆转。克隆动物的过程及其卵母细胞质中的特殊物质破坏了维持供体细胞分化状态的各种条件,改变了分化细胞染色体的特定空间结构,对分化细胞进行了重新编程。克隆过程中卵母细胞质对体细胞的去分化过程并非完全正确,同时由于体细胞染色体可能存在的变异,导致体细胞克隆效率很低。加强对发育生物学基本问题的研究和对现有克隆动物进行详细的研究分析,并继续改进和完善现有的体细胞克隆操作程序,是提高克隆动物效率的当务之急。

关键词：细胞分化克隆后生性遗传重新编程

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山羊角膜内皮细胞分离培养与鉴定

农业生物技术学报 2008年第2期16卷 258-263页

作者：赵清梅杨学义弥胜利窦忠英西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心杨凌712100 西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心

比较山羊眼角膜内皮细胞(GCEC)的4种原代分离培养方法,并对分离培养的角膜内皮细胞(CEC)进行鉴定和研究其生长特性。取屠宰1～24月龄关中奶山羊(Caprar hircus)眼角膜,无菌分离角膜内皮层和Descemet’s membrane,分别用组织块法、胰蛋... 详细信息

比较山羊眼角膜内皮细胞(GCEC)的4种原代分离培养方法,并对分离培养的角膜内皮细胞(CEC)进行鉴定和研究其生长特性。取屠宰1～24月龄关中奶山羊(Caprar hircus)眼角膜,无菌分离角膜内皮层和Descemet’s membrane,分别用组织块法、胰蛋白酶法、dispase酶法和dispase酶联合胰蛋白酶法分离培养原代CEC,比较经4种方法处理后的细胞离散和贴壁情况,筛选出GCEC最佳培养方法,并纯化该方法培养的CEC,对纯化的细胞进行鉴定和研究其生长特性。结果显示,dispase酶联合胰蛋白酶法为最佳分离纯化角膜内皮细胞的方法。分离纯化的细胞经形态学观察、免疫组化染色、Giemsa染色、扫描电镜和透射电镜鉴定为角膜内皮细胞。说明dispase酶联合胰蛋白酶法为角膜内皮细胞分离培养的理想方法,该方法可为哺乳动物角膜内皮细胞的理论研究和构建组织工程化人工角膜内皮提供种子细胞。

关键词：角膜内皮细胞细胞分离体外培养山羊