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利用辅助生殖技术阻断线粒体疾病发生与遗传的可行性探讨

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中国科学：生命科学 2024年第1期54卷 187-196页

作者：罗世明陈雷宁欧湘红孙青原广东省第二人民医院生殖医学中心广州510317 广东省第二人民医院代谢与生殖粤港联合实验室广州510317 广东省第二人民医院广州市代谢疾病与生殖健康重点实验室广州510317

线粒体是细胞的能量工厂,线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)突变会影响线粒体功能的发挥,进而引发线粒体疾病.线粒体功能的异常不仅影响各组织器官功能的发挥,也是影响个体发育的重要因素,尤其是对一些不可再生的细胞和组织,这种影... 详细信息

线粒体是细胞的能量工厂,线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)突变会影响线粒体功能的发挥,进而引发线粒体疾病.线粒体功能的异常不仅影响各组织器官功能的发挥,也是影响个体发育的重要因素,尤其是对一些不可再生的细胞和组织,这种影响将是终生的,且没有任何治疗手段可对其进行恢复.近几年,有关mtDNA的基因编辑技术取得了重要进展,对已出生的线粒体疾病患者的治疗具有潜在重要意义,但无法阻断线粒体疾病向后代的传递.利用辅助生殖技术在胚胎形成时即对线粒体疾病进行阻断有可能成为最有效、可靠和简单的治疗和阻断线粒体疾病遗传的方法.本文将主要从有效性、安全性以及局限性等方面,探讨利用辅助生殖技术阻断线粒体疾病的发生与遗传的可行性.

关键词：线粒体DNA 线粒体疾病辅助生殖技术线粒体置换技术

左旋肉碱在卵母细胞成熟和早期胚胎发育中的生物学作用

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中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 661-665页

作者：孙理兰孙平平赵文杰马华刚潍坊市人民医院生殖医学中心潍坊261000

卵母细胞质量差是导致女性不孕的主要原因之一, 寻找改善卵母细胞质量的调节剂越来越受到重视。目前已有大量研究表明左旋肉碱在调节女性生殖能力方面具有重要功能。鉴于此, 本文综述了左旋肉碱在卵母细胞成熟和早期胚胎发育中的关键作... 详细信息

卵母细胞质量差是导致女性不孕的主要原因之一, 寻找改善卵母细胞质量的调节剂越来越受到重视。目前已有大量研究表明左旋肉碱在调节女性生殖能力方面具有重要功能。鉴于此, 本文综述了左旋肉碱在卵母细胞成熟和早期胚胎发育中的关键作用及其调控机制, 包括活化脂肪酸进行β-氧化来调节能量代谢、抗氧化防止氧化损伤和抑制细胞凋亡等, 及左旋肉碱在改善卵母细胞质量和早期胚胎发育中的研究进展。

关键词：左旋肉碱卵母细胞脂质代谢抗氧化凋亡胚胎

不同食盐摄入水平对辅助生殖技术女性首次移植周期助孕结局的影响

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中华生殖与避孕杂志 2024年第3期44卷 272-277页

作者：岳峰张少娣徐嘉宁崔趁趁王倩张翠莲郑州大学人民医院、河南省人民医院生殖医学中心郑州450003

目的研究不同食盐摄入水平对行辅助生殖技术助孕女性首次移植周期妊娠结局的影响。方法回顾性队列研究分析2021年1月至2021年7月期间于河南省人民医院生殖医学中心接受体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植助孕首次移植周期的163例患... 详细信息

