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IL-33增强体外培养的外周血单个核细胞细胞因子的分泌以及杀伤功能

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第9期31卷 1246-1250页

作者：李晓晨吕全省夏瑞古彦铮高腾飞虞培娟张学光朱一蓓苏州大学医学部基础医学与生命科学学院江苏苏州215123

目的探讨白细胞介素33(IL-33)是否能在体外增强外周血单个核细胞(PBMC)分泌细胞因子和杀伤功能。方法常规分离培养健康人PBMC,分别经CD3单克隆抗体(m Ab)/CD28mAb/IL-2、CD3mAb/CD28mAb/IL-2/IL-12、CD3mAb/CD28m Ab/IL-2/IL-12/IL-33三种组合刺激培养72 h,收集细胞。经实时定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞γ干扰素(IFN-γ)、颗粒酶B(granzyme B)mRNA的水平;CCK-8法检测各组细胞对A549人肺腺癌细胞的杀伤活性;采用流式细胞术分析各组细胞IFN-γ、程序性死亡蛋白1(PD-1)的水平。结果各组因子组合刺激的PBMC,形态无明显差异;qRT-PCR检测发现,IL-33刺激组的PBMC中IFN-γ、granzyme B mRNA的水平升高;IL-33刺激组的PBMC对A549的杀伤能力更强;IL-33刺激组的PBMC中CD3+CD8+细胞亚群IFN-γ的水平升高、PD-1的水平降低。结论 IL-33能够在体外增强PBMC的效应功能。

关键词：白细胞介素33(IL-33) 外周血单个核细胞 γ干扰素肿瘤免疫

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江苏苏北地区汉族群体指纹特征分析

解剖学杂志 2014年第2期37卷 248-251页

作者：方星陈梅倪鹏平成中芹苏州大学基础医学与生命科学学院苏州215123

目的：探讨江苏苏北地区汉族人群的指纹特征,为皮纹学、遗传学、医学研究提供参考.方法：采用油墨拓印法采集男性144名、女性169名江苏籍苏北地区健康成年人的指纹,放大镜下观察分析.结果：箕形纹52.24％,斗形纹44.85％,弓形纹2.91％,且... 详细信息

目的：探讨江苏苏北地区汉族人群的指纹特征,为皮纹学、遗传学、医学研究提供参考.方法：采用油墨拓印法采集男性144名、女性169名江苏籍苏北地区健康成年人的指纹,放大镜下观察分析.结果：箕形纹52.24％,斗形纹44.85％,弓形纹2.91％,且L的分布具有明显性别差异,Lu多见于小指;Ws多见于无名指.左、右对应手指各种指纹组合格局频率为L/L（40.96％）＞W/W（34.44％）＞L/W（19.81％）＞A/L（2.81％）＞A/A（1.02％）＞A/W（0.96％）.L/L多分布于小指,W/W多分布于无名指,A/A及A/L组合在示指频率较高.对应手指同型组合频率为76.40％,十指同型的比例高达19.16％.一手五指纹型组合频率为OLW（57.35％）＞同型组合（31.79％）＞ALW（6.39％）＞ALO（3.67％）＞AOW（0.80％）.结论：江苏苏北地区汉族指纹纹型的分布具有一定的地区特点,表现出箕形纹频率高、OLW类型（一手五指纹型）频率高的倾向性,同时还表现出一定的对称性.

关键词：皮纹学指纹江苏苏北群体汉族

agr系统在单核增生细胞李斯特菌耐药及生物被膜形成中的作用

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生物技术通报 2023年第2期39卷 254-262页

作者：任思雨姜聪一于涛康瑞姜晓冰河南师范大学生命科学学院新乡453007 新乡学院生命科学与基础医学学院新乡453000

研究agr系统在单核增生细胞李斯特菌(Lm)对不同抗菌剂耐药及生物被膜形成中的作用。构建agr基因缺失突变株,测定突变株对抗菌药物的敏感性;微孔板定量法检测Lm在不同温度下生物被膜的形成量并利用倒置显微镜观察生物被膜结构;采用软平... 详细信息

