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磷霉素联合亚胺培南对携带blaNDM的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的体外抗菌活性

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中国抗生素杂志 2024年第10期 1121-1130页

作者：林佳瑶朱婕闻奕丞王靓翟雅轩钱艳杜鸿苏州大学附属第二医院医学检验中心

目的探究磷霉素与亚胺培南联合使用对携带blaND00M的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌（carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE）的体外抗菌活性。方法收集2021—2022年苏州大学附属第二医院医学检验中心临床分离的非重复CRE，并通过聚... 详细信息

目的探究磷霉素与亚胺培南联合使用对携带blaND00M的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌（carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE）的体外抗菌活性。方法收集2021—2022年苏州大学附属第二医院医学检验中心临床分离的非重复CRE，并通过聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）筛选出携带blaNDM的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CR-KP）和耐碳青霉烯类大肠埃希菌（carbapenem-resistant Escherichia coli,CR-E. coli）。通过微量肉汤稀释法测定菌株对常用抗生素的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）和琼脂稀释法测定菌株对磷霉素的MIC；采用棋盘法分别测定磷霉素与6种抗生素联用的部分抑菌浓度指数（fractional inhibitory concentration index,FICI）以判定药物联合效果；通过时间杀菌实验判断磷霉素与亚胺培南体外联合杀菌效果；采用结晶紫染色法检测菌株生物膜形成能力；通过荧光定量PCR检测不同抗生素条件下菌株blaNDM、fosA、mrkA和murA基因的转录水平。结果 PCR筛选出24株携带blaNDM基因的CR-KP（12/24）和CR-E. coli（12/24）。棋盘试验显示磷霉素联合亚胺培南的协同作用（FICI≤0.5）相较其他抗生素效果最好（70.8%）。时间杀菌实验显示，磷霉素联合亚胺培南作用24 h内细菌数降低≥3 log10CFU/mL，呈现出较强的杀菌效应。结晶紫染色结果显示磷霉素与亚胺培南联合可以抑制细菌生物膜形成。荧光定量PCR结果显示，磷霉素与亚胺培南联合处理后，生物膜形成与Ⅲ型菌毛合成重要基因mrkA表达相较对照组和亚胺培南组显著下调，而细胞壁形成重要基因murA表达相较其他两组上调。结论磷霉素与亚胺培南联用可以抑制细菌生长，其可能通过减少生物膜形成、影响菌毛和细胞壁形成等方面对携带blaNDM的CR-KP与CR-E. coli发挥协同抗菌或杀菌作用。

关键词：磷霉素亚胺培南联合用药肺炎克雷伯菌大肠埃希菌

关节镜下距腓前韧带联合跟腓韧带修复治疗慢性踝关节外侧不稳合并距下关节不稳的临床效果

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中华外科杂志 2024年第6期62卷 565-571页

作者：毛伟伟汤骏杰张勇李伟祝蓥王颖桂鉴超秦建忠苏州大学附属第二医院手足外科苏州215004 江苏省太湖强制隔离戒毒所苏州215111 苏州大学医学院苏州215006 苏州大学附属第二医院造口中心苏州215004 南京医科大学附属南京医院运动关节科南京210012

目的探究关节镜下修复距腓前韧带(ATFL)和跟腓韧带(CFL)治疗慢性踝关节外侧不稳(CLAI)合并距下关节不稳(STI)的临床效果。方法本研究为回顾性病例系列研究。回顾性分析2019年1月至2022年12月于苏州大学附属第二医院手足外科行关节镜手... 详细信息

