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扁蒴藤素通过活性氧调控PI3K/AKT通路增强顺铂诱导鼻咽癌细胞凋亡

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南方医科大学学报 2024年第5期44卷 904-912页

作者：王媛媛陈腾从小凡李依然陈蕊张配孙小锦赵素容蚌埠医科大学药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心安徽蚌埠233030

目的观察扁蒴藤素和顺铂对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法CCK-8法检测不同浓度扁蒴藤素、顺铂处理24 h后HNE-1和CNE-2Z细胞的存活率,集落形成实验观察细胞集落形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)水平,We... 详细信息

目的观察扁蒴藤素和顺铂对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法CCK-8法检测不同浓度扁蒴藤素、顺铂处理24 h后HNE-1和CNE-2Z细胞的存活率,集落形成实验观察细胞集落形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)水平,Western blotting检测蛋白表达。N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后,检测细胞增殖、凋亡及通路的影响。结果CCK-8结果显示,扁蒴藤素和顺铂均可抑制HNE-1和CNE-2Z细胞的存活率(P<0.05)。与单用扁蒴藤素或顺铂相比,联合使用明显抑制细胞存活率和细胞集落形成能力(P<0.05),升高细胞凋亡率(P<0.01)和细胞内ROS水平(P<0.01),上调Bax、Cleaved caspase-3和Cleaved PARP的表达(P<0.05),下调Bcl-2、Mcl-1和PARP的表达(P<0.05),同时,下调细胞中p-PI3K和p-AKT的表达(P<0.05)。而NAC可部分逆转扁蒴藤素联合顺铂对HNE-1和CNE-2Z细胞的增殖抑制(P<0.01)和凋亡诱导作用(P<0.05),部分恢复p-PI3K和p-AKT的下调作用(P<0.05)。结论扁蒴藤素能增强鼻咽癌细胞对顺铂的增殖抑制和凋亡诱导作用,其机制可能与ROS介导的PI3K/AKT信号通路失活有关。

关键词：鼻咽癌扁朔藤素顺铂活性氧 PI3K/AKT信号通路

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牛蒡低聚果糖的羧甲基化修饰及对RAW264.7细胞免疫活性提升

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精细化工 2024年第7期41卷 1542-1549,1624页

作者：赵志刚金丹黄慧丹李贵文单振伟皖南医学院药学院安徽芜湖241002 安徽省多糖药物工程技术研究中心安徽芜湖241002

采用水媒法对牛蒡低聚果糖(BFO)进行了羧甲基化修饰,制备了不同羧甲基化取代度(DS)的修饰产物(CM-BFO),通过单因素和响应面实验考察了反应条件对DS的影响,以及各因素的交互作用。采用GC、FTIR、^(1)HNMR、^(13)CNMR对BFO及CM-BFO的结构... 详细信息

采用水媒法对牛蒡低聚果糖(BFO)进行了羧甲基化修饰,制备了不同羧甲基化取代度(DS)的修饰产物(CM-BFO),通过单因素和响应面实验考察了反应条件对DS的影响,以及各因素的交互作用。采用GC、FTIR、^(1)HNMR、^(13)CNMR对BFO及CM-BFO的结构进行了表征,以RAW264.7细胞为模型测试了不同DS的CM-BFO体外细胞实验的免疫活性。结果表明,0.5 g BFO用30 mL质量分数为20%的Na OH水溶液碱化处理1h,以30 mL质量分数为2.5%的氯乙酸水溶液为羧甲基化试剂,在反应温度65℃、反应时间3.3 h的最佳条件下,BFO的DS最高,为1.06。BFO和CM-BFO均能提升RAW264.7细胞的免疫活性,3种DS为0.82、0.93和0.96的CM-BFO免疫活性较BFO明显提升,而低DS(0.73)和高DS(1.06)的CM-BFO则影响较小。CM-BFO的免疫活性在一定范围内随其DS的升高呈先增强后减弱的趋势。