目的研究不同食盐摄入水平对行辅助生殖技术助孕女性首次移植周期妊娠结局的影响。方法回顾性队列研究分析2021年1月至2021年7月期间于河南省人民医院生殖医学中心接受体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植助孕首次移植周期的163例患者的资料。点尿法近似估算患者的24 h钠盐摄入量,并以其第25和第75百分位数将所有患者分为3组:低盐组(≤9.21 g,n=41)、中盐组(9.22~13.31 g,n=81)和高盐组(≥13.32 g,n=41)。分析比较各组间控制性促排卵指标及移植后临床结局。通过多因素logistic回归分析调整混杂因素后分析3组患者的临床结局。结果高盐组患者的MⅡ卵率[72.7%(410/564)]、优质胚胎率[42.1%(109/259)]低于低盐组患者[82.5%(461/559),52.4%(154/294),均P0.05)。调整可能的混杂因素后,中盐组的临床妊娠率(OR=0.520,95%CI:0.221~1.221,P=0.133)、早期流产率(OR=1.226,95%CI:0.219~6.851,P=0.817)、活产率(OR=0.730,95%CI:0.323~1.647,P=0.448)及高盐组的临床妊娠率(OR=0.659,95%CI:0.246~1.762,P=0.406)、早期流产率(OR=1.080,95%CI:0.162~7.180,P=0.937)、活产率(OR=1.012,95%CI:0.396~2.588,P=0.980)与低盐组相比,其差异均无统计学意义。结论高食盐摄入水平并不影响首次助孕移植周期的临床妊娠结局,但对卵子成熟、正常卵裂及优质胚胎形成有不利影响。

关键词：受精,体外胚胎移植盐摄入点尿法

囊胚二次活检对胚胎植入前遗传学检测患者临床结局的影响

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中华生殖与避孕杂志 2024年第5期44卷 447-455页

作者：李艳如王祎玟陈圆辉张慧娟殷宝莉张翠莲郑州大学人民医院、河南省人民医院生殖医学中心郑州450003

目的探究囊胚二次活检对胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)患者临床妊娠和新生儿结局的影响。方法回顾性队列研究分析了河南省人民医院生殖医学中心于2019年1月至2022年12月期间行一次活检PGT和二次活检PGT后... 详细信息

目的探究囊胚二次活检对胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)患者临床妊娠和新生儿结局的影响。方法回顾性队列研究分析了河南省人民医院生殖医学中心于2019年1月至2022年12月期间行一次活检PGT和二次活检PGT后助孕患者(分别为453例、60例)的临床妊娠和新生儿结局。采用2∶1倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM)方法对两组的女方年龄、体质量指数(body mass index,BMI)、不孕年限进行匹配,比较两组PGT患者实验室指标及移植助孕结局和新生儿结局相关指标。同时依据PGT类型对二次活检PGT组进行亚组分析,分为胚胎植入前非整倍体遗传学检测(preimplantation genetic testing for aneuploidy,PGT-A)亚组、胚胎植入前染色体结构异常遗传学检测(preimplantation genetic testing for structural rearrangements,PGT-SR)亚组、胚胎植入前单基因遗传学检测(preimplantation genetic testing for monogenic,PGT-M)亚组,两两比较其二检率、扩增成功率、可移植率等指标。结果PSM后,两组PGT患者间女方年龄、女方BMI、不孕类型、促排卵方案、PGT类型及实验室相关指标的差异均无统计学意义(均P>0.05);同时,二次活检胚胎的种植率、临床妊娠率、活产率均略降低,流产率略增高,但差异均无统计学意义(均P>0.05);然而,二次活检PGT组患者的第3天可利用胚胎率[87.50%(434/496)]明显高于一次活检PGT组[82.19%(812/980),P=0.020],而囊胚形成数[4.00(2.25,6.75)]明显少于一次活检PGT组[5.50(3.00,8.00),P=0.028];同时,二次活检胚胎的染色体整倍体率[35.9%(28/78)]低于一次活检胚胎[49.3%(226/458),P=0.028],且异常率[9.0%(7/78)]高于一次活检胚胎[0.9%(4/458),P二次活检PGT组非整倍体率和多条染色体嵌合体率高于一次活检PGT组,但差异均无统计学意义(均P>0.05)。新生儿出生体质量、胎龄、性别比例、低出生体质量儿、巨大儿、小于胎龄儿、大于胎龄儿、出生缺陷发生率两组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。二次活检PGT组亚组之间两两比较,其二检率、扩增成功率、可移植率的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论对于第一次活检失败的患者,经过二次活检行PGT后的临床妊娠率、活产率和新生儿出生体质量、出生缺陷发生率等与一次活检PGT患者相当。

关键词：囊胚倾向性匹配二次活检胚胎植入前遗传学检测新生儿结局

应用子宫输卵管超声造影评估输卵管通畅性:在争议与困境中前行

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中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 656-660页

