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基于微流控芯片评估富血小板血浆促进子宫内膜细胞的增殖

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中国组织工程研究 2024年

作者：闻哲嘉吕芳苏州大学附属第二医院生殖中心

背景：富血小板血浆可促进薄型子宫内膜细胞的增殖，但存在剂量难以控制、取样困难等问题。微流控芯片具有高通量、低消耗、操作简便等优点，为模拟子宫内膜细胞在体微环境提供了新途径。目的：利用三通道微流控芯片构建富血小板血浆促... 详细信息

背景：富血小板血浆可促进薄型子宫内膜细胞的增殖，但存在剂量难以控制、取样困难等问题。微流控芯片具有高通量、低消耗、操作简便等优点，为模拟子宫内膜细胞在体微环境提供了新途径。目的：利用三通道微流控芯片构建富血小板血浆促进子宫内膜细胞增殖的研究模型。方法：从1名女性外周静脉血中提取富血小板血浆。采用含不同浓度[0%(对照)，0.5%,1%,2%]富血小板血浆的无血清细胞培养基培养人子宫内膜间质细胞，采用划痕实验检测细胞迁移，CCK-8法检测细胞增殖。利用聚二甲基硅氧烷胶制备微流控芯片，该微流控芯片设计有3个通道，中间通道为细胞外基质水凝胶通道，左右两侧分别为人子宫内膜间质细胞及富血小板血浆通道，3个通道之间保存有可以相互沟通以及实现物质交换的面积，实验组两侧通道分别加入人子宫内膜间质细胞(绿色荧光蛋白GFP标记)和含0.5%富血小板血浆的无血清培养基，对照组两侧通道分别加入人子宫内膜间质细胞(绿色荧光蛋白GFP标记)和无血清细胞培养基，共培养48 h后，采用Ki67免疫荧光染色观察细胞增殖与迁移。结果与结论：(1)细胞划痕实验和CCK-8检测结果显示，与对照组相比，0.5%,1%,2%浓度的富血小板血浆可促进人子宫内膜间质细胞的迁移与增殖(P <0.05)，并且0.5%浓度富血小板血浆的促进细胞迁移与增殖作用强于其他2个浓度(P <0.05);(2)Ki67免疫荧光染色结果显示，与对照组相比，实验组人子宫内膜间质细胞的增殖和迁移能力更强；(3)实验证实通过三通道微流控芯片可以模拟子宫内膜细胞的微环境，同时利用该系统验证了富血小板血浆可显著促进子宫内膜间质细胞的增殖与迁移。

关键词：微流控芯片富血小板血浆子宫内膜间质细胞子宫内膜增殖迁移细胞外基质薄型子宫内膜子宫内膜相关疾病

口咽分泌物微误吸管理方案在ICU气管插管患者中的应用研究

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中华护理杂志 2024年第10期59卷 1157-1163页

作者：邓伟李小珍王英谭丽萍周保纯田凤美黄慧邹洁唐雯徐苏娟苏州大学附属第二医院重症医学科苏州市215004 苏州大学附属第二医院护理部苏州市215004

目的构建ICU气管插管患者口咽分泌物微误吸管理方案并进行临床应用。方法基于证据总结和专家函询,构建ICU气管插管患者口咽分泌物微误吸管理方案,该方案包含微误吸危险因素识别、体位管理、导管及气囊选择、气囊管理、机械通气与镇痛镇... 详细信息

目的构建ICU气管插管患者口咽分泌物微误吸管理方案并进行临床应用。方法基于证据总结和专家函询,构建ICU气管插管患者口咽分泌物微误吸管理方案,该方案包含微误吸危险因素识别、体位管理、导管及气囊选择、气囊管理、机械通气与镇痛镇静管理、口腔及气囊上分泌物清除、口腔护理7个方面、19条内容。便利选取2022年6月—2023年9月在苏州市某三级甲等医院综合ICU接受治疗的141例气管插管患者为研究对象。根据病区将患者分为试验组(n=72)和对照组(n=69),试验组应用ICU气管插管患者口咽分泌物微误吸管理方案,对照组采用呼吸机相关性肺炎(ventilator associated pneumonia,VAP)集束化护理措施。比较两组微误吸、VAP发生率和微误吸发生时间,以及机械通气时长、ICU住院时长和疾病转归。结果干预后两组口咽分泌物微误吸发生率和发生时间及机械通气时长的比较,差异有统计学意义(P0.05)。试验组与对照组VAP的平均发生时间分别为气管插管后7.5 d和3.8 d。结论ICU气管插管患者口咽分泌物微误吸管理方案的实施有利于降低微误吸发生率,推迟微误吸和VAP发生时间,缩短机械通气时长。