研究agr系统在单核增生细胞李斯特菌(Lm)对不同抗菌剂耐药及生物被膜形成中的作用。构建agr基因缺失突变株,测定突变株对抗菌药物的敏感性;微孔板定量法检测Lm在不同温度下生物被膜的形成量并利用倒置显微镜观察生物被膜结构;采用软平板法测定细菌的群集及泳动运动能力;通过实时荧光定量PCR检测运动相关基因的转录水平。缺失agr系统导致Lm对头孢噻肟、环丙沙星及苯扎氯铵的耐药性降低。与野生株EGD-e相比,突变株在37℃、20℃以及4℃条件下生物被膜形成量均明显降低;?agrC的群集运动能力增强。RT-qPCR结果显示,缺失agr系统后flaA的转录水平下降。agr系统参与Lm耐药及生物被膜的形成。

关键词：单核细胞增生李斯特菌 agr系统耐药生物被膜

IL-8在LPS诱导的草鱼炎症过程中的表达特征

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水产学报 2017年第7期41卷 1028-1035页

作者：柳昭君赵杰卜云璇肖兰莹时凯丽宋学宏苏州大学基础医学与生物科学学院

采用原核表达获得草鱼白细胞介素-8(IL-8)重组蛋白,并以腹腔与皮下组织交替注射的方法免疫小鼠,制备抗草鱼IL-8的多克隆抗体。采用免疫印迹(Western blot)和酶联免疫吸附(ELISA)技术检测抗体的特异性与效价,运用流式细胞术分析健康草鱼... 详细信息

采用原核表达获得草鱼白细胞介素-8(IL-8)重组蛋白,并以腹腔与皮下组织交替注射的方法免疫小鼠,制备抗草鱼IL-8的多克隆抗体。采用免疫印迹(Western blot)和酶联免疫吸附(ELISA)技术检测抗体的特异性与效价,运用流式细胞术分析健康草鱼及细菌脂多糖(LPS)刺激后草鱼各免疫相关组织中IL-8的表达特征。结果显示,草鱼IL-8多克隆抗体效价可达1∶40 000。健康草鱼的胸腺、头肾、肝脏、肠道、鳃、脾脏、体肾等组织均表达IL-8蛋白,其中,头肾和鳃中表达量较高。LPS刺激后,各组织IL-8蛋白表达量均显著升高,其中,肠道、肝脏、肾脏在LPS刺激4 h后IL-8蛋白上调达最高峰,头肾、脾脏、鳃于LPS刺激后12 h时表达量最高,胸腺则在24 h时达最高峰。研究表明,IL-8参与了草鱼炎症应答;IL-8表达量的升高,可作为早期炎症监测指标,应用于养殖鱼类炎症性疾病的预警指标。

关键词：草鱼白细胞介素-8 多克隆抗体细菌脂多糖组织表达炎症应答

芳香烃受体抑制miR-101a介导PM_(2.5)有机提取物所致斑马鱼胚胎心脏畸形

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环境与职业医学 2021年第4期38卷 336-341页

作者：蔡畅黄玉洁陶怡舟陈涛姜岩苏州大学医学部公共卫生学院江苏苏州215123 苏州大学医学部基础医学与生命科学学院江苏苏州215123

[背景]研究表明芳香烃受体(AhR)介导大气PM_(2.5)引起的斑马鱼胚胎心脏畸形,但其具体分子机制有待明确。小分子核糖核酸(miRNAs)等表观遗传机制在心脏发育中起重要作用,而且有报道AhR能调控miRNAs的表达。因此,PM_(2.5)有可能通过AhR信... 详细信息

