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二甲双胍通过调节成脂影响脂肪细胞对白血病细胞作用

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中国实验血液学杂志 2015年第2期23卷 340-344页

作者：王慧刘四红翟元梅朱晓宇章菁万云路伟石军上海交通大学附属第六人民医院血液科上海200233 苏州大学医学部江苏苏州215123

目的:探讨二甲双胍对3T3-L1前脂肪细胞的诱导分化作用,并研究处理后脂肪细胞对白血病细胞的影响。方法:在3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成熟过程中分别给予不同浓度二甲双胍处理,诱导后通过油红O染色和吸光度值(OD值)检测其分化程度;应用rea... 详细信息

目的:探讨二甲双胍对3T3-L1前脂肪细胞的诱导分化作用,并研究处理后脂肪细胞对白血病细胞的影响。方法:在3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成熟过程中分别给予不同浓度二甲双胍处理,诱导后通过油红O染色和吸光度值(OD值)检测其分化程度;应用real-time PCR检测成脂后关键基因PPARγ、C/EBPα、FABP4(ap2)mRNA的表达水平。诱导后的脂肪细胞分别与GFP+-THP-1细胞共培养,加入1μg/ml的阿糖胞苷,48 h后采用流式细胞仪检测GFP+-THP-1细胞的凋亡。收集诱导后脂肪细胞的上清,与肿瘤细胞基础培养液(RPMI1640)以1∶1混合后培养肿瘤细胞,应用CCK8检测脂肪细胞对白血病细胞增殖,加入1μg/ml的阿糖胞苷,48 h后应用细胞计数仪检测其化疗保护作用。结果:二甲双胍处理组OD值及成脂基因C/EBPα、FABP4表达较对照组低,而PPARγmRNA表达无明显改变;二甲双胍处理后的脂肪细胞共培养组白血病细胞凋亡率高于对照组。脂肪细胞促进白血病细胞增殖并对其有化疗保护作用,这些作用被二甲双胍降低。结论:二甲双胍能抑制3T3-L1前脂肪细胞的成脂分化,并调节脂肪细胞对白血病细胞凋亡、增殖及化疗的保护作用。

关键词：二甲双胍 3T3-L1前脂肪细胞脂肪细胞白血病细胞细胞增殖细胞凋亡化疗保护

Real-Time PCR监测巨细胞病毒在肾移植中的应用

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现代医药卫生 2003年第1期19卷 16-17页

作者：罗光华叶青许贤林郑璐牟琴峰常州苏州大学附属第三医院 213003

目的 :推荐一种快速、敏感、特异的可以早期诊断肾移植受者并发巨细胞病毒 (Cytomegalovirus,CMV)感染的检测技术。方法 :使用实时在线荧光定量PCR(Real-TimePCR)对39名肾移植受者的标本进行CMV— -DNA检测。结果 :39名肾移植受者有17... 详细信息

目的 :推荐一种快速、敏感、特异的可以早期诊断肾移植受者并发巨细胞病毒 (Cytomegalovirus,CMV)感染的检测技术。方法 :使用实时在线荧光定量PCR(Real-TimePCR)对39名肾移植受者的标本进行CMV— -DNA检测。结果 :39名肾移植受者有17名检出CMV -DNA ,阳性检出率为43 6 % ;116份血浆标本中检出5例阳性 ,中位数 (Md)为5 18×102 拷贝/ml,116份尿液标本中检出13例阳性 ,Md为6 93×102 拷贝/ml,P<0 05 ,未检出同一患者血浆和尿液标本同时阳性的病例。结论 :CMV是肾移植受者中常见的感染 ;尿液与血浆中CMV -DNA检出率的差异具有统计学意义 ;Real-TimePCR是监测肾移植受者CMV感染进程和监测抗病毒药物疗效的有效工具。

关键词：肾移植巨细胞病毒定量PCR

尘螨变应性哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞和调节性T淋巴细胞的表达及其临床意义

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中华实用儿科临床杂志 2013年第21期28卷 1619-1621页

作者：施筠王凤鸣骆亚丽甘露南京医科大学附属苏州医院儿科江苏苏州215002 常州市疾病预防控制中心检测中心苏州大学附属儿童医院呼吸科

目的分析尘螨阳性的哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞（Th）和调节性T淋巴细胞（Treg）的表达及其临床意义。方法选取尘螨阳性的哮喘患儿（尘螨阳性哮喘组）和健康儿童（健康对照组）各30例。采集2组儿童外周血，密度梯度离心法分离获得... 详细信息

