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心肌梗死后心肌纤维化小鼠心肌线粒体功能和能量代谢重塑相关性的转录组学分析

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南方医科大学学报 2024年第4期44卷 666-674页

作者：王梓凝杨明李双磊迟海涛王军惠肖苍松解放军医学院北京100853 解放军总医院第六医学中心心血管外科北京100037 解放军总医院第一医学中心心脏大血管外科北京100853

目的探究心肌梗死小鼠心肌纤维化过程中线粒体呼吸功能的变化,阐述其与糖酵解通量增加的相关性。方法选取40只C57BL/6N小鼠,随机分为实验组(心肌梗死组)和对照组(假手术组),20只/组。实验组采用结扎冠状动脉左前降支的方法构建小鼠心肌... 详细信息

目的探究心肌梗死小鼠心肌纤维化过程中线粒体呼吸功能的变化,阐述其与糖酵解通量增加的相关性。方法选取40只C57BL/6N小鼠,随机分为实验组(心肌梗死组)和对照组(假手术组),20只/组。实验组采用结扎冠状动脉左前降支的方法构建小鼠心肌梗死模型,对照组除不对左前降支进行结扎外,其他操作均与实验组相同。选取心肌梗死后28d和假手术组小鼠各5只进行安乐死取材,取左心室组织样本进行转录组学测序,采用FPKM法计算基因表达量,寻找差异表达基因。并通过GO和KEGG数据库对差异基因进行富集分析,寻找影响疾病进程的相关通路。通过绘制热图,展示富集分析中显示的通路和相关基因的表达差异,并对体外培养的小鼠原代CFs通过促纤维化激动剂TGF-β1或溶剂对照干预,通过Seahorse实验检测其线粒体呼吸和糖酵解水平。结果通过心脏大体图和心脏超声验证心梗模型构建成功,心肌梗死组舒张期左心室内径增加(P<0.05),收缩期左心室内径增加更为显著(P<0.001),左心室射血分数明显下降,差异有统计学意义(P<0.0001)。与假手术组相比,心肌梗死组上调基因124个,下调基因106个。GO和KEGG富集分析显示差异表达基因显著富集在脂肪酸代谢、细胞器等代谢通路和线粒体中。基因表达热图显示脂肪酸β氧化和线粒体功能障碍,相反糖酵解水平增加。Seahorse实验中,与溶剂对照组(Vehicle组)相比,TGF-β1干预组心肌成纤维细胞基础和最大呼吸水平明显降低,基础和最大糖酵解水平升高,差异均有统计学意义(P<0.0001)。结论在心肌纤维化过程中,心肌成纤维细胞能量代谢重塑,线粒体功能下降,相反更倾向于通过糖酵解产生能量。

关键词：转录组学心肌梗死心肌纤维化线粒体糖酵解心肌成纤维细胞

心脏磁共振在系统性硬化症亚临床心脏受累中的应用

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中华内科杂志 2024年第2期63卷 176-182页

作者：赵征赵亚男金京玉杨金水朱剑李涛解放军总医院第一医学中心风湿免疫科北京100853 解放军总医院第一医学中心放射诊断科北京100853

目的通过心血管磁共振来描述和识别亚临床系统性硬化症原发性心脏受累(SSc-PHI),明确疾病严重程度及血清生物标志物与亚临床SSc-PHI是否存在相关性。方法回顾性分析2022年1月至12月在解放军总医院住院的系统性硬化症(SSc)患者。共有26... 详细信息

目的通过心血管磁共振来描述和识别亚临床系统性硬化症原发性心脏受累(SSc-PHI),明确疾病严重程度及血清生物标志物与亚临床SSc-PHI是否存在相关性。方法回顾性分析2022年1月至12月在解放军总医院住院的系统性硬化症(SSc)患者。共有26例无心血管疾病或肺动脉高压病史的SSc患者进行了3 T增强心血管磁共振检查,测量包括native T_(1)、细胞外容积(ECV)、晚期钆增强(LGE)、T_(2)mapping和左室容积功能,以及肌钙蛋白T和N端脑钠肽前体。结果在26例患者中有13例(50.0%)患者观察到LGE,提示局灶性纤维化,弥漫型SSc组的T_(2)mapping显著高于局限型SSc(P=0.009)。所有患者的左室容积和功能均在正常范围内,但弥漫型SSc组的左室收缩末期容积显著高于局限型SSc组(P=0.021)。有LGE局灶性纤维化患者的改良Rodnan皮肤评分(mRSS)显著升高(P=0.019)。logistic回归分析证实了mRSS和LGE之间的关联(OR=1.224,P=0.037)。多因素分析中,T_(2)mapping与病程呈负相关,与弥漫型SSc及指端溃疡相关(R 2=0.711,P=0.018,P=0.013,P=0.030),肌钙蛋白T和T_(2)mapping存在相关性(r=0.555,P=0.049)。结论亚临床SSc-PHI的特征是心肌弥漫性和局灶性纤维化,但保留心肌收缩功能。亚临床SSc-PHI与肌钙蛋白T、SSc疾病严重程度和复杂的周围血管病变有关。这些数据为识别有SSc-PHI风险的个体提供了信息。

