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共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒的构建及免疫效果评价

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畜牧兽医学报 2024年第5期55卷 2123-2134页

作者：吕亚迪杨洁谢文婷徐婷陈瑞爱华南农业大学兽医学院广州510642 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心肇庆526238 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司肇庆526238 肇庆大华农生物药品有限公司肇庆526238

旨在构建能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒,有望开发抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗,为控制H9N2 AIV和NDV提供新的防御思路,对NDV疫苗载体的构建和优化有重要的参考意义。利用反向遗传技术,以rDHN3-mF... 详细信息

旨在构建能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒,有望开发抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗,为控制H9N2 AIV和NDV提供新的防御思路,对NDV疫苗载体的构建和优化有重要的参考意义。利用反向遗传技术,以rDHN3-mF为骨架,在病毒基因组的P和M之间的非编码区插入全长膜结合HA和另外一个带有截短跨膜结构域的可溶性HA蛋白,获得了能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的基因Ⅶ型NDV减毒株重组病毒rDHN3mF-HA和rDHN3mF-2HA。通过鸡胚接种、Western blot、血凝效价(HA)及平均鸡胚致死时间(MDT)等试验来检测重组病毒的稳定性以及生物学特性,将重组病毒以10~6 EID_(50·)只^(-1)剂量免疫7日龄SPF鸡并测定血凝抑制(HI)抗体,在免疫后28 d对各组进行攻毒保护试验。结果显示:重组病毒在鸡胚中连续传至十五代后HA基因无突变发生;Western blot证明重组病毒可稳定高效地表达特异性的HA蛋白;重组病毒的生长曲线说明了重组病毒与亲本毒株具有相似的复制特性和低毒力特征;重组病毒免疫组的SPF鸡均能产生针对NDV或者H9N2 AIV的特异性HI抗体;攻毒保护试验结果:重组病毒均能对攻毒后的鸡产生100%保护效果;喉、肛拭子检测结果说明重组病毒可显著减少NDV与H9N2 AIV的体外排毒;气管与肺qPCR检测结果显示攻毒后3 d, rDHN3mF-2HA较rDHN3mF-HA更显著地降低了脏器中H9N2 AIV含量。本研究成功构建了共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感HA蛋白的基因Ⅶ型重组NDV,为H9N2 AIV和NDV的一种新型重组基因工程二联活载体疫苗的研制与应用奠定了基础。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒 HA蛋白新城疫病毒免疫原性载体疫苗免疫保护效率

基于并行短时面部特征的驾驶人疲劳检测方法研究

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汽车技术 2024年第5期 15-21页

作者：刘强谢谦方玺李波解孝民中山大学智能工程学院深圳518107 国家邮政局发展研究中心北京100868 广州汽车集团股份有限公司汽车工程研究院广州511434 广东玛西尔电动科技有限公司肇庆523268

为实现更快速、准确的疲劳预警,提出了一种基于并行短时面部特征的驾驶人疲劳检测方法。基于加入了MicroNet模块、CA注意力机制、Wise-IoU损失函数的YOLOv7-MCW目标检测网络提取驾驶人面部的短时面部特征,再使用并行Informer时序预测网... 详细信息

为实现更快速、准确的疲劳预警,提出了一种基于并行短时面部特征的驾驶人疲劳检测方法。基于加入了MicroNet模块、CA注意力机制、Wise-IoU损失函数的YOLOv7-MCW目标检测网络提取驾驶人面部的短时面部特征,再使用并行Informer时序预测网络整合YOLOv7-MCW目标检测网络得到的面部时空信息,对驾驶人疲劳状态进行检测与预警。结果表明:在领域内公开数据集UTA-RLDD和NTHU-DDD上,YOLOv7-MCW-Informer模型的准确率分别为97.50%和94.48%,单帧检测时间降低至28 ms,证明该模型具有良好的实时疲劳检测性能。

关键词：智能交通疲劳检测目标检测注意力机制时序预测

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高层建筑地基检测手段及优化方案研究

中国厨卫 2023年第12期22卷 73-75页

作者：罗敏强肇庆华粤工程检测有限公司怀集分公司广东肇庆526400

高层建筑地基的稳固性和质量直接影响到建筑物的安全性和性能。因此,高层建筑的地基检测和评估至关重要。文章研究了高层建筑地基检测手段,并提出了优化方案,以期提高地基检测的准确性和效率,从而为高层建筑工程的可持续发展提供支持。