目的分析尘螨阳性的哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞（Th）和调节性T淋巴细胞（Treg）的表达及其临床意义。方法选取尘螨阳性的哮喘患儿（尘螨阳性哮喘组）和健康儿童（健康对照组）各30例。采集2组儿童外周血，密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞（PBMC），胞内染色技术和流式细胞术检测尘螨刺激前后CD4-T淋巴细胞内干扰素-γ（IFN-γ）、IL4和叉状头螺旋转录因子（Foxp3）的表达，尘螨刺激后，PBMC中分别加入阻断型抗人可诱导共刺激分子（ICOS）、抗人CD28或抗人细胞毒T淋巴细胞相关抗原（CTLA-4）单克隆抗体共培养3d后，检测Thl（CD4＋IFN-γ＋T淋巴细胞）、Th2（CD4＋IL4＋T淋巴细胞）和Treg（CD4＋CD25＋Foxp3＋T淋巴细胞）的表达，比较各组之间的差异。结果与健康对照组相比，尘螨阳性哮喘组尘螨刺激前外周血Thl细胞显著增加（P〈0．05），Treg细胞显著减少（P〈0．05），Th2细胞差异无统计学意义（P〉0．05）；与刺激前相比，尘螨刺激后Th1和Treg细胞变化均无统计学意义（P均〉0．05），Th2细胞显著增加（P〈0．01）；加入抗ICOS和抗CD25单克隆抗体后，Thl细胞和Treg细胞变化无统计学意义，Th2细胞显著减少（P均〈0．0001）；加入抗cTLA4单克隆抗体后，Th1、Th2和Treg细胞变化差异均无统计学意义（P均〉0．05）。结论尘螨变应性哮喘患儿外周血中存在组成性的不依赖抗原刺激的Th1异常表达和Treg的表达减少，同时存在抗原诱导性，依赖ICOS和CD25信号的Th2异常活化。

关键词：尘螨变应性哮喘辅助性T淋巴细胞调节性T淋巴细胞

胸壁和区域淋巴引流区整体调强放疗在乳腺癌改良根治术后的应用研究

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现代肿瘤医学 2022年第21期30卷 3959-3963页

作者：吴刚朱佳浩魏贤顶冀胜军顾科杨波赵于天江南大学附属医院肿瘤放疗科江苏无锡214000 南京医科大学附属苏州医院放疗科江苏苏州215000

目的:评价胸壁和区域淋巴引流区整体调强放疗与分段三维适形放疗两种方法在乳腺癌改良根治术后患者中的疗效差异。方法:回顾性分析两种放疗模式在311例乳腺癌改良根治术患者中的疗效差异,采用Kaplan-Meier法计算无疾病生存(disease free... 详细信息

目的:评价胸壁和区域淋巴引流区整体调强放疗与分段三维适形放疗两种方法在乳腺癌改良根治术后患者中的疗效差异。方法:回顾性分析两种放疗模式在311例乳腺癌改良根治术患者中的疗效差异,采用Kaplan-Meier法计算无疾病生存(disease free survival,DFS)率及总体生存率(overall survival,OS),Cox回归分析影响预后的单因素及多因素。基于CTCAE 4.0(Common Toxicity Criteria for Adverse Events)准则评估两种放疗技术的晚期副反应差异。结果:纳入的311例患者中,有195例接受了整体调强放疗,116例接受传统三维适形放疗。整体调强放疗组和分段三维适形放疗组5年DFS分别为88.7%和78.8%(P=0.013),5年OS分别为93.8%和89.4%(P=0.280)。单因素分析显示,T、N分期、分化程度、内乳淋巴结照射及放疗方式是影响乳腺癌改良根治术后患者DFS的预后因素,T分期、分化程度是OS的预后因素。多因素分析显示,分化程度、内乳淋巴结照射及放疗方式是影响患者DFS的独立预后因素,分化程度、内乳淋巴结照射是影响患者OS的独立预后因素。两种放疗方式常见的晚期副反应无明显差异。结论:胸壁和区域淋巴引流区整体化调强放疗可降低乳腺癌改良根治术后患者的复发率,且毒副反应可耐受。

关键词：调强放疗乳腺癌晚期副反应

抗人基质金属蛋白酶-2的单抗制备及功能研究

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中国病理生理杂志 2005年第5期21卷 876-881页