关键词：硬皮病,系统性磁共振成像心脏纤维化

牙髓和牙周韧带间充质干细胞成骨能力差异分析研究

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中国骨质疏松杂志 2024年第8期30卷 1102-1107,1115页

作者：李欢苗博韩智慧张保荣航空总医院口腔医学中心北京100012 上海市徐汇区中心医院上海200000

目的探究牙髓间充质干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)和牙周韧带间充质干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)在成骨能力上的差异机制。方法培养人牙髓干细胞和牙周干细胞(分为DPSCs组和PDLSCs组),比较两种干细胞诱导成... 详细信息

目的探究牙髓间充质干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)和牙周韧带间充质干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)在成骨能力上的差异机制。方法培养人牙髓干细胞和牙周干细胞(分为DPSCs组和PDLSCs组),比较两种干细胞诱导成骨分化能力的差异,通过实时荧光定量PCR检测成骨分化过程中关键转录因子的转录表达差异。同时,从GEO官网下载牙组织单细胞测序数据(GSE161267_RAW),通过比较干细胞亚群占比差异、调控成骨分化基因表达差异及生物学功能富集等揭示两种组织干细胞成骨分化功能差异的原因。结果成骨诱导分化结果显示,DPSCs组茜素红着色较PDLSCs组更深,运用RT-PCR检测成骨分化关键转录因子骨钙素(osteocalcin,OC)、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RunX2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、破骨细胞抑制因子(osteoprotegerin,OPG)和骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)。结果显示,与PDLSCs组相比,DPSCs组Osteocalin、ALP、RunX2、OPG和BMP-2基因转录水平显著升高(**P<0.01,*P<0.05)。单细胞测序数据分析结果显示,牙周和牙髓组织中干细胞构成比例不同,其中牙周组织中MSC2和MSC3亚群占比多,牙髓组织中MSC1亚群占比多;MSC1中调控成骨分化基因表达显著高于MSC2和MSC3。差异基因生物学功能富集结果显示,MSC1亚群主要表现为成骨分化及参与成骨分化的信号通路。结论DPSCs较PDLSCs有更高的成骨分化功能,是由于DPSCs中成骨分化功能强大的细胞亚群含量高于PDLSCs。

关键词：间充质干细胞成骨诱导分化碱性磷酸酶单细胞测序基因富集分析

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严重烧伤小鼠肠-胰岛轴功能的变化及其作用

中华烧伤与创面修复杂志 2024年第7期40卷 625-633页

作者：刘馨竹李大伟蒋敏李志生冯柏塨申传安解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部北京100048

目的探讨严重烧伤小鼠肠-胰岛轴功能的变化及其作用。方法该研究为实验研究。将90只雄性8~10周龄C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为假伤组和烧伤组(每组45只小鼠),于烧伤组小鼠背部制备30%体表总面积Ⅲ度烫伤(以下称烧伤)创面,假伤组小鼠... 详细信息

