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慢性不完全睡眠剥夺对小鼠卵巢储备功能的影响

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中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 574-578页

作者：潘烨栋周晟王严慧张杨常柳燕杨素荣复旦大学基础医学院药理学系上海200032

目的探讨慢性不完全睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对小鼠卵巢储备功能的影响及其可能作用机制。方法16只SPF级7~8周龄雌性C57BL/6小鼠,适应性饲养1周后,简单随机化分为对照组和SD组,每组8只,其中SD组小鼠每天7∶00~10∶00采用剥夺杆... 详细信息

目的探讨慢性不完全睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对小鼠卵巢储备功能的影响及其可能作用机制。方法16只SPF级7~8周龄雌性C57BL/6小鼠,适应性饲养1周后,简单随机化分为对照组和SD组,每组8只,其中SD组小鼠每天7∶00~10∶00采用剥夺杆进行慢性不完全SD,共计40 d。在实验开始前与结束前的9 d内每天进行阴道脱落细胞涂片检查,记录动情周期。于第40天通过酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测血清雌二醇、孕酮、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)和褪黑素(melatonin,MT)水平。取卵巢,计算卵巢指数,并通过切片苏木精-伊红染色计数原始卵泡数量。免疫组织化学方法检测灌注取脑后小鼠视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN)脑区神经元c-Fos表达情况。结果相比于对照组,SD组小鼠动情周期出现紊乱趋势。SD组小鼠雌二醇[(20.19±3.67)ng/L]、孕酮[(2.88±0.53)μg/L]、FSH[(13.42±2.36)U/L]水平明显低于对照组小鼠[(24.66±2.15)ng/L,P=0.010;(3.43±0.49)μg/L,P=0.049;(17.01±1.49)U/L,P=0.003]。SD组小鼠LH和MT水平低于对照组小鼠,但差异均无统计学意义(均P>0.05)。SD组小鼠卵巢原始卵泡数量与对照组小鼠相比,差异无统计学意义(P>0.05),但是SD组卵母细胞形态不佳,颗粒细胞排列紊乱,闭锁卵泡数量减少,卵巢纤维化明显。免疫组织化学染色观察到SD组小鼠SCN区神经元c-Fos蛋白表达上调。结论连续40 d每天进行3 h SD后小鼠卵巢储备功能受损,可能与SCN过度激活有关。

关键词：睡眠剥夺卵巢储备功能动情周期

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灵芝孢子油的药效物质基础研究进展

菌物研究 2024年第1期22卷 79-87页

作者：林志彬北京大学基础医学院药理学系北京100191

灵芝孢子油是以灵芝孢子粉为原料,通过破壁技术提取出的一种油脂。药理学研究发现灵芝孢子油具有调节免疫功能、抗肿瘤、抗炎、抗氧化以及抗衰老等多种生物活性,但目前关于灵芝孢子油的药效物质基础研究尚少。文中在回顾文献的基础上,... 详细信息

灵芝孢子油是以灵芝孢子粉为原料,通过破壁技术提取出的一种油脂。药理学研究发现灵芝孢子油具有调节免疫功能、抗肿瘤、抗炎、抗氧化以及抗衰老等多种生物活性,但目前关于灵芝孢子油的药效物质基础研究尚少。文中在回顾文献的基础上,总结灵芝孢子油的提取方法,探讨灵芝孢子油药效的物质基础,以期为灵芝孢子油的研究、开发、产品质量控制和应用提供科学依据。

关键词：灵芝孢子油药理活性提取方法检测方法

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灵芝抗辐射作用研究进展

菌物研究 2024年第1期22卷 88-93页

作者：管允鹤杨宝学李敏北京大学基础医学院药理学系北京100191

长时间暴露于X射线、γ射线等电离辐射和紫外线等非电离辐射之下,将引发细胞损伤、突变和癌症等健康问题。近年来,研究人员对灵芝抗辐射作用的研究取得了较大进展。现有研究认为,灵芝及其提取物可有效减小辐射对人体组织的损伤,缓解辐... 详细信息

长时间暴露于X射线、γ射线等电离辐射和紫外线等非电离辐射之下,将引发细胞损伤、突变和癌症等健康问题。近年来,研究人员对灵芝抗辐射作用的研究取得了较大进展。现有研究认为,灵芝及其提取物可有效减小辐射对人体组织的损伤,缓解辐射症状,改善因辐射引起的人体生理功能紊乱,其作用机制主要涉及减少DNA损伤、降低机体活性氧水平和调节机体免疫功能等途径。文中对灵芝抗辐射作用及其机制的研究结果进行了总结及综述,旨在为灵芝在防护辐射损伤方面的应用提供理论依据。

关键词：灵芝抗辐射 DNA损伤活性氧免疫功能

单独应用长效二氢吡啶类钙通道阻滞剂降压会增加交感神经兴奋性和血压波动性吗?钙通道阻滞剂与哪类降压药合用更合理?