关键词：重症监护病房插管法气管内口咽分泌物微误吸护理

kisspeptin调控Notch1/Akt/Foxo1通路参与复发性流产患者子宫内膜蜕膜化

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四川大学学报（医学版） 2024年第3期55卷 542-551页

作者：杨艳红张建亮李冬晓刘翠平郭融肖伊周玲佟玲霞张弘苏州大学附属第二医院妇产科苏州215004 苏州大学附属第一医院江苏省临床免疫研究所苏州215021

目的 kisspeptin是一种肿瘤抑制因子,由KISS1基因编码。Notch1/Akt/Foxo1是调节细胞增殖、分化的重要信号通路。本研究探讨kisspeptin通过Notch1/Akt/Foxo1信号通路调控子宫内膜蜕膜化在复发性流产(RSA)中的作用机制。方法纳入2020年6... 详细信息

目的 kisspeptin是一种肿瘤抑制因子,由KISS1基因编码。Notch1/Akt/Foxo1是调节细胞增殖、分化的重要信号通路。本研究探讨kisspeptin通过Notch1/Akt/Foxo1信号通路调控子宫内膜蜕膜化在复发性流产(RSA)中的作用机制。方法纳入2020年6月–2020年12月苏州大学附属第二医院生殖中心门诊收治的RSA患者45例及同期计划生育门诊择期人工流产女性50例,Western blot、RT-qPCR检测蜕膜组织中kisspeptin(及其基因KISS1)、蜕膜化标志物胰岛素样生长因子结合蛋白1(insulin-like growth factor binding protein 1, IGFBP1)、Notch1、Akt、Foxo1表达水平。使用siRNA干扰KISS1或添加kisspeptin10(kisspeptin的活性片段)处理永生化子宫内膜基质细胞(hESC)后,命名为siKP组或KP10组,并设转染空白siRNA的hESC为对照组,CCK8检测增殖情况。对3组hESC进行体外诱导蜕膜化,免疫荧光检测siKP组和KP10组细胞Notch1表达及蜕膜化形态差异,RT-qPCR和Western blot检测3组细胞IGFBP1、Notch1、Akt、Foxo1的表达。hESC添加Notch1、Akt、Foxo1对应抑制剂后诱导蜕膜化(以仅诱导蜕膜化、未添加抑制剂的hESC为正常对照组),检测4组细胞上述蛋白和基因的表达。建立正常妊娠(CBA/J×BALB/c)和复发性流产(CBA/J×DBA/2)小鼠模型,即NP模型和RSA模型,实验组分别给予kisspeptin10和kisspeptin234(阻滞剂)隔日1次腹腔注射(RSA-KP10组和NP-KP234组),对照组给予生理盐水隔日1次腹腔注射(RSA-NS组和NP-NS组),共4组,每组6只,取孕9.5 d的子宫组织,观察胚胎吸收的情况,检测上述蛋白和基因的表达。结果与正常妊娠(NP)女性相比,RSA患者kisspeptin、IGFBP1、Notch1、Akt、Foxo1的蛋白及其基因表均降低(P<0.01或P<0.05)。hESC添加kisspeptin10后蜕膜化能力增强,Notch1、Akt、Foxo1的蛋白及基因表达增加,干扰KISS1后表达降低;免疫荧光见增殖状态的hESC呈细长形,蜕膜化后细胞变圆、变大,Notch1表达增加,添加kisspeptin10后蜕膜化程度增高,干扰KISS1后减弱;分别用Notch1、Akt、Foxo1抑制剂处理hESC,发现三者按Notch1/Akt/Foxo1的顺序依次调控(P<0.05)。与注射生理盐水组相比,正常妊娠小鼠注射kisspeptin234后吸收胎增多(P<0.001),IGFBP1、Notch1、Akt、Foxo1的蛋白及基因表达下降(P<0.05);复发流产小鼠注射kisspeptin10后吸收胎减少(P<0.001),上述蛋白及基因表达升高(P<0.05)。结论 kisspeptin可能通过Notch1/Akt/Foxo1信号通路调控子宫内膜蜕膜化,其表达下调导致蜕膜化不良,可能是导致RSA发病的原因之一。