关键词：牛蒡低聚果糖羧甲基化修饰取代度免疫活性中药现代化技术

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双氢青蒿素通过促进活性氧的产生增强鼻咽癌细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性

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南方医科大学学报 2024年

作者：从小凡陈腾李硕王媛媛周龙云李小龙张配孙小锦赵素容蚌埠医科大学药学院//安徽省生化药物工程技术研究中心

目的探究双氢青蒿素（DHA）与顺铂（DDP）联合应用对耐DDP鼻咽癌细胞株HNE1/DDP增殖抑制和促凋亡的作用及其机制。方法 CCK-8法检测不同浓度DHA(0、5、10、20、40、80、160μmol/L)和不同浓度DDP(0、4、8、16、32、64、128μmol/L)处理... 详细信息

目的探究双氢青蒿素（DHA）与顺铂（DDP）联合应用对耐DDP鼻咽癌细胞株HNE1/DDP增殖抑制和促凋亡的作用及其机制。方法 CCK-8法检测不同浓度DHA(0、5、10、20、40、80、160μmol/L)和不同浓度DDP(0、4、8、16、32、64、128μmol/L)处理24 h和48 h后HNE1/DDP细胞的存活率；采用Compusyn软件计算DHA与DDP的联合指数。将HNE1/DDP细胞分为对照组、DHA组、DDP组、DHA联合DDP组，给药处理24 h后，CCK-8、EdU和集落克隆形成实验分别检测细胞活力、细胞增殖和集落克隆形成能力；流式细胞术检测细胞凋亡情况和细胞内活性氧（ROS）水平；Western blotting检测凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3表达水平。ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸预处理后，检测其对DHA联合DDP诱导的细胞增殖、凋亡的影响。结果不同浓度DHA和不同浓度DDP均能明显抑制HNE1/DDP细胞活力，DHA(5μmol/L)联合DDP(8、16、32、64、128μmol/L)的联合指数均小于1。与DHA或DDP单独处理组相比，DHA联合DDP组细胞活力下降（P<0.01），集落形成数和EdU阳性染色细胞减少（P<0.01），细胞凋亡率和细胞内ROS水平升高（P<0.01），细胞凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3的表达水平增加（P<0.05），而N-乙酰半胱氨酸预处理可部分逆转DHA联合DDP对HNE1/DDP细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用（P<0.01）。结论 DHA增强DDP对HNE1/DDP细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用，其机制可能与细胞内ROS的积累有关。

关键词：鼻咽癌双氢青蒿素顺铂活性氧增殖细胞凋亡

线粒体质量控制在阿霉素心肌损伤中的作用研究进展

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中国药理学通报 2024年 1814-1818页

作者：刘诗瑶张梦晓刘浩蚌埠医科大学药学院安徽省生化药物工程技术研究中心

阿霉素(adriamycin/doxorubicin,DOX)是蒽环类抗肿瘤抗生素的代表药,其主要不良反应为心脏毒性,严重影响DOX的临床应用和患者生存质量。线粒体功能受损是DOX心脏毒性的重要病理机制。心脏是高耗能器官,含有丰富的线粒体以支持心肌细胞... 详细信息

阿霉素(adriamycin/doxorubicin,DOX)是蒽环类抗肿瘤抗生素的代表药,其主要不良反应为心脏毒性,严重影响DOX的临床应用和患者生存质量。线粒体功能受损是DOX心脏毒性的重要病理机制。心脏是高耗能器官,含有丰富的线粒体以支持心肌细胞的能量需要。机体通过线粒体自噬、线粒体融合/裂变、线粒体生物合成以及线粒体未折叠蛋白反应等质量控制机制来维持线粒体稳态。大量研究表明,DOX心脏毒性与破坏心肌细胞内线粒体质量控制系统有关,重建线粒体质量控制稳态能够减轻DOX相关心肌损伤。该文针对心肌线粒体质量控制系统紊乱在DOX心肌损伤中的作用及其潜在机制进行综述,并探讨靶向线粒体质量控制是否为治疗DOX心肌病的潜在策略。

