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干细胞工程化双面异性静电纺丝膜促进硬脊膜修复的体外实验

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中国组织工程研究 2024年第10期28卷 1540-1546页

作者：徐敬之王文博孙慧雯顾勇苏州大学附属第一医院骨科江苏省苏州市215000

背景:目前临床上采用自体组织或明胶海绵等材料对硬脊膜进行修补,但都存在不同程度的缺陷,因此亟需一种可以促进硬脊膜修复的生物材料。目的:利用定向静电纺丝及胶原自组装技术构建双面异性静电纺丝膜,并将其负载骨髓间充质干细胞构建... 详细信息

背景:目前临床上采用自体组织或明胶海绵等材料对硬脊膜进行修补,但都存在不同程度的缺陷,因此亟需一种可以促进硬脊膜修复的生物材料。目的:利用定向静电纺丝及胶原自组装技术构建双面异性静电纺丝膜,并将其负载骨髓间充质干细胞构建人工硬脊膜,探讨该人工硬脊膜的各项理化性能以及生物特性。方法:采用静电纺丝技术及胶原自组装技术制备有序聚乳酸静电纺丝纤维的双面(一面为胶原蛋白,另一面为聚乳酸)异性静电纺丝膜(胶原组)、无序的聚乳酸静电纺丝膜(无序纤维组)、有序定向的聚乳酸静电纺丝膜(有序纤维组),通过扫描电镜、力学拉伸、水接触角测试、降解实验等来表征静电纺丝膜的理化性能。将胶原组(在胶原蛋白面接种骨髓间充质干细胞,即得到干细胞工程化静电纺丝膜)、无序纤维组、有序纤维组静电纺丝膜分别与骨髓间充质干细胞共培养,采用CCK-8法和活/死染色评估静电纺丝膜的生物相容性,整合素β1免疫荧光染色评估静电纺丝膜的黏附特性。将干细胞工程化静电纺丝膜及胶原组静电纺丝膜分别与骨髓巨噬细胞共培养,通过诱导型一氧化氮合酶(M1型)、CD206(M2型)免疫荧光染色及qRT-PCR检测炎症相关基因的表达来评估免疫调控性能。结果与结论:①定向静电纺丝纤维膜可模拟天然硬脊膜的纵向排列结构,胶原蛋白加入后,纤维膜的亲水性提高约2倍,力学性能提升了1.2倍;②与骨髓间充质干细胞共培养时,CCK-8和活/死染色显示,胶原组静电纺丝膜的细胞生物活性明显高于无序纤维组、有序纤维组;免疫荧光染色显示,胶原组整合素β1表达约为无序纤维组、有序纤维组的2.6倍,且细胞铺展形态良好;③与骨髓巨噬细胞共培养时,免疫荧光染色显示,干细胞工程化静电纺丝膜组M1型巨噬细胞荧光强度低于胶原组(P型巨噬细胞荧光强度高于胶原组(P型极化,调控局部的炎症微环境。

关键词：硬脊膜修补人工硬脊膜静电纺丝胶原蛋白骨髓间充质干细胞聚乳酸

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静态拉伸对大鼠椎间盘髓核和纤维环的影响

中国组织工程研究 2024年第8期28卷 1180-1185页

作者：莫骏罗宗平江苏省血吸虫病防治研究所江苏省无锡市214064 苏州大学附属第一医院骨科研究所江苏省苏州市215006

背景:牵引在临床上用于椎间盘退变早期的治疗,但其对正常椎间盘的影响仍未可知,是直接造成椎间盘退变还是正向作用即是此次实验的观察要点。目的:建立大鼠尾椎椎间盘静态拉伸模型,观察静态拉伸对椎间盘髓核和纤维环的影响。方法:选用20... 详细信息

