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辣椒素对斯氏按蚊肠道菌群和抗菌肽表达的影响

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中国热带医学 2025年第1期25卷 15-21页

作者：郑丹刘治隆王静刘婷婷于莎莎赵才志郑斐斐李昕吴家红王英贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室陆军军医大学军事预防医学系热带医学教研室贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室

目的探讨辣椒素对斯氏按蚊肠道菌群和抗菌肽表达的影响，为辣椒素在蚊媒传染病防控中的应用提供实验参考。方法实验组和对照组斯氏按蚊分别连续饲喂含辣椒素和等量二甲基亚砜（辣椒素溶剂）糖水72 h，提取雌蚊中肠及肠道细菌DNA，采... 详细信息

目的探讨辣椒素对斯氏按蚊肠道菌群和抗菌肽表达的影响，为辣椒素在蚊媒传染病防控中的应用提供实验参考。方法实验组和对照组斯氏按蚊分别连续饲喂含辣椒素和等量二甲基亚砜（辣椒素溶剂）糖水72 h，提取雌蚊中肠及肠道细菌DNA，采用细菌16S rDNA高通量测序和实时荧光定量PCR方法，分析比较对照组和实验组雌蚊中肠细菌的菌群多样性、组成结构和相对丰度以及肠道细菌总负荷。提取2组按蚊的中肠总RNA，利用实时荧光定量逆转录PCR(quantitative reverse transcription PCR, RT-qPCR)检测和比较重要抗菌肽的表达水平。结果 2组共检测到10门、11纲、28目、43科、62属细菌；实验组的分类单元数少于对照组，细菌多样性明显降低，2组间的菌群组成结构和相对丰度不同。在门分类水平上，两组的优势菌均为拟杆菌门、变形菌门和厚壁菌门。在目分类水平上，黄杆菌目、醋酸菌目、假单胞菌目和乳酸杆菌目为优势菌，实验组中假单胞菌目和醋酸菌目的相对丰度减少，而黄杆菌目和乳酸杆菌目的相对丰度增加。在属分类水平上，伊丽莎白菌属的相对丰度在2组样本中都占据优势，实验组中伊丽莎白菌属、明串珠菌属和葡糖杆菌属的相对丰度更高，而亚细亚菌属和不动杆菌属的相对丰度则显著低于对照组。除上述变化外，在实验组中，肠道细菌总负荷升高，而按蚊攻击素、天蚕素和防御素等抗菌肽的转录水平显著降低。结论辣椒素处理显著影响斯氏按蚊肠道菌群结构组成和增加肠道细菌总负荷并抑制抗菌肽表达；分析提示，辣椒素可能通过改变能量代谢和天然免疫相关菌群影响按蚊的繁殖能力和传病能力。

关键词：辣椒素斯氏按蚊肠道菌群 16S rDNA 抗菌肽

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白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1促进Raw264.7细胞免疫应答及DENV-2的复制

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中国热带医学 2025年

作者：旷晓元肖秋秋吴文诗牟小会吴家红贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室贵州省安顺市人民医院生殖医学科

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1对巨噬细胞（Raw264.7）的免疫调控作用及对Raw264.7细胞中2型登革病毒（Denguevirustype2，DENV-2）复制的影响。方法将原核表达质粒pET32a(+)-rAlb-34kDa-1转入到大肠埃希菌（***）BL21（DE3）... 详细信息