关键词：阿霉素心肌损伤线粒体稳态线粒体融合/裂变线粒体自噬线粒体生物发生线粒体未折叠蛋白反应

BiOI/g-C_(3)N_(4)修饰电极伏安法检测磺胺甲噁唑

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分析试验室 2024年第1期43卷 1-8页

作者：武天恒刘蕊韩雪刘日嘉孙源哈尔滨商业大学药学院药物工程技术研究中心哈尔滨150076

通过热聚合法高温煅烧尿素得到g-C_(3)N_(4)纳米片,再以溶剂热法得到Bi OI/g-C_(3)N_(4)复合材料,采用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、红外光谱(FT-IR)等手段对Bi OI/g-C_(3)N_(4)纳米复合材料的微观结构... 详细信息

通过热聚合法高温煅烧尿素得到g-C_(3)N_(4)纳米片,再以溶剂热法得到Bi OI/g-C_(3)N_(4)复合材料,采用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、红外光谱(FT-IR)等手段对Bi OI/g-C_(3)N_(4)纳米复合材料的微观结构和形貌进行了表征。通过滴涂法将Bi OI/g-C_(3)N_(4)复合材料修饰在玻碳电极(GCE)表面,构建了用于快速检测磺胺甲噁唑(SMX)的电化学传感平台,通过循环伏安(CV)和差分脉冲伏安(DPV)技术对SMX进行电化学分析,峰值电流随SMX浓度呈线性增加,线性范围为5~1000μmol/L,检出限为0.025μmol/L。采用加标回收法测定自来水样品中的SMX,加标回收率为90.0%~103.4%。

关键词： g-C_(3)N_(4)纳米片电化学传感器磺胺甲噁唑

参芪扶正注射液增强免疫检查点抑制剂anti-PD-L1抗肿瘤作用及机制研究

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中国临床药理学与治疗学 2024年第7期29卷 792-799页

作者：周智华常静雯严元元漆亚男韩晶晶朱欣怡俞晨吴红雁范方田蚌埠医学院药学院安徽省生化药物工程技术研究中心安徽蚌埠233030 江苏省肿瘤医院江苏省肿瘤防治研究所江苏南京210000 江苏医药职业学院医药生物技术研究院江苏盐城224005

目的:探究参芪扶正注射液(Shenqifuzheng injection,SFI)联合PD-L1抗体对肿瘤免疫微环境的影响及其疗效研究。方法:构建B16F10-LUC黑色素瘤皮下移植瘤模型,采用免疫组化技术标记抗体Ki67、CD31、CD8、CD16、CD163、FOXP3、LY6C、LY6G检... 详细信息

目的:探究参芪扶正注射液(Shenqifuzheng injection,SFI)联合PD-L1抗体对肿瘤免疫微环境的影响及其疗效研究。方法:构建B16F10-LUC黑色素瘤皮下移植瘤模型,采用免疫组化技术标记抗体Ki67、CD31、CD8、CD16、CD163、FOXP3、LY6C、LY6G检测肿瘤组织中CD8^(+)T细胞、Treg细胞、NK细胞、MDSCs细胞、中心粒细胞的表达情况,进一步应用流式细胞技术检测脾脏组织中CD11c^(+)、IA/IE^(+)、CD80^(+)细胞的比值,以及肿瘤组织中CD8^(+)T、CD4^(+)T、Treg的比值。结果:免疫组化结果显示,相较于对照组,给药组可以显著抑制肿瘤血管生成、肿瘤细胞增殖,降低免疫抑制细胞因子CD4^(+)T细胞、Treg细胞、MDSCs细胞、中性粒细胞的表达水平,促进CD8、NK的浸润(P<0.05,P<0.01)。流式结果显示,给药组明显提升了肿瘤组织CD8^(+)T细胞,脾脏中DC细胞的表达水平,抑制CD4^(+)T、Treg细胞的浸润(P<0.05,P<0.01)。肿瘤体积大小结果显示,给药组明显抑制肿瘤的生长,单用PD-L1抗体抑瘤率优于单用SFI组,联合用药优于单用PD-L1抗体组(P<0.01)。结论:参芪扶正注射液联合PD-L1抗体可以发挥协同抗肿瘤的作用,且可能与增强DC细胞浸润,促进T细胞活化有关,免疫组化结果提示对肿瘤免疫微环境也具有很好的改善。

