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三种大鼠椎间盘细胞提取、鉴定及在单层和微团培养中的基质表达

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中国组织工程研究 2025年第12期29卷 2528-2535页

作者：胡思远陈建权苏州大学苏州医学院骨科研究所江苏省苏州市215031

背景:目前获得椎间盘原代细胞的方法大多较繁琐,且缺少同时提取纤维环、终板与髓核原代细胞的相关报道,因此找到同时提取3种细胞的方法十分关键。目的:探索一种同时提取并培养大鼠来源3种椎间盘细胞(纤维环、终板与髓核)的方法,对之进... 详细信息

背景:目前获得椎间盘原代细胞的方法大多较繁琐,且缺少同时提取纤维环、终板与髓核原代细胞的相关报道,因此找到同时提取3种细胞的方法十分关键。目的:探索一种同时提取并培养大鼠来源3种椎间盘细胞(纤维环、终板与髓核)的方法,对之进行鉴定并探究单层与微团培养对细胞外基质的影响。方法:取材自3周龄雄性SD大鼠椎间盘组织,从其中分离出软骨终板、髓核与纤维环组织。针对髓核及纤维环组织,先使用0.1%链酶蛋白酶E于37℃消化30 min,然后使用0.2%Ⅱ型胶原酶消化4 h来释放其中的细胞;针对终板组织,直接使用0.2%Ⅱ型胶原酶消化4 h来释放其中的细胞。将去除消化酶后的细胞接种于含有培养基的培养皿中,并观察细胞形态;通过实时定量荧光PCR与蛋白印迹实验检测各细胞标记物的表达水平;单层或微团培养大鼠原代纤维环细胞与软骨终板细胞,并采用阿尔新蓝与番红染色检测细胞外基质的表达能力。结果与结论:①3种椎间盘细胞均在培养4 d后开始贴附在皿底,并逐渐展现出增殖的活力;培养至第8天时,3种细胞增殖显著,形态均呈梭形,其中髓核细胞中存在多囊泡的脊索样细胞;②通过实时定量荧光PCR和/或蛋白免疫印迹实验发现原代髓核细胞中K19与Car3表达较高,原代纤维环细胞中Sparc与Bgn表达较高,原代软骨终板细胞中Pth1r与Lars2表达较高;③原代纤维环、软骨终板细胞微团培养后,经阿尔新蓝与番红染色证明这种培养方式相较于单层培养能够提高细胞外基质的表达能力;④结果表明,通过此次实验方法提取并培养获得的原代椎间盘细胞形态较好并具有较高的胞外基质表达水平,这一成果有望为科研人员提供一种新的科研工具,帮助科研人员更好地理解椎间盘生物学。

关键词：原代髓核细胞原代纤维环细胞原代终板细胞细胞提取细胞鉴定微团培养

尿石素B对骨髓来源巨噬细胞向破骨细胞分化的调控机制

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2201-2209页

作者：罗晰陈建权苏州大学苏州医学院骨科研究所江苏省苏州市215000

背景:尿石素B在机体免疫应答中起重要调节作用,具备抗炎、抗氧化和抗癌的特性,并能抑制Raw 264.7细胞向破骨细胞分化,但其对于骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化的具体作用及机制尚未阐明。系统性研究破骨细胞过度活化的调控机制,有助... 详细信息

