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奶牛胚胎一步冷冻保存的研究

西北农业大学学报 1996年第4期24卷 16-19页

作者：王新庄窦忠英唐铁山高志敏樊敬庄西北农业大学奶牛胚胎移植试验站

用ＦＳＨ－ＰＧＦ＿（２α）超排黑白花奶牛２２头，以非手术方法采得７～８日龄胚胎６８枚，其中４５枚胚胎用于一步冷冻试验。水浴解冻后共回收４０枚胚胎。用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖一步除去保护剂，胚胎形态完好率为９０％（３６／４... 详细信息

用ＦＳＨ－ＰＧＦ＿（２α）超排黑白花奶牛２２头，以非手术方法采得７～８日龄胚胎６８枚，其中４５枚胚胎用于一步冷冻试验。水浴解冻后共回收４０枚胚胎。用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖一步除去保护剂，胚胎形态完好率为９０％（３６／４０）；荧光染色阳性率为８７．５％（７／８）；体外培养发育率为７５％（６／８）；冻胚移植受体妊娠率为４３．５％（１０／２３）。

关键词：一步冷冻妊娠率冷冻胚胎奶牛

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哺乳动物胚胎干细胞系建立方法的研究进展

西北农林科技大学学报（自然科学版） 1993年第S2期26卷 87-92页

作者：唐铁山窦忠英西北农业大学奶牛胚胎移植试验站陕西杨陵712100

本文概述了近10年来哺乳动物胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells,ES细胞)系建立的方法及其研究进展概况,并对目前家畜ES细胞建立方法研究中存在的问题及可能解决的途径进行了一些探讨。

关键词：胚胎干细胞哺乳动物培养

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小鼠胚胎直接投入液氮冷冻保存试验

西北农林科技大学学报（自然科学版） 1993年第S2期26卷 73-76页

作者：王新庄窦忠英樊敬庄徐照学西北农业大学奶牛胚胎移植试验站陕西杨陵712100

室温下,将292枚小鼠胚胎在含128.9g/L甘油PBSS(含20％犊牛血清的磷酸盐缓冲液)和含193.2g/L甘油+85.6g/L蔗糖PBSS内分别孵育片刻,装管后直接投入液氮冷冻保存。冻胚快速解冻后,用含342.3g/L蔗糖PBSS脱去甘油,用PBSS清洗后镜下观察评定,... 详细信息

室温下,将292枚小鼠胚胎在含128.9g/L甘油PBSS(含20％犊牛血清的磷酸盐缓冲液)和含193.2g/L甘油+85.6g/L蔗糖PBSS内分别孵育片刻,装管后直接投入液氮冷冻保存。冻胚快速解冻后,用含342.3g/L蔗糖PBSS脱去甘油,用PBSS清洗后镜下观察评定,胚胎回收率为86.9％(254/292),胚胎形态正常率为77.1％(196/254)。其中部分桑椹胚经体外培养,囊胚发育率为71.4％(20/28)。将110枚冻胚移植给7只受体,3只妊娠,产仔12只(5,7),妊娠率为43％(3/7),产仔率为10.9％(12/110),其中囊胚移植1只受体妊娠产仔3只,产仔率为25％(3/12)。

关键词：胚胎快速冷冻小鼠

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超数排卵对奶牛产奶量及繁殖能力的影响

西北农林科技大学学报（自然科学版） 1993年第S2期26卷 62-64页

作者：高志敏窦忠英王新庄毛向嵘徐公玉韩晓良西北农业大学奶牛胚胎移植试验站陕西杨陵712100

用FSH+PGF_(2)对16头黑白花奶牛进行超数排卵处理。超排前4d和超排1～10d日均产奶量差异不显著(P>0.05)。超排采胚后1头因年老淘汰,1头冲胚时发现患有慢性卡他性脓性子宫内膜炎进行治疗未配,其余14头冲胚后发情正常,人工授精后均妊娠,... 详细信息

用FSH+PGF_(2)对16头黑白花奶牛进行超数排卵处理。超排前4d和超排1～10d日均产奶量差异不显著(P>0.05)。超排采胚后1头因年老淘汰,1头冲胚时发现患有慢性卡他性脓性子宫内膜炎进行治疗未配,其余14头冲胚后发情正常,人工授精后均妊娠,和正常牛发情配种妊娠率无差异。超数排卵对奶牛产奶量及繁殖能力无影响。

关键词：超数排卵产奶量繁殖能力奶牛

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家兔原核期受精卵的体外培养

西北农林科技大学学报（自然科学版） 1993年第S2期26卷 84-86页

作者：唐铁山杨锦昌窦忠英徐照学西北农业大学奶牛胚胎移植试验站陕西杨陵712100

原核期兔胚胎用微滴法分别在mDM液、TCM-199液和PBS液中进行培养,结果表明,发育到二细胞的百分率分别为96.95％(127/131),77.19％(44/57)和72.31％(47/65);发育到四细胞期的百分率分别为95.42％(125/131),64.91％(37/57)和63.08％(41/65);发育到八细胞期的百分率分别为84.73％(111/131),33.33％(19/57)和41.54％(27/65);发育到桑椹胚的百分率分别为67.94％(89/131),19.29(11/57)和23.08％(15/65)。以上结果说明:上述3种培养液中,改良DM液是把兔胚胎从原核期培养到桑椹胚的最佳培养液。

