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高效液相色谱法和质谱法检测和鉴定化妆品中5种羟基酸

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分析科学学报 2024年第3期40卷 364-368页

作者：张雷胡积东王海瑞孙乐苏州华搏生物检测有限公司江苏苏州215000

建立了同时测定化妆品中乳糖酸、葡萄糖酸、甘油酸、丙酮酸、羟基丙二酸5种羟基酸含量的高效液相色谱法,并采用液相色谱-串联质谱法进行了鉴定。样品先用少量异丙醇分散,再经一级水提取后,以30 mmol/L乙酸铵水溶液(磷酸调节pH至2.9)-甲... 详细信息

建立了同时测定化妆品中乳糖酸、葡萄糖酸、甘油酸、丙酮酸、羟基丙二酸5种羟基酸含量的高效液相色谱法,并采用液相色谱-串联质谱法进行了鉴定。样品先用少量异丙醇分散,再经一级水提取后,以30 mmol/L乙酸铵水溶液(磷酸调节pH至2.9)-甲醇作为流动相,经ZORBAX SB-Aq(250 mm×4.6 mm×5μm)色谱柱分离,用二极管阵列检测器进行检测;若出现疑似阳性样品,则进一步采用液相色谱-串联质谱法进行确证,采用ESI离子源,在SRM负离子监测模式下分别确立了5种羟基酸组分的定量、定性离子以及离子对的相对丰度比。结果表明,5种羟基酸在各自浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出浓度为30~100 mg/kg,定量浓度为120~300 mg/kg,平均加标回收率为91.8%~104.1%,RSD为0.1%~1.9%。该方法高效、准确、可靠,适用于化妆品中5种羟基酸组分的定性筛查及含量测定。

关键词：羟基酸高效液相色谱高效液相色谱-串联质谱化妆品

基于RAW264.7细胞模型的槲皮万寿菊素与叶黄素协同改善急性肺损伤的作用机制

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食品科学 2024年第17期45卷 96-104页

作者：冯丹琦王向红吴迪连运河程鑫颖刘卫华米思河北农业大学食品科技学院河北保定071000 晨光生物科技集团股份有限公司河北邯郸057250 河北晨光检测技术服务有限公司河北邯郸057250

为解析槲皮万寿菊素、槲皮素与叶黄素单独处理以及联合处理对急性肺损伤的作用机制,以脂多糖诱导构建RAW264.7细胞炎症模型,以一氧化氮(nitric oxide,NO)相对含量为评价指标,采用联合指数法确定槲皮万寿菊素与叶黄素以及槲皮素与叶黄素... 详细信息

为解析槲皮万寿菊素、槲皮素与叶黄素单独处理以及联合处理对急性肺损伤的作用机制,以脂多糖诱导构建RAW264.7细胞炎症模型,以一氧化氮(nitric oxide,NO)相对含量为评价指标,采用联合指数法确定槲皮万寿菊素与叶黄素以及槲皮素与叶黄素的最佳复配比例;分析比较槲皮万寿菊素、槲皮素与叶黄素单独及联合处理对RAW264.7细胞中炎症因子(肿瘤坏死因子-α、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6)含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性以及谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响;采用免疫印迹法测定核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路中p65、p50以及沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2 related factor 2,Nrf2)和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)的相对表达量。结果表明,槲皮万寿菊素与叶黄素高剂量3∶1(30μg/mL+10μg/mL)复配能够最大程度降低RAW264.7细胞中的NO相对含量。二者单独及联合作用均能通过降低炎症因子、丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽还原酶活性,下调NF-κB p65、p50以及NLRP3表达水平并上调SIRT1、Nrf2蛋白相对表达量发挥改善急性肺损伤的作用,且联合处理效果优于单独处理组。

关键词：万寿菊槲皮万寿菊素叶黄素槲皮素 RAW264.7细胞急性肺损伤

基于灰色关联度分析砂仁传统性状鉴别特征与内在成分含量的相关性研究

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中华中医药杂志 2024年第6期39卷 3036-3043页

作者：崔阳米文娟李阳韩玉翟恩爱王亚顺邹慧琴闫永红北京中医药大学北京100029 纳美信(上海)生物科技有限公司上海201112

目的:以砂仁中的非挥发性成分作为目标成分,与目前公认的挥发油成分进行比较,分析其与传统性状的相关性,以此验证所筛选的砂仁质量评价指标的合理性与科学性。方法:以砂仁作为研究对象,采用HPLC测定砂仁中的非挥发性成分(槲皮苷、C1、C... 详细信息

