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苹果赤霉素信号转导因子MdGAMYB的克隆和表达分析

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园艺学报 2017年第5期44卷 817-827页

作者：樊胜雷超辛明志邵红霞 Muhammad Mobeen Tahir 张东韩明玉西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100

以‘长富2号’苹果为试验材料,从其短枝顶芽中克隆得到1个赤霉素信号转导因子MdGAMYB,对其进行生物信息学和表达分析。结果表明,MdGAMYB的开放阅读框(ORF)长度为1 656bp,编码551个氨基酸,蛋白质分子量为59.741 kD。生物信息学分析表明Md... 详细信息

以‘长富2号’苹果为试验材料,从其短枝顶芽中克隆得到1个赤霉素信号转导因子MdGAMYB,对其进行生物信息学和表达分析。结果表明,MdGAMYB的开放阅读框(ORF)长度为1 656bp,编码551个氨基酸,蛋白质分子量为59.741 kD。生物信息学分析表明MdGAMYB编码的蛋白存在多个糖基化位点和磷酸化位点;序列分析表明,Md GAYMB和其他物种的GAMYB蛋白有很高的相似性,均含有保守的R2R3 DNA结合域和GAMYB家族所特有的Box1,Box2和Box3保守区域;系统进化分析表明,Md GAYMB与梨、梅花、草莓、枣和葡萄等的GAMYB蛋白具有较高的同源性。实时荧光定量PCR分析表明,Md GAYMB具有组织表达特异性,在叶片、花和芽中的表达量较高。外源GA3处理抑制了花芽孕育和翌年成花,抑制MdGAMYB的表达。在易成花品种‘烟富6号’中的表达量高于难成花品种‘长富2号’。

关键词：苹果 MdGAMYB 基因克隆基因表达成花诱导

高温强光下水杨酸对黄瓜叶片叶绿素荧光和叶黄素循环的影响

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应用生态学报 2006年第3期17卷 399-402页

作者：孙艳徐伟君范爱丽西北农林科技大学园艺学院杨凌712100

在高温强光条件下，研究了外源水杨酸对黄瓜叶片叶绿索荧光参数和叶黄素循环的影响．结果表明，在高温强光胁迫前2d用50～400μmol·L^-1水扬酸处理叶片，抑制了高温强光下原初光能转换效率（Fv／Fm）、光合电子传递量子效率（ФPSⅡ）... 详细信息

在高温强光条件下，研究了外源水杨酸对黄瓜叶片叶绿索荧光参数和叶黄素循环的影响．结果表明，在高温强光胁迫前2d用50～400μmol·L^-1水扬酸处理叶片，抑制了高温强光下原初光能转换效率（Fv／Fm）、光合电子传递量子效率（ФPSⅡ）、最大荧光（Fm）和光化学猝灭系数（qP）的下降，分别比对照提商，16．1％～30．2％、11．9％～33．0％、7．2％～41．0％和27．2％～160．8％。促进了非光化学猝灭系数（NPQ）的升高，比对照提高了13．1％～62．9％，而对初始荧光（R）影响不大．水杨酸处理可减小高温强光下叶黄素循环库的下降幅度。使（A＋Z）／（V＋A＋Z）升高，分别比对照高29．5％和24．6％．这些结果说明。水杨酸可通过提高非辐射能量耗散，对高温强光引起的黄瓜叶片光合机构的破坏具有保护作用．

关键词：黄瓜水杨酸高温强光叶绿素荧光叶黄素循环

‘长富2号’苹果短枝幼果摘除对芽叶可溶性糖积累和成花相关基因表达的影响

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园艺学报 2017年第4期44卷 622-632页

作者：杜利莎齐思言马娟娟邢利博樊胜李有梅张东赵彩平韩明玉西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100

以‘长富2号’苹果为材料,在盛花期后31d进行短枝摘果处理,研究处理后短枝顶芽生长状态、成花率以及短枝芽叶可溶性糖(蔗糖、果糖、葡萄糖及山梨醇)的动态变化,并利用实时荧光定量PCR检测顶芽糖代谢相关基因(MdSPS6、MdSUSY1、MdHXK1、M... 详细信息

