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广西道地药材肉桂及阴香的DNA分子鉴定研究

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食品与发酵工业 2024年第4期50卷 191-196,203页

作者：李立吴桂凡罗轶李丽莉凌婕马双成广西壮族自治区食品药品检验所国家药品监督管理局中药材质量监测与评价重点实验室广西南宁530021 中国食品药品检定研究院北京100050

建立一种能够准确鉴别肉桂及阴香的特异性聚合酶链式反应方法,以保障肉桂用药的安全性和有效性。通过对比分析肉桂及阴香的psbA-trnH序列差异找到特异性单核苷酸多态性位点,设计特异性引物,通过优化退火温度、循环次数,评估不同聚合酶... 详细信息

建立一种能够准确鉴别肉桂及阴香的特异性聚合酶链式反应方法,以保障肉桂用药的安全性和有效性。通过对比分析肉桂及阴香的psbA-trnH序列差异找到特异性单核苷酸多态性位点,设计特异性引物,通过优化退火温度、循环次数,评估不同聚合酶种类和不同基因扩增仪等扩增条件对不同来源的肉桂及阴香进行特异性扩增,根据特异性扩增条带进行鉴别。结果表明退火温度为54℃,循环次数为35次时,肉桂经肉桂特异性引物扩增后在100~200 bp处出现特异性条带,阴香无条带;退火温度为56℃,循环次数为40次时,阴香经阴香引物扩增后在200~300 bp处出现特异性条带,肉桂无条带。该研究所建立的特异性PCR方法可以快速准确鉴别出肉桂及阴香,为控制肉桂的质量安全提供参考。

关键词：肉桂阴香特异性聚合酶链式反应特异性引物质量安全

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浙江省仙居县药用植物资源的调查与评估

中药材 2024年 1643-1648页

作者：陈如兵浦锦宝王松琳楼柯浪吴晓俊梁卫青浙江省中医药研究院/浙江省中药新药研发重点实验室/道地药材品质评价与开发浙江省工程研究中心浙江省农业技术推广中心

目的:整理和分析仙居县第四次中药资源普查的数据资料,了解当地药用植物资源的现状及特点,为仙居县中药资源保护与利用的策略制定提供科学依据。方法:采用样地和样线相结合的方法,收集仙居县野生及栽培药用植物资源相关的信息,分析其组... 详细信息

目的:整理和分析仙居县第四次中药资源普查的数据资料,了解当地药用植物资源的现状及特点,为仙居县中药资源保护与利用的策略制定提供科学依据。方法:采用样地和样线相结合的方法,收集仙居县野生及栽培药用植物资源相关的信息,分析其组成结构和分布特点,测算重点药用资源的蕴藏量并评价其综合价值。结果:仙居县药用植物共计905种,隶属于147科504属;菊科、豆科、蔷薇科植物较占优势;生活型以草本为主。重点调查的野生药用植物有113种,其中综合价值(CVMP)等级高或较高的有110种,总蕴藏量大于100 000 t,栽培药用植物以浙贝母和延胡索为主。结论:仙居县野生药用植物资源丰富,但是野生资源利用率较低,栽培药用植物的种类较少,产业化程度较低,建议在保护野生药用资源的前题下,充分发挥仙居县药用植物的资源优势,探寻适合于当地特色的中医药产业发展新途径。

关键词：仙居县资源调查蕴藏量综合价值

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桑白皮中21种无机元素的测定及其质量评价

中国无机分析化学 2024年第5期14卷 670-676页

作者：王苗周德来王行智李运杨扶德甘肃中医药大学药学院兰州730000 兰州市食品药品检验检测研究院/甘肃省种植中药材外源性污染物监测工程研究中心兰州730050

为准确了解不同产区桑白皮中多种元素分布及含量情况,用65%硝酸溶液对其样品进行微波消解处理,后采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS/MS)法测定桑白皮样品中21种元素的含量。得到21种元素的线性关系良好,R^(2)>0.999,方法学考察实验的RSD... 详细信息