背景:尿石素B在机体免疫应答中起重要调节作用,具备抗炎、抗氧化和抗癌的特性,并能抑制Raw 264.7细胞向破骨细胞分化,但其对于骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化的具体作用及机制尚未阐明。系统性研究破骨细胞过度活化的调控机制,有助于探索新的治疗靶点,筛选研发更安全、有效的治疗药物,为阻断破骨细胞过度活化提供新思路。目的:利用骨髓来源的巨噬细胞建立体外破骨细胞分化模型,探究尿石素B对核因子κB受体活化因子配体介导破骨细胞分化的影响,并系统性分析其作用机制。方法:(1)采用CCK-8法筛选尿石素B干预骨髓来源巨噬细胞的安全工作浓度;(2)用不同浓度(0,12.5,25,50μmol/L)尿石素B干预骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化,进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞的数目及面积大小;(3)不同浓度(0,12.5,25,50μmol/L)尿石素B干预骨髓来源巨噬细胞的破骨分化,通过实时荧光定量PCR检测破骨特异性基因的相对表达水平;(4)蛋白印迹实验观察尿石素B对骨髓来源巨噬细胞P65、ERK信号通路的影响;(5)蛋白印迹实验检测尿石素B对骨髓来源巨噬细胞的破骨分化关键转录因子活化T细胞核因子1和c-Fos的影响。结果与结论:(1)50μmol/L及以下浓度的尿石素B对骨髓来源巨噬细胞的增殖无影响,能显著抑制骨髓来源巨噬细胞的破骨分化;(2)尿石素B主要在破骨形成前中期抑制骨髓来源巨噬细胞的破骨分化;(3)尿石素B可下调骨髓来源巨噬细胞中破骨特异性基因的相对表达水平;(4)50μmol/L的尿石素B抑制骨髓来源巨噬细胞的P65和ERK磷酸化水平,进而抑制破骨细胞形成;(5)50μmol/L的尿石素B抑制骨髓来源的巨噬细胞中破骨分化关键转录因子活化T细胞核因子1和c-Fos的表达;(6)提示尿石素B通过P65/ERK信号轴下调破骨关键转录因子活化T细胞核因子1、c-Fos的表达,抑制下游破骨特异性基因的表达,从而抑制骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化。

关键词：尿石素B P65 ERK 活化T细胞核因子1 c-Fos 骨髓来源巨噬细胞破骨细胞分化

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脊髓电刺激治疗痛性周围神经病的现状和进展

安徽医药 2025年第1期29卷 7-14页

作者：汤颜冰陈周青王紫兰倪涵宇王中苏州大学苏州医学院江苏苏州215006 苏州大学附属第一医院神经外科江苏苏州215006

痛性周围神经病是以神经病理性疼痛为突出表现的周围神经病。脊髓电刺激通过脉冲电流刺激脊髓神经,阻断疼痛信号的传递。脊髓电刺激已被用于包括痛性周围神经病在内的多种神经系统疾病,并广泛用于临床。该研究就脊髓电刺激镇痛的基本机... 详细信息

痛性周围神经病是以神经病理性疼痛为突出表现的周围神经病。脊髓电刺激通过脉冲电流刺激脊髓神经,阻断疼痛信号的传递。脊髓电刺激已被用于包括痛性周围神经病在内的多种神经系统疾病,并广泛用于临床。该研究就脊髓电刺激镇痛的基本机制、在痛性周围神经病的临床应用价值以及该技术的最新进展展开论述。

关键词：痛性周围神经病脊髓电刺激疗法疼痛机制神经调控

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m5C阅读器YBX1通过调节铁死亡抑制因子MS4A15的稳定性促进结直肠癌生长

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重庆医科大学学报 2025年

作者：夏术森朱彦斌刘礼鑫蒙长远彭洪成都医学院第一附属医院胃肠外科川北医学院附属医院血管外科川北医学院附属医院胃肠外科二川北医学院第二临床医学院肛肠外科

目的：探讨5-甲基胞嘧啶（5-methylcytosine,m5C）阅读器Y-框结合蛋白1 (Y-box binding protein1,YBX1)通过调节铁死亡抑制因子人跨膜结构域4亚家族成员15(Membrane-spanning 4-domains subfamily A 15,MS4A15)的稳定性参与结直肠癌发生发展的分子机制。方法：通过生物信息学数据库分析YBX1 mRNA和蛋白在结肠癌中的表达。RT-qPCR法检测结直肠癌细胞中YBX1的表达水平。LC-MS法检测结直肠癌细胞和正常结直肠粘膜细胞中m5C修饰水平。CCK8法检测YBX1对结直肠癌细胞增殖的影响，Transwell法检测对结直肠癌细胞迁移能力的影响，流式细胞仪检测对结直肠癌细胞凋亡的影响。通过生物信息学方法分析可与YBX1相互作用的铁死亡抑制因子MS4A15和潜在m5C修饰位点。通过GEPIA2分析YBX1表达与MS4A15的相关性。抑制YBX1表达并分析MS4A15 mRNA的表达水平及MS4A15的m5C修饰水平。通过catRAPID数据库寻找YBX1蛋白和MS4A15 mRNA的结合位点。抑制YBX1表达并用放线菌素D(actinomycinD)处理结直肠癌细胞，RT-qPCR法检测MS4A15 mRNA的稳定性。抑制MS4A15表达并检测细胞增殖活性，细胞迁移能力和细胞凋亡率，抑制MS4A15表达，检测铁死亡关键指标MDA、ROS和Fe2+的表达水平。结果：YBX1 mRNA和蛋白在结直肠癌中高表达并且YBX1在结直肠癌细胞中高表达。结直肠癌细胞的m5C修饰水平明显高于正常结直肠粘膜细胞。YBX1可促进结直肠癌细胞增殖，迁移及抑制细胞凋亡。生物信息学分析证实YBX1与铁死亡抑制因子MS4A15表达水平呈正相关，并且MS4A15上存在多个潜在m5C修饰位点。抑制YBX1表达可降低MS4A15 mRNA表达水平及MS4A15基因的m5C修饰水平，并可降低MS4A15 mRNA的稳定性。抑制MS4A15表达后细胞增殖活性和细胞迁移能力明显降低，细胞凋亡率增高，MDA、ROS和Fe2+含量均明显增高。结论：上述结果表明YBX1通过m5C修饰稳定MS4A15促进结直肠癌的发生和发展，为结直肠癌患者提供有前景的靶向治疗策略。

