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RFWD2调控小鼠大脑皮层神经元树突发育及树突棘形成的功能效应

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南方医科大学学报 2022年第1期42卷 78-85页

作者：孙婷婷王圆圆方祝玲徐佳佳马世玟常久翔刘高峰郭俣刘长青蚌埠医学院生命科学学院安徽蚌埠233000 蚌埠医学院检验医学院安徽蚌埠233000 蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233000

目的探讨环指和色氨酸-天冬氨酸重复序列结构域2(RFWD2)差异表达对小鼠大脑皮层神经元树突发育及树突棘形成的功能效应。方法利用免疫荧光鉴定RFWD2在小鼠全脑的定位及表达谱,通过RFWD2与神经元突触蛋白的共定位,明确其在神经元的细胞... 详细信息

目的探讨环指和色氨酸-天冬氨酸重复序列结构域2(RFWD2)差异表达对小鼠大脑皮层神经元树突发育及树突棘形成的功能效应。方法利用免疫荧光鉴定RFWD2在小鼠全脑的定位及表达谱,通过RFWD2与神经元突触蛋白的共定位,明确其在神经元的细胞定位。通过电转染RFWD2-Myc过表达与shRNA载体,分析其对体外培养小鼠大脑皮层神经元树突发育、树突棘形成与突触功能的影响及作用机制。结果RFWD2在小鼠大脑皮层与海马区均高表达,与突触形成具有明显的正相关性。RFWD2在神经元的突触前膜及后膜均有表达,与神经元树突的长度、分支数量与复杂性呈正相关。与对照组相比,RFWD2过表达显著降低了神经元突触蛋白数量[突触小泡蛋白(SYN)4.5±1.2 vs 17.2±2.4/10μm,P<0.01;突触后致密蛋白(PSD95):2.1±0.3 vs 8.5±1.3/10μm,P<0.01];而RFWD2抑制表达显著增加了突触蛋白数量(SYN:19.6±2.6/10μm,P<0.05;PSD95:11.5±1.1/10μm,P<0.05)。与对照组和RFWD2过表达相比,RFWD2抑制表达降低了树突棘的数量(4.3±0.2 vs 6.2±0.5/10μm,P<0.05;4.3±0.2 vs 6.9±1.1/10μm,P<0.01)。结论RFWD2可通过Pea3家族成员与c-Jun的泛素化影响突触蛋白的表达,调控小鼠大脑皮层神经元树突发育、树突棘形成与突触功能效应,为后期作为靶点开展神经系统疾病的治疗奠定基础。

关键词： RFWD2 神经元树突棘突触

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Mtb-EVs的提取及其对鼠源树突状细胞ROS和炎症因子表达的影响

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四川大学学报（医学版） 2023年第1期54卷 122-127页

作者：陈光璋范芳芳邓思茜夏欣怡卞小川任依涵韦莉蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院临床医学院蚌埠233030 蚌埠医学院基础医学院蚌埠233030

目的提取结核分枝杆菌(***,Mtb)胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs),检测其形态、粒径大小及分布,研究Mtb-EVs对树突状细胞(dendritic cell,DC)胞内活性氧(ROS)和细胞因子水平的影响,初步探讨其对DC的免疫调节作用。方法超滤浓缩法... 详细信息

目的提取结核分枝杆菌(***,Mtb)胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs),检测其形态、粒径大小及分布,研究Mtb-EVs对树突状细胞(dendritic cell,DC)胞内活性氧(ROS)和细胞因子水平的影响,初步探讨其对DC的免疫调节作用。方法超滤浓缩法分离获取Mtb-EVs,BCA法检测蛋白浓度,负染电镜检测Mtb-EVs形态,纳米颗粒跟踪分析技术检测其粒径大小分布和浓度;无菌分离获取小鼠骨髓,经重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rm GM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rm IL-4)联合诱导扩增出DC,并进行形态学及免疫表型鉴定;用不同剂量Mtb-EVs作用于DC,DCFH-DA荧光探针法检测DC胞内ROS水平,ELISA法检测DC细胞IL-1β和IL-6分泌。结果超滤浓缩法提取的Mtb-EVs为大小不等的球状囊泡结构,形态典型,直径约100 nm;NanoSight纳米颗粒追踪仪检测结果显示,粒径峰值98.5 nm,平均粒径110.2 nm,主要分布在68.4~155.7 nm之间,小于250 nm囊泡数量占总量98.39%;体外定向诱导扩增的细胞具有典型DC的形态特征,纯度可达85%以上,透射电镜可见DC表面有丰富微绒毛及放射状突起,胞浆均匀,核膜清晰;10^(2)、10^(3)、10^(4)particles/cell Mtb-EVs处理DC后,ROS水平与Mtb-EVs剂量呈正相关(r=0.9694,P生IL-1β和IL-6(P研究建立了超滤浓缩法分离提取Mtb-EVs的技术流程,可得到形态完整、纯度较高、粒径分布集中的细胞外囊泡。同时,Mtb-EVs可以诱发DC胞内ROS水平上调,并以剂量依赖方式诱导细胞因子IL-1β和IL-6的释放。