[背景]研究表明芳香烃受体(AhR)介导大气PM_(2.5)引起的斑马鱼胚胎心脏畸形,但其具体分子机制有待明确。小分子核糖核酸(miRNAs)等表观遗传机制在心脏发育中起重要作用,而且有报道AhR能调控miRNAs的表达。因此,PM_(2.5)有可能通过AhR信号通路干扰miRNAs表达,从而导致心脏发育异常。[目的]探讨PM_(2.5)有机提取物(EOM)激活AhR后对miR-101a的调控,以及miR-101a异常表达影响斑马鱼胚胎心脏发育的作用机制。[方法]收集苏州市区PM_(2.5)并以索氏提取法提取EOM,在受精后2 h(hpf)内加入EOM(5 mg·L^(-1))及AhR小分子抑制剂CH223191(0.05μmol·L^(-1))进行斑马鱼胚胎染毒。以吗啉寡核苷酸进行AhR基因敲减,以miR-101a类似物注射进行miR-101a过表达。在受精后72 hpf,观察各组斑马鱼胚胎发育情况,统计心脏畸形率。剖取斑马鱼胚胎心脏,提取总RNA,以实时荧光定量PCR方法检测miR-101a和elfa、gsk3β、cdc42 mRNA的表达。以在线数据库Targetscan进行斑马鱼miRNA靶基因预测,并以DAVID数据库对靶基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。[结果]与DMSO对照组相比,5 mg·L^(-1) EOM引起72 hpf的斑马鱼胚胎心脏畸形率由5%升高至18%(P及AhR基因敲减均对EOM所致miR-101a表达变化有拮抗作用(P及Wnt等心脏发育相关的重要信号通路,并且Wnt通路基因gsk3β及Rho家族小分子鸟苷酸三磷酸酶cdc42的表达在EOM染毒斑马鱼胚胎心脏中升高(升高1.9倍,P及cdc42等基因干扰心脏发育,引起心脏畸形。

关键词： PM2.5 有机提取物芳香烃受体 miR-101a 心脏发育斑马鱼胚胎

中华绒螯蟹围食膜结构观察及其主要蛋白质种类的鉴定

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水产学报 2016年第1期40卷 55-63页

作者：李婷蔡春芳朱健明何捷吴韬叶元土苏州大学基础医学与生物科学学院

为揭示中华绒螯蟹围食膜的分泌、形态和功能,实验采用组织切片技术和电镜技术观察了中华绒螯蟹消化道及围食膜的基本形态,采用几丁质酶溶解法和SDS-PAGE电泳法研究了围食膜的基本组成成分,采用液相色谱电离串联质谱(LC-ESI-MS/MS)分析... 详细信息

为揭示中华绒螯蟹围食膜的分泌、形态和功能,实验采用组织切片技术和电镜技术观察了中华绒螯蟹消化道及围食膜的基本形态,采用几丁质酶溶解法和SDS-PAGE电泳法研究了围食膜的基本组成成分,采用液相色谱电离串联质谱(LC-ESI-MS/MS)分析了围食膜蛋白的种类。显微切片结果显示,中华绒螯蟹整个消化道表面都有围食膜存在,除中肠外围食膜区室化作用明显;围食膜与上皮细胞分离时,柱状细胞变成不规则圆形,核消失。电镜结果显示,围食膜形成时上皮细胞内含有大量线粒体和分泌泡;中肠上皮细胞表面密生微绒毛。围食膜能被几丁质酶溶解,围食膜蛋白质SDS-PAGE图谱显示有7条比较清晰的电泳条带,蛋白质分子量主要分布在40 ku以上。LC-ESI-MS/MS分析结果发现,中华绒螯蟹围食膜蛋白主要包括钠、钾-ATP酶、ATP合成酶、肌动蛋白、微管蛋白、硫氧还原蛋白、加氧酶等。研究表明,中华绒螯蟹的围食膜由上皮细胞分泌形成,可能参与免疫、渗透调节和营养物质转运等生理过程。

关键词：中华绒螯蟹围食膜结构组成

一株降解微囊藻毒素的缺陷短波单胞菌的分离鉴定及降解特性研究

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环境科学学报 2017年第1期37卷 201-206页

作者：谷青赵琪史全良苏州大学基础医学与生物科学学院苏州215123

从太湖水华腐烂蓝藻中筛选出一株能够降解MC-LR的细菌,将其编号为Q3.经形态、生理生化及16S rRNA基因序列分析鉴定为缺陷短波单胞菌(Brevundimonas diminuta).研究发现,在实验条件下该菌能以MC-LR为唯一碳源和氮源生长;7 d内可将初始浓... 详细信息