目的探讨严重烧伤小鼠肠-胰岛轴功能的变化及其作用。方法该研究为实验研究。将90只雄性8~10周龄C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为假伤组和烧伤组(每组45只小鼠),于烧伤组小鼠背部制备30%体表总面积Ⅲ度烫伤(以下称烧伤)创面,假伤组小鼠模拟致假伤。伤后24 h,检测空腹血糖(样本数为12)后,行腹腔糖耐量实验和口服糖耐量实验,并绘制血糖浓度-时间变化曲线,计算曲线下面积(样本数为6);分别于腹腔注射或灌胃给予葡萄糖溶液前及腹腔注射或灌胃给予葡萄糖溶液后30、60、120 min从心脏取血,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血浆胰岛素和胰高血糖素样肽1(GLP-1)水平(样本数为3);取每组3只小鼠回肠组织,行免疫荧光染色及原位末端标记染色检测肠道L细胞GLP-1表达及凋亡水平;提取每组6只小鼠胰岛行葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验,分别经低糖(2.8 mmol/L葡萄糖)和高糖(16.7 mmol/L葡萄糖)孵育后取上清液,采用ELISA法检测胰岛素水平。取36只雄性8~10周龄C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为假伤组、烧伤组和烧伤+艾塞那肽4(Ex-4)组(每组12只小鼠),对假伤组和烧伤组小鼠行同前对应处理,将烧伤+Ex-4组小鼠同烧伤组小鼠致伤后给予其GLP-1受体激动剂Ex-4。伤后24 h,提取小鼠胰岛,采用蛋白质印迹法检测重链结合蛋白(BIP)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化PERK(p-PERK)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)、磷酸化eIF2α(p-eIF2α)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白表达并计算p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α比值(样本数为3),采用流式细胞术检测胰岛细胞凋亡率(样本数为3),同前行葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验以检测上清液中胰岛素水平(样本数为6)。结果伤后24 h,烧伤组小鼠空腹血糖为(7.3±1.0)mmol/L,显著高于假伤组的(5.1±0.6)mmol/L(t=6.36,P<0.05)。伤后24 h,在腹腔糖耐量实验和口服糖耐量实验中,烧伤组小鼠血糖浓度-时间变化曲线下面积均显著大于假伤组(t值分别为4.32、6.03,P<0.05);与假伤组相比,烧伤组小鼠经腹腔注射给予葡萄糖溶液前血浆胰岛素水平及经腹腔注射或灌胃给予葡萄糖溶液前血浆GLP-1水平均显著降低(P<0.05),经腹腔注射或灌胃给予葡萄糖溶液后30、60、120 min血浆胰岛素水平及经灌胃给予葡萄糖溶液后30、60 min血浆GLP-1水平均显著降低(P<0.05)。伤后24 h,与假伤组相比,烧伤组小鼠肠道L细胞GLP-1表达水平显著降低(t=7.74,P<0.05),凋亡水平显著升高(t=14.28,P<0.05)。伤后24 h,烧伤组小鼠经高糖孵育的胰岛上清液中胰岛素水平为(8.5±0.4)ng/mg,显著低于假伤组的(15.7±0.3)ng/mg(t=18.68,P<0.05)。伤后24 h,与假伤组相比,烧伤组小鼠胰岛中BIP、p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α和CHOP的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与烧伤组相比,烧伤+Ex-4组小鼠胰岛中BIP、p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α和CHOP的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。伤后24 h,烧伤组小鼠胰岛细胞凋亡率为(32.0±3.0)%,显著高于假伤组的(10.3±2.5)%(P<0.05);烧伤+Ex-4组小鼠胰岛细胞凋亡率为(20.0±3.6)%,显著低于烧伤组(P<0.05)。伤后24 h,烧伤组小鼠经高糖孵育的胰岛上清液中胰岛素水平显著低于假伤组(P<0.05),烧伤+Ex-4组小鼠经高糖孵育的胰岛上清液中胰岛素水平显著高于烧伤组(P<0.05)。结论严重烧伤后小鼠肠-胰岛轴功能障碍,肠道L细胞凋亡增多、GLP-1合成及分泌减少,胰岛细胞发生内质网应激、凋亡增多,葡萄糖刺激的胰岛素分泌减少;GLP-1受体激动剂Ex-4能保护严重烧伤小鼠胰岛细胞功能,可能通过减轻内质网应激降低胰岛细胞凋亡水平,促进胰岛素分泌。

关键词：烧伤胰岛素胰高血糖素样肽1 内质网应激高糖血症肠-胰岛轴

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儿童动脉缺血性脑卒中的分型

中华医学杂志 2024年第31期104卷 2875-2880页

作者：卓秀伟李久伟孟令丙熊晖方方邹丽萍于泽谋国家儿童医学中心首都医科大学附属北京儿童医院神经内科北京100045 北京清华长庚医院心脏内科清华大学临床医学院北京102218 解放军总医院儿科医学部解放军总医院第一医学中心儿科北京100853

儿童动脉缺血性脑卒中的病因复杂,识别其病因是优化治疗和预防卒中复发的关键。关于儿童动脉缺血性脑卒中的分型方法,目前多参考国外研究数据,但尚未达成统一。本文梳理了现有的分型方法及其亚型定义,并指出了存在的一些疑问和歧义。在... 详细信息