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1对巨噬细胞（Raw264.7）的免疫调控作用及对Raw264.7细胞中2型登革病毒（Denguevirustype2，DENV-2）复制的影响。方法将原核表达质粒pET32a(+)-rAlb-34kDa-1转入到大肠埃希菌（***）BL21（DE3）后，按实验室前期建立的表达纯化条件获取唾液蛋白并通过SDS-PAGE及WesternBlot（WB）方法鉴定；以CCK8法分析rAlb-34kDa-1蛋白对Raw264.7细胞的毒性。将0.02 、0.20和2.0μg/mL浓度rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞6、12和24 h，采用实时荧光定量逆转录PCR（Real-timequantitativereversetranscriptionPCR，qRT-PCR）检测细胞中白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子-α(Tumornecrosisfactor-α，TNF-α)、趋化因子配体2（Chemokineligand2，CCL2）、干扰素-β（Interferon-β，IFN-β）、干扰素刺激基因15（InterferonStimulatedGene15，ISG15）的表达，运用酶联免疫吸附实验（Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）检测细胞培养上清IL-6和TNF-α的分泌；免疫荧光法观察rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞后p65进入细胞核的情况，分析rAlb-34kDa-1蛋白是否通过NF-κB信号通路实现对Raw264.7细胞的免疫调控；按分组（DENV-2作用组、唾液蛋白+DENV-2共孵育组）加不同的处理因素作用6、12和24 h后收集细胞，利用qRT-PCR检测细胞内DENV-2的mRNA表达量及运用流式细胞术（FCM）检测不同处理因素作用24h细胞内J2（dsRNA）的荧光强度。结果 SDS-PAGE及WB结果显示成功获得rAlb-34kDa-1蛋白且经CCK8法分析该蛋白对Raw264.7细胞无毒性；0.2μg/mL和2.0μg/mL的rAlb-34kDa-1均能诱导Raw264.7细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL2、IFN-β、ISG15的表达；rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞1 h后显著增强Raw264.7细胞核内的p65的荧光强度；rAlb-34kDa-1与DENV-2作用于Raw264.7细胞12 h时，2 μg/mL的rAlb-34kDa-1显著增强细胞中DENV-2的mRNA表达量。作用24 h时，0.02μg/mL、0.2μg/mL、2μg/mL的rAlb-34kDa-1均能增强Raw264.7细胞中DENV-2的mRNA表达量，2μg/mL的rAlb-34kDa-1与DENV-2共孵育于Raw264.7细胞24h后细胞内J2的荧光信号显著增强；结论 rAlb-34kDa-1蛋白能调节小鼠Raw264.7细胞免疫应答，促进DENV-2在Raw264.7细胞中复制。

关键词：白纹伊蚊 rAlb-34kDa-1蛋白 2型登革病毒免疫调控

金刚烷胺抗人呼吸道合胞病毒感染的体内外研究

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中国抗生素杂志 2025年

作者：陈芳张勇沈胡艳张平平林思宇侯长周张淋牟荣罗语思张科贵州医科大学基础医学院贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室/病毒研究所/现代病原生物学特色重点实验室/人体寄生虫学教研室贵州中医药大学药学院贵州医科大学附属医院急诊ICU 贵州医科大学附属医院六盘水医院急诊科

目的研究离子通道阻断剂金刚烷胺在体内外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)感染的活性。方法以MTT方法测定金刚烷胺对HEp-2细胞的半数毒性浓度，分别将30、60、90和120μmol/L金刚烷胺加入已感染RSV的HE... 详细信息

目的研究离子通道阻断剂金刚烷胺在体内外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)感染的活性。方法以MTT方法测定金刚烷胺对HEp-2细胞的半数毒性浓度，分别将30、60、90和120μmol/L金刚烷胺加入已感染RSV的HEp-2细胞上清，通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验和免疫荧光实验评估金刚烷胺的体外抗病毒活性。将Balb/c小鼠分为Mock组、GZ08-18攻毒组、GZ08-18攻毒加10 mg/kg金刚烷胺治疗组、GZ08-18攻毒加20 mg/kg金刚烷胺治疗组和GZ08-18攻毒加50 mg/kg利巴韦林治疗组。通过小鼠体重变化、存活情况、肺指数、肺泡灌洗液病毒滴度、肺切片免疫荧光、肺组织病理损伤和炎症因子变化等评估金刚烷胺的体内抗病毒活性。结果体外实验qRT-PCR和免疫荧光结果显示不同浓度金刚烷胺处理后，病毒滴度与病毒融合蛋白表达均显著下降，且具量效依赖性。体内实验结果示，与GZ08-18攻毒组相比，金刚烷胺治疗后小鼠体重下降减缓，存活率显著提高，肺指数和病毒滴度在20 mg/kg金刚烷胺治疗组显著降低，肺组织切片病毒融合蛋白免疫荧光强度明显降低，相关炎症因子表达水平显著下调。肺组织病理切片的H&E染色结果示金刚烷胺明显抑制小鼠肺组织损伤。结论金刚烷胺在体内外均可显著抑制RSV感染。

关键词：人呼吸道合胞病毒金刚烷胺抗病毒离子通道

日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿与Th1/Th2细胞因子水平的动态变化

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复旦学报（医学版） 2001年第1期28卷 39-41,46页

作者：夏超明龚唯骆伟周卫芳李允鹤查锡良熊思东苏州大学基础医学部寄生虫学教研室苏州215007 复旦大学基础医学院上海200032

目的　观察小鼠感染日本血吸虫后急、慢性期肝肉芽肿病变与Th1/Th2细胞因子的动态变化 ,探讨Th1/Th2在肉芽肿形成及调节中的作用。方法　采用石蜡切片 ,HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变 ,用ELISA双抗夹心法测定小鼠感染后 0、4、6、8和... 详细信息