从太湖水华腐烂蓝藻中筛选出一株能够降解MC-LR的细菌,将其编号为Q3.经形态、生理生化及16S rRNA基因序列分析鉴定为缺陷短波单胞菌(Brevundimonas diminuta).研究发现,在实验条件下该菌能以MC-LR为唯一碳源和氮源生长;7 d内可将初始浓度为0.96 mg·L-1的MC-LR降解为0.37 mg·L-1,降解效率达到61.5%.同时,本研究首次发现缺陷短波单胞菌能够降解藻毒素,并且在此菌种中扩增出了降解过程的关键基因mlr A,推测该菌可能与已报道的Sphingomonas sp.ACM-3962等菌具有相同的降解机制.

关键词：微囊藻毒素生物降解 mlrA基因缺陷短波单胞菌

转录因子Eomes调控CD8^(+)T细胞效应功能、免疫记忆和耗竭

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现代免疫学 2022年第5期42卷 416-420页

作者：伍诣娴朱一蓓苏州大学基础医学与生物科学学院免疫学系苏州215123

脱中胚蛋白(Eomesodermin, Eomes)是与CD8^(+)T细胞分化和效应功能密切相关的T-box家族转录因子。在应对慢性病毒感染及抗肿瘤免疫应答的过程中,Eomes可促进初始CD8^(+)T细胞分化为效应CD8^(+)T细胞并增强其效应功能,驱动经典记忆T细胞... 详细信息

脱中胚蛋白(Eomesodermin, Eomes)是与CD8^(+)T细胞分化和效应功能密切相关的T-box家族转录因子。在应对慢性病毒感染及抗肿瘤免疫应答的过程中,Eomes可促进初始CD8^(+)T细胞分化为效应CD8^(+)T细胞并增强其效应功能,驱动经典记忆T细胞的形成和维持,并且与CD8^(+)T细胞的耗竭密切相关。文章就Eomes在调控CD8^(+)T细胞效应功能,免疫记忆和耗竭方面的作用及潜在机制展开探讨,以发掘抗肿瘤免疫治疗的新策略。

关键词：脱中胚蛋白 CD8^(+)T细胞效应功能免疫记忆 T细胞耗竭

URI基因稳定表达对肝癌SMMC-7721细胞增殖能力的影响

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中国生物工程杂志 2013年第6期33卷 1-6页

作者：季辉王琦仲蕾魏文祥苏州大学医学部基础医学与生命科学学院苏州215123

目的:瞬转以及筛选出能够稳定表达URI(RPB5-mediating protein)基因的SMMC-7721细胞株,以其为模型研究URI基因对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响。方法:首先,抽提URI的重组质粒并转染到SMMC-7721细胞中,在G418药物的筛选下选出能够稳定表... 详细信息

目的:瞬转以及筛选出能够稳定表达URI(RPB5-mediating protein)基因的SMMC-7721细胞株,以其为模型研究URI基因对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响。方法:首先,抽提URI的重组质粒并转染到SMMC-7721细胞中,在G418药物的筛选下选出能够稳定表达URI基因的细胞株,RT-PCR法和酶切检测该稳定细胞中URI基因的表达效率以确认URI是否稳定表达,MTT法和克隆形成实验检测URI基因对SMMC-7721细胞增殖的影响。结果:成功建立URI基因过表达的稳定细胞株。与SMMC-7721细胞对照组比较,其URI mRNA表达水平显著上调,能稳定表达URI细胞株的增殖,克隆形成率明显升高。结论:pFLAG-CMV-4-URI重组质粒能使URI在肝癌SMMC-7721细胞内稳定表达,过表达URI基因有可能帮助细胞通过G2/M期检验点来提高肝癌细胞SMMC-7721的增殖能力。

关键词：肝癌细胞 URI过表达细胞增殖