作者：胡晓慧沈飞董宁征李佩霞阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所江苏苏州215006

目的在体外原核表达MMP-2纤维连接蛋白样片段(MFD),制备抗MMP-2特异性的单克隆抗体(McAb),以期得到能够有效抑制MMP-2活性的单抗。方法运用原核表达的MFD蛋白纯化浓缩后免疫BALB/C小鼠,尾静脉加强后取脾细胞融合,ELISA法筛选阳性克隆,... 详细信息

目的在体外原核表达MMP-2纤维连接蛋白样片段(MFD),制备抗MMP-2特异性的单克隆抗体(McAb),以期得到能够有效抑制MMP-2活性的单抗。方法运用原核表达的MFD蛋白纯化浓缩后免疫BALB/C小鼠,尾静脉加强后取脾细胞融合,ELISA法筛选阳性克隆,制备腹水。运用Westernblotting对抗体进行鉴定,并观察抗体与天然MMP-2的反应情况,进行亚型鉴定,组织特异性鉴定同时进行功能实验增殖实验、侵袭实验以及体外血管新生实验。结果小鼠脾细胞与杂交瘤细胞融合后筛选获得一株持续分泌单克隆抗体的细胞株,命名为SZ-117。ELISA法测定上清和腹水效价分别为2×10-3和2×10-5。抗体为IgG1亚型,可以与天然的MMP-2相结合,与血细胞表面没有交叉反应。免疫组化提示胃、胆囊、脾脏、卵巢、前列腺、输卵管以及淋巴结的间质中都有阳性表达,而在甲状腺、小肠、肝脏等组织器官未见阳性表达。该抗体可以有效地抑制血管内皮细胞株Eahy926细胞以及胰腺癌细胞株1990细胞的侵袭行为,同时还可以抑制Eahy926细胞在体外的血管生成。结论抗MMP-2特异性抗体的获得为MMP-2测定提供了一个有效工具,并且该抗体还可以有效地抑制内皮细胞在体外的血管生成和肿瘤细胞的侵袭行为,有望成为一种新的抗肿瘤物质。

关键词：基质金属蛋白酶抗体,单克隆

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腹腔镜保留肾单位术对术后肾功能的影响

江苏医药 2011年第11期37卷 1305-1307页

作者：孙伟单玉喜孙传洋苏州大学附属第二医院泌尿外科 215004

目的探讨腹腔镜保留肾单位术(LPN)对术后肾功能的影响。方法 37例肾癌患者分为两组:LPN组16例;开放性保留肾单位术(OPN)组21例,实施开放性保留肾单位术。检测术前、术后1个月和6个月的肌酐清除率。麻醉时间、动脉阻断时间、术中血压及... 详细信息

目的探讨腹腔镜保留肾单位术(LPN)对术后肾功能的影响。方法 37例肾癌患者分为两组:LPN组16例;开放性保留肾单位术(OPN)组21例,实施开放性保留肾单位术。检测术前、术后1个月和6个月的肌酐清除率。麻醉时间、动脉阻断时间、术中血压及术中红细胞压积的变化,分别作为评估术后肾功能变化的影响因素,分析影响两组术后肾功能的预测因素。结果两组患者的年龄、性别、基础疾病、术前肾功能及肿瘤大小等因素未见明显差异。术后红细胞压积的下降与术后1个月及6个月肾功能的下降有关联。OPN组的麻醉时间较LPN组略短;LPN组术中出血量明显较OPN组少。结论 LPN可以成为治疗小肾癌的首选手术方式。

关键词：肾癌腹腔镜下保留肾单位手术

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胃癌组织中MACC1基因的表达及意义

临床检验杂志 2013年第2期31卷 102-104页

作者：陈忠谢峰钟丰云杜鸿毛飞苏州永鼎医院检验科江苏吴江215200 苏州永鼎医院普通外科江苏吴江215200 苏州大学附属第二医院普通外科江苏苏州215004 苏州大学附属第二医院检验科江苏苏州215004 江苏大学基础医学与医学技术学院江苏镇江212013

目的探讨胃癌组织中结肠癌转移相关基因(MACC1)的表达,评价其在胃癌进展、侵袭和转移中的作用。方法用RT-PCR检测60例胃癌患者癌组织和癌旁组织中MACC1 mRNA的表达情况,分析其与临床病理参数的相关性。结果 MACC1mRNA在胃癌组织中阳性率... 详细信息

