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灵芝多糖通过Akt/mTOR通路调控肝母细胞瘤细胞凋亡及自噬的机制研究

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中国中药杂志 2025年

作者：葛洋高航覃云鹏沈瑞吴华彰叶婷宋航安徽中医药大学中西医结合学院张家界学院医学院蚌埠医学院安徽省癌症转化医学重点实验室

通过探讨灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide， GLP）对肝母细胞瘤HepG2、Huh6细胞模型及KM小鼠原位移植瘤模型的作用机制，以期为GLP的临床应用提供理论依据。采用CCK-8法检测细胞活力；BeyoClickTMEdU-488实验检测细胞增殖... 详细信息

通过探讨灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide， GLP）对肝母细胞瘤HepG2、Huh6细胞模型及KM小鼠原位移植瘤模型的作用机制，以期为GLP的临床应用提供理论依据。采用CCK-8法检测细胞活力；BeyoClickTMEdU-488实验检测细胞增殖能力；Hochest 33258染色检测细胞凋亡情况；Mrfp-GFP-LC3双荧光染色检测细胞自噬情况；采用HepG2细胞建立原位移植瘤动物模型，分别用生理盐水及100、200、300 mg·kg-1GLP处理小鼠，分析取材后肿瘤数目和大小的变化；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察肿瘤组织及主要脏器（心、肝、脾、肺、肾）组织病理情况；Western blot法检测细胞中肿瘤抑制蛋白53（tumor protein P53， P53）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma-2， Bcl-2）、Bcl-2关联X蛋白（Bcl-2-associated X protein， Bax）、裂解半胱氨酸蛋白酶蛋白-3（cleaved-caspase-3）、苄氯素-1（Beclin-1）、自噬相关蛋白-5（autophagy related protein-5， Atg-5）、微管相关蛋白轻链-3Ⅰ（microtubule-associated protein-light chain-3Ⅰ， LC3Ⅰ）/LC3Ⅱ、自噬衔接蛋白62（autophagy adapter protein 62， P62）、蛋白激酶B（protein kinase B， Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin， mTOR）、磷酸化mTOR（p-mTOR）的蛋白表达。体外实验结果显示，与对照组相比，GLP处理后肿瘤细胞活力显著降低，细胞凋亡比例呈剂量依赖性增高，且自噬流被抑制。在体内实验中，与模型组相比，GLP处理后小鼠的肿瘤数目和大小显著下降；Western blot结果显示，与对照组或模型组相比，GLP处理后P53、Bax、cleaved-caspase-3、Beclin-1、Atg-5、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平显著升高，Bcl-2、P62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平显著降低。这些结果表明GLP能够通过调控Akt/mTOR途径诱导肝母细胞瘤细胞凋亡与自噬。

关键词：灵芝多糖肝母细胞瘤凋亡自噬 Akt/mTOR信号通路

小分子药物治疗骨关节炎的热点问题及应用前景

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中国组织工程研究 2025年第9期29卷 1913-1922页

作者：余帅刘家伟朱彬潘檀李兴龙孙广峰于海洋丁亚王宏亮蚌埠医学院附属阜阳市人民医院骨科关节及创伤病区安徽省阜阳市236000

背景:骨关节炎的病理生理过程中存在多种蛋白、信号通路及炎症递质等的参与,开发针对这些蛋白、信号通路及炎症递质等的小分子药物,可有效延缓骨关节炎的进展并改善其临床表现。目的:基于骨关节炎的发病机制,对小分子药物治疗骨关节炎... 详细信息

背景:骨关节炎的病理生理过程中存在多种蛋白、信号通路及炎症递质等的参与,开发针对这些蛋白、信号通路及炎症递质等的小分子药物,可有效延缓骨关节炎的进展并改善其临床表现。目的:基于骨关节炎的发病机制,对小分子药物治疗骨关节炎的研究进展作一综述。方法:检索PubMed、中国知网和万方数据库,英文检索词为“osteoarthritis,arthritis,osteoarthrosis,degenerative,arthritides,deformans,small molecule drugs,small molecule inhibitors,small molecule agents”,中文检索词为“骨关节炎,小分子药物,小分子抑制剂”,按纳入和排除标准共纳入68篇文献进行总结。结果与结论:①目前对于骨关节炎发病机制的研究尚不明确,骨关节炎的发生发展与蛋白质、细胞因子及信号转导通路的关系较为密切,因此其治疗机制较为复杂,当前通过小分子药物靶向骨关节炎相关的蛋白质、细胞因子及信号转导通路成为一大研究热点。②小分子药物通常具有明确的细胞内或细胞外靶点和疗效,包括增强软骨修复、抑制关节退化、减轻炎症和缓解疼痛,另外一些抗骨关节炎的小分子药物在促进干细胞软骨分化和软骨基质重建方面显示出前景。③目前对于小分子药物靶向骨关节炎的病理生理过程从而延缓骨关节炎的进展,还处于实验性阶段,但这些小分子药物在实验过程中大部分都表现出预期的结果,目前并无相关研究说明小分子药物治疗骨关节炎的疗效。④小分子药物治疗骨关节炎在基础实验阶段已经达到了预期的实验结果,大量研究表明,小分子药物可以靶向抑制引起骨关节炎的特定蛋白质、细胞因子及信号转导通路,从而治疗骨关节炎,但其安全性和有效性等问题还需要进一步的基础和临床研究进行验证,这一过程需要更多的学者进行探索和研究。⑤目前国内外有许多学者针对骨关节炎的治疗做出了贡献,比起传统治疗方式而言,小分子药物在基础实验阶段表现出更好的疗效和安全性,有望成为未来骨关节炎治疗的新兴方法,为骨关节炎患者摆脱痛苦。