目的　观察小鼠感染日本血吸虫后急、慢性期肝肉芽肿病变与Th1/Th2细胞因子的动态变化 ,探讨Th1/Th2在肉芽肿形成及调节中的作用。方法　采用石蜡切片 ,HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变 ,用ELISA双抗夹心法测定小鼠感染后 0、4、6、8和 12周血清及脾淋巴细胞IL 2、IFNγ 和IL 4水平的动态变化。结果　小鼠感染后 6周出现明显肝肉芽肿病变 ,8周肉芽肿反应达高峰 ;12周则明显缩小 ;感染小鼠血清及脾淋巴细胞的Th1细胞因子IL 2和IFNγ 在感染后 4～ 6周开始上升 ,8周达高峰 ,随后下降 ;而Th2细胞因子IL 4在感染后 8周时迅速上升且随感染时间延长而明显升高。结论　Th1细胞因子IL 2和IFNγ 与血吸虫卵肉芽肿的诱导和形成密切相关 ,而Th2细胞因子IL 4可抑制Th1细胞因子在血吸虫病慢性期虫卵肉芽肿自发性免疫调节中起重要作用。

关键词：日本血吸虫肝肉芽肿病变 Th1/Th2细胞因子小鼠

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基于负集加权迭代修正最小二乘拟合原理的快速自适应拉曼光谱基线校正算法

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光谱学与光谱分析 2025年第2期45卷 344-350页

作者：徐嘉阳蒙思宇张志伟陈弘毅马玉婷王策齐向东胡慧杰宋一之浙江大学医学院基础医学系浙江杭州310011 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所医学检验研究室江苏苏州215163

拉曼光谱是无损光谱分析技术,通过分析散射光的频率变化获取物质的分子结构信息。基线校正是提升光谱数据质量的关键步骤,可以去除背景信号和不相关噪声,凸显并纯化目标信号。传统的拉曼光谱技术对基线校正的时效性要求不高,但随着流式... 详细信息

拉曼光谱是无损光谱分析技术,通过分析散射光的频率变化获取物质的分子结构信息。基线校正是提升光谱数据质量的关键步骤,可以去除背景信号和不相关噪声,凸显并纯化目标信号。传统的拉曼光谱技术对基线校正的时效性要求不高,但随着流式拉曼和内窥拉曼等需要实时处理光谱数据的应用场景增多,基线校正在速度和准确性要求也随之提高。传统的迭代多项式拟合和小波变换方法在时间、精度或自适应能力上存在不足。本研究开发了一种基于负集加权迭代修正最小二乘原理的快速自适应基线校正算法(MWIALS)。主要原理是提取负数集并赋予更高权重,在迭代过程中不断修正基线,并通过设置参数阈值以跳出循环,实现快速准确的基线校正。提出两种参数选择策略:固定参数(FMWIALS)适用于批量同类型光谱的快速处理,自适应(AMWIALS)适用于差异化光谱的自适应处理。该算法应用于颗粒物的流式拉曼光谱分析。结果表明,与其他主流算法相比,MWIALS在实际光谱处理上显著高效(平均处理时长47 ms·谱^(-1)),具有较高的准确性和自适应性。该算法能够满足流式拉曼和内窥拉曼等生物样本检测中实时光谱处理的需求,为拉曼光谱技术的进一步应用提供了强有力的支持。

关键词：拉曼光谱基线校正流式拉曼快速自适应负集加权迭代修正最小二乘算法(MWIALS)

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铜转运蛋白1介导的铜死亡途径及其在肿瘤治疗中的潜在价值

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海军军医大学学报 2025年

作者：王议贤欧崇阳郝璐焦旸曹建平海军军医大学(第二军医大学)影像医学系核医学教研室苏州大学放射医学与防护学院放射医学与辐射防护国家重点实验室

作为一种独特的细胞死亡方式，铜死亡的发生取决于细胞内铜离子的累积。铜离子是生物体内正常生理状态下的必需微量元素，但细胞内过量的游离铜不仅对正常细胞产生毒害作用，还会对肿瘤细胞发挥其特异性杀伤功能。铜转运蛋白1（copper t... 详细信息