背景:牵引在临床上用于椎间盘退变早期的治疗,但其对正常椎间盘的影响仍未可知,是直接造成椎间盘退变还是正向作用即是此次实验的观察要点。目的:建立大鼠尾椎椎间盘静态拉伸模型,观察静态拉伸对椎间盘髓核和纤维环的影响。方法:选用20只3月龄SD大鼠,采用外固定装置静态拉伸大鼠尾椎7/8、8/9、9/10椎间隙1 mm,6/7、10/11椎间盘作为对照;拉伸2,4,6,8周随机抽取5只大鼠进行尾椎椎间盘MRI T2加权扫描、组织切片染色、合成分解代谢RT-PCR基因检测,观察静态拉伸对椎间盘髓核和纤维环的影响。结果与结论:①大鼠尾椎椎间盘经过短期静态拉伸后,椎间盘髓核区的T2加权像信号增强;②整个拉伸期间,髓核区域髓核细胞生长状态良好,细胞间基质含量丰富,纤维环排布整齐;③RT-PCR结果显示,拉伸之后蛋白多糖基因表达升高,基质金属蛋白酶3表达降低,Ⅰ、Ⅱ型胶原基因表达降低,基质金属蛋白酶13表达升高,基质金属蛋白酶抑制剂1表达升高,这些基因结果也进一步表明拉伸使得蛋白多糖更趋向合成代谢状态,Ⅰ、Ⅱ型胶原更趋向于分解代谢状态;④结果提示静态拉伸有助于促进髓核区域蛋白多糖的合成代谢,使得水分得以维持。

关键词：静态拉伸髓核纤维环 T2高信号蛋白多糖

芦可替尼治疗中国人群难治性移植物抗宿主病效果和安全性的Meta分析

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白血病．淋巴瘤 2024年第3期33卷 161-171页

作者：詹宇宸刘吟王栋徐杨国家血液系统疾病临床医学研究中心江苏省血液研究所苏州大学附属第一医院国家卫生健康委员会血栓与止血重点实验室苏州215006

目的系统评价芦可替尼治疗中国人群难治性移植物抗宿主病(SR-GVHD)的效果及安全性。方法以"芦可替尼""移植物抗宿主病""ruxolitinib""Graft vs Host Disease""graft versus host disease""Graft-Versus-Host Disease"为关键词,检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库、PubMed、Ebscore Medline、EMBASE、Web of Science核心合集以及Cochrane Library,检索时限为自建库起至2021年12月7日。根据纳入及排除标准筛选芦可替尼治疗中国人群SR-GVHD的相关文献,并提取文献特征;结局指标为总体客观缓解率(ORR)、激素减量及停用比例、生存指标、不良反应发生率等。采用Stata 16.0软件或R3.6.3软件对ORR、受累器官缓解率、12个月总生存率、总体死亡率和因移植物抗宿主病死亡率进行Meta分析;对患者激素使用情况和不良反应进行统计。结果纳入19篇关于芦可替尼治疗中国人群SR-GVHD的文献,共775例患者。Meta分析结果显示,芦可替尼治疗急性移植物抗宿主病(aGVHD)患者ORR为84%(285/339),各研究间具有中等异质性(I2=62.04%,P研究间具有中等异质性(I2=50.17%,P=0.02),其中CR率、PR率和NR率分别为36%(155/431)、41%(177/431)和21%(91/431)。aGVHD患者中有46.5%激素减量,34.9%激素停用;cGVHD患者中有28.2%激素减量,36.9%激素停用。SR-GVHD患者经芦可替尼治疗后的12个月总生存率为71%(95%CI:63%~79%,I2=72.70%,P<0.01)。共发生各类不良反应760例次,其中病毒感染[287例次(36.0%)]和血细胞减少[269例次(34.7%)]是最常见的不良反应。结论芦可替尼可有效治疗中国人群SR-GVHD,有助于减少激素依赖,延长患者生存期。

关键词：移植物抗宿主病难治芦可替尼 Meta分析

中国髓外浆细胞瘤诊断与治疗专家共识(2024年版)

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中华血液学杂志 2024年第1期45卷 8-17页

作者：中华医学会血液学分会浆细胞疾病学组中国医师协会多发性骨髓瘤专业委员会黄晓军吴德沛李娟不详国家血液系统疾病临床医学研究中心北京大学人民医院北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室北京100044 国家血液系统疾病临床医学研究中心江苏省血液研究所苏州大学附属第一医院苏州215006 中山大学附属第一医院广州510080