以‘长富2号’苹果为材料,在盛花期后31d进行短枝摘果处理,研究处理后短枝顶芽生长状态、成花率以及短枝芽叶可溶性糖(蔗糖、果糖、葡萄糖及山梨醇)的动态变化,并利用实时荧光定量PCR检测顶芽糖代谢相关基因(MdSPS6、MdSUSY1、MdHXK1、MdSUT1)、MdTPS基因和成花相关基因(MdFT、MdFD、MdCO、MdSOC1、MdLFY、MdAP1)的表达模式。结果表明:摘果处理后,短枝顶芽长度、宽度及鲜样质量有一定的增加,次年成花率显著高于对照;短枝顶芽中蔗糖、果糖、山梨醇变化较为明显,在生理分化后期都显著高于对照,而葡萄糖含量变化较小;短枝叶片中,4种可溶性糖含量第1个高峰由盛花期后60 d提前至40 d;顶芽糖代谢相关基因及3个MdTPS基因(MdTPS1-1~MdTPS1-3)都响应摘果处理;MdFT、MdFD、MdCO、MdSOC1和MdLFY等的表达在盛花期后40 d均有显著的上调,其中MdLFY的变化最为明显,而MdAP1在整个生理分化期与对照无显著差异。

关键词：苹果摘果成花可溶性糖基因表达

苹果渣总三萜对小鼠CCl_4急性肝损伤的保护作用

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现代食品科技 2015年第9期31卷 45-50页

作者：张爽任亚梅刘春利马婷陈相杰任小林西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100

本文研究了富士苹果渣中总三萜体外抗氧化活性及其体内对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用。采用超声波辅助提取、大孔树脂纯化得到苹果渣总三萜,以抗坏血酸(Vc)为对照,测定苹果渣总三萜清除DPPH·、ABTS+·、·OH的能力,评价其体外抗氧化... 详细信息

本文研究了富士苹果渣中总三萜体外抗氧化活性及其体内对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用。采用超声波辅助提取、大孔树脂纯化得到苹果渣总三萜,以抗坏血酸(Vc)为对照,测定苹果渣总三萜清除DPPH·、ABTS+·、·OH的能力,评价其体外抗氧化活性;建立CCl4急性肝损伤模型,生化法测定小鼠血清中ALT、AST的活性,肝组织匀浆中SOD、GSH-Px的活性及MDA、IL-6的含量。结果表明:苹果渣总三萜具有一定的体外抗氧化能力,但不及Vc。在体内实验中与模型组相比,血清中ALT、AST活性显著下降,最高达48%以上;肝组织中SOD、GSH-Px活性显著升高,最高达69%;MDA、IL-6含量显著降低,最高达43%。苹果渣总三萜对CCl4急性肝损伤有明显保护作用,其机制可能与清除体内自由基,调节血清酶、抗氧化物酶的活力和含量有关。

关键词：苹果渣总三萜自由基抗氧化活性四氯化碳肝损伤

山梨酸盐与钙胁迫对甜樱桃灰霉病抗性的诱导作用

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食品科学 2018年第15期39卷 219-224页

作者：徐乐艺张丽媛郭宇欢颜佳薇陈红梅何绪生何玲西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100

以‘秦樱1号’樱桃为试材,研究不同质量浓度山梨酸钾(1、3、5、7 g/L)、CaCl_2(5、10、15、20 g/L)处理对离体灰霉菌的抑制效果,通过菌丝生长抑制率、扫描电子显微镜观察芽管生长及孢子萌发抑制率筛选出最佳处理质量浓度。结果表明:与... 详细信息