为准确了解不同产区桑白皮中多种元素分布及含量情况,用65%硝酸溶液对其样品进行微波消解处理,后采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS/MS)法测定桑白皮样品中21种元素的含量。得到21种元素的线性关系良好,R^(2)>0.999,方法学考察实验的RSD均小于3%,加标回收率在91.3%~109%,RSD均小于4%;Al、Ga、Sr、Ba相比而言含量较高,且不同产区的特异性较明显;主成分分析中17批样品得到4个主成分,累计方差贡献率达87.380%,确定V、Co、Al、Li、As、Se、Pb、U、Zn、Cr、Cd、Ga、Ba、Cs、Ni等15种元素为桑白皮药材的特征元素;相关性分析可知,元素间的相关性较强,P≤0.05的元素与主成分分析的特征元素基本一致。参照2020年版《中国药典》中对中药材中有害元素的限量规定,发现桑白皮样品中Pb、Cd、As、Cu有害元素的含量均未超过限量要求。ICP-MS/MS能准确快速测定桑白皮中21种元素含量,这对评价不同产区桑白皮质量,完善桑白皮质量标准具有一定参考价值。

关键词： ICP-MS/MS 桑白皮主成分分析相关性评价

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藏药亚吉玛(长梗金腰)药材质量标准研究

中国现代应用药学 2024年第4期41卷 469-475页

作者：任刚蒲超伟温静静蒋伟钟国跃罗维早尼珍向佳美江西中医药大学中药资源与民族药研究中心重庆400060 江西中医药大学科技学院南昌330004 重庆中药研究院重庆400060 西藏自治区食品药品检验研究院拉萨850000

目的依据中国药典2020版四部通则,对藏药亚吉玛(长梗金腰)进行系统研究,建立其药材质量标准。方法采用显微鉴别法对药材的粉末特征进行描述;采用硅胶GF_(254)薄层板,以5-O-去甲基阿朴黄酮和羟基阿亚黄素A为对照品,建立薄层色谱鉴别方法... 详细信息

目的依据中国药典2020版四部通则,对藏药亚吉玛(长梗金腰)进行系统研究,建立其药材质量标准。方法采用显微鉴别法对药材的粉末特征进行描述;采用硅胶GF_(254)薄层板,以5-O-去甲基阿朴黄酮和羟基阿亚黄素A为对照品,建立薄层色谱鉴别方法;参照四部通则方法检测长梗金腰药材中的水分、总灰分、酸不溶性灰分及醇溶性浸出物含量;采用HPLC,建立长梗金腰药材的特征图谱,并以chrysosplenoside I(CI)和chrysosplenoside A(CA)为质控指标成分建立长梗金腰药材的含量测定方法。结果多产地10批次样品的测定结果为水分9.17%~12.52%,总灰分14.11%~16.74%,酸不溶性灰分1.50%~4.72%,醇溶性浸出物32.77%~40.30%,CI质量分数0.30%~0.99%,CA质量分数0.28%~0.88%。结论本研究首次建立了亚吉玛(长梗金腰)的药材鉴别和含量测定方法。该方法易于操作,专属性较强,对准确评价药材内在质量,保证用药品质具有重要意义。

关键词：长梗金腰质量标准薄层色谱特征图谱高效液相色谱法

清胃散基准样品HPLC指纹图谱的建立及关键成分的量值传递分析

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中华中医药杂志 2024年第6期39卷 3044-3053页

作者：朱仁愿续艳丽丁辉刘兴国蒲玉红刘国华李坚兰州市食品药品检验检测研究院兰州730050 甘肃省种植中药材外源性污染物监测工程研究中心兰州730050 甘肃中医药大学兰州730099 兰州大学第二医院兰州730030

目的:建立清胃散基准样品的指纹图谱及关键成分含量测定方法,并分析量值传递规律。方法:依据古籍制备18批清胃散基准样品冻干粉,采用HPLC法建立指纹图谱及关键成分含量测定方法,以出膏率、指纹图谱相似度,指标成分含量和转移率评价清胃... 详细信息