关键词：高层建筑地基检测手段

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汽车管件连接螺母断裂失效分析及工艺改进

机电工程技术 2024年第3期53卷 92-94,215页

作者：曹迪何达雄李金任文浩广东省肇庆市质量计量监督检测所广东省汽车配件产业计量测试中心广东肇庆526070 广东骏驰科技股份有限公司广东肇庆526000

汽车管件连接螺母在汽车上起到管件连接、紧固和密封等作用,广泛应用在汽车的供油、供水、供气等相关系统中,对汽车各系统的正常运行和行驶安全起到重要作用。然而,在汽车行驶过程中,管件连接螺母容易受到高温、高压、震动等恶劣环境的... 详细信息

汽车管件连接螺母在汽车上起到管件连接、紧固和密封等作用,广泛应用在汽车的供油、供水、供气等相关系统中,对汽车各系统的正常运行和行驶安全起到重要作用。然而,在汽车行驶过程中,管件连接螺母容易受到高温、高压、震动等恶劣环境的影响,导致松动、渗漏、疲劳裂纹、断裂等故障,对汽车质量和驾乘人员安全造成较大影响。通过使用扫描电镜、硬度计、工业CT等设备对断裂失效的管件连接螺母进行全面分析,找出了断裂的根本原因,并确定了存在问题的工艺参数。最后,对汽车管件连接螺母的成型工艺参数进行了优化,有效避免了由于微裂纹产生而导致的失效,提升了管件连接螺母的质量,保障了驾乘人员的安全。本研究对于分析螺母类零件断裂失效原因并解决实际问题具有指导意义。

关键词：螺母断裂失效工艺改进微观形貌工业CT

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H5亚型禽流感病毒病毒样颗粒的制备及鉴定

养禽与禽病防治 2024年第3期 11-18页

作者：董楠刘郁夫杨小云谭银娟欧阳征亮陈瑞爱农业农村部兽用生物制品工艺技术重点实验室广东省兽用生物制品技术研究与应用企业重点实验室肇庆大华农生物药品有限公司广东肇庆526238 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司广东肇庆526238 肇庆学院生命科学学院广东肇庆526060 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心广东肇庆526238

为构建H5亚型禽流感病毒病毒样颗粒,研制新型基因工程疫苗。利用杆状病毒一昆虫细胞表达系统,在Sf9细胞中共表达H5亚型禽流感病毒HA蛋白和M1蛋白。将H5亚型禽流感病毒的HA基因和M1基因分别克隆至pFastBac-dual载体PH和P10启动子下游多... 详细信息

为构建H5亚型禽流感病毒病毒样颗粒,研制新型基因工程疫苗。利用杆状病毒一昆虫细胞表达系统,在Sf9细胞中共表达H5亚型禽流感病毒HA蛋白和M1蛋白。将H5亚型禽流感病毒的HA基因和M1基因分别克隆至pFastBac-dual载体PH和P10启动子下游多克隆位点,获得穿梭质粒pFastBac-H5-M1,再通过蓝白斑筛选获得重组杆粒,将重组杆粒转染至昆虫细胞Sf9中,拯救重组杆状病毒,通过间接免疫荧光、westernblot试验鉴定是否表达特异性蛋白,最后在透射电镜下观察病毒样颗粒的形态。重组H5亚型禽流感病毒HA基因和M1基因的杆状病毒,在Sf9细胞中盲传3代后,可在显微镜下观察到杆状病毒感染引起的细胞肿胀破裂等细胞病变;通过间接免疫荧光试验可观察到细胞内绿色荧光信号,证明重组杆状病毒拯救成功;westernblots试验结果显示Sf9细胞中可检测到HA蛋白和M1蛋白,目的条带大小分别为70ku和25ku左右,与预期相符,并且均以分泌上清的形式表达;通过透射电镜可在Sf9细胞上清中观察到与流感病毒结构类似的颗粒。本研究成功构建共表达H5亚型禽流感病毒HA蛋白和M1蛋白的重组杆状病毒,该重组杆状病毒可在Sf9昆虫细胞中组装成与天然流感病毒粒子结构相似的颗粒样物质。

关键词： H5亚型禽流感病毒杆状病毒病毒样颗粒

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城市高层建筑的地基检测技术研究

城市开发 2023年第12期 116-117页

作者：罗敏强肇庆华粤工程检测有限公司怀集分公司

城市高层建筑作为城市建设的重要组成部分,其地基的稳定性对建筑的稳定性、使用寿命和抗震能力等有着重要影响。为确保城市高层建筑的安全稳定运行,实施地基检测是城市高层建筑施工前的一项重要工作。本文从地基检测技术的应用分析、优... 详细信息

城市高层建筑作为城市建设的重要组成部分,其地基的稳定性对建筑的稳定性、使用寿命和抗震能力等有着重要影响。为确保城市高层建筑的安全稳定运行,实施地基检测是城市高层建筑施工前的一项重要工作。本文从地基检测技术的应用分析、优化方案以及实践价值三个方面,分析阐述城市高层建筑的地基检测技术。