目的:以砂仁中的非挥发性成分作为目标成分,与目前公认的挥发油成分进行比较,分析其与传统性状的相关性,以此验证所筛选的砂仁质量评价指标的合理性与科学性。方法:以砂仁作为研究对象,采用HPLC测定砂仁中的非挥发性成分(槲皮苷、C1、C17)的含量,GC测定砂仁中主要的4个挥发性成分(龙脑、樟脑、柠檬烯、乙酸龙脑酯)的含量;通过电子鼻及百果重、横径、纵径、纵径/横径比的测定,对砂仁传统性状鉴别特征进行量化分析,基于灰色关联度分析将两类化学成分与性状指标进行相关性研究。结果:由灰色关联分析结果可知,关联度由大到小为:龙脑(r=0.751)>槲皮苷(r=0.745)>樟脑(r=0.711)>柠檬烯(r=0.682)>C1(r=0.568)>乙酸龙脑酯(r=0.540)>C17(r=0.505),槲皮苷作为非挥发性成分与性状的关联程度仅次于龙脑,可作为补充成分以完善现有的砂仁质量标准。结论:通过相关性分析不仅可阐明砂仁传统性状鉴别特点的科学性,体现了中药“辨状论质”的整体思想,同时可将目标成分与药材质量有效结合,有利于砂仁质量评价体系的完善。

关键词：砂仁性状特征挥发性成分非挥发性成分相关性质控指标槲皮苷

黑水虻幼虫中肠区块化免疫表达促进特征肠道微生物群落形成

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环境昆虫学报 2024年第5期46卷 1104-1112页

作者：韩璐滢项方铭孙佳杰刘乘源张志剑浙江大学环境与资源学院杭州310058 杭州行也生物科技有限公司杭州310058

黑水虻Hermetia illucens L.幼虫肠道中的免疫系统既需要消灭病原体,又要创造有益环境,保留共生微生物。Toll和免疫缺陷(Immune deficiency,Imd)通路是昆虫肠道内抵御病原体的基本免疫防御机制,然而黑水虻幼虫肠道中耐受共生菌的机制尚... 详细信息

黑水虻Hermetia illucens L.幼虫肠道中的免疫系统既需要消灭病原体,又要创造有益环境,保留共生微生物。Toll和免疫缺陷(Immune deficiency,Imd)通路是昆虫肠道内抵御病原体的基本免疫防御机制,然而黑水虻幼虫肠道中耐受共生菌的机制尚不清楚。本研究通过对比不同废弃物(餐厨垃圾、豆渣和鸡粪)中黑水虻幼虫中肠微生物组,发现放线菌门Actinobacteria、厚壁菌门Firmicutes、拟杆菌门Bacteroidetes和变形菌门Proteobacteria在肠道中占主导,并且肠道能富集放线菌门和拟杆菌门。通过随机森林模型预测,异单胞菌Dysgonomonas、摩氏摩根菌属Morganella、厌氧球菌属Anaerococcus最有可能是中肠中的特征菌属,这些菌的存在可能对黑水虻的生长有着重要影响并且可以作为判定样品是否属于黑水虻的标准。进一步研究表明后中肠的微生物负荷平均是前中肠和中中肠的8.56倍,同时异单胞菌主要在后中肠富集。另外,前中肠和中中肠的抗菌肽表达分别是后中肠的1645倍和10.20倍,而负反馈因子在后中肠的表达平均提高了4.66倍。本研究初步表明黑水虻幼虫肠道可能对微生物具有重塑作用,幼虫在前中肠通过抗菌肽筛选微生物,并在后中肠抑制抗菌肽释放保存共生菌。综上,本研究揭示了黑水虻幼虫肠道免疫的区域化表达可维持抗病原体能力的同时为共生微生物群构建保护区域的“先清除-后招募”机制。

关键词：黑水虻肠道微生物抗菌肽免疫通路

质粒DNA Fast NGS测序方法的开发和应用

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生物技术进展 2024年第4期14卷 594-600页

作者：宋辉曹文刚肖晓文杜军北京擎科生物科技股份有限公司研究院北京100000 湖北擎科生物科技有限公司研发部湖北鄂州431800

质粒DNA是最常用的基因运载工具,在基因合成技术中扮演着至关重要的角色。如何实现合成质粒DNA的准确且快速检测,是确保基因组完整性和提高基因合成效率的关键。尽管基于一代DNA的测序方法,其准确性已成为行业标准,但在检测通量、检测... 详细信息