目的:建立清胃散基准样品的指纹图谱及关键成分含量测定方法,并分析量值传递规律。方法:依据古籍制备18批清胃散基准样品冻干粉,采用HPLC法建立指纹图谱及关键成分含量测定方法,以出膏率、指纹图谱相似度,指标成分含量和转移率评价清胃散基准样品的质量。结果:18批清胃散基准样品的指纹图谱相似度良好(≥0.984),26个共有峰中指认出10个峰,主成分分析显示盐酸小檗碱、异阿魏酸、阿魏酸、山柰酚、儿茶素和藁本内酯是其特征成分。10个指标成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9956),精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%,平均加样回收率为99.6%~113.3%,RSD为0.13%~5.28%(n=6),转移率为5%~64%。结论:清胃散基准样品的质量稳定性、可靠性和一致性良好,可为清胃散复方制剂开发和质量控制提供参考。

关键词：清胃散基准样品指纹图谱含量测定量值传递

红花CtWRKY7和CtWRKY72基因的克隆及功能分析

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植物资源与环境学报 2024年第4期33卷 12-20页

作者：鲁丹丹苏小雨谭政委余永亮李磊许兰杰杨青梁慧珍河南省农业科学院中药材研究所河南郑州450002

根据前期对红花(Carthamus tinctorius Linn.)WRKY基因家族的鉴定结果,利用RT-PCR技术克隆了红花CtWRKY7和CtWRKY72基因,其蛋白质编码序列(CDS)长度分别为600和861 bp,全长序列均含有3个外显子和2个内含子。CtWRKY7和CtWRKY72蛋白分别含... 详细信息

根据前期对红花(Carthamus tinctorius Linn.)WRKY基因家族的鉴定结果,利用RT-PCR技术克隆了红花CtWRKY7和CtWRKY72基因,其蛋白质编码序列(CDS)长度分别为600和861 bp,全长序列均含有3个外显子和2个内含子。CtWRKY7和CtWRKY72蛋白分别含有199和286个氨基酸残基,且二者均无跨膜结构和信号肽,定位于细胞核,二级结构主要由无规卷曲组成,三级结构较为松散。多序列比对及系统进化分析结果显示:CtWRKY7与菊花〔Chrysanthemum×morifolium(Ramat.)Hemsl.〕CmWRKY15和莴笋(Lactuca sativa *** Irish ex Bremer)LsWRKY18的亲缘关系最近,均属于Ⅱa类WRKY;CtWRKY72与拟南芥〔Arabidopsis thaliana(Linn.)Heynh.〕AtWRKY70和AtWRKY54的亲缘关系最近,均属于Ⅲ类WRKY。启动子分析结果显示:CtWRKY7和CtWRKY72的启动子均含有多种逆境胁迫应答元件,且CtWRKY7的启动子含有W-box,而CtWRKY72的启动子无W-box。基因表达分析结果显示:CtWRKY7和CtWRKY72在红花的不同组织中均有表达,其中,CtWRKY7在根中表达量最高,CtWRKY72在叶中表达量最高;且二者均在花组织形成过程中表达量逐渐下降,在花开放过程中表达量逐渐上升。此外,CtWRKY7和CtWRKY72均响应多种逆境胁迫和外源激素诱导,但表达模式不同,总体上上调表达,仅CtWRKY7在外源ABA诱导下下调表达。综上所述,CtWRKY7和CtWRKY72可能参与红花花早期发育及衰老过程,CtWRKY7可能存在自我调节或与其他WRKY蛋白存在交叉调节;并且,CtWRKY7和CtWRKY72能响应多种逆境胁迫,但作用机制不同。

关键词：红花 WRKY 表达模式花发育逆境胁迫

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基于金属元素含量差异的茜草辨别研究

中药材 2024年 1467-1471页

作者：刘志荣张明童李冬华马潇谢楠郭朝晖甘肃省药品检验研究院/甘肃省中藏药检验检测技术工程实验室中药材及饮片质量控制重点实验室

目的:测定茜草、大茜草、大叶茜草中多种金属元素含量,应用多元统计分析对茜草进行辨别。方法:采用ICP-MS法测定茜草、大茜草、大叶茜草样品中37种金属元素的含量,统计分析三者中金属元素含量的差异。同时,采用层次聚类分析、主成分分... 详细信息