作为一种独特的细胞死亡方式，铜死亡的发生取决于细胞内铜离子的累积。铜离子是生物体内正常生理状态下的必需微量元素，但细胞内过量的游离铜不仅对正常细胞产生毒害作用，还会对肿瘤细胞发挥其特异性杀伤功能。铜转运蛋白1（copper transporter 1，CTR1）是细胞跨膜摄取铜离子的关键转运体，作为一种铜死亡调节因子，其在肿瘤中的突变及表达变化对铜离子在胞内外的分布有影响，并可能通过调控铜死亡途径参与肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移等多个生物学过程。本文对CTR1介导的铜死亡途径及其在肿瘤治疗中的潜在价值进行综述，阐述铜离子稳态调控机制对于生物体完成正常生命活动的重要性以及CTR1调控的铜死亡机制，探讨以CTR1为干预靶点进行肿瘤治疗的潜在价值，为临床肿瘤患者的救治提供理论研究基础。

关键词：铜离子铜死亡 CTR1 肿瘤治疗

华支睾吸虫3-磷酸甘油醛脱氢酶与肝纤维化的关系

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热带医学杂志 2025年第1期 6-11+2页

作者：胡月黄艳李文芳合肥市第二人民医院院感处中山大学中山医学院寄生虫学教研室中山大学附属第五医院检验科

目的探讨华支睾吸虫3-磷酸甘油醛脱氢酶（***）与肝纤维化之间的关系，为华支睾吸虫病的防治提供理论依据和实验基础。方法采用腹腔注射法建立***诱导大鼠肝纤维化模型，以注射磷酸盐缓冲液（PBS）作为阴性对照组，以注射猪血清作为... 详细信息

目的探讨华支睾吸虫3-磷酸甘油醛脱氢酶（***）与肝纤维化之间的关系，为华支睾吸虫病的防治提供理论依据和实验基础。方法采用腹腔注射法建立***诱导大鼠肝纤维化模型，以注射磷酸盐缓冲液（PBS）作为阴性对照组，以注射猪血清作为阳性肝纤维化模型对照组，通过HE染色、Masson染色和免疫组织化学法观察大鼠肝脏炎症及坏死反应的严重程度；利用免疫组织化学实验观察肝脏组织石蜡切片的Ⅲ型胶原表达情况；通过免疫细胞化学实验观察***与人肝星状细胞LX-2的结合情况，以及这种结合是否依赖其纤溶酶原结合特性；通过CCK-8细胞增殖和流式细胞法评估不同浓度***(0、2、5、10、20、40μg/mL)对人肝星状细胞LX-2分别在24、48、72 h的影响；通过RT-PCR方法和ELISA检测***刺激RAW264.7细胞分泌细胞因子白细胞介素-33(IL-33)的转录和表达水平变化。结果通过对实验组大鼠肝脏HE染色和Masson染色发现，与对照组相比，注射***大鼠肝脏组织中出现了纤维胶原的沉积与炎症细胞的浸润；免疫组织化学染色显示，***组肝组织可见Ⅲ型胶原成条索状小片状分布在肝窦间隙中；***与LX-2细胞结合并不依赖于其纤溶酶原结合特性；低浓度（2μg/mL）的***可以在短期内诱导LX-2细胞的增殖（F=11.69, P学意义（t=5.69, P<0.05）。结论 ***通过诱导RAW264.7细胞分泌IL-33，进一步介导肝星状细胞的增殖和凋亡，参与华支睾吸虫长期慢性感染引起的肝纤维化发生与发展，为深入了解肝纤维化机制及华支睾吸虫病的防治提供了潜在的研究方向。

关键词：华支睾吸虫 3-磷酸甘油醛脱氢酶肝纤维化白细胞介素-33

华支睾吸虫一氧化氮合酶相互作用蛋白的组织定位及免疫学功能的初步研究

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热带医学杂志 2025年第1期 19-23+145页

作者：边萌余新炳许青霞郑州大学附属肿瘤医院(河南省肿瘤医院)检验科中山大学中山医学院寄生虫学教研室中山大学热带病防治研究教育部重点实验室

目的诱导表达华支睾吸虫一氧化氮合酶相互作用蛋白（CsNOSIP）的重组质粒并进行组织定位研究，初步了解重组产物免疫小鼠后细胞因子的变化及诱发宿主免疫应答类型。方法应用生物信息学分析软件，分析Cs NOSIP的序列特征；将重组质粒pE... 详细信息