关键词：肿瘤免疫微环境参芪扶正注射液免疫细胞

在抑郁症大鼠模型中MiRNA-103-3p调控Rab10促进神经细胞自噬

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南方医科大学学报 2024年第7期44卷 1315-1326页

作者：张叶明张袁祥沈学彬王国栋朱磊皖南医学院药学院安徽芜湖241002 安徽省多糖药物工程技术研究中心安徽芜湖241002 安徽省皖南地区植物药活性物质筛选与再评价工程实验室安徽芜湖241002 安徽省代谢性疾病药物基础研究创新中心安徽芜湖241002

目的探讨与神经保护相关的基因Rab10在抑郁症体内外模型中发挥的功能和作用机制。方法选取36只大鼠作为慢性应激模型组(CUMS组),每只大鼠单笼饲养,进行6周慢性不可预测温和应激,另选取12只作为对照组。CUMS组大鼠完成6周CUMS刺激后,根... 详细信息

目的探讨与神经保护相关的基因Rab10在抑郁症体内外模型中发挥的功能和作用机制。方法选取36只大鼠作为慢性应激模型组(CUMS组),每只大鼠单笼饲养,进行6周慢性不可预测温和应激,另选取12只作为对照组。CUMS组大鼠完成6周CUMS刺激后,根据旷场实验数据和体质量分成3组(12只/组):CUMS+生理盐水组、CUMS+AAV载体组和CUMS+AAV过表达Rab10组,CUMS+saline组大鼠侧脑室注射生理盐水;CUMS+AAV组大鼠侧脑室注射AAV空病毒载体;CUMS+AAV-oe-Rab10组大鼠侧脑室注射AAV过表达Rab10载体实现Rab10基因过表达,CUMS刺激在整个实验期间持续进行。对照组大鼠始终不进行任何刺激。利用大鼠行为学指标的变化评价大鼠抑郁状态。构建CORT诱导的PC12细胞模型,CCK-8法检测细胞活力。通过TargetScan数据库预测与Rab10相互作用的miRNA及miRNA结合位点,并结合双荧光素酶和RIP实验探究miRNA-103-3p与Rab10的相互作用。在CORT刺激的PC12细胞中过表达Rab10,或在转染miRNA-103-3p inhibitor基础上沉默Rab10,qRT-PCR法检测miRNA-103-3p和Rab10的表达水平;Western blotting检测细胞中Rab10、BDNF、CREB、p62、Beclin-1、Wnt3a、Gsk3β、磷酸化(p)-Gsk3β和β-catenin的蛋白含量。结果病毒过表达Rab10后明显改善CUMS大鼠行为学指标(P<0.05)。qRT-PCR和Western blotting证实Rab10基因在CUMS大鼠海马与CORT诱导的PC12细胞中表达下调(P<0.05)。生物信息学结合双荧光素酶和RIP实验证实miRNA-103-3p靶向Rab10(P<0.05)。过表达Rab10或沉默miRNA-103-3p激活了Wnt/β-catenin信号通路,上调BDNF、CREB和Beclin-1的含量,下调p62蛋白的表达(P<0.05);下调miRNA-103-3p的基础上沉默Rab10逆转了miRNA-103-3p的作用(P<0.05)。结论miRNA103-3p靶向Rab10激活Wnt/β-catenin信号通路,改善神经细胞的可塑性,促进细胞自噬,从而对抗CORT诱导的PC12细胞损伤。