关键词：骨关节炎退行性骨关节病蛋白质细胞因子信号转导通路靶向治疗炎症软骨修复小分子药物综述

靶向c-Met的CAR-T细胞构建及其对人浆液性卵巢癌细胞SKOV-3的体外杀伤性

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生理学报 2025年

作者：杜娜娜张艳君李艳秋张露安然甄翔程闵静婷李正红蚌埠医科大学基础医学院蚌埠医科大学生命科学院蚌埠医科大学公共基础学院蚌埠医科大学临床医学院蚌埠医科大学安徽省肿瘤演进及智能诊疗重点实验室

本研究旨在构建靶向细胞间质上皮转换因子(c-mesenchymal-epithelial transition factor, c-Met)的第二代和第三代嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells, CAR-T)，观察其对人浆液性卵巢癌细胞SKOV-3的体外杀伤作用。采用生物信息学分析MET基因在卵巢浆液性囊腺癌中的表达情况、MET基因表达与免疫细胞浸润丰度的相关性及其对卵巢浆液性囊腺癌组织功能的影响；免疫组织化学染色法检测浆液性卵巢癌组织以及癌旁组织中c-Met的表达情况；流式细胞术检测SKOV-3表面c-Met蛋白的表达；通过慢病毒感染制备第二代和第三代c-Met CAR-T细胞，流式细胞术检测细胞亚群和感染效率。以CD19 CART和活化T细胞为对照组，以c-Met阴性表达的人卵巢癌细胞A2780细胞设置Non target组，通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放、ELISA、CCK-8等功能实验探究第二代[c-Met CAR-T(2G)]和第三代[c-Met CAR-T(3G)] c-Met CAR-T对c-Met阳性表达的SKOV-3细胞的杀伤效果、细胞因子分泌和增殖能力。生物信息学分析与免疫组织化学染色结果显示，与正常组织相比，卵巢癌组织的MET基因表达显著上调，而在各病理阶段MET表达无明显差异，且MET基因表达与卵巢癌患者的种族、年龄均没有相关性。成功构建第二代和第三代cMet CAR-T细胞，且在慢病毒感染后c-Met CAR-T(2G)的CD8+T细胞比例有所上调，c-Met CAR-T(3G)细胞亚群无明显变化；LDH释放实验显示，第二代和第三代c-Met CAR-T对靶细胞SKOV-3的杀伤效率随效靶比提高而上升，效靶比为20:1时，c-Met CAR-T(2G)的杀伤效率达到(42.02±5.17)%(P<0.05),c-Met CAR-T(3G)的杀伤效率达到(51.4±2.71)%(P<0.05);ELISA结果显示，c-Met CAR-T相较于CD19 CAR-T和活化T细胞能释放更多细胞因子(P<0.05)，并且，c-Met CAR-T(3G)的释放量高于c-Met CAR-T(2G)(P<0.01);CCK-8结果显示，在48 h后，c-Met CAR-T(2G)细胞数量显著多于c-Met CAR-T(3G)(P<0.01)。以上结果提示，第二代和第三代c-Met CAR-T均能靶向识别并杀伤c-Met阳性的人浆液性卵巢癌细胞SKOV-3，两者的细胞毒性无明显差异，c-Met CAR-T(2G)的增殖能力更强，c-Met CAR-T(3G)释放细胞因子的水平更高。

关键词：浆液性卵巢癌 c-Met CAR-T 生物信息学

蚌埠医学院医学生参与式控烟干预活动的效果评估

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卫生研究 2011年第2期40卷 240-241页

作者：周占伟梅翠竹周纯先王春华张玉媛蚌埠医学院预防医学系蚌埠233030

控烟策略指南中明确提出医务工作者由于其示范和教育作用,在控烟工作中具有至关重要的关键作用。国内研究结果显示,医学生的吸烟率为13.5%～37.8%,随年级而升高,且与非医学生的吸烟率差异无统计学意义,关于吸烟健康危害知识的知晓情况... 详细信息