目的诱导表达华支睾吸虫一氧化氮合酶相互作用蛋白（CsNOSIP）的重组质粒并进行组织定位研究，初步了解重组产物免疫小鼠后细胞因子的变化及诱发宿主免疫应答类型。方法应用生物信息学分析软件，分析Cs NOSIP的序列特征；将重组质粒pET-30a（+）-Cs NOSIP诱导表达并用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化，用纯化的Cs NOSIP蛋白免疫BABL/c小鼠获得免疫血清；应用免疫荧光方法观察Cs NOSIP在华支睾吸虫成虫的定位；应用ELISA检测实验组（重组蛋白皮下免疫小鼠）和对照组（磷酸盐缓冲液免疫小鼠）细胞因子水平的变化。应用qPCR检测内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和诱导性一氧化氮合酶（iNOS）转录水平的变化。结果 CsNOSIP编码288个氨基酸，SecP分值为0.955 097，无信号肽；理论分子量为35 000；免疫组化结果显示，该蛋白定位于虫体的肠支和虫卵。与对照组相比，r Cs NOSIP免疫组用5μg/mL ConA刺激后白细胞介素4、白细胞介素6水平均升高，差异均有统计学意义（t=12.16、8.91,P均学意义（P均学活性。

关键词：华支睾吸虫一氧化氮合酶相互作用蛋白组织定位免疫反应

白纹伊蚊唾液蛋白促进巨噬细胞免疫应答及2型登革病毒的复制

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中国热带医学 2025年第2期25卷 149-155页

作者：旷晓元肖秋秋吴文诗牟小会吴家红贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室安顺市人民医院生殖医学科

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1对巨噬细胞（Raw264.7）的免疫调控作用及对Raw264.7细胞中2型登革病毒（Dengue virus type 2,DENV-2）复制的影响。方法将原核表达质粒pET32a(+)-rAlb-34kDa-1转入大肠埃希菌（***）BL21(DE3)... 详细信息

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1对巨噬细胞（Raw264.7）的免疫调控作用及对Raw264.7细胞中2型登革病毒（Dengue virus type 2,DENV-2）复制的影响。方法将原核表达质粒pET32a(+)-rAlb-34kDa-1转入大肠埃希菌（***）BL21(DE3)后，按实验室前期建立的表达纯化条件获取唾液蛋白并通过SDS-PAGE及Western Blot(WB)方法鉴定；以CCK8法分析rAlb-34kDa-1蛋白对Raw264.7细胞的毒性。将0.02、0.20和2.0μg/mL浓度rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞6、12和24 h，采用实时荧光定量逆转录PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR, qRTPCR)检测细胞中白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、趋化因子配体2(chemokine ligand 2, CCL2)、干扰素-β(interferon-β, IFN-β)、干扰素刺激基因15(interferon stimulated gene 15, ISG15)的表达，运用酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）检测细胞培养上清IL-6和TNF-α的分泌；免疫荧光法观察rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞后p65进入细胞核的情况，分析rAlb-34kDa-1蛋白是否通过NF-κB信号通路实现对Raw264.7细胞的免疫调控；按分组（DENV-2作用组、唾液蛋白+DENV-2共孵育组）加不同的处理因素作用6、12和24 h后收集细胞，利用qRT-PCR检测细胞内DENV-2的mRNA表达量及运用流式细胞术（FCM）检测不同处理因素作用24 h细胞内J2(dsRNA)的荧光强度。结果 SDS-PAGE及WB结果显示成功获得rAlb-34kDa-1蛋白且经CCK8法分析该蛋白对Raw264.7细胞无毒性；0.2μg/mL和2.0μg/mL的rAlb-34kDa-1均能诱导Raw264.7细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL2、IFN-β、ISG15的表达；rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞1 h后显著增强Raw264.7细胞核内的p65的荧光强度；rAlb-34kDa-1与DENV-2作用于Raw264.7细胞12 h时，2μg/mL的rAlb-34kDa-1显著增强细胞中DENV-2的mRNA表达量。作用24 h时，0.02、0.20和2μg/mL的rAlb-34kDa-1均能增强Raw264.7细胞中DENV-2的mRNA表达量，2μg/mL的rAlb-34kDa-1与DENV-2共孵育于Raw264.7细胞24h后细胞内J2的荧光信号显著增强。结论 rAlb-34kDa-1蛋白能调节小鼠Raw264.7细胞免疫应答，促进DENV-2在Raw264.7细胞中复制。

关键词：白纹伊蚊 rAlb-34kDa-1蛋白 2型登革病毒免疫调控