目的探究关节镜下修复距腓前韧带(ATFL)和跟腓韧带(CFL)治疗慢性踝关节外侧不稳(CLAI)合并距下关节不稳(STI)的临床效果。方法本研究为回顾性病例系列研究。回顾性分析2019年1月至2022年12月于苏州大学附属第二医院手足外科行关节镜手术治疗的15例CLAI合并STI患者的临床资料。男性11例,女性4例,年龄(28.6±1.5)岁(范围:19~39岁)。右侧9例,左侧6例。所有患者术前拍摄踝关节内翻应力位X线片并行MRI检查,术中在关节镜下采用拉索技术分别行ATFL和CFL修复术。术后1年复查MRI,记录患肢功能恢复情况,采用疼痛视觉模拟评分(VAS)、美国足踝外科协会踝与后足评分(AOFAS-AH)及Karlsson踝关节功能评分(KAFS)评估患肢疼痛和功能情况。手术前后数据比较采用配对样本t检验。结果所有患者均获随访,随访时间(23.6±2.3)个月(范围:12~30个月),切口均一期愈合,未发生血管神经损伤、感染等并发症。末次随访时,AOFAS-AH由术前的(50.5±11.7)分升至(94.2±6.1)分(t=-13.132,P学意义。结论采用关节镜技术修复ATFL和CFL可恢复患者踝关节和距下关节稳定性,且操作简便、创伤小、患者术后恢复快,为临床治疗CLAI合并STI提供了一种新思路。

关键词：踝关节关节不稳定性距下关节不稳慢性踝关节外侧不稳定跟腓韧带距腓前韧带关节镜韧带修复

异基因造血干细胞移植供患者HLA基因确认分型中存在的问题及解决策略

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中华医学杂志 2024年第11期104卷 793-798页

作者：鲍晓晶袁晓妮何军苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所HLA配型实验室，苏州215031

由于人类白细胞抗原(HLA)在异基因造血干细胞移植中的重要性,临床移植中心对HLA基因分型结果的准确性提出了较高的要求。本文针对本实验室在进行HLA基因确认分型工作中发现的一些问题,并基于国家标准、行业标准等,结合我国HLA基因分型... 详细信息

由于人类白细胞抗原(HLA)在异基因造血干细胞移植中的重要性,临床移植中心对HLA基因分型结果的准确性提出了较高的要求。本文针对本实验室在进行HLA基因确认分型工作中发现的一些问题,并基于国家标准、行业标准等,结合我国HLA基因分型技术开展的实际情况,探讨了在造血干细胞移植前对患者和潜在供者进行HLA基因确认分型的必要性。通过回顾性分析本实验室确认分型过程中所发现的患者/供者初次分型错误,分析了检验前、中、后各个阶段中,HLA基因分型工作可能存在哪些问题及关键节点,针对问题的原因归类为人为因素、技术方法局限性、患者自身疾病和治疗三大类,并分别提出具体的解决策略;并且在针对不同问题原因提出的具体建议和解决策略的基础上,思考如何才能做好HLA确认分型以及HLA在我国未来的发展方向。

关键词：人类白细胞抗原异基因造血干细胞移植基因确认分型

人类白细胞抗原混合试剂筛查实验结果判断界限值的建立与验证

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中华医学杂志 2024年第11期104卷 857-864页

作者：陈璐瑶鲍晓晶袁晓妮郁玲莹何军苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所HLA配型实验室，苏州215031

目的建立人类白细胞抗原(HLA)混合试剂筛查实验结果判断的界限值,并以HLA单抗原试剂确认实验结果进行验证。方法回顾性分析苏州大学附属第一医院HLA配型实验室2017年10月至2021年12月2255份采用HLA混合试剂进行HLA抗体检测的血清样本结... 详细信息