关键词：结直肠癌 5-甲基胞嘧啶 Y-框结合蛋白1 铁死亡人跨膜结构域4亚家族成员15

基于调节肠道菌群的疏风解毒胶囊改善甲型流感病毒肺炎小鼠肺损伤的机制研究

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中国临床药理学与治疗学 2025年

作者：吴义锟郭红敏李艳穆伟歌黄淑芸朱久玲杨竹钟树志皖南医学院苏州高博软件职业技术学院

目的：研究疏风解毒胶囊（SFJDC）对病毒性肺炎小鼠肺损伤的改善作用及可能机制。方法：48只BALB/c小鼠采用甲型流感病毒H1N1滴鼻建立病毒性肺炎模型后，随机分为4组，每组12只，除模型组外，给药组分别给予奥司他韦（OSTW）、疏风解毒... 详细信息

目的：研究疏风解毒胶囊（SFJDC）对病毒性肺炎小鼠肺损伤的改善作用及可能机制。方法：48只BALB/c小鼠采用甲型流感病毒H1N1滴鼻建立病毒性肺炎模型后，随机分为4组，每组12只，除模型组外，给药组分别给予奥司他韦（OSTW）、疏风解毒胶囊低、高剂量（SFJDC-L、SFJDC-H）灌胃，另取12只小鼠做为正常组。连续给药7 d，给药过程中计算体质量变化率及肺指数、疾病活动指数；给药结束后取肺、肠组织及肠道内容物，苏木素-伊红（HE）染色法检测小鼠肺组织的病理改变；RT-qPCR法检测小鼠肺组织甲型流感病毒（influenza A，infA）载量、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）mRNA的表达；16S rRNA高通量测序法检测小鼠肠道菌群；ELISA法检测小鼠血清中脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）水平；Western Blotting法检测小鼠肺组织环鸟嘌呤-腺嘌呤核苷酸合成酶（cyclic GMP-AMP synthase，cGAS）、干扰素基因刺激蛋白（stimulator of interferon genes，STING）、磷酸化干扰素基因刺激蛋白（phospho-STING，p-STING）、核因子-кB（nuclear factor kappa B，NF-кB）、磷酸化核因子-кB（phospho-NF-кB，p-NF-кB）、紧密连接蛋白（zonula occludens 1，ZO-1；Occludin）。结果：与模型组比较，疏风解毒组小鼠肺指数、病毒载量显著降低（P<0.01）DAI评分显著降低；肺组织炎症明显减轻，伴肺组织TNF-α和IL-6 mRNA表达水平降低（P<0.01）；肠道厚壁菌门、毛螺菌科丰度显著升高（P<0.01)，拟杆菌门、拟杆菌科丰度显著降低（P<0.05、P<0.01）；肠组织ZO-1、Occludin蛋白表达量显著增加（P<0.05），血清LPS水平显著减少（P<0.01）；肺组织cGAS、p-STING、p-NF-кB蛋白表达量显著下降（P<0.05、P<0.01）。结论：疏风解毒胶囊减轻小鼠肺组织的炎症反应，其机制可能与其调节肠道菌群、保护肠黏膜屏障，从而减少肠道漏出的LPS对肺组织cGAS/STING/NF-кB信号通路活化有关。