髓外浆细胞瘤(extramedullary plasmacytoma,EMP)是恶性浆细胞病的一种特殊类型,表现复杂、异质性强。大部分EMP预后差,缺乏循证医学证据支持下的预后分层系统和理想的治疗策略,无法满足临床需求。为提高对这类疾病的认识,中华医学会血... 详细信息

髓外浆细胞瘤(extramedullary plasmacytoma,EMP)是恶性浆细胞病的一种特殊类型,表现复杂、异质性强。大部分EMP预后差,缺乏循证医学证据支持下的预后分层系统和理想的治疗策略,无法满足临床需求。为提高对这类疾病的认识,中华医学会血液学分会浆细胞疾病学组和中国医师协会多发性骨髓瘤专业委员会编写《中国髓外浆细胞瘤诊断与治疗专家共识》,旨在规范EMP的临床诊治,最终改善浆细胞瘤患者的总体生存。

关键词：浆细胞瘤诊断鉴别临床方案

人工智能辅助血细胞形态学检查的技术要求及其临床应用中国专家共识(2024年版)

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中华血液学杂志 2024年第4期45卷 330-338页

作者：中华医学会血液学分会实验诊断学组吴德沛张曦陈苏宁彭贤贵刘水清刘丹丹杨武晨王翊不详苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所国家血液系统疾病临床医学研究中心苏州215006 陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心重庆400037 陆军军医大学第二附属医院苏州大学附属第一医院重庆大学计算机学院

血细胞形态学检查是血液疾病诊断的重要手段,传统人工镜检存在效率低、易受主观影响等问题。人工智能技术的应用提高了血细胞检查的效率和质量,促进了检测结果的标准化。目前,多种人工智能设备已在临床使用或研究中,但其技术要求和配置... 详细信息

血细胞形态学检查是血液疾病诊断的重要手段,传统人工镜检存在效率低、易受主观影响等问题。人工智能技术的应用提高了血细胞检查的效率和质量,促进了检测结果的标准化。目前,多种人工智能设备已在临床使用或研究中,但其技术要求和配置各异。中华医学会血液学分会实验诊断学组组织相关专家,制订了本共识。本共识内容包括术语定义、适用范围、技术要求、临床应用、数据管理和信息安全,强调了标本制备、图像采集、图像分割算法、细胞特征提取与识别分类的重要性,并提出了细胞识别谱的基本要求。同时,对病理细胞的细分类、细胞训练与测试的要求、质量控制标准、辅助人工出具诊断报告等方面进行了详细说明。此外,还强调了数据管理和信息安全的重要性,确保患者信息的安全和数据的准确性。

关键词：血细胞形态学检查人工智能临床应用数据管理与信息安全细胞识别谱

褪黑素抑制NLRP3炎症小体激活缓解钴铬钼颗粒引起的骨溶解

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中国组织工程研究 2024年第10期28卷 1484-1489页

作者：张晨辉付婷婷吴阳林张钦刘昂杨惠林林俊苏州大学附属第一医院骨科江苏省苏州市215006 苏州独墅湖医院骨科苏州大学附属独墅湖医院苏州大学医学中心江苏省苏州市215001

背景:假体周围骨溶解是人工关节置换术最常见的远期并发症,研究表明炎症小体可能在其发病过程中发挥重要作用。褪黑素是松果体分泌的节律调节激素,具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤等多种功效,但其对骨溶解和炎症小体的影响还有待探索。目的:... 详细信息