关键词：结核分枝杆菌胞外囊泡树突状细胞

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肺螨症的临床观察及其治疗的研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1990年第3期8卷 217-219页

作者：陈兴保孙新胡守锋蚌埠医学院

调查与粮食和中药材密切接触者363人,其中65例肺螨症患者痰螨检查阳性。具有咳嗽、痰多、痰中带血、胸闷、胸痛、气急、乏力、低热等临床症状。胸片示肺门特征性结节状阴影。患者血清特异性抗体阳性,嗜酸粒细胞增高。所有患者均采用甲... 详细信息

调查与粮食和中药材密切接触者363人,其中65例肺螨症患者痰螨检查阳性。具有咳嗽、痰多、痰中带血、胸闷、胸痛、气急、乏力、低热等临床症状。胸片示肺门特征性结节状阴影。患者血清特异性抗体阳性,嗜酸粒细胞增高。所有患者均采用甲硝达唑治疗3个疗程,治疗量为0.2g每日3次,或0.4g每日2次,疗程7d,每疗程间隔7～10d,治后痰螨阴转率达94.4％,多数患者临床症状的X线胸片有明显改善,嗜酸粒细胞降至正常范围,提示对肺螨症有明显的疗效。

关键词：肺螨症甲硝达唑

PI3K/Akt通路在内吗啡肽-1后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

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南方医科大学学报 2021年第6期41卷 870-875页

作者：吴胜男张露樊红莲黄艳平宗巧凤高琴李正红蚌埠医学院生理教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院药学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院科研中心安徽蚌埠233030

目的探讨内吗啡肽-1对心肌缺血再灌注损伤中PI3K/Akt信号通路的作用以及对细胞凋亡的影响。方法将50只SD雄性大鼠随机分为5组:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、内吗啡肽-1后处理组(EM50组)、内吗啡肽-1+渥曼青霉素后处理组(EM50+Wor... 详细信息

目的探讨内吗啡肽-1对心肌缺血再灌注损伤中PI3K/Akt信号通路的作用以及对细胞凋亡的影响。方法将50只SD雄性大鼠随机分为5组:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、内吗啡肽-1后处理组(EM50组)、内吗啡肽-1+渥曼青霉素后处理组(EM50+Wort组)和PI3K/Akt信号通路抑制剂渥曼青霉素后处理组(Wort组)。采用结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min复制心肌缺血再灌注模型,实验期间动态监测大鼠心率、平均动脉压;再灌注结束后检测大鼠血浆乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌钙蛋白I、白介素-6、肿瘤坏死因子-α、氧化应激指标超氧化物歧化酶和丙二醛等生化指标,RT-PCR检测Bax和Bcl-2基因的表达情况,Western blot检测心肌组织中凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、磷酸化Akt蛋白和总Akt蛋白的表达。结果与S组比较,IR组心率和血压降低(P生的心肌保护效应发挥一定的介导作用。

关键词：内吗啡肽-1 PI3K/Akt信号通路细胞凋亡心肌缺血再灌注

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生脉散对家兔膈肌功能的影响

中国中西医结合杂志 1995年第12期15卷 732-733页

作者：关宿东葛敏韩永勤刘桂兰蚌埠医学院

实验以膈肌肌电图及膈肌诱发电位为指标，研究生脉散对家兔膈肌功能的影响。结果表明：（１）生脉散能提高正常家兔膈肌肌电的高、低频比值，中心频率及膈肌诱发电位幅度；（２）复制家兔膈肌疲劳后，静脉注射生脉散注射液２ｍｌ／ｋｇ... 详细信息