质粒DNA是最常用的基因运载工具,在基因合成技术中扮演着至关重要的角色。如何实现合成质粒DNA的准确且快速检测,是确保基因组完整性和提高基因合成效率的关键。尽管基于一代DNA的测序方法,其准确性已成为行业标准,但在检测通量、检测速度和检测成本等方面仍然存在局限性,这促使科学家们不断寻求新的解决方案。基于生物酶库,开发了DNA建库酶TN5,建立了高通量质粒DNA检测方案——Fast NGS。利用不同长度、不同质量的质粒DNA样本评估了Fast NGS的可行性,并对质粒DNA样本进行了高通量测序,最后对比了Fast NGS与Sanger测序的效率。结果表明,DNA建库酶TN5蛋白的纯度和质量符合二代测序要求。Fast NGS适用于3~8 kb基因合成质粒的测序检测,其检测通量高达2500个·12 h-1,测序成功率超过95%,测序准确性与一代测序相当,并且无明显序列偏好性。Fast NGS实现了质粒DNA的高通量、快速且低成本检测,为基因合成技术的发展提供了新的方向。

关键词： Fast NGS 质粒DNA 高通量测序 TN5

丹参绞股蓝茶对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤细胞炎症凋亡保护作用和机制研究

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中国实验动物学报 2024年

作者：谭电波刘中华杜青曾宏亮李跃辉湖南省中医药研究院湖南善源生物科技有限公司

目的基于沉默信息调节因子1（silentinformationregulator1，SIRT1）/高迁移率族蛋白B1（highmobilitygroupproteinB1，HMGB1）/核转录因子-κB（nucleartranscriptionfactor-κB，NF-κB）信号轴探讨丹参绞股蓝茶对四氯化碳(carbontetrachloride，CCl4)所致小鼠急性肝损伤肝细胞炎症凋亡反应的抑制作用和机制研究。方法 C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、白藜芦醇组、丹参绞股蓝茶低、中、高剂量组、阳性药组，连续灌胃给药14 d。采用腹腔注射0.5%CCl4橄榄油溶液（5mL/kg）的方法建立小鼠急性肝损伤模型。生化法检测小鼠血清中丙氨酸转移酶（alaninetransferase，ALT）、天冬氨酸转移酶（aspartatetransferase，AST）、乳酸脱氢酶（lactatedehydrogenase，LDH）及肝组织羟脯氨酸（hydroxyproline，Hyp）、丙二醛（malonaldehyde，MDA）和超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）水平；酶联免疫吸附法检测血清炎性因子肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）水平；苏木素-伊红（HE）染色和TUNEL染色检测肝组织病理形态结构和肝细胞凋亡情况；WesternBlot检测SIRT1、HMGB1和NF-κB蛋白表达。结果与正常组比较，模型组小鼠血清ALT、AST、LDH水平和肝组织Hyp活性显著升高，以及肝组织中MDA和SOD活性明显降低，血清炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著增多（P<0.05或P<0.01），肝组织存在明显的病理损伤以及肝细胞凋亡情况，肝组织中SIRT1蛋白的表达明显降低，HMGB1和NF-κB蛋白的表达升高；与模型组比较，丹参绞股蓝茶高剂量组和白藜芦醇组小鼠血清肝功能指标ALT、AST、LDH水平和肝组织Hyp活性显著降低，以及肝组织中MDA和SOD活性明显增加，血清炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著减少，肝组织的病理损伤以及肝细胞凋亡情况得到明显改善，肝组织中SIRT1蛋白表达增加，HMGB1和NF-κB蛋白的表达降低（P<0.05或P<0.01）。结论丹参绞股蓝茶能有效保护急性肝损伤，其作用机制可能与调控SIRT1/HMGB1/NF-κB信号通路，减轻肝细胞炎性凋亡有关。

关键词：急性肝损伤炎性凋亡沉默信息调节因子1 高迁移率族蛋白B1 核转录因子-κB

基于欠定盲源分离和深度学习的生猪状态音频识别

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华南农业大学学报 2024年第5期45卷 730-742页

作者：潘伟豪盛卉子王春宇闫顺丕周小波辜丽川焦俊安徽农业大学信息与人工智能学院安徽合肥230036 安徽喜乐佳生物科技有限公司安徽亳州233500

【目的】为解决群养环境下生猪音频难以分离与识别的问题,提出基于欠定盲源分离与E C A-EfficientNetV2的生猪状态音频识别方法。【方法】以仿真群养环境下4类生猪音频信号作为观测信号,将信号稀疏表示后,通过层次聚类估计出信号混合矩... 详细信息