关键词：体外培养早期胚胎家兔

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现场分割奶牛胚胎产生同胚双犊的研究

西北农林科技大学学报（自然科学版） 1993年第S2期26卷 49-51页

作者：樊敬庄窦忠英王新庄高志敏徐照学武成财刘民学西北农业大学奶牛胚胎移植试验站陕西杨陵712100 西安市草滩农场第一奶牛场西安710021

采用简易徒手胚胎分割法,一分为二分割奶牛胚胎。应用非手术方法,每头受体移植成对二分胚。移植4头受体,2头妊娠,其中1头产公犊1头,1头产母犊2头。该母犊为同胚双犊,健康,发育正常。

关键词：胚胎分割同胚双犊奶牛

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奶牛胚胎一分为四分割移植试验

西北农业大学学报 1992年第2期20卷 1-4页

作者：窦忠英王新庄樊敬庄徐照学高志敏国永周薛帅岐西北农业大学奶牛胚胎移植试验站陕西杨陵712100 陕西武功镇畜牧兽医站陕西武功712200

1990年7月至1991年3月,以非手术方法采得黑白花奶牛7日龄胚胎。在立体显微镜下,应用徒手简易胚胎分割法,一分为四分割6枚胚胎。将所分割的24枚1/4裸胚,以非手术方法,分别移植给18头受体牛。其中9头妊娠,受体移植妊娠率为50％(9/18),胚... 详细信息

1990年7月至1991年3月,以非手术方法采得黑白花奶牛7日龄胚胎。在立体显微镜下,应用徒手简易胚胎分割法,一分为四分割6枚胚胎。将所分割的24枚1/4裸胚,以非手术方法,分别移植给18头受体牛。其中9头妊娠,受体移植妊娠率为50％(9/18),胚胎移植妊娠率为150％(9/6)。得到同胚三犊一组,同胚二胎一组(其中一头产犊,一头流产)和单胎四个(其中两头产犊,两头流产)。

关键词：胚胎移植受胎率胚胎分割奶牛

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奶牛胚胎直接投入液氮冷冻保存试验

西北农林科技大学学报（自然科学版） 1993年第S2期26卷 65-68页

作者：窦忠英王新庄樊敬庄高志敏徐照学国永周韩晓良薛帅歧西北农业大学奶牛胚胎移植试验站陕西杨陵712100 武功镇畜牧兽医工作站陕西武功713200

将奶牛7日龄胚胎,常温下在含128.9g/L甘油PBSS肉孵育20min后移入193.2g/L甘油+85.6g/L蔗糖PBSS内孵育7min,装管后即投入液氮内冷冻保存。182d后解冻8枚,用含342.3g/L蔗糖PBSS脱去甘油,7枚可供移植用,胚胎可用率为87.5％(7/8),移植给7头... 详细信息

将奶牛7日龄胚胎,常温下在含128.9g/L甘油PBSS肉孵育20min后移入193.2g/L甘油+85.6g/L蔗糖PBSS内孵育7min,装管后即投入液氮内冷冻保存。182d后解冻8枚,用含342.3g/L蔗糖PBSS脱去甘油,7枚可供移植用,胚胎可用率为87.5％(7/8),移植给7头受体牛,3头妊娠,妊娠率为42.9％。

关键词：胚胎冷冻直接投入液氮奶牛

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奶牛鲜胚移植技术的研究

西北农林科技大学学报（自然科学版） 1993年第S2期26卷 52-56页

作者：窦忠英徐照学高志敏张怀玉粟国标黄彩珍武成财刘民学西北农业大学奶牛胚胎移植试验站陕西杨陵712100 西安市奶业科学研究所西安710021 西安市草滩农场第一奶牛场西安710012

用PMSG+PG,PMSG+PG+激光照射,FSH+PG和PSH+PG+促排卵3号四组药物组合,超排处理15头黑白花奶牛。各组获得可用胚胎头均数分别为1.50±2.52枚(n=2)。3.30±2.52枚(n=3),2.86±3.85枚(n=7)和6.00±5.29枚(n=3),四组总头均数为3.40±3.70枚(n=15)。鲜胚移植三批受体妊娠率平均为62.2％(28/45),前两批移植妊娠率高达78.3％(18/23),其中1头供体一次冲胚11枚,移植11头受体,有9头妊娠。15头供体牛冲胚后40d内人工授精全部妊娠。

关键词：胚胎移植奶牛鲜胚妊娠率