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中华高血压杂志（中英文） 2024年第2期32卷 115-118页

作者：陈红上海交通大学医学院药理学与化学生物学系上海200025

林甲宜(安徽省九成医院心内科,安徽安庆 246200)心率变异性分析是评估自主神经活动的可靠无创检测方法,其频域分析中的低频谱功率(low frequency power,LF)与高频谱功率(high frequency power,HF)比值升高表明交感神经活性增高。研究发... 详细信息

林甲宜(安徽省九成医院心内科,安徽安庆 246200)心率变异性分析是评估自主神经活动的可靠无创检测方法,其频域分析中的低频谱功率(low frequency power,LF)与高频谱功率(high frequency power,HF)比值升高表明交感神经活性增高。研究发现,长期应用短效硝苯地平增加血浆和尿中去甲肾上腺素水平,升高LF/HF,缓释硝苯地平仅轻微增加去甲肾上腺素水平和LF/HF。

关键词：交感神经活性心率变异性分析去甲肾上腺素钙通道阻滞剂自主神经活动血压波动性无创检测降压药

炎症部位定植水凝胶益生菌治疗炎性肠病的效果观察

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第7期44卷 883-890页

作者：徐唯李蒙王昊泽崔凯肖泽宇上海大学生命科学学院上海200444 上海交通大学医学院药理学与化学生物学系上海200025

目的·构建负载在富含负电羟基的高聚物聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)/海藻酸盐(alginate,ALG)水凝胶(PVA-ALG)上的益生菌(Escherichia coli Nissle1917,EcN)体系(EcN@PVA-ALG),探究其在结肠炎症部位定植性及其对葡聚糖硫酸钠盐(dextran sulfate sodium salt,DSS)诱导的炎性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的治疗效果。方法·将EcN悬液加入PVA-ALG水凝胶中,过筛离心后得到EcN@PVA-ALG水凝胶益生菌复合物,使用流变仪验证PVAALG水凝胶的合成。利用电位仪检测EcN@PVA-ALG的表面电荷,荧光显微镜观察PVA-ALG上的EcN负载情况。通过酶标仪检测EcN@PVA-ALG在600 nm处的吸光度;同时,取EcN@PVA-ALG复合物悬液进行细菌平板计数,检测EcN@PVA-ALG内EcN的生长活力。采用CCK-8法评估EcN@PVA-ALG对HEK293细胞增殖的抑制作用。利用活体成像系统(IVIS)分析PVA-ALG对炎症结肠的富集作用,观察其炎症靶向性能;将EcN负载在PVA-ALG上,再用IVIS观察EcN@PVA-ALG对炎症结肠的富集,观察其在炎症部位的定植能力。建立DSS诱导的IBD小鼠模型,EcN@PVA-ALG组(n=5)每天灌肠给予1×10^(8)CFU的EcN@PVA-ALG,连续5 d;另设PVA-ALG组、EcN组、PBS组和健康对照组,每组5只。治疗期间,每天记录小鼠的体质量。治疗结束后处死小鼠,取其结肠组织,测量结肠长度;进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分;检测炎症细胞因子的水平,包括肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β);通过苏木精-伊红染色(H-E染色)进行结肠组织的病理评估。结果·PVA-ALG和EcN@PVA-ALG均带负电。EcN成功负载于PVA-ALG,并且PVA-ALG不影响EcN的生长活力;同时,PVA-ALG对正常细胞也具有良好的安全性。与健康对照组相比,PVA-ALG对炎症结肠组织具有超过2倍的富集效果。体内外实验发现,负载EcN的EcN@PVA-ALG复合物对炎症组织的富集效果比未加任何修饰的EcN高8倍。EcN@PVA-ALG治疗后,小鼠体质量迅速恢复,DAI的上升被显著抑制,结肠长度与健康小鼠相近,促炎细胞因子TNF-α、IL-6水平降低而抗炎细胞因子IL-10和TGF-β水平升高,结肠组织隐窝结构恢复。结论·相比于未加修饰的EcN,EcN@PVA-ALG促进了EcN在结肠炎症部位的定植,并使其发挥更好的治疗DSS诱导的IBD的功效。