目的建立人类白细胞抗原(HLA)混合试剂筛查实验结果判断的界限值,并以HLA单抗原试剂确认实验结果进行验证。方法回顾性分析苏州大学附属第一医院HLA配型实验室2017年10月至2021年12月2255份采用HLA混合试剂进行HLA抗体检测的血清样本结果。其中1139份同期采用HLA单抗原试剂-Ⅰ类试剂检测,1116份同期采用HLA单抗原试剂-Ⅱ类试剂检测。针对两种试剂包被的相同抗原,录入混合试剂中12个HLA-Ⅰ类微珠及5个HLA-Ⅱ类微珠的平均荧光强度(MFI)、标准化背景(NBG)比值及HLA单抗原试剂检测到的77种抗HLA-Ⅰ类抗体及35种抗HLA-Ⅱ类抗体的MFI值。以混合试剂各微珠包被抗原对应的单抗原试剂检测到抗体的阳性率将1139份及1116份样本中各混合试剂检测到的微珠的MFI值及NBG比值进行范围分段,并采用HLA单抗原试剂确认实验对HLA混合试剂筛查实验结果进行验证。结果建立了HLA混合试剂筛查实验17个微珠MFI值及NBG比值判断界限值表,HLA混合试剂1~17号微珠的MFI值为26.86~21925.58,NBG比值为0~434.65。按照包被抗原对应单抗原试剂的阳性检出率,将混合试剂各微珠的MFI值及NBG比值分为阳性区间、可疑阳性区间、可疑阴性区间、阴性区间。HLA混合试剂和HLA单抗原试剂对HLA-Ⅰ类抗体阳性检出率分别为87.5%(997/1139)、66.3%(755/1139);对HLA-Ⅱ类抗体阳性检出率分别为63.4%(707/1116)、44.9%(501/1116)。HLA混合试剂检测HLA-Ⅰ类抗体结果为可疑阴性、可疑阳性、阳性样本中,HLA单抗原试剂的阳性检出率分别为14.9%(17/114)、41.3%(145/351)、91.3%(590/646);HLA混合试剂检测HLA-Ⅱ类抗体结果为可疑阴性、可疑阳性、阳性样本中,HLA单抗原试剂的阳性检出率分别为15.5%(58/375)、26.5%(81/306)、88.8%(356/401)。结论本研究建立了HLA混合试剂筛查实验判断各抗原微珠MFI值及NBG比值的界限值,并经HLA单抗原试剂确认实验进行验证。HLA混合试剂筛查实验可以用于HLA抗体的筛查,必要时应和HLA单抗原试剂确认实验联合应用于临床HLA抗体检测。

关键词：人类白细胞抗原抗体界限值移植

EIF4A3 shRNA慢病毒载体的构建及其稳定转染细胞系的建立

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 831-839页

作者：何嘉文李友廖科棋李胜男广东医科大学广东省衰老相关心脑疾病重点实验室广东湛江524002 广东医科大学附属医院神经病学研究所广东湛江524002

目的:构建真核细胞翻译起始因子4A3(EIF4A3)-短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,建立Neuro-2a-EIF4A3-shRNA稳定转染细胞系。方法:通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库检索EIF4A3基因序列,设计并合成PCR鉴定引物,并将其连接至经EcoRⅠ和... 详细信息

目的:构建真核细胞翻译起始因子4A3(EIF4A3)-短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,建立Neuro-2a-EIF4A3-shRNA稳定转染细胞系。方法:通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库检索EIF4A3基因序列,设计并合成PCR鉴定引物,并将其连接至经EcoRⅠ和AgeⅠ酶切的慢病毒GV493载体,构建GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒质粒,PCR筛选阳性克隆并测序鉴定。将GV493空载质粒和GV493-EIF4A3-shRNA重组质粒分别转染至HEK293T细胞中,分别为GV493对照慢病毒和GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒,转染48 h后收集慢病毒进行包装并测定病毒滴度。将Neuro-2a细胞分为空白组、GV493对照组和GV493-EIF4A3 shRNA组,空白组不作处理,GV493对照组和GV493-EIF4A3 shRNA组分别采用相应慢病毒感染Neuro-2a细胞,慢病毒感染复数(MOI)为100,使用10 mg·L-1嘌呤霉素筛选成功感染慢病毒的Neuro-2a细胞,荧光显微镜观察各组Neuro-2a细胞的生长状态和绿色荧光表达情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组Neuro-2a细胞中EIF4A3 mRNA及蛋白表达水平。结果:PCR测序结果显示GV493-EIF4A3-shRNA重组质粒基因序列与设计合成的EIF4A3-shRNA序列一致,成功构建GV493-EIF4A3慢病毒载体。荧光显微镜观察可见HEK293T细胞荧光表达强烈,生长状态良好,慢病毒包装成功。GV493-对照慢病毒和GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒的滴度均为2×10~8 TU·mL^(-1),GV493对照组和GV493-EIF4A3 shRNA组Neuro-2a细胞生长状态良好且表达绿色荧光,表明慢病毒感染稳定细胞系构建成功。RT-qPCR法,与空白组和GV493对照组比较,GV493-EIF4A3shRNA组Neuro-2a细胞EIF4A3mRNA表达水平明显降低(P病毒载体,建立了Neuro-2a-EIF4A3-shRNA稳定转染细胞系,为EIF4A3在颅内动脉粥样硬化的作用机制研究提供了参考。