实验以膈肌肌电图及膈肌诱发电位为指标，研究生脉散对家兔膈肌功能的影响。结果表明：（１）生脉散能提高正常家兔膈肌肌电的高、低频比值，中心频率及膈肌诱发电位幅度；（２）复制家兔膈肌疲劳后，静脉注射生脉散注射液２ｍｌ／ｋｇ有治疗作用；（３）提前３０ｍｉｎ静脉注射生脉散２ｍｌ／ｋｇ，对电刺激致伤家兔膈肌有保护作用。

关键词：生脉散肌电图膈肌功能诱发电位

靶向c-Met的嵌合抗原受体T细胞制备及其对非小细胞肺癌的杀伤作用

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中华肿瘤杂志 2023年第4期45卷 322-329页

作者：闵静婷张露龙赤荣樊红莲李正红蚌埠医学院基础医学院蚌埠233017 蚌埠医学院生命科学院蚌埠233017

目的:制备靶向c-Met蛋白的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T),并检测其对人非小细胞肺癌(NSCLC)H1975细胞的体外杀伤作用。方法:将含c-Met抗体scFv片段的CAR序列插入慢病毒质粒中,用酶切质粒电泳,检测目的基因正确性。质粒转染工具为HEK293细胞... 详细信息

目的:制备靶向c-Met蛋白的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T),并检测其对人非小细胞肺癌(NSCLC)H1975细胞的体外杀伤作用。方法:将含c-Met抗体scFv片段的CAR序列插入慢病毒质粒中,用酶切质粒电泳,检测目的基因正确性。质粒转染工具为HEK293细胞,收集浓缩慢病毒,通过慢病毒感染的方式制备第二代c-Met CAR-T,通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot验证CAR序列的表达,采用流式细胞术检测c-Met CAR-T的阳性率、细胞亚型,流式细胞术验证NSCLC细胞H1975中c-Met蛋白的阳性表达并选择c-Met蛋白阴性表达的卵巢癌细胞A2780作为对照,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测c-Met CAR-T在效靶比为1∶1、1∶5、1∶10、1∶20时对H1975细胞的杀伤作用。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测c-Met CAR-T在靶抗原刺激下,细胞因子白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IFN-γ的释放情况。结果:成功合成c-Met CAR慢病毒重组质粒,酶切条带位置符合理论值。基因测序结果符合原设计序列,并成功包装慢病毒。Western blot和qRT-PCR结果显示,CAR分子存在于慢病毒感染后的T细胞中,c-Met CAR-T构建成功。c-Met CAR-T阳性率可达38.4%以上,且在慢病毒感染过后CD8 + T细胞比例有所上调。流式细胞术验证结果显示,NSCLC细胞H1975有较强的c-Met蛋白表达,卵巢癌细胞A2780 c-Met蛋白表达阴性。LDH释放实验提示,c-Met CAR-T的抗肿瘤作用随效靶比的提升而增强,且均高于对照组,当效靶比为20∶1时杀伤率达到51.12%。ELISA检测结果显示,与对照组比较,在靶细胞刺激下c-Met CAR-T能释放出更多的IL-2、TNF-α和IFN-γ,而Non target组无此效应。结论:c-Met在NSCLC细胞系H1975中表达,可以作为NSCLC免疫治疗的靶点;靶向c-Met的CAR-T能对c-Met阳性肺癌细胞产生较强的体外杀伤作用。

关键词：肺肿瘤嵌合抗原受体 c-Met

基于增强CT影像组学列线图预测进展期胃癌隐匿性腹膜转移

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国际医学放射学杂志 2023年第6期46卷 652-658页

作者：赵德雷赵灿灿李淑华徐敏谢宗玉蚌埠医学院第一附属医院放射科蚌埠233004 蚌埠医学院研究生院

目的探讨基于增强CT影像组学列线图在术前预测进展期胃癌隐匿性腹膜转移(PM)中的价值。方法回顾性收集经手术病理证实为进展期胃癌且行术后PM评估的110例病人的临床及影像学资料,其中男77例,女33例,平均年龄(64.65±10.24)岁。所有病人... 详细信息