关键词： kisspeptin Notch1 子宫内膜蜕膜化复发性流产

关节镜下距腓前韧带联合跟腓韧带修复治疗慢性踝关节外侧不稳合并距下关节不稳的临床效果

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中华外科杂志 2024年第6期62卷 565-571页

作者：毛伟伟汤骏杰张勇李伟祝蓥王颖桂鉴超秦建忠苏州大学附属第二医院手足外科苏州215004 江苏省太湖强制隔离戒毒所苏州215111 苏州大学医学院苏州215006 苏州大学附属第二医院造口中心苏州215004 南京医科大学附属南京医院运动关节科南京210012

目的探究关节镜下修复距腓前韧带(ATFL)和跟腓韧带(CFL)治疗慢性踝关节外侧不稳(CLAI)合并距下关节不稳(STI)的临床效果。方法本研究为回顾性病例系列研究。回顾性分析2019年1月至2022年12月于苏州大学附属第二医院手足外科行关节镜手... 详细信息

目的探究关节镜下修复距腓前韧带(ATFL)和跟腓韧带(CFL)治疗慢性踝关节外侧不稳(CLAI)合并距下关节不稳(STI)的临床效果。方法本研究为回顾性病例系列研究。回顾性分析2019年1月至2022年12月于苏州大学附属第二医院手足外科行关节镜手术治疗的15例CLAI合并STI患者的临床资料。男性11例,女性4例,年龄(28.6±1.5)岁(范围:19~39岁)。右侧9例,左侧6例。所有患者术前拍摄踝关节内翻应力位X线片并行MRI检查,术中在关节镜下采用拉索技术分别行ATFL和CFL修复术。术后1年复查MRI,记录患肢功能恢复情况,采用疼痛视觉模拟评分(VAS)、美国足踝外科协会踝与后足评分(AOFAS-AH)及Karlsson踝关节功能评分(KAFS)评估患肢疼痛和功能情况。手术前后数据比较采用配对样本t检验。结果所有患者均获随访,随访时间(23.6±2.3)个月(范围:12~30个月),切口均一期愈合,未发生血管神经损伤、感染等并发症。末次随访时,AOFAS-AH由术前的(50.5±11.7)分升至(94.2±6.1)分(t=-13.132,P<0.01);KAFS由术前的(44.3±10.8)分升至(90.8±6.4)分(t=-12.510,P<0.01);VAS由术前的(6.1±1.4)分降至(1.4±1.2)分(t=9.482,P<0.01),差异均有统计学意义。结论采用关节镜技术修复ATFL和CFL可恢复患者踝关节和距下关节稳定性,且操作简便、创伤小、患者术后恢复快,为临床治疗CLAI合并STI提供了一种新思路。

关键词：踝关节关节不稳定性距下关节不稳慢性踝关节外侧不稳定跟腓韧带距腓前韧带关节镜韧带修复

经颅超声评估注意缺陷多动障碍儿童黑质回声的应用研究

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中华超声影像学杂志 2024年第1期33卷 42-48页

作者：马冰沈耀红陈艳朱俊益王才善张迎春苏州大学附属第二医院超声中心苏州215004 苏州市立医院南京医科大学附属苏州医院超声中心苏州215008 苏州市立医院南京医科大学附属苏州医院儿科苏州215008 苏州大学附属儿童医院儿童保健科苏州215025