作者：徐子宁王瑶婷孙娟陈双喜邹彦崔艾琳舒静浙江省人民医院杭州医学院附属人民医院生殖医学中心超声医学科杭州310012 浙江省人民医院杭州医学院附属人民医院生殖医学中心生殖内分泌科杭州310012

近年来,输卵管性不孕的发病率不断上升。在我国,多数输卵管性不孕女性为了尽可能保留输卵管,会优先考虑接受保守治疗或者输卵管重建手术。为了满足这类患者的生育需求,生殖领域的临床医生就需要综合评价各种不孕危险因素,权衡利弊,探求... 详细信息

近年来,输卵管性不孕的发病率不断上升。在我国,多数输卵管性不孕女性为了尽可能保留输卵管,会优先考虑接受保守治疗或者输卵管重建手术。为了满足这类患者的生育需求,生殖领域的临床医生就需要综合评价各种不孕危险因素,权衡利弊,探求更符合患者利益的个体化诊疗方案。对于输卵管的影像学评估水准也相应地提出了更高的要求。子宫输卵管超声造影(hysterosalpingo-contrast sonography,HyCoSy)作为评价输卵管通畅性的一线影像学技术,其价值已得到大量临床实践的肯定,但仍面临着众多争议与困境。本文通过文献回顾和经验总结,为HyCoSy这项技术的前行提供观点。

关键词：子宫输卵管超声造影输卵管通畅性输卵管性不孕

人脐带间充质干细胞培养上清对米非司酮处理的人子宫内膜基质细胞存活、凋亡和子宫内膜容受性的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第1期50卷 79-87页

作者：武梦雪陈士玲刘艳米旭光林秀英付建华方艳秋吉林省人民医院生殖医学中心吉林长春130021

目的:探讨人脐带间充质干细胞培养上清(hUCMSCs-Sup)对米非司酮(Ms)处理的人子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)增殖、凋亡和子宫内膜容受性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:体外培养hEndoSCs,分为对照组和40、60、80及100μmol·L-1 Ms组... 详细信息

目的:探讨人脐带间充质干细胞培养上清(hUCMSCs-Sup)对米非司酮(Ms)处理的人子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)增殖、凋亡和子宫内膜容受性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:体外培养hEndoSCs,分为对照组和40、60、80及100μmol·L-1 Ms组,MTT法检测各组细胞存活率。hEndoSCs分为对照组、40μmol·L-1 Ms组和60μmol·L-1 Ms组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平并计算Bcl-2/Bax比值。hUCMSCs-Sup作用后,hEndoSCs分为对照组、Ms组、Ms+hUCMSCs-Sup组和Ms+hUCMSCs-Sup+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,MTT法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)和微管相关蛋白1轻链3B-Ⅰ(LC3B-Ⅰ)蛋白表达水平并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中子宫内膜容受性标志分子mRNA表达水平。结果:与对照组比较,40、60、80和100μmol·L-1 Ms组细胞存活率明显降低(P<0.05),且具有时间和剂量依赖性。与对照组比较,40和60μmol·L-1 Ms组细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05)。hUCMSCs-Sup作用后,与对照组比较,Ms组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中同源框基因A10 (HOXA10)、白血病抑制因子(LIF)和整合素亚基β3 (ITGB3) mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与Ms组比较,Ms+hUCMSCs-Sup组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),细胞中HOXA10、LIF和ITGb3 mRNA表达水平表达明显升高(P<0.05);与Ms+hUCMSCs-Sup组比较,Ms+hUCMSCs-Sup+3-MA组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显降低(P<0.05)。结论:hUCMSCs-Sup可提高Ms处理后hEndoSCs的存活率,降低其凋亡率,提高子宫内膜容受性,其机制可能与hUCMSCs-Sup激活hEndoSCs自噬有关。

关键词：脐带间充质干细胞人子宫内膜基质细胞细胞凋亡细胞自噬子宫内膜容受性

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精浆在女性生殖调控中的作用

中华生殖与避孕杂志 2024年第4期44卷 428-431页

作者：李小玲肖卓妮武汉大学人民医院生殖医学中心武汉430060

精浆的功能包括作为精子的运输媒介,以及作为男性向女性生殖组织传递信息的交流手段。它是刺激女性的生殖道向受孕状态转变的重要因素。雌性的生殖道接触到精浆时会发生剧烈的炎症样反应,继而女性多个生殖器官的功能受到调节。在交配过... 详细信息