目的探讨胃癌组织中结肠癌转移相关基因(MACC1)的表达,评价其在胃癌进展、侵袭和转移中的作用。方法用RT-PCR检测60例胃癌患者癌组织和癌旁组织中MACC1 mRNA的表达情况,分析其与临床病理参数的相关性。结果 MACC1mRNA在胃癌组织中阳性率为70.0%(42/60),显著高于癌旁组织[13.3%(8/60),χ2=37.34,P肿瘤大小无关。结论 MACC1 mRNA高表达与胃癌进展、侵袭及转移相关,可作为胃癌诊断和预后评估的分子标志物。

关键词：胃癌结肠癌转移相关基因逆转录-聚合酶链反应

3T3-L1细胞与人骨髓间充质干细胞体外成脂及脂肪细胞功能的比较研究

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中国实验血液学杂志 2015年第6期23卷 1729-1733页

作者：刘四红王慧翟元梅朱晓宇章菁万云路伟石军苏州大学医学部江苏苏州215123 上海交通大学附属第六人民医院血液科上海200233

目的:探讨3T3-L1细胞与人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外成脂及脂肪细胞功能的差异。方法:用密度梯度离心和贴壁培养的方法分离纯化人骨髓MSC,在倒置显微镜下观察细胞形态,体外向脂肪方向诱导分化,并通过油红O染色... 详细信息

目的:探讨3T3-L1细胞与人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外成脂及脂肪细胞功能的差异。方法:用密度梯度离心和贴壁培养的方法分离纯化人骨髓MSC,在倒置显微镜下观察细胞形态,体外向脂肪方向诱导分化,并通过油红O染色和吸光度值(OD值)检测其分化程度;qRT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂肪酸结合蛋白(FABP4)、CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPα)mRNA表达水平;通过诱导的脂肪细胞与THP-1细胞共培养,加入1μg/ml的阿糖胞苷,在48 h测定其对肿瘤细胞的化疗抵抗作用。结果:通过油红O染色和测定吸光度值发现,3T3-L1细胞组脂质聚集量多于MSC组,且OD值大于MSC组(P<0.05);qRTPCR结果显示,3T3-L1来源的脂肪细胞的成脂基因PPARγ、FABP4和C/EBPαmRNA的相对表达量高于人骨髓MSC的脂肪细胞(P<0.05);共培养实验结果表明,含脂肪细胞组THP-1细胞存活数较对照组多(P<0.05),且3T3-L1细胞组与MSC组之间具有统计学差异(P<0.05)。结论:3T3-L1细胞的体外成脂能力比人骨髓MSC强;脂肪细胞具有促使THP-1细胞耐受化疗的作用,且在3T3-L1细胞组的作用大于人骨髓MSC组。

关键词： 3T3-L1细胞人骨髓间充质干细胞成脂分化

肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶耐药基因的临床研究

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国际呼吸杂志 2014年第22期34卷 1686-1689页

作者：周倜王翎周军苏州大学附属第一医院常州213003

目的探讨肺炎克雷伯菌感染的药敏及β-内酰胺酶耐药基因的分布情况。方法对近2年分离的268株肺炎克雷伯菌培养阳性标本结果进行回顾性分析，并随机选择其中20株肺炎克雷伯菌进行p内酰胺酶基因（TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX-M-... 详细信息

目的探讨肺炎克雷伯菌感染的药敏及β-内酰胺酶耐药基因的分布情况。方法对近2年分离的268株肺炎克雷伯菌培养阳性标本结果进行回顾性分析，并随机选择其中20株肺炎克雷伯菌进行p内酰胺酶基因（TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX-M-9群、OXA-1群、OXA-2群、0xA-10群、PER、GES、VEB、CARB、DHA、ACT-1）检测并分析。结果产超广谱β-内酰胺酶菌对多种抗生素的耐药性较非产酶株显著升高，对β-内酰胺类、喹诺酮类和青霉素类抗生素几乎全部耐药，但对亚胺培南的敏感性为100．0％；且肺炎克雷伯菌β-内酰胺类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶密切相关。结论近年来该菌感染率高，且产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌对多种抗生素的耐药性呈上升趋势，应高度重视，及时加强对该菌的药敏及耐药谱检测，具有十分重要的临床意义。

关键词：肺炎克雷伯菌超广谱伊内酰胺酶耐药性抗生素