目的利用经颅超声(TCS)技术分析儿童注意缺陷多动障碍(ADHD)患儿的超声神经影像学特点,探讨TCS对辅助诊断儿童ADHD的临床应用价值。方法前瞻性纳入2021年8月至2022年8月于苏州市立医院和苏州大学附属儿童医院就诊的50例6~12岁ADHD儿童(A... 详细信息

目的利用经颅超声(TCS)技术分析儿童注意缺陷多动障碍(ADHD)患儿的超声神经影像学特点,探讨TCS对辅助诊断儿童ADHD的临床应用价值。方法前瞻性纳入2021年8月至2022年8月于苏州市立医院和苏州大学附属儿童医院就诊的50例6~12岁ADHD儿童(ADHD组)和年龄匹配的45例健康儿童(对照组),ADHD的诊断以美国精神病学会《精神疾病诊断与统计手册》第5版(DSM-Ⅴ)为标准,并根据患儿临床症状特征将其分为3种亚型,其中注意缺陷为主型14例,多动冲动为主型3例,混合型33例。应用TCS观察两组儿童中脑黑质(SN)的变化,测量SN强回声面积并计算SN强回声面积与中脑面积的比值(S/M),比较两组间各参数的差异。采用Pearson相关分析法分析ADHD组SN强回声面积和S/M与DSM-Ⅴ评分的相关性。结果半定量分析:ADHD组SN强回声≥Ⅲ级比例明显大于对照组[96.00%(48/50)比13.33%(6/45),P0.05)。结论TCS可以发现ADHD患儿SN回声增强,SN回声增强比例、SN强回声面积及S/M明显高于正常儿童,但SN强回声面积和S/M与DSM-Ⅴ评分无明显相关性。

关键词：超声检查,经颅注意缺陷多动障碍儿童黑质

经颅超声联合血清学指标与帕金森病患者认知状态的相关性研究

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中华超声影像学杂志 2024年第6期33卷 512-518页

作者：王海张迎春丁常伟王才善盛余敬陈晓芳张英杨敏毛攀杨勇冯萍毛成洁陈静刘春风苏州大学附属第二医院超声中心苏州215004 铜仁市人民医院超声科铜仁554300 苏州大学附属第二医院检验科苏州215004 苏州大学附属第二医院神经内科和神经疾病临床研究中心苏州215004

目的探讨经颅超声(TCS)联合血清同型半胱氨酸(Hcy)、血糖、血脂与帕金森病(PD)患者认知状态之间的相关性,分析这些参数对评估PD患者认知状态的临床应用价值。方法回顾性收集2020年1月至2023年6月苏州大学附属第二医院收治住院的PD患者15... 详细信息