关键词：益生菌水凝胶炎性肠病炎性定植

DDAH1/ADMA促高糖诱导血管内皮细胞线粒体功能障碍

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中国药理学通报 2024年

作者：陈素雅陈慧丽彭锦鸿李年生江俊麟中南大学湘雅药学院药理学系湖南师范大学医学院康复治疗学专业

目的探讨二甲基精氨酸二甲胺水解酶1（dimethylarginine dimethylamino hydrolase 1，DDAH1）对高糖诱导的血管内皮细胞线粒体功能障碍及自噬的影响。方法采用JC-1染色检测线粒体膜电位；DCFH-DA荧光探针检测活性氧水平；Hoechst法检... 详细信息

目的探讨二甲基精氨酸二甲胺水解酶1（dimethylarginine dimethylamino hydrolase 1，DDAH1）对高糖诱导的血管内皮细胞线粒体功能障碍及自噬的影响。方法采用JC-1染色检测线粒体膜电位；DCFH-DA荧光探针检测活性氧水平；Hoechst法检测细胞凋亡；Real-time PCR法检测DDAH1 mRNA水平；Western blot检测DDAH1、LC3-I和LC3-II蛋白表达；线粒体探针Mitotracker与LC3细胞免疫荧光共定位法检测线粒体自噬水平；高效液相法检测细胞上清液中非对称二甲基精氨酸（asymmetric dimethylarginine，ADMA）水平。结果高糖处理人脐静脉内皮细胞（HUVECs）48 h明显降低线粒体膜电位，增加活性氧产生，促进细胞凋亡；高糖下调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达，减少Mitotracker与LC3共定位，抑制线粒体自噬。自噬抑制剂3-MA或CQ加重高糖诱导的HUVECs线粒体损伤和细胞凋亡；自噬激动剂RAPA减轻高糖诱导的HUVECs线粒体损伤和凋亡。高糖下调HUVECs DDAH1蛋白表达，增加ADMA水平。DDAH1 siRNA抑制线粒体自噬，降低线粒体膜电位，促进细胞凋亡，而DDAH1过表达则促进线粒体自噬，减轻高糖诱导的HUVECs凋亡。结论高糖诱发内皮细胞线粒体功能损伤与其抑制DDAH1表达，增加ADMA水平，降低线粒体自噬有关。

关键词：二甲基精氨酸二甲胺水解酶1 非对称二甲基精氨酸线粒体自噬线粒体功能障碍血管内皮细胞凋亡

生长分化因子15引发摄食抑制和内脏不适的研究进展

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中国药理学通报 2024年第7期40卷 1206-1210页

作者：郭瑞郭思齐张启春南京中医药大学医学院生理学系江苏南京210023 南京中医药大学药学院药理学系江苏南京210023

生长分化因子15(growth differentiation factor 15,GDF15)是转化生长因子β超家族的成员。先前的研究表明,GDF15与表达在大脑最后区和孤束核的受体结合,激活下游多个与摄食相关的脑区,抑制摄食,降低体质量,展现出治疗肥胖的潜力。但GD... 详细信息

生长分化因子15(growth differentiation factor 15,GDF15)是转化生长因子β超家族的成员。先前的研究表明,GDF15与表达在大脑最后区和孤束核的受体结合,激活下游多个与摄食相关的脑区,抑制摄食,降低体质量,展现出治疗肥胖的潜力。但GDF15也引起恶心、呕吐等内脏不适症状,可能限制其进一步应用。该文将探讨GDF15抑制摄食,引发内脏不适的神经通路以及阻断其内脏不适效应的可能途径。

关键词：生长分化因子15 内脏不适摄食条件性味觉厌恶葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽

萝卜硫素对内皮素-1诱导大鼠平滑肌细胞增殖的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第3期40卷 363-367页

作者：汪晨净裴淑艳王晓坤孙枫郭忠西北民族大学医学部基础医学院药理学教研室甘肃兰州730030

目的研究萝卜硫素(SFN)对内皮素-1(ET-1)诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及其机制。方法将组织贴块法原代培养的VSMC随机分为对照组(正常培养)、模型组(给予0.1μmol·L^(-1 )ET-1处理)和低、中、高剂量实验组(分别给... 详细信息

目的研究萝卜硫素(SFN)对内皮素-1(ET-1)诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及其机制。方法将组织贴块法原代培养的VSMC随机分为对照组(正常培养)、模型组(给予0.1μmol·L^(-1 )ET-1处理)和低、中、高剂量实验组(分别给予5、10、20μmol·L^(-1 )SFN+0.1μmol·L^(-1) ET-1处理)。