控烟策略指南中明确提出医务工作者由于其示范和教育作用,在控烟工作中具有至关重要的关键作用。国内研究结果显示,医学生的吸烟率为13.5%～37.8%,随年级而升高,且与非医学生的吸烟率差异无统计学意义,关于吸烟健康危害知识的知晓情况不乐观,控烟意识及能力较弱。

关键词：控烟医学生参与式干预大学生医学院校

2017年蚌埠医学院第一附属医院细菌耐药性监测

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中国感染与化疗杂志 2018年第6期18卷 634-640页

作者：郭普乔艳李静蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院感染性疾病科安徽蚌埠233004

目的了解蚌埠医学院第一附属医院2017年临床分离菌的分布及耐药情况。方法采用自动化仪器法或纸片扩散法进行药物敏感性试验,按CLSI 2017年标准判断结果,采用WHONET 5.6软件进行统计分析。结果 2017年临床共分离4295株细菌,其中革兰阳性... 详细信息

目的了解蚌埠医学院第一附属医院2017年临床分离菌的分布及耐药情况。方法采用自动化仪器法或纸片扩散法进行药物敏感性试验,按CLSI 2017年标准判断结果,采用WHONET 5.6软件进行统计分析。结果 2017年临床共分离4295株细菌,其中革兰阳性菌1196株,占27.8%,革兰阴性菌3099株,占72.2%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药菌株的检出率分别为54.7%和77.4%。甲氧西林耐药株对除甲氧苄啶-磺胺甲唑外的大多数测试抗菌药物耐药率均高于甲氧西林敏感株,未检出万古霉素和利奈唑胺耐药菌株。肠球菌属细菌中以屎肠球菌和粪肠球菌为主,粪肠球菌对大多数测试抗菌药物(除四环素和利奈唑胺外)的耐药率低于屎肠球菌。两种肠球菌中检出少数万古霉素和利奈唑胺耐药菌株。检出少数肺炎链球菌对青霉素耐药株。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β内酰胺酶(ESBL)菌株占各自菌种的66.0%和22.7%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药率有所上升,肺炎克雷伯菌、肠杆菌属和枸橼酸杆菌属细菌对亚胺培南和厄他培南耐药率均>10%。铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率为43.3%,对头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林-他唑巴坦、左氧氟沙星的耐药率均70%,对亚胺培南耐药率为87.5%。广泛耐药(XDR)的铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌检出率分别占各自菌种的15.8%、28.4%和46.7%。结论该院2017年临床分离的细菌耐药情况严重,特别是碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌检出率增长和XDR的肺炎克雷伯菌值得关注,应加强抗菌药物的合理使用,重视细菌耐药监测。

关键词：细菌碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌耐药性监测

蚌埠医学院2007-2009年新生体质健康状况分析

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中国学校卫生 2011年第8期32卷 999-1000页

作者：王红雨崔杰杨毅蚌埠医学院体育艺术部安徽233030

青少年身心健康、体魄强健、意志坚强是一个民族旺盛生命力的体现,是社会进步的标志[1]。我国从1985年开始进行了4次全国青少年体质健康调查,结果显示,最近20 a青少年体能素质持续下降,肥胖率比5 a前增长了1倍[2]。大学新生由于经历过... 详细信息

青少年身心健康、体魄强健、意志坚强是一个民族旺盛生命力的体现,是社会进步的标志[1]。我国从1985年开始进行了4次全国青少年体质健康调查,结果显示,最近20 a青少年体能素质持续下降,肥胖率比5 a前增长了1倍[2]。大学新生由于经历过高考的特殊过程,他们在身心上仍旧比较疲惫,尤其是身体机能和素质方面。

关键词：体质营养状况运动活动学生,医科

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核因子I-C调控人根尖牙乳头干细胞的分化

中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6667-6673页

作者：吴越朱永娜葛翔刘樊何泽禹刘茜蚌埠医科大学口腔医学院蚌埠医科大学第二附属医院口腔科安徽省蚌埠市233000

背景:体外过表达核因子I-C基因可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,Wnt/β-catenin信号通路的激活也可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,而且核因子I-C对间充质干细胞中Wnt/β-catenin通路具有调节作用。然而,核因子I-C能否通过激活人根尖牙... 详细信息