目的探讨经颅超声(TCS)联合血清同型半胱氨酸(Hcy)、血糖、血脂与帕金森病(PD)患者认知状态之间的相关性,分析这些参数对评估PD患者认知状态的临床应用价值。方法回顾性收集2020年1月至2023年6月苏州大学附属第二医院收治住院的PD患者152例作为PD组,选取同期年龄和性别相匹配的健康体检者101例作为对照组。收集临床资料[年龄、性别、患病时长、蒙特利尔认知评分量表(MoCA)评分、简易精神状态评价量表(MMSE)评分、统一帕金森评定量表第三部分(UPDRS-Ⅲ)评分、Hoehn-Yahr(H-Y)分期等]、血清学检查(Hcy、血糖、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白浓度)及TCS检查(第三脑室宽度、中脑面积、双侧大脑中动脉收缩期峰值流速、双侧大脑中动脉阻力指数、双侧黑质强回声面积)结果。以Hcy浓度≥15μmol/L为界,将上述两组分为单纯PD组与PD伴Hcy增高组、单纯对照组与单纯Hcy增高组。比较四组间以上参数的差异。分析PD患者Hcy及认知状态(MoCA评分、MMSE评分)与上述参数的相关性。结果PD伴Hcy增高组MoCA评分、MMSE评分低于单纯PD组,UPDRS-Ⅲ评分及H-Y分期高于单纯PD组(均P<0.001)。Hcy浓度由高至低依次为PD伴Hcy增高组、单纯Hcy增高组、单纯PD组、单纯对照组,四组间血清学数据差异及TCS数据差异有统计学意义(均P<0.001)。Spearman相关分析显示:①PD组Hcy浓度与血糖浓度、H-Y分期、低密度脂蛋白浓度、右侧大脑中动脉阻力指数、UPDRS-Ⅲ评分、总胆固醇浓度、三酰甘油浓度、左侧大脑中动脉阻力指数、第三脑室宽度、年龄呈正相关(rs=0.422、0.350、0.348、0.334、0.325、0.300、0.293、0.283、0.221、0.164,均P<0.05);Hcy浓度与中脑面积、MMSE评分、MoCA评分、右侧大脑中动脉收缩期峰值流速、左侧大脑中动脉收缩期峰值流速、高密度脂蛋白浓度呈负相关(rs=-0.328、-0.282、-0.245、-0.229、-0.224、-0.192,均P<0.05)。②PD组MoCA评分及MMSE评分与临床数据、血清学数据、TCS数据均存在相关性,以中脑面积呈最大正相关(rs=0.524、0.516,均P<0.05),H-Y分期为最大负相关(rs=-0.490、-0.468,均P<0.05)。结论PD伴Hcy增高患者认知评分低于单纯PD患者;PD患者Hcy浓度与其血糖浓度相关性最大,其次为H-Y分期;PD患者认知评分与其中脑面积相关性最大,与黑质强回声面积无关。降低PD患者血清Hcy浓度可能是延缓其认知功能损害的途径之一。

关键词：超声检查,经颅同型半胱氨酸帕金森病认知评分

恩替卡韦片在中国健康受试者空腹状态下的生物等效性研究

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中国临床药理学杂志 2024年第9期40卷 1311-1315页

作者：张娟王蒙黄明王吉张全英苏州大学附属第二医院药学部江苏苏州215004 苏州大学附属第二医院肿瘤科江苏苏州215004

目的评价2种恩替卡韦片在中国健康受试者空腹条件下的药代动力学和生物等效性。方法采用单中心、随机、开放、双周期交叉试验设计。30例健康中国受试者空腹口服恩替卡韦受试制剂或参比制剂0.50 mg后,血浆样品中加入乙腈直接沉淀蛋白后,... 详细信息

目的评价2种恩替卡韦片在中国健康受试者空腹条件下的药代动力学和生物等效性。方法采用单中心、随机、开放、双周期交叉试验设计。30例健康中国受试者空腹口服恩替卡韦受试制剂或参比制剂0.50 mg后,血浆样品中加入乙腈直接沉淀蛋白后,按照质谱和色谱条件进行HPLC-MS/MS分析,利用WinNonlin软件(版本6.4)计算药代动力学参数,并对2种制剂的空腹给药进行生物等效性评价。结果空腹给药受试和参比制剂血浆中恩替卡韦的C_(max)分别为(4390.00±1257.56)和(4421.00±1239.55)pg·mL^(-1),t_(max)为0.67(0.33,2.00)和0.75(0.50,2.00)h,t_(1/2)为(29.71±14.50)和(35.43±16.58)h,AUC_(0-72 h)为(12252.43±2671.28)和(12063.43±2151.50)pg·mL^(-1)·h。受试制剂和参比制剂C_(max)、AUC_(0-72 h)和AUC_(0-∞)的均值比的90%置信区间均落在80.00%~125.00%。结论受试制剂和参比制剂在空腹状态下具有生物等效性。

关键词：恩替卡韦空腹生物等效性药代动力学液相-串联质谱方法

中国65岁及以上老年人肌少症和膳食多样性关系的研究

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现代预防医学 2024年第6期51卷 1005-1011页

作者：钱鸣崎杜俏俏张文雅施蓉芳杨海珍朱小军苏州大学附属第二医院健康管理中心

目的探讨膳食多样性评分(DDS)和老年人肌少症之间的关系。方法利用中国老年健康与家庭幸福调查(CLHLS-HF)2018年的调查数据进行分析。采用2019年亚洲肌少症工作组(AWGS2019)制定的标准评估肌少症。通过构建四个新的DDS指标：总体膳食... 详细信息