关键词：城市高层建筑地基检测高层建筑施工抗震能力优化方案使用寿命稳定性安全稳定运行

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珠三角区域水资源生态足迹动态分析与预测

人民珠江 2024年第5期45卷 34-45页

作者：牛亚朝罗柱王强付志君徐承毅广东建科源胜工程检测有限公司广东东莞523710 广东省建筑科学研究院集团股份有限公司广东广州510500 珠江水利委员会珠江水利科学研究院广东广州510611

水资源的短缺和过度开发制约着大多数地区的可持续发展,为分析水资源可持续利用水平,基于水资源生态足迹法,通过指标计算法(水资源生态经济协调度、水资源可持续利用水平、人均万元GDP水资源生态足迹)动态分析了2010—2022年珠三角区域... 详细信息

水资源的短缺和过度开发制约着大多数地区的可持续发展,为分析水资源可持续利用水平,基于水资源生态足迹法,通过指标计算法(水资源生态经济协调度、水资源可持续利用水平、人均万元GDP水资源生态足迹)动态分析了2010—2022年珠三角区域各地市水资源可持续利用情况,同时构建GM(1,1)灰色预测模型模拟未来10 a该区域人均水资源生态足迹的演变情况,结果表明:从整体趋势来看,2010—2022年各地市人均水资源生态足迹都有所下降,其中下降趋势最明显的为中山市,下降幅度达到了47.01%;从时间变化上看,珠三角区域各地市的水资源承载力出现较大的差异而呈波动变化;肇庆市的水资源经济协调度较差;佛山市的水资源压力较大,处于不可持续水平;各地市的人均万元水资源生态足迹值都随年份呈下降趋势,未来10 a该区域人均水资源生态足迹呈稳定下降趋势。研究成果可为未来该地区水资源可持续利用和缓解生态环境压力提供决策依据。

关键词：水资源生态足迹水资源承载力灰色预测模型珠三角区域

火焰原子吸收光谱法测定水性食品油墨中铜与铅的溶出量

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包装学报 2024年第2期16卷 1-7页

作者：曹瑜钟泽辉林锐斌唐聪湖南工业大学包装与材料工程学院湖南株洲412007 广东天龙油墨有限公司广东肇庆526000

为探究水性油墨和印刷纸杯中可溶性铅和铜的溶出量,有效控制重金属迁移的安全风险,提出基于火焰原子吸收光谱法测定铜与铅元素的溶出量方法。先配制两种水性食品油墨即深红油墨和深绿油墨,并分析其性能,然后采用火焰原子吸收光谱法测定... 详细信息

为探究水性油墨和印刷纸杯中可溶性铅和铜的溶出量,有效控制重金属迁移的安全风险,提出基于火焰原子吸收光谱法测定铜与铅元素的溶出量方法。先配制两种水性食品油墨即深红油墨和深绿油墨,并分析其性能,然后采用火焰原子吸收光谱法测定两种油墨和印刷纸杯中铜和铅的溶出量。实验结果表明:两种油墨的物理状态较为稳定,铜与铅元素在检测中质量浓度与光谱强度线性关系良好,其相对标准偏差分别为1.64%与2.24%,回收率分别在94.0%~101.0%和91.0%~94.8%之间;时间和温度对重金属溶出有较大影响,100℃条件下2 h的铅与铜溶出量分别是25℃条件下24 h铅与铜的8.3与2.36倍;深红墨的安全性高于深绿墨,所配制油墨及纸杯中铅与铜元素的溶出量在高温或长时间使用下存在超标的风险,因而需要严格控制材料制品与食物接触的时间和温度。所建立的方法快速简单、经济环保,可满足企业日常检验的要求。

关键词：火焰原子吸收光谱法食品接触材料水性油墨印刷纸杯重金属溶出量

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建筑材料检测中影响检测结果的关键因素研究

中国厨卫 2023年第12期22卷 91-93页

作者：钟福健肇庆华粤工程检测有限公司广东肇庆526060

建筑材料是构筑社会基础设施和个人住宅的基石,其质量和性能直接影响着建筑工程的安全、稳定和持久性。文章探讨了影响建筑材料检测结果的关键因素。检测操作过程中的因素包括检测环境(如温度、湿度、光照等)、检测人员的技能和经验,以... 详细信息

建筑材料是构筑社会基础设施和个人住宅的基石,其质量和性能直接影响着建筑工程的安全、稳定和持久性。文章探讨了影响建筑材料检测结果的关键因素。检测操作过程中的因素包括检测环境(如温度、湿度、光照等)、检测人员的技能和经验,以及遵守检测程序和协议。综合考虑这些因素,可以确保建筑材料检测结果的准确性和可靠性,从而提高建筑工程的质量和安全性。

关键词：建筑材料检测影响检测结果