关键词：疏风解毒胶囊甲型流感病毒肠道菌群环鸟嘌呤-腺嘌呤核苷酸合成酶/干扰素基因刺激蛋白/核因子-кB信号通路

生物学检测与影像学综合评估1017例肺部结节良恶性的回顾性队列研究

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中国胸心血管外科临床杂志 2025年第1期32卷 60-66页

作者：张蕾李子豪李楠程钧张锋夏平会吕望胡坚浙江大学医学院附属第一医院干部保健中心杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院普胸外科杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院健康管理中心杭州310003

目的通过联合生物学检测与影像学评估,在大型队列基础上构建临床预测模型,以提高肺结节良恶性鉴别的准确性。方法回顾性分析浙江大学医学院附属第一医院2020年1月—2024年4月接受胸部CT和7种肺癌相关血清自身抗体(7-AABs)检测32627例肺... 详细信息

目的通过联合生物学检测与影像学评估,在大型队列基础上构建临床预测模型,以提高肺结节良恶性鉴别的准确性。方法回顾性分析浙江大学医学院附属第一医院2020年1月—2024年4月接受胸部CT和7种肺癌相关血清自身抗体(7-AABs)检测32627例肺结节患者的临床资料。通过单因素和多因素logistic回归分析筛选肺结节良恶性的独立风险因素,并构建列线图模型。通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线、校准曲线及决策曲线分析(decision curve analysis,DCA)评估模型性能。结果共纳入1017例肺结节患者。训练集共712例,其中男291例、女421例,平均年龄(58±12)岁;验证集共305例,其中男129例、女176例,平均年龄(58±13)岁。单因素ROC曲线分析显示,CT联合7-AABs检测的诊断效能[曲线下面积(area under the curve,AUC)=0.794],高于单独使用CT(AUC=0.667)或7-AABs(AUC=0.514)。多因素logistic回归分析显示,影像学结节直径、结节性质及CT联合7-AABs检测为肺结节良恶性诊断的独立预测因子,以此构建列线图预测模型。该模型在训练集和验证集的AUC值分别为0.826和0.862。DCA结果显示,该模型能够为临床决策提供较高的净收益。结论联合7-AABs与CT能够显著提高肺结节良恶性鉴别的准确性。构建的预测模型为临床决策提供了有力支持,有助于肺结节的精准诊断与治疗。

关键词：肺结节自身抗体胸部影像学预测模型

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基于微变放大技术的肺结节识别算法研究

中国胸心血管外科临床杂志 2025年

作者：张子睿焦子宸史校铭王涛南京医科大学鼓楼临床医学院胸外科南京大学医学院附属鼓楼医院胸外科

目的开发一种能够帮助医师定位肺结节的新型识别算法。方法纳入南京大学附属鼓楼医院胸外科行胸腔镜手术的16例肺结节患者，其中男9例、女7例，平均年龄（54.9±14.9）岁，采集患者60帧/s帧率、1 920×1 080分辨率的胸腔镜肺表面探查... 详细信息

目的开发一种能够帮助医师定位肺结节的新型识别算法。方法纳入南京大学附属鼓楼医院胸外科行胸腔镜手术的16例肺结节患者，其中男9例、女7例，平均年龄（54.9±14.9）岁，采集患者60帧/s帧率、1 920×1 080分辨率的胸腔镜肺表面探查数据，并以定间隔保存帧图像，对帧进行分块处理。用以上数据构建一个针对肺部结节识别的算法数据库。结果在经过优化的多拓扑卷积网络模型中，测试结果显示准确识别率达94.39%。进一步通过整合微变扰乱放大技术的卷积网络模型，在识别肺部结节方面的准确率提高至96.90%。将这两个模型的表现综合评估，整体的识别准确率达95.59%。据此，我们推断所提出的网络模型适用于肺部结节的识别任务，且融合微变放大技术的卷积网络在准确率上表现更为优异。结论与传统方法相比，我们提出的技术能够显著提高肺部结节识别的精度和定位准确度并帮助术者在胸腔镜手术过程中定位肺结节。

关键词：肺结节术前定位微变放大计算机视觉多尺度检测

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转移性前列腺癌的临床危险因素分析

重庆医科大学学报 2025年

作者：李俊洋余晓东吕宗应陈贵源胡安能朱潇乐林宇航郑永波川北医学院附属医院泌尿外科

目的：探寻转移性前列腺癌的临床危险因素。方法：回顾2019年1月至2024年3月于川北医学院附属医院泌尿外科首次入院后病理检查诊断为前列腺癌的180例患者的临床资料，收集患者年龄、体质量指数、Gleason评分、术前游离前列腺特异性抗原... 详细信息