关键词：真核细胞翻译起始因子4A3 短发夹RNA 慢病毒稳定转染细胞系 Neuro-2a细胞

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CAR-T与阻断PD-1联合治疗在实体瘤中的研究进展

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中国药学杂志 2024年第11期59卷 961-969页

作者：郑梦王燕缪丽燕苏州大学附属第一医院临床药理实验室江苏苏州215006 苏州大学药物研究与转化交叉研究所江苏苏州215123

近年来,嵌合抗原受体修饰T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cells,CAR-T)在血液系统肿瘤中的临床疗效显著,但在实体瘤的治疗中面临诸多挑战。在实体肿瘤微环境中,CAR-T细胞表面高表达的程序性细胞死亡蛋白-1(programmed cell... 详细信息

近年来,嵌合抗原受体修饰T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cells,CAR-T)在血液系统肿瘤中的临床疗效显著,但在实体瘤的治疗中面临诸多挑战。在实体肿瘤微环境中,CAR-T细胞表面高表达的程序性细胞死亡蛋白-1(programmed cell death-1,PD-1)是限制发挥疗效的主要因素。故而,阻断PD-1可以提高CAR-T细胞的效应功能,并显著降低肿瘤负荷。本文总结了CAR-T与PD-1阻断联合治疗在实体瘤中临床前及临床中的研究现状。

关键词：嵌合抗原受体T细胞免疫疗法程序性细胞死亡蛋白-1 实体瘤免疫疗法

基于失效模式与效应分析法的智能手术室药房管理体系的构建与应用

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医药导报 2024年第1期43卷 41-46页

作者：狄俊鸿耿洲邱琦苏州大学附属第二医院药学部苏州215004

目的建立智能手术室药房管理体系,促进手术室药品的规范化管理,为医疗机构提供借鉴与参考。方法基于失效模式与效应分析(FMEA)法对苏州大学附属第二医院手术室药房工作流程进行风险识别及评估,依据风险优先指数(RPN)值确定需要采取措... 详细信息

目的建立智能手术室药房管理体系,促进手术室药品的规范化管理,为医疗机构提供借鉴与参考。方法基于失效模式与效应分析(FMEA)法对苏州大学附属第二医院手术室药房工作流程进行风险识别及评估,依据风险优先指数(RPN)值确定需要采取措施进行改善的失效模式,分析失效原因,拟定干预措施并对改进效果进行评价。结果在手术室药房工作流程中共发现12个需优先改善的失效模式,将智能药柜及相应管理体系投入使用后,RPN值共下降337,下降幅度达67.8%;麻醉药品管理水平、患者用药及时性和医务人员满意度均显著提高。结论运用FMEA法能够能有效识别手术室药房环节的风险,智能手术室药房管理体系显著提高了手术室药品管理水平和医疗服务质量。

关键词：手术室药房智能药柜管理体系失效模式与效应分析

新型分子探针^(89)Zr-DFO-G4C2监测PD-1表达水平的临床前研究

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中华核医学与分子影像杂志 2024年第10期44卷 603-608页

作者：朱怡蓉孔维唯尤嘉熙倪凯茹张兵刘增礼石怡珍洪智慧苏州大学附属第二医院核医学科苏州215004

目的设计合成靶向程序性细胞死亡受体1(PD-1)新型分子探针^(89)Zr-去铁胺(DFO)-G4C2,探究其在荷瘤小鼠体内的生物分布并行microPET/CT显像。方法DFO偶联抗PD-1单克隆抗体G4C2合成DFO-G4C2,采用流式细胞术和表面等离子共振技术评估DFO-G... 详细信息