背景:体外过表达核因子I-C基因可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,Wnt/β-catenin信号通路的激活也可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,而且核因子I-C对间充质干细胞中Wnt/β-catenin通路具有调节作用。然而,核因子I-C能否通过激活人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-catenin通路进而影响细胞分化,目前尚未见报道。目的:探讨核因子I-C通过Wnt/β-Catenin信号通路调控人根尖牙乳头干细胞分化的作用。方法:玻片覆盖组织块法培养人根尖牙乳头干细胞,慢病毒转染过表达核因子I-C基因。①设置对照组、空载体组和过表达核因子I-C组,Western blot检测β-Catenin、LRP5和TCF7L2的表达。②设置对照组、空载体组、过表达核因子I-C组和过表达核因子I-C+DKK-1(Wnt通路抑制剂)组,细胞成骨诱导7 d后进行碱性磷酸酶染色及活性定量,细胞成骨诱导14 d后qPCR和Western blot检测Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白的表达,茜素红染色观察矿化结节形成情况。结果与结论:①与对照组、空载体组相比,过表达核因子I-C组人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-Catenin通路相关蛋白β-Catenin、LRP5、TCF7L2表达显著升高(P<0.01);②与对照组、空载体组相比,过表达核因子I-C组人根尖牙乳头干细胞中碱性磷酸酶活性显著升高(P<0.01),Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01),矿化结节数量显著增加(P<0.01);③与过表达核因子I-C组相比,过表达核因子I-C+DKK-1组人根尖牙乳头干细胞中碱性磷酸酶活性、Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.05),矿化结节数量显著减少(P<0.05)。结果表明:核因子I-C能够激活人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-catenin信号通路,介导人根尖牙乳头干细胞的成骨/成牙分化。

关键词：人根尖牙乳头干细胞核因子I-C Wnt 信号通路分化成骨 DKK-1 工程化干细胞

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蚌埠医学院30年教职工死亡动态分析

中国学校卫生 1992年第5期 300-301页

作者：周学明蚌埠医学院保健科 233000

本文对蚌埠医学院30年来教职员工的死亡人数和死亡原因进行调查分析,30年来共死亡71人,因病死亡67人,其中死于癌症33人,占死亡总人数76.47%,居第一位,心血管病14人,占19.71%,居第二位。

关键词：死亡动态调查分析癌症

2020年蚌埠医学院第一附属医院细菌耐药性监测

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中国抗生素杂志 2022年第8期47卷 816-822页

作者：郭普孙红李静郑晶黄永强应冲涛汪华学乔艳蚌埠医学院第一附属医院检验科蚌埠233004

目的通过对2020年蚌埠医学院第一附属医院临床分离菌分布及对抗菌药物的耐药性分析,为临床合理选择抗菌药物提供参考。方法采用自动化仪器法、纸片扩散法(K-B法)或E-test方法对我院2020年临床分离的菌株进行药敏试验,按CLSI2020版标准... 详细信息

目的通过对2020年蚌埠医学院第一附属医院临床分离菌分布及对抗菌药物的耐药性分析,为临床合理选择抗菌药物提供参考。方法采用自动化仪器法、纸片扩散法(K-B法)或E-test方法对我院2020年临床分离的菌株进行药敏试验,按CLSI2020版标准判断结果,WHONET5.6软件统计分析数据。结果2020年我院临床共分离4209株细菌,其中革兰阳性菌1121株(26.6%,1121/4209),革兰阴性菌3088株(73.4%,3088/4209)株,前10位分离菌分别为:大肠埃希菌1093株(26.0%)、肺炎克雷伯菌565株(13.4%)、凝固酶阴性葡萄球菌402株(9.6%)、鲍曼不动杆菌354株(8.4%)、铜绿假单胞菌345株(8.2%)、金黄色葡萄球菌313株(7.4%)、奇异变形杆菌132株(3.1%)、屎肠球菌122株(2.9%)、粪肠球菌94株(2.2%)和阴沟肠杆菌63株(1.5%)。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林菌株的检出率分别为43.1%和66.2%,未检出耐万古霉素和利奈唑胺菌株。肠球菌属细菌中以屎肠球菌和粪肠球菌为主,屎肠球菌对大多数测试抗菌药物的耐药率高于粪肠球菌,检出少数耐万古霉素和利奈唑胺药的肠球菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株占各自菌的63.1%和31.2%,肺炎克雷伯菌亚胺培南和厄他培南耐药率分别为26.7%和26.4%,较我院2017年有所下降(P生素耐药率均小于10%。铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率为34.2%,对头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、左氧氟沙星和阿米卡星的耐药率均小于30%。鲍曼不动杆菌对阿米卡星的耐药率为31.0%,亚胺培南耐药率为89.5%。流感嗜血杆菌产β-内酰酶检出率为60.7%。结论临床分离菌对常见抗菌药物耐药情况较严重,耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的检出率有所下降,但仍值得警惕,应重视细菌耐药监测,继续加强医院感染的防控,合理使用抗菌药物。

关键词：细菌耐药性监测碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