目的探讨基于增强CT影像组学列线图在术前预测进展期胃癌隐匿性腹膜转移(PM)中的价值。方法回顾性收集经手术病理证实为进展期胃癌且行术后PM评估的110例病人的临床及影像学资料,其中男77例,女33例,平均年龄(64.65±10.24)岁。所有病人术前均行全腹部增强CT检查且PM诊断为阴性。将全部病人按7∶3的比例随机分为训练集77例(术后PM阳性33例)与验证集33例(术后PM阳性14例)。采用卡方检验及二元Logistic回归分析筛选与隐匿性PM显著相关的独立预测因素来构建临床模型。基于增强CT影像提取并筛选影像组学特征,构建组学模型并计算模型的影像组学评分(Radscore)。将临床独立预测因素与Radscore联合来构建联合模型及其列线图。采用受试者操作特征(ROC)曲线评估各模型的预测效能,DeLong检验比较各模型间的AUC值,并用校准曲线及决策曲线分析评估联合模型的拟合优度和临床价值。结果在训练集及验证集中,联合模型的预测效能(AUC值分别为0.944、0.915)均高于临床模型(AUC值分别为0.780、0.865)及组学模型(AUC值分别为0.844、0.825)(均P5%时,联合模型具有最高的临床净获益。结论基于增强CT影像组学列线图能够在术前精准预测进展期胃癌是否发生隐匿性PM,协助临床决策,改善病人预后。

关键词：影像组学列线图进展期胃癌隐匿性腹膜转移

新藤黄酸对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移的影响及机制研究

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中药材 2016年第6期39卷 1393-1398页

作者：石玉荣杨滢蚌埠医学院安徽蚌埠233000

目的:研究新藤黄酸对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移的影响及其机制。方法:不同浓度新藤黄酸(0.00、0.63、1.25、2.50、5.00、10.00 mg/L)作用于HeLa细胞72 h,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;荧光显微镜和DNA ladder检测细... 详细信息

目的:研究新藤黄酸对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移的影响及其机制。方法:不同浓度新藤黄酸(0.00、0.63、1.25、2.50、5.00、10.00 mg/L)作用于HeLa细胞72 h,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;荧光显微镜和DNA ladder检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移;RT-PCR、Western blot检测BCL-2、BAX、NF-κB及E-cadherin的mRNA和蛋白表达。结果:不同浓度新藤黄酸作用HeLa细胞72 h后,细胞抑制率随药物浓度升高而升高;穿过Transwell小室的细胞数随药物浓度升高而减少;BCL-2、NF-κB mRNA及蛋白表达随新藤黄酸浓度升高而降低;BAX、E-cadherin mRNA及蛋白表达随新藤黄酸浓度的升高而升高。结论:新藤黄酸在一定范围内能以剂浓度依赖性抑制HeLa细胞增殖,促进其凋亡,并抑制其迁移。

关键词：宫颈癌 HeLa细胞新藤黄酸增殖凋亡迁移

基层党建信息化建设的难点和对策——以蚌埠医学院第一附属医院为例

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新西部（中旬·理论） 2017年第11期 58-59页

作者：沈永祥郑志方丁夏夏黄超蚌埠医学院第一附属医院安徽蚌埠233004

本文阐述了基层党建信息化的研究背景以及加强医院基层党建信息化的必要性和现状,分析了当前基层党建信息化面临的问题,提出了相应对策。要高度重视党建信息化建设,扩大党员参与度;重视虚拟党建网维护,促进党建信息化的可持续发展;打造... 详细信息

本文阐述了基层党建信息化的研究背景以及加强医院基层党建信息化的必要性和现状,分析了当前基层党建信息化面临的问题,提出了相应对策。要高度重视党建信息化建设,扩大党员参与度;重视虚拟党建网维护,促进党建信息化的可持续发展;打造一支高水平的党建信息化人才队伍;推进虚拟党建与实体党建协调发展;利用手机终端拓展基层党建平台。

关键词：基层党建信息化建设难点对策