以‘秦樱1号’樱桃为试材,研究不同质量浓度山梨酸钾(1、3、5、7 g/L)、CaCl_2(5、10、15、20 g/L)处理对离体灰霉菌的抑制效果,通过菌丝生长抑制率、扫描电子显微镜观察芽管生长及孢子萌发抑制率筛选出最佳处理质量浓度。结果表明:与对照组相比,山梨酸钾、CaCl_2处理均能不同程度地抑制灰霉菌菌丝的生长,抑制灰霉菌芽管的伸长,降低孢子的萌发率,抑制效果随质量浓度的升高逐渐加强,20 g/L CaCl_2、5 g/L山梨酸钾处理抑制效果最好。以无菌水为对照,用采前喷20 g/L CaCl_2、采后5 g/L山梨酸钾处理及二者复合处理接种灰霉菌的甜樱桃,在(23±1)℃下存放5 d,通过测定发病率、病斑直径及相关酶活力探究不同处理对甜樱桃灰霉病的抑制效果。在活体接种实验中,与对照组相比,20 g/L CaCl_2、5 g/L山梨酸钾单独及复合处理均能有效抑制接种到甜樱桃果实上灰霉菌的生长,减缓病斑的扩展,CaCl_2与山梨酸钾处理能显著抑制樱桃果实中MDA含量上升,诱导果实合成与积累抗性相关酶(多酚氧化酶、过氧化物酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶)在接种1 d后或接种3 d后的活力提高,以5 g/L山梨酸钾与20 g/L CaCl_2复合处理抑制效果最好,该研究为降低由灰霉菌侵染引起的病害及采后甜樱桃果实防腐保鲜提供了参考。

关键词：甜樱桃灰霉病山梨酸钾钙抗病相关酶

苹果HD-ZipⅠ家族基因序列特征及其在果实中的激素响应

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中国农业科学 2015年第21期48卷 4314-4322页

作者：温小红姜永华亢键王豪杰任小林西北农林科技大学园艺学院

[目的]对苹果基因组中挖掘得到的HD-Zip Ⅰ(Homeodomain leucine zipper Ⅰ)家族基因进行生物信息预测,结合生理生化数据为苹果果实发育的激素调控网络研究提供最佳候选基因。[方法]应用Ex PASy进行HD-ZipⅠ家族蛋白基本理化性质分析,采... 详细信息

[目的]对苹果基因组中挖掘得到的HD-Zip Ⅰ(Homeodomain leucine zipper Ⅰ)家族基因进行生物信息预测,结合生理生化数据为苹果果实发育的激素调控网络研究提供最佳候选基因。[方法]应用Ex PASy进行HD-ZipⅠ家族蛋白基本理化性质分析,采用MEME和PLACE软件预测各成员启动子含有的顺式作用元件及其功能,利用GSDS绘制基因内含子/外显子结构示意图;通过内源乙烯浓度、可溶性固形物、可滴定酸、硬度等品质指标检测‘皇家嘎啦’苹果果实在不同激素处理条件下的后熟进程;运用半定量RT-PCR分析HD-Zip I家族各成员对外源激素的响应。[结果]鉴定完整的22个HD-ZipⅠ基因可以细分为5个亚类,同一亚类基因的内含子/外显子结构相似,但仍有差异;各基因起始密码子上游-600 bp区域内广泛分布多个响应赤霉素、细胞分裂素、茉莉酸、乙烯和脱落酸的顺式作用元件,以(GA/TC)8重复序列最为保守和丰富。乙烯和脱落酸两种激素处理后,果实内源乙烯浓度及硬度等各指标变化表现出极高的相似度,均加快了‘皇家嘎啦’果实的后熟进程;不同于其他各家族成员,MdHZ1和MdHZ17两个基因的转录水平在乙烯和脱落酸处理后48 h均被不同程度的上调,而在有延缓果实衰老效果的腐胺(PUT)和赤霉素(GA4)处理组中表现为下调,表明MdHZ1和MdHZ17可能与果实的后熟进程有较为紧密的联系。MdHZ16在成熟果实组织中未检测到表达,其他家族成员的激素响应特性未表现出一定的规律性,表明同一家族内即使结构相似的基因也并不一定呈现相似的表达模式,家族基因上游调控机制有一定的复杂性。[结论]通过苹果基因组扫描获得22个HD-Zip I基因,这些基因编码的蛋白结构相似度较高;基因启动子区域含有多个参与不同激素交互作用的顺式作用元件,这或许为家族成员差异响应各外源激素处理的原因;MdHZ1和MdHZ17两个基因与果实的后熟进程表现出较为紧密的联系,可以作为候选基因进行果实后熟相关方面的深入研究。