目的：探寻转移性前列腺癌的临床危险因素。方法：回顾2019年1月至2024年3月于川北医学院附属医院泌尿外科首次入院后病理检查诊断为前列腺癌的180例患者的临床资料，收集患者年龄、体质量指数、Gleason评分、术前游离前列腺特异性抗原（free prostate-specific antigen,FPSA）/总前列腺特异性抗原（total prostate-specific antigen,TPSA）比值（F/T比值）、血浆纤维蛋白原、中性粒细胞、血小板、淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞/淋巴细胞比值（neutrophil to lymphocyte ratio,NLR）、血小板-淋巴细胞比值（platelet to lymphocyte ratio,PLR）、单核细胞计数与淋巴细胞计数比值（monocyte-lymphocyte count ratio,MLR）、全身免疫炎症指数（systemic immune-inflammation index,SII），前列腺体积、TPSA，碱性磷酸酶、吸烟史、饮酒史。根据诊断分为局限性前列腺癌组99例和转移性前列腺癌组81例，采用Mann-Whitney U检验、χ2检验和多因素logistic回归分析分别对变量进行分析，探寻转移性前列腺癌的临床危险因素。结果：单因素分析结果显示，患者体质量指数（u=-2.456,P20 ug/L，碱性磷酸酶≥90 ng/mL是转移性前列腺癌的独立危险因素。结论：对于初次入院诊断为前列腺癌的患者，发现其体质量指数低，Gleason评分高，TPSA>20 ug/L，碱性磷酸酶≥90 ng/mL的患者应该进一步评估病情的严重程度，以明确是否发生转移。

关键词：转移性前列腺癌临床危险因素

不同内固定系统治疗股骨转子间骨折的力学稳定性

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中国组织工程研究 2025年第9期29卷 1783-1788页

作者：陈曦汤涛陈铜兵李青张文常州市第一人民医院江苏省常州市213003 苏州大学附属第三医院江苏省常州市213003 苏州大学苏州医学院骨科研究所江苏省苏州市215006

背景:股骨转子间骨折的骨折类型和固定方式多样,各固定系统间的力学稳定性相差较大。使用有限元分析方法对各固定系统开展生物力学研究具有科学的临床意义。目的:通过有限元方法对比分析多种内固定应用于股骨A031-A2.1型转子间骨折的力... 详细信息

背景:股骨转子间骨折的骨折类型和固定方式多样,各固定系统间的力学稳定性相差较大。使用有限元分析方法对各固定系统开展生物力学研究具有科学的临床意义。目的:通过有限元方法对比分析多种内固定应用于股骨A031-A2.1型转子间骨折的力学稳定性。方法:在已验证有效性的股骨有限元模型基础上,对模型进行必要的切割,造模成股骨A031-A2.1型转子间骨折,模拟临床手术方法置入不同的内固定系统,分别建立股骨近端防旋髓内钉、动力髋螺钉、经皮加压钢板和股骨近端锁定钢板固定模型。约束4组模型股骨远端下所有节点,在股骨头上施加700,1400和2100N的压缩载荷,通过计算分析,观察各组模型的等效应力分布和压缩刚度,比较各组模型之间的力学稳定性。结果与结论:①通过计算分析,对比各组模型的变形量计算压缩刚度后,在各级载荷作用下,各组模型上压缩刚度呈现的趋势:生理组>股骨近端防旋髓内钉组>股骨近端锁定钢板组>经皮加压钢板组>动力髋螺钉组;完整的生理组模型的压缩刚度明显高于所有的手术组模型;②观察应力指标,因存在应力遮挡效应,致使各固定组的应力峰值均高于生理组,最大峰值均集中分布于各内固定上;其中股骨近端防旋髓内钉固定组应力峰值最小,动力髋螺钉固定组应力最高,应力分布趋势呈现:生理组一种内固定选择,呈现变形量小、应力峰值低,应力分布均匀的特性;经皮加压钢板组和股骨近端锁定钢板组的力学效果优良,固定效果接近股骨近端防旋髓内钉固定;动力髋螺钉固定效果欠佳,同比于其他内固定,其力学稳定性较差。

关键词：股骨转子间骨折内固定系统力学稳定性有限元分析等效应力压缩刚度