背景:假体周围骨溶解是人工关节置换术最常见的远期并发症,研究表明炎症小体可能在其发病过程中发挥重要作用。褪黑素是松果体分泌的节律调节激素,具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤等多种功效,但其对骨溶解和炎症小体的影响还有待探索。目的:探究褪黑素对磨损颗粒诱导的骨溶解与NLRP3炎症小体激活的作用。方法:①体内实验:取15只C57BL/6小鼠,采用随机数字表法随机分为假手术组、骨溶解组、褪黑素组,每组5只。骨溶解组、褪黑素组通过向颅骨矢状缝内注射钴铬钼颗粒建立骨溶解模型,注射后,褪黑素组腹腔注射50 mg/(kg·d)的褪黑素,连续注射14 d。药物干预结束后取小鼠颅骨,进行Micro-CT分析,观察颅骨矢状缝周围微观结构变化。②体外实验:取小鼠骨髓源性巨噬细胞与THP-1细胞(已诱导分化为巨噬细胞),均分为7组干预,分别为正常组、脂多糖组、脂多糖+钴铬钼组及褪黑素0.5,1,1.5,2 mmol/L组(褪黑素干预各组均加入脂多糖与钴铬钼)。药物干预6 h后,采用Western blot法检测细胞裂解液或细胞培养上清中炎症小体相关蛋白(NLRP3、Caspase-1、白细胞介素1β和焦孔素D、焦孔素D-N末端)的表达,通过乳酸脱氢酶释放与活死荧光染色观察细胞毒性和死亡情况。结果与结论:①体内实验:micro-CT扫描3D重建图像显示,骨溶解组小鼠颅骨矢状缝周围骨量明显减少,骨组织结构被严重破坏;与骨溶解组相比,褪黑素组小鼠颅骨矢状缝周围骨量明显增加,组织结构破坏减少。②体外实验:对于小鼠骨髓源性巨噬细胞,脂多糖显著上调了细胞裂解液中NLRP3蛋白的表达,而褪黑素干预可呈剂量依赖性降低NLRP3蛋白的表达;钴铬钼颗粒显著上调了细胞裂解液中焦孔素D-N末端及细胞培养上清中Caspase-1、白细胞介素1β的蛋白表达,而褪黑素干预可呈剂量依赖性降低这些蛋白的表达。对于THP-1细胞,钴铬钼颗粒显著上调了细胞培养上清中Caspase-1、白细胞介素1β的蛋白表达,而褪黑素干预可呈剂量依赖性降低这些蛋白的表达。乳酸脱氢酶释放与活死荧光染色显示,钴铬钼颗粒显著增加了小鼠骨髓源性巨噬细胞培养上清中乳酸脱氢酶的释放及细胞的死亡,而褪黑素干预可减少乳酸脱氢酶的释放及细胞的死亡。③结果表明:褪黑素可以抑制磨损颗粒诱导的炎症小体激活和焦亡,抑制假体周围骨溶解。

关键词：钴铬钼颗粒骨溶解巨噬细胞炎症小体细胞焦亡褪黑素

脆弱拟杆菌六型分泌系统对肠道屏障的影响及机制

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生物技术通报 2024年第3期40卷 286-295页

作者：雷棋怡徐杨李鹏飞苏州大学附属第一医院血液科苏州215000 苏州大学造血干细胞移植研究所苏州215000

【目的】探讨脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)中六型蛋白分泌系统(T6SS)对肠道屏障的影响及作用机制。【方法】采用自杀载体构建*** T6SS缺陷株。建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的肠炎小鼠模型,并分别补充PBS,*** WT和***ΔT6SS,随后比较... 详细信息

【目的】探讨脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)中六型蛋白分泌系统(T6SS)对肠道屏障的影响及作用机制。【方法】采用自杀载体构建*** T6SS缺陷株。建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的肠炎小鼠模型,并分别补充PBS,*** WT和***ΔT6SS,随后比较三组小鼠疾病特征、肠道屏障完整性的差异。利用荧光定量PCR和免疫组化检测小鼠紧密连接蛋白的表达。采用非靶向代谢组学比较各组小鼠肠道差异代谢物。【结果】T6SS缺失不影响***的生物活性。与PBS对照组相比,*** WT明显改善小鼠的体重丢失、结肠长度等疾病指标,表现出对DSS诱导的肠炎的保护性,而***ΔT6SS随着T6SS的敲除丧失了对DSS诱导的肠炎的保护性。小鼠血清中异硫氰酸荧光素葡聚糖含量和肠道病理切片均表明*** T6SS能改善小鼠肠道屏障的完整性。荧光定量PCR和免疫组化均表明*** T6SS影响肠道紧密连接蛋白的表达。非靶向代谢组学分析表明,与***ΔT6SS组相比,*** WT组显著上调96个肠道差异代谢产物,其中多个代谢产物富集到胆碱能突触代谢和甘油磷脂代谢相关通路。【结论】拟杆菌T6SS改变肠道代谢组并提高肠道细胞紧密连接蛋白的表达,改善肠道屏障的通透性,参与到拟杆菌对肠道屏障的保护性。