儿童动脉缺血性脑卒中的病因复杂,识别其病因是优化治疗和预防卒中复发的关键。关于儿童动脉缺血性脑卒中的分型方法,目前多参考国外研究数据,但尚未达成统一。本文梳理了现有的分型方法及其亚型定义,并指出了存在的一些疑问和歧义。在此基础上,结合北京儿童医院收集的中国儿童动脉缺血性卒中的数据,根据病因和发病机制,提出了新的分型方法(COIST分型方法),即:炎症性(I)、血管结构异常(S)、易栓症(T)、心脏疾病(C)、其他可确定病因(O)、原因不能确定;并列出了各亚型疾病。希望这一新的分型方法能引起国内同行的关注和讨论,以期进一步完善,从而方便临床医师更好地了解和快速识别儿童缺血性卒中的病因。

关键词：卒中脑动脉缺血儿童病因分型

常见心血管疾病合并轻度认知障碍患者的临床特征及相关因素分析

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中华医学杂志 2024年第2期104卷 132-137页

作者：孔羽蒋超周乐叶一何柳陈青潘昱崔晶曾勇马长生首都医科大学附属北京安贞医院心脏内科医学中心，北京100029

目的分析常见心血管疾病(高血压、冠心病、心房颤动和心力衰竭)合并轻度认知障碍(MCI)患者的临床特征及其发生MCI的影响因素。方法回顾性纳入2021年6月1日至2022年1月5日于首都医科大学附属北京安贞医院心脏内科医学中心就诊的符合标准... 详细信息

目的分析常见心血管疾病(高血压、冠心病、心房颤动和心力衰竭)合并轻度认知障碍(MCI)患者的临床特征及其发生MCI的影响因素。方法回顾性纳入2021年6月1日至2022年1月5日于首都医科大学附属北京安贞医院心脏内科医学中心就诊的符合标准的常见心血管疾病患者2294例,根据认知功能情况将研究对象分为认知功能正常组(1107例)和MCI组(1187例)。收集所有患者人口学信息、心血管疾病情况、蒙特利尔认知评估(MoCA)等精神心理量表和认知障碍诊断等相关疾病信息。比较两组患者的疾病特征,采用多因素logistic回归模型分析常见心血管疾病背景下发生MCI的相关因素。结果2294例常见心血管疾病住院患者的年龄为(60.6±10.4)岁,女性占29.99%(688例)。与认知功能正常组相比,MCI组年龄更大[(57.9±11.4)比(63.1±8.9)岁,P<0.001],女性所占比例较高[26.47%(293例)比33.28%(395例),P<0.001];MCI组中罹患高血压的患者比例更高[59.62%(660例)比64.62%(767例),P=0.014],共患心血管病的数量更多[(1.68±0.62)比(1.74±0.65)种,P=0.017]。常见心血管疾病患者发生MCI的危险因素为:年龄增加、抑郁评分增高、罹患高血压、共患≥3种常见心血管疾病,OR值(95%CI)分别为1.043(1.032~1.054)、1.021(1.004~1.037)、1.151(1.142~3.439)、1.137(1.023~1.797);受教育程度增高会降低MCI发生的风险,OR值(95%CI)为0.319(0.271~0.378);均P<0.05。结论常见心血管疾病患者的MCI发生率较高。常见心血管疾病发生MCI的可能危险因素主要包括高血压和共患≥3种常见心血管疾病等。

关键词：心血管病认知障碍轻度认知障碍痴呆

母胎医学多学科诊疗模式下胎儿心脏超声异常孕妇妊娠结局及产后结果分析

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中国实用妇科与产科杂志 2024年第4期40卷 448-452页

作者：邓涵予阮燕萍谷孝艳韩建成张烨孙琳赵映刘晓伟陈卓孙海瑞何怡华首都医科大学附属北京安贞医院心脏超声医学中心(胎儿心脏病母胎医学中心) 北京100029

目的通过对母胎医学多学科诊疗模式下胎儿心脏超声异常孕妇妊娠结局和产后情况进行分析,旨在为母胎医学多学科诊疗模式针对胎儿心脏病单病种的获益人群和各级预防获益情况提供数据研究基础。方法回顾分析2014—2021年在北京安贞医院进... 详细信息