目的设计合成靶向程序性细胞死亡受体1(PD-1)新型分子探针^(89)Zr-去铁胺(DFO)-G4C2,探究其在荷瘤小鼠体内的生物分布并行microPET/CT显像。方法DFO偶联抗PD-1单克隆抗体G4C2合成DFO-G4C2,采用流式细胞术和表面等离子共振技术评估DFO-G4C2的亲和力及结合特异性。进行^(89)Zr标记,得到^(89)Zr-DFO-G4C2,分析其标记率及体外稳定性。建立PD-1表达阳性的CT26结直肠癌荷瘤小鼠模型,通过microPET/CT显像及体内生物分布探讨^(89)Zr-DFO-G4C2的潜在临床应用价值,并在4T1乳腺癌模型中验证该分子探针在不同肿瘤模型中显像效果。采用两独立样本t检验分析数据。结果DFO-G4C2亲和力常数KD值为(0.55±0.02)μmol/L,与小鼠PD-1蛋白的结合率为(61.82±8.49)%。^(89)Zr-DFO-G4C2的标记率为(98.76±0.51)%,在溶媒和人血清中放置144 h的标记率分别为(93.07±2.16)%和(83.42±3.21)%。CT26荷瘤小鼠microPET/CT显像示肿瘤组织有明显^(89)Zr-DFO-G4C2摄取,在注射后72 h肿瘤摄取值为(10.47±0.34)每克组织百分注射剂量率(%ID/g),而注射过量未标记抗体的阻断组的肿瘤摄取值为(6.26±1.03)%ID/g,明显低于实验组肿瘤摄取值(t=6.67,P=0.003)。体内生物分布结果与microPET/CT显像基本一致。4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型microPET/CT显像结果与CT26模型相似。结论基于^(89)Zr-DFO-G4C2分子探针的免疫PET显像可以无创、可视化地评估肿瘤微环境中PD-1表达水平,有望成为一种用于PD-1抑制剂免疫治疗监测的分子影像学新技术。

关键词：程序性细胞死亡受体1 同位素标记锆结直肠肿瘤乳腺肿瘤正电子发射断层显像术小鼠

经颅超声评估注意缺陷多动障碍儿童黑质回声的应用研究

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中华超声影像学杂志 2024年第1期33卷 42-48页

作者：马冰沈耀红陈艳朱俊益王才善张迎春苏州大学附属第二医院超声中心苏州215004 苏州市立医院南京医科大学附属苏州医院超声中心苏州215008 苏州市立医院南京医科大学附属苏州医院儿科苏州215008 苏州大学附属儿童医院儿童保健科苏州215025

目的利用经颅超声(TCS)技术分析儿童注意缺陷多动障碍(ADHD)患儿的超声神经影像学特点,探讨TCS对辅助诊断儿童ADHD的临床应用价值。方法前瞻性纳入2021年8月至2022年8月于苏州市立医院和苏州大学附属儿童医院就诊的50例6~12岁ADHD儿童(A... 详细信息

目的利用经颅超声(TCS)技术分析儿童注意缺陷多动障碍(ADHD)患儿的超声神经影像学特点,探讨TCS对辅助诊断儿童ADHD的临床应用价值。方法前瞻性纳入2021年8月至2022年8月于苏州市立医院和苏州大学附属儿童医院就诊的50例6~12岁ADHD儿童(ADHD组)和年龄匹配的45例健康儿童(对照组),ADHD的诊断以美国精神病学会《精神疾病诊断与统计手册》第5版(DSM-Ⅴ)为标准,并根据患儿临床症状特征将其分为3种亚型,其中注意缺陷为主型14例,多动冲动为主型3例,混合型33例。应用TCS观察两组儿童中脑黑质(SN)的变化,测量SN强回声面积并计算SN强回声面积与中脑面积的比值(S/M),比较两组间各参数的差异。采用Pearson相关分析法分析ADHD组SN强回声面积和S/M与DSM-Ⅴ评分的相关性。结果半定量分析:ADHD组SN强回声≥Ⅲ级比例明显大于对照组[96.00%(48/50)比13.33%(6/45),P0.05)。结论TCS可以发现ADHD患儿SN回声增强,SN回声增强比例、SN强回声面积及S/M明显高于正常儿童,但SN强回声面积和S/M与DSM-Ⅴ评分无明显相关性。

关键词：超声检查,经颅注意缺陷多动障碍儿童黑质