关键词：肠道菌群六型分泌系统肠道屏障肠道炎症代谢产物

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质谱流式及相关成像技术在淋巴瘤微环境研究中的应用

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中华检验医学杂志 2024年第3期47卷 341-348页

作者：陈睿泽顾博涵李建勇夏奕南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院血液科南京医科大学血液研究重点实验室江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心南京210029 苏州大学医学院苏州215031

肿瘤微环境(TME)由肿瘤细胞、免疫细胞和基质细胞共同构成, 每个细胞组分之间的相互作用对肿瘤发生发展起着关键影响。TME中免疫细胞和基质细胞通过引起细胞毒性或炎症反应来对抗肿瘤细胞, 但它们也通过一系列免疫调节机制参与肿瘤逃逸... 详细信息

肿瘤微环境(TME)由肿瘤细胞、免疫细胞和基质细胞共同构成, 每个细胞组分之间的相互作用对肿瘤发生发展起着关键影响。TME中免疫细胞和基质细胞通过引起细胞毒性或炎症反应来对抗肿瘤细胞, 但它们也通过一系列免疫调节机制参与肿瘤逃逸。既往抗淋巴瘤的治疗主要靶向恶性细胞本身, 但随着免疫检查点抑制剂、双特异性抗体和嵌合抗原受体T细胞等免疫治疗的临床应用, 消除TME对肿瘤细胞的保护作用也越发得到重视。借助质谱流式分析仪(CyTOF)和成像质谱流式细胞术(IMC)高通量和高维数据的解析能力, 大样本量解析淋巴瘤TME构成已经成为可能。

关键词：淋巴瘤微环境质谱流式

基于骨髓样本的多发性骨髓瘤微小残留病检测中国专家共识(2024年版)

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中华血液学杂志 2024年第6期45卷 534-541页

作者：中华医学会血液学分会实验诊断学组、浆细胞疾病学组中国医师协会多发性骨髓瘤专业委员会吴德沛黄晓军陈苏宁常英军傅琤琤路瑾朱明清姚利不详国家血液系统疾病临床医学研究中心江苏省血液研究所苏州大学附属第一医院苏州215006 国家血液系统疾病临床医学研究中心北京大学人民医院北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室北京100044 苏州大学附属第一医院北京大学人民医院

多发性骨髓瘤(MM)是血液系统第二大常见恶性肿瘤,标准的整体治疗模式及以新药为主的方案极大地改善了MM患者的生存,但微小残留病(MRD)导致大多数患者复发。因此,需要在传统血清学疗效评估的基础上联合MRD检测,以更精准地评估患者的疾病... 详细信息

多发性骨髓瘤(MM)是血液系统第二大常见恶性肿瘤,标准的整体治疗模式及以新药为主的方案极大地改善了MM患者的生存,但微小残留病(MRD)导致大多数患者复发。因此,需要在传统血清学疗效评估的基础上联合MRD检测,以更精准地评估患者的疾病状态。目前,二代流式细胞术(NGF)和二代测序(NGS)是基于骨髓样本检测MRD的主流技术。为使MRD检测标准化和规范化,专家组讨论制订了在MM患者中应用NGF和NGS技术进行骨髓MRD检测的中国专家共识。

关键词：多发性骨髓瘤微小残留病二代流式细胞术二代测序