关键词： Rab10 miRNA-103-3p 神经可塑性自噬抑郁症

骨膜水凝胶负载脂肪间充质干细胞来源外泌体治疗骨关节炎

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海南医学院学报 2024年

作者：章竞常恬刘欣张诗晗刘阳霍强蚌埠医科大学药学院药物化学教研室安徽省生化药物工程技术研究中心南京医科大学药学院药剂学教研室

目的：制备了一种骨膜细胞外基质（periosteum extracellular matrix， PECM）水凝胶负载脂肪间充质干细胞来源的外泌体（exosomes of adipose mesenchymal stem cells， AdMSC-Exo），评价其对内侧半月板失稳术（destabilization of medial meniscus， DMM）构建的骨关节炎大鼠模型的治疗效果。方法：采用超速离心法提取AdMSC-Exo并进行表征。PECM通过脱细胞和酶降解工艺制备。以制得的水凝胶负载外泌体得到PECM@AdMSC-Exo。SD雄鼠随机分为假手术(Sham)组、DMM+Saline组、DMM+PECM组、DMM+ AdMSC-Exo组、DMM+PECM@AdMSC-Exo组。通过关节腔注射药物进行体内药效实验，观察其对骨关节炎的治疗作用。结果：表征实验结果表明，成功制备了AdMSC-Exo、PECM和PECM@AdMSC-Exo。体外实验表明，AdMSC-Exo对损伤的软骨细胞具有修复作用。体内药效实验结果表明，与对照组相比，PECM@AdMSC-Exo可以有效修复软骨，对大鼠骨关节炎具有较好的治疗作用，且对大鼠的体重无明显影响。结论：本研究成功制备了PECM@AdMSC-Exo，对大鼠软骨损伤具有较好的修复效果，为骨关节炎的治疗提供了一种新策略。

关键词：骨膜细胞外基质水凝胶间充质干细胞外泌体软骨修复骨关节炎

酒川芎联合吉非替尼或厄洛替尼治疗EGFR突变型非小细胞肺癌脑移植瘤的作用机制

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中医学报 2024年第7期39卷 1534-1542页

作者：荣翔宇赵倩张振周星琦李姗姗李娴蚌埠医科大学药学院/安徽省生化药物工程技术研究中心

目的：探讨酒川芎（wine-processed Chuanxiong Rhizoma,WCR）联合吉非替尼或厄洛替尼治疗表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）突变型非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）脑移植瘤的作用机制。方法：建立ABCB1-MDCK细胞和PC9细胞共培养体系，采用流式细胞术检测WCR(2 g·L-1)联合吉非替尼或厄洛替尼(10μmol·L-1、20μmol·L-1)作用于PC9细胞的凋亡情况。通过ABCB1-MDCK细胞单层转运模型评估WCR(0.5 g·L-1、1 g·L-1、2 g·L-1)联合吉非替尼或厄洛替尼(8μmol·L-1)的跨膜转运情况，并计算表观渗透系数（Papp）。体外培养ABCB1-MDCK细胞，采用透射电镜法、免疫荧光法（immunofluorescence, IF）和蛋白质免疫印迹法（Western blot, WB）检测超微结构和紧密连接蛋白-1（zonula occludens-1,ZO-1）、P-糖蛋白（P-glycoprotein, P-gp）表达水平。建立裸鼠NSCLC脑移植瘤模型，检测WCR联合吉非替尼或厄洛替尼对裸鼠脑内肿瘤生长、生存时间和药物含量的影响。结果：与单用吉非替尼或厄洛替尼比较，WCR联合吉非替尼或厄洛替尼可增加PC9细胞的凋亡率（P药物转运以及下调ZO-1、P-gp表达水平，从而发挥治疗EGFR突变型NSCLC脑移植瘤的作用。

关键词：非小细胞肺癌脑移植瘤酒川芎吉非替尼厄洛替尼 EGFR 血脑屏障 ZO-1 小鼠

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