目的通过对母胎医学多学科诊疗模式下胎儿心脏超声异常孕妇妊娠结局和产后情况进行分析,旨在为母胎医学多学科诊疗模式针对胎儿心脏病单病种的获益人群和各级预防获益情况提供数据研究基础。方法回顾分析2014—2021年在北京安贞医院进行母胎医学多学科会诊的1342例胎儿心脏超声异常孕妇,分析胎儿的出生结局和孕妇再次妊娠结局。结果 (1)494例合并母体自身免疫性疾病孕妇经母胎医学多学科会诊后,胎儿出生466例,其中手术2例,均未出现并发症和后遗症。这部分孕妇再次妊娠188例,均正常。(2)488例单纯胎儿先天性心脏病孕妇经母胎医学多学科会诊后,胎儿出生185例,其中手术112例,110例未出现术后并发症和后遗症。这部分孕妇再次妊娠208例,下一胎正常205例。(3)360例合并遗传综合征的胎儿心脏异常孕妇经母胎医学多学科会诊后全部引产,下一胎正常1例。结论母胎医学多学科诊疗模式实现了产前多维度诊断。推进了对合并母体自身免疫性疾病、单纯胎儿先天性心脏病和合并遗传综合征的胎儿心脏异常这三类孕妇的一、二、三级预防,降低了畸形胚胎的出生及新生儿死亡率,提高了患儿生存质量。

关键词：母胎医学多学科诊疗模式胎儿心脏超声异常获益人群预防获益

超声心动图用于诊断及治疗儿童心脏瓣膜病进展

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中国医学影像技术 2024年第7期40卷 961-963页

作者：马宁国家儿童医学中心首都医科大学附属北京儿童医院心脏中心心脏超声科北京100045

儿童心脏瓣膜病的诊断思路和治疗方案均与成人有所不同.超声心动图是诊断和评估儿童心脏瓣膜疾病的首选影像学方法.本文就超声心动图技术用于诊断及治疗儿童心脏瓣膜病进展进行述评.

关键词：儿童心脏瓣膜疾病超声心动描记术

立体定向脑电图在药物难治性癫痫患儿致痫灶切除术中的应用价值分析(附126例报告)

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中华神经医学杂志 2024年第7期23卷 684-691页

作者：刘垚岭胡月张昭昭陈建伟胡建飞郎永翠李文倩张宁刘强张光明航空总医院癫痫中心北京100012

目的探讨立体定向脑电图(SEEG)引导下致痫灶切除术治疗药物难治性癫痫患儿的有效性及安全性。方法选择航空总医院癫痫中心自2015年1月至2022年3月应用SEEG引导下致痫灶切除术治疗的126例药物难治性癫痫患儿(<18岁)为研究对象,回顾性分... 详细信息

目的探讨立体定向脑电图(SEEG)引导下致痫灶切除术治疗药物难治性癫痫患儿的有效性及安全性。方法选择航空总医院癫痫中心自2015年1月至2022年3月应用SEEG引导下致痫灶切除术治疗的126例药物难治性癫痫患儿(<18岁)为研究对象,回顾性分析患儿的临床资料和疗效(术后1年采用Engel分级评估患者的预后)。结果(1)126例患儿共植入1289根电极,平均每个患者(10.09±2.92)根,其中单侧植入55例,双侧植入71例。平均脑电监测时间(8.69±5.71)d,范围3~28 d。首次SEEG电极植入后可成功定位致痫灶患儿114例(90.5%),为精确定位二次调整电极植入12例(9.5%)。(2)126例患儿中行单一脑叶切除27例(21.4%),多脑叶联合或多部位剪裁式切除36例(28.6%),局灶剪裁式皮层切除60例(47.6%),局灶剪裁式皮层切除或海马杏仁核切除联合胼胝体切开术3例(2.4%)。13例患儿(植入17根电极)术中采用实时小切口探查止血,术后CT显示正常。4例患儿SEEG电极植入后出现少量无症状性硬膜外、硬膜下或脑实质血肿,均自行吸收。所有患儿均无感染、脑脊液漏、死亡或严重致残发生。(3)126例患儿随访(26.1±7.26)个月,术后1年随访时Engel分级Ⅰ级66例、Engel分级Ⅱ级33例、Engel分级Ⅲ级21例、Engel分级Ⅳ级6例。126例患儿中13例为既往手术失败、第2次行SEEG引导下致痫灶切除术治疗,术后1年随访时Engel分级Ⅰ级8例、Engel分级Ⅱ级2例,占76.9%(10/13)。结论SEEG引导下致痫灶切除术治疗药物难治性癫痫患儿安全有效。初次手术效果不佳的患儿可通过SEEG重新定位致痫灶、再次手术切除致痫灶,也可获得较好疗效。

关键词：立体定向脑电图儿童癫痫癫痫外科药物难治性癫痫