【目的】为解决群养环境下生猪音频难以分离与识别的问题,提出基于欠定盲源分离与E C A-EfficientNetV2的生猪状态音频识别方法。【方法】以仿真群养环境下4类生猪音频信号作为观测信号,将信号稀疏表示后,通过层次聚类估计出信号混合矩阵,并利用lp范数重构算法求解lp范数最小值以完成生猪音频信号重构。将重构信号转化为声谱图,分为进食声、咆哮声、哼叫声和发情声4类,利用ECA-EfficientNetV2网络模型识别音频,获取生猪状态。【结果】混合矩阵估计的归一化均方误差最低为3.266×10^(−4),分离重构的音频信噪比在3.254~4.267 dB之间。声谱图经ECA-EfficientNetV2识别检测,准确率高达98.35%;与经典卷积神经网络ResNet50和VGG16对比,准确率分别提升2.88和1.81个百分点;与原EfficientNetV2相比,准确率降低0.52个百分点,但模型参数量减少33.56%,浮点运算量(FLOPs)降低1.86 G,推理时间减少9.40 ms。【结论】基于盲源分离及改进EfficientNetV2的方法,轻量且高效地实现了分离与识别群养生猪音频信号。

关键词：猪盲源分离声谱图音频识别稀疏重构卷积神经网络

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应用时间分辨荧光免疫层析法快速定量检测玉米及其副产物中的伏马毒素

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中国饲料 2024年

作者：肖蕴祺汪劲能邱良祝施寿荣上海雄图生物科技有限公司江苏省家禽科学研究所

文章旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB1)含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。试验以玉米及其副产物中FB1为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB1抗体与荧光微球进行偶联标记... 详细信息

文章旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB1)含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。试验以玉米及其副产物中FB1为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB1抗体与荧光微球进行偶联标记,制备FB1荧光免疫层析试纸条,以检测线T信号值与质控线C信号值的比值为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,建立定量标准曲线。通过优化抗体标记过程中混匀转速和复溶液pH,及改变样品垫的处理方式,以提升FB1-TRFIA试纸条的稳定性和精密度。结果显示:FB1-TRFIA试纸条的最低检测限为50.75μg/kg,定量限为100.10μg/kg;组内CV分别为4.83%(FB11mg/kg)、2.86%(FB115 mg/kg)、4.88%(FB150 mg/kg);组间CV分别为4.90%、3.11%、5.32%,FB1添加回收率为98.33%～102.87%;阳性样本检测结果与LC-MS/MS方法一致;试纸条在4℃和37℃放置14 d,T/C基本不变。本研究建立的FB1-TRFIA试纸条性能良好,适用于玉米及其副产物中FB1含量的快速定量检测。

关键词：伏马毒素时间分辨荧光免疫层析法玉米定量快检

依克多因和棉子糖协同减缓视黄醇引起的皮肤屏障功能下降

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中国化妆品 2024年第4期 102-106页

作者：张亚孙欣王瑞妍华熙生物科技有限公司

视黄醇作为抗衰的流行成分,被广泛应用于化妆品领域。但由于视黄醇会引起皮肤刺激和干燥,在配方中的应用受到一定限制。研究针对依克多因、棉子糖以及两者的组合物在减缓视黄醇造成的皮肤屏障损伤上进行了探索。研究采用人体模型,共挑... 详细信息

视黄醇作为抗衰的流行成分,被广泛应用于化妆品领域。但由于视黄醇会引起皮肤刺激和干燥,在配方中的应用受到一定限制。研究针对依克多因、棉子糖以及两者的组合物在减缓视黄醇造成的皮肤屏障损伤上进行了探索。研究采用人体模型,共挑选20名受试者,在受试者前臂内侧分别涂抹仅含视黄醇的样品,以及含单独依克多因、单独棉子糖和不同配比的依克多因和棉子糖的视黄醇乳液样品。各样品连续重复涂抹2天,每天2次,于第3天评价各样品的TEWL改善率,同时利用金氏公式计算Q值判断组合物是否具有协同性。结果表明,当依克多因和棉子糖的质量配比在0.5∶1~9∶1范围内时,两者组合可协同提高TEWL改善率,说明该配比范围的组合物可以协同修复视黄醇造成的皮肤屏障受损,相对于单独的依克多因或棉子糖更好。与此同时,受试者对涂抹区域进行感官评价刺痛程度,数据表明,当依克多因和棉子糖的质量配比在0.5∶1~9∶1范围内时,两者组合带来的刺痛程度相对于单体显著降低,证明在上述配比范围内组合物可以降低因屏障功能受损带来的刺痛感。

关键词：视黄醇依克多因棉子糖屏障修复