目的:测定茜草、大茜草、大叶茜草中多种金属元素含量,应用多元统计分析对茜草进行辨别。方法:采用ICP-MS法测定茜草、大茜草、大叶茜草样品中37种金属元素的含量,统计分析三者中金属元素含量的差异。同时,采用层次聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析对样品进行聚类分析和差异分析,阐明茜草、大茜草、大叶茜草与37种金属元素之间的潜在联系。结果:茜草、大茜草、大叶茜草中金属元素的含量存在差异,结合层次聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析可将样品归为2类,并筛选出8种差异金属元素。结论:该方法可成功区分茜草与大茜草、大叶茜草,为中药材的真伪辨别提供了新的研究思路和方法。

关键词：茜草金属元素层次聚类分析主成分分析正交偏最小二乘判别分析

基于Box-Behnken设计-响应面法结合熵权法优化鹿仲健骨汤提取工艺

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中药材 2024年 1492-1498页

作者：景田园杜海涛丁晓彦解仲伯徐男王仪王平山东现代学院药学院山东省中医药研究院

目的:应用Box-Behnken设计-响应面法结合熵权法优化鹿仲健骨汤的提取工艺。方法:采用胃蛋白酶酶解法、胰蛋白酶酶解法、仿生酶解法,以多肽含量为指标,对鹿仲健骨汤中君药鹿角胶提取工艺进行优化;以绿原酸、王不留行黄酮苷、阿魏酸、川... 详细信息

目的:应用Box-Behnken设计-响应面法结合熵权法优化鹿仲健骨汤的提取工艺。方法:采用胃蛋白酶酶解法、胰蛋白酶酶解法、仿生酶解法,以多肽含量为指标,对鹿仲健骨汤中君药鹿角胶提取工艺进行优化;以绿原酸、王不留行黄酮苷、阿魏酸、川续断皂苷Ⅵ、蛇床子素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、甘草酸含量及出膏率为关键质量属性(critical quality attributes,CQAs),以加水量、提取时间、提取次数为关键工艺参数(critical process parameters,CPPs),采用单因素试验确定各因素水平,Box-Behnken设计优化提取工艺参数并进行验证,计算不同提取参数的各评价指标下各样品与基准样品的基准关联度,采用AHP-熵权法确定各评价指标的权重系数,进行综合评分,预测最佳提取工艺。结果:鹿仲健骨汤的最佳提取工艺为:联合应用胃蛋白酶、胰蛋白酶的仿生酶解法酶解鹿角胶,全方饮片加13倍量水,提取3次,每次提取67 min,平行3次的验证试验综合评分均值为99.21,RSD为0.16%。结论:基于质量源于设计(quality by design,QbD)理念和AHP-熵权法筛选的鹿仲健骨汤提取工艺参数稳定可靠,为后续研究提供了数据支持。

关键词：鹿仲健骨汤 Box-Behnken设计-响应面法熵权法仿生酶解法关键工艺参数

UPLC结合一测多评法测定药典中淫羊藿的13种化学成分

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 981-988页

作者：刘鑫何小英刘柏龙宋平顺甘肃中医药大学甘肃兰州730030 甘肃省药品检验研究院国家中药材及饮片质量控制重点实验室甘肃省中藏药检验检测技术工程实验室甘肃兰州730030

建立淫羊藿Epimedium brevieornu中13种化学成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的一测多评法,考察该方法在评价不同产地和不同品... 详细信息

建立淫羊藿Epimedium brevieornu中13种化学成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的一测多评法,考察该方法在评价不同产地和不同品种的淫羊藿药材质量中具有一定的可行性和准确性。通过对实验方法的科学性及准确性考察,采用外标法测定淫羊藿中13种化学成分的含量,同时,以淫羊藿苷为内标,分别建立淫羊藿苷与新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的相对较正因子,计算淫羊藿中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的含量,实现用一测多评法测定其含量,最后比较实测值与计算值的差异,来验证一测多评法在测定中的准确性及科学性。各成分相对校正因子重复性较好,外标法测定结果与一测多评测定结果无显著性差异。以淫羊藿苷为内标,同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的一测多评法可用于淫羊藿的定量分析。

关键词： UPLC 一测多评法淫羊藿淫羊藿苷相对校正因子