目的探讨膳食多样性评分(DDS)和老年人肌少症之间的关系。方法利用中国老年健康与家庭幸福调查(CLHLS-HF)2018年的调查数据进行分析。采用2019年亚洲肌少症工作组(AWGS2019)制定的标准评估肌少症。通过构建四个新的DDS指标：总体膳食、动物性膳食、植物性膳食和不包含豆制品和坚果的植物性膳食评分。采用logistic回归来分析总体膳食、动物性膳食、植物性膳食和不包含豆制品和坚果的植物性膳食的DDS与可能肌少症之间的关联。并进行混杂因素调整、亚组分析及敏感性分析。结果共纳入研究对象2 555名(平均年龄84.4岁),男性1 244人(48.7%),女性1 311人(51.3%)。可能肌少症患病率为63.9%(1 632/2 555),可能肌少症组的DDS明显低于非肌少症组(t=-5.216,P<0.001)。调整混杂因素后，总体膳食(OR=0.544, 95%CI:0.405～0.732),动物性膳食(OR=0.613;95%CI:0.423～0.888),植物性膳食(OR=0.469;95%CI:0.321～0.684)和不包含豆制品和坚果的植物性膳食(OR=0.382;95%CI:0.206～0.709)与肌少症的发生风险均有关联。DDS越高发生可能肌少症的风险越低。敏感性分析显示相关性保持不变。亚组分析结果显示男性人群中总体膳食、动物性膳食和植物性膳食仍然与可能肌少症风险降低相关，而在女性人群中，植物性膳食以及不包含豆制品和坚果的植物性膳食与可能肌少症的风险降低有关。结论膳食多样性是老年人肌少症的保护因素，采用多样化的饮食可能会降低老年人肌少症的风险。

关键词：膳食多样性肌少症植物性膳食老年人

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铁调素水平与骨代谢相关性临床及实验研究

中国骨质疏松杂志 2024年第2期30卷 198-203页

作者：王一可刘功稳王雄毅张睿智刘炜峰谢伊代·如则李俊杰徐又佳苏州大学附属第二医院骨科江苏苏州215000 苏州市中医院江苏苏州215000 苏州大学附属第二医院骨质疏松症临床中心江苏苏州215000

目的探讨人群血清铁调素浓度与骨密度的相关性,并了解铁调素对小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)分化影响及相关机制。方法①采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测骨量正常与骨质疏松症两组人群血清铁调素水平;②采用细胞计数试剂检测比较成骨前体细... 详细信息

目的探讨人群血清铁调素浓度与骨密度的相关性,并了解铁调素对小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)分化影响及相关机制。方法①采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测骨量正常与骨质疏松症两组人群血清铁调素水平;②采用细胞计数试剂检测比较成骨前体细胞(MC3T3-E1)在不同浓度铁调素干预后细胞增殖的影响,运用RT-PCR、Western Blot方法了解铁调素对成骨分化功能指标(ALP、Runx2、BMP2、P-SMAD1/5和SMAD5)影响。结果人群血清铁调素水平与腰椎、髋部骨密度呈显著正相关;铁调素在一定浓度范围(0~10 ng/mL)浓度增加可显著上调细胞功能分化表达(ALP、Runx2)、促进成骨信号通路蛋白表达(BMP2、P-SMAD1/5和SMAD5)。结论临床数据显示血清铁调素水平和骨量具有显著相关性,铁调素水平低骨密度值也低;而细胞实验显示一定浓度铁调素可显著激活BMP2-SMAD1/5信号通路、上调成骨分化相关基因的表达,诱导细胞成骨分化。因此,本研究结果提示:血清铁调素可能与骨质疏松症存在相关性,临床检测铁调素可能是骨质疏松症诊疗过程中一种新的评估指标,值得进一步研究。

关键词：铁调素绝经后骨质疏松症随机森林成骨表型成骨机制