精浆的功能包括作为精子的运输媒介,以及作为男性向女性生殖组织传递信息的交流手段。它是刺激女性的生殖道向受孕状态转变的重要因素。雌性的生殖道接触到精浆时会发生剧烈的炎症样反应,继而女性多个生殖器官的功能受到调节。在交配过程中可以观察到女性宫颈和子宫腔内对病原体和碎片的清除能力增强。精浆还能够影响子宫内膜上皮细胞和间质细胞的活动,调节子宫的容受性,并通过对免疫细胞系统的调节来建立母体对半异体胚胎的耐受性,为胚胎的有效着床和妊娠提供理想的条件。对于不孕症的治疗,辅助生殖技术已被广泛应用。应用精浆作为一种辅助治疗方法,可能在辅助生殖治疗周期中改善子宫内膜的接受性并调节母体免疫耐受,从而提高胚胎着床及继续发育的潜能。本文对精浆的组成及其对女性生殖道各部分的生理作用进行了综述,并对精浆目前在辅助生殖领域的应用进展进行综述。

关键词：精浆女性生殖系统炎症反应免疫耐受

中年男性精子DNA碎片率对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

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解剖学报 2024年第3期55卷 345-348页

作者：王平王静陈先兵陈曦北京大学人民医院妇产科生殖医学中心北京100044

目的探讨中年男性精子DNA碎片率(DFI)与精液质量和体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。方法共收集180例接受常规体外受精-胚胎移植治疗且男性年龄>38岁的精液标本。根据DFI的阈值分成(0.05)。结论DFI可以作为中年男性精液常规分析的重要... 详细信息

目的探讨中年男性精子DNA碎片率(DFI)与精液质量和体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。方法共收集180例接受常规体外受精-胚胎移植治疗且男性年龄>38岁的精液标本。根据DFI的阈值分成(0.05)。结论DFI可以作为中年男性精液常规分析的重要参考指标,虽然DFI影响优质胚胎率,但与辅助生殖治疗的临床妊娠结局无关。

关键词：精子DNA碎片率精子活力精子染色质扩散形态学观察人

miR-27a通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ/葡萄糖转运蛋白4调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞功能的研究

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中国糖尿病杂志 2024年第1期32卷 51-58页

作者：王睿郭清民尹正芳熊正方青海省人民医院生殖医学中心西宁810000 青海省人民医院妇科西宁810000

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-I... 详细信息

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-IR组,HOMA-IR≥2.57,n=23)和非IR组(PCOS-NIR组,HOMA-IR<2.57,n=22),另选取同期本院因男性或输卵管因素的已婚不孕患者为对照组(Con,n=21)。miR-27a模拟物(miR-27a mimics)、miR-27a抑制剂(miR-27a inhibitor)和相应对照(mimics NC和inhibitor NC)转染PCOS-IR组颗粒细胞,分为miR-27a mimics组、miR-27a inhibitor组、mimics-NC组和inhibitor-NC组。双荧光素酶报告试验证实miR-27a与PPARγ结合。CCK-8法和Annexinv-FITC/PI法检测细胞增殖和凋亡。定量实时PCR和Western blot法分别检测miR-27a、GluT4、PPARγ、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达。结果与Con组比较,PCOS-NIR、PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.01),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与PCOS-NIR组比较,PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.05),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。双荧光素酶报告显示,PPARγ和miR-27a之间有靶向结合位点。与inhibitor-NC组比较,miR-27a inhibitor组24、48、72和96 h时细胞活性升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a inhibitor、mimics-NC组凋亡率降低(P<0.05或P<0.01),miR-27a mimics组凋亡率升高,48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组凋亡率升高,24、48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.05或P<0.01)。与inhibitor-NC组比较,miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),miR-27a inhibitor组GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达表达升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论miR-27a表达与颗粒细胞IR,细胞增殖及细胞凋亡相关,其过程可能与PPARγ信号通路相关。

关键词： miR-27a 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 葡萄糖转运蛋白4 颗粒细胞多囊卵巢综合征