关键词：苹果 HD-ZipⅠ家族激素后熟差异表达基因

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葡萄抗病无核胚挽救育种及分子标记辅助选择

西北植物学报 2005年第12期25卷 2395-2401页

作者：郭海江王跃进张剑侠潘学军唐冬梅田莉莉西北农林科技大学园艺学院

以欧洲葡萄无核品种为母本，中国野生葡萄双优，欧山杂种北醉及8个欧洲葡萄品种为父本共进行了16个组合的杂交，通过胚挽救技术获得胚挽救苗55个株系。利用无核基因特异引物GSLP1、抗黑痘病和抗炭疽病基因RAPD标记对杂种株系进行分子检... 详细信息

以欧洲葡萄无核品种为母本，中国野生葡萄双优，欧山杂种北醉及8个欧洲葡萄品种为父本共进行了16个组合的杂交，通过胚挽救技术获得胚挽救苗55个株系。利用无核基因特异引物GSLP1、抗黑痘病和抗炭疽病基因RAPD标记对杂种株系进行分子检测，杂种中检测出拥有无核基因RAPD标记的22株、拥有抗黑痘病基因RAPD标记的16株、拥有抗炭疽病基因RAPD标记的9株。在这些胚挽救杂种苗中，同时拥有无核、抗黑痘病、抗炭疽病基因RAPD标记的胚挽救苗4株，同时拥有无核和抗黑痘病基因RAPD标记的胚挽救苗9株，同时拥有无核、抗炭疽病基因RAPD标记的胚挽救苗1株。

关键词：葡萄抗病性无核性胚挽救分子标记辅助选择

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脱水素在植物非生物胁迫中的作用研究进展

农业生物技术学报 2022年第3期30卷 594-605页

作者：潘潇潇胡慧芳陈楠张华锋陈儒钢西北农林科技大学园艺学院

脱水素(dehydrin, DHN)属于胚胎发育晚期丰富蛋白(late embryogenesis abundant protein, LEA)Ⅱ家族成员，通常在植物受到逆境胁迫时产生并积累，以提高植物对逆境的耐受性，在植物抵抗逆境过程中发挥重要作用。本文综述了脱水素的蛋... 详细信息

脱水素(dehydrin, DHN)属于胚胎发育晚期丰富蛋白(late embryogenesis abundant protein, LEA)Ⅱ家族成员，通常在植物受到逆境胁迫时产生并积累，以提高植物对逆境的耐受性，在植物抵抗逆境过程中发挥重要作用。本文综述了脱水素的蛋白结构特征，以及在低温、干旱、盐胁迫等非生物胁迫下的功能，以期为脱水素的深入研究提供参考依据，同时展望了利用现代生物技术将脱水素用于提高植物对逆境耐受力的应用前景。此综述归纳脱水素的功能，探讨脱水素的作用机理，解析脱水素的分子调控机制，对培育新品种及维护高产稳产和可持续发展具有重要的作用。

关键词：脱水素非生物胁迫抗逆性

辣椒烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸基因(NADPH)在辣椒中的遗传转化及其抗病性鉴定

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农业生物技术学报 2011年第1期19卷 45-50页

作者：包良帅巩振辉柴贵贤李大伟西北农林科技大学园艺学院

为了分析辣椒NADPH基因与辣椒疫病抗性之间的关系,明确其在辣椒抗疫病方面的作用,以辣椒NADPH基因为目的基因,利用载体pBI121构建了植物表达载体pBI121-NADPH,采用农杆菌介导法转化辣椒(Capsicum annuum L.)感病品种B12,获得了5个卡那... 详细信息

为了分析辣椒NADPH基因与辣椒疫病抗性之间的关系,明确其在辣椒抗疫病方面的作用,以辣椒NADPH基因为目的基因,利用载体pBI121构建了植物表达载体pBI121-NADPH,采用农杆菌介导法转化辣椒(Capsicum annuum L.)感病品种B12,获得了5个卡那霉素抗性转化株系。对卡那霉素抗性转化植株进行PCR和RT-PCR分子检测发现,这5个转化株系含有目的基因CanNADPH。应用辣椒疫病抗性离体叶片鉴定技术,鉴定转基因植株对疫霉菌(Phytophthora capsici)的抗病性,结果表明,转基因辣椒的发病率较非转基因植株降低了22.2%,其病情指数降低了46.5%,表明辣椒NADPH基因在辣椒抗疫病方面有重要作用。

关键词：辣椒烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)基因遗传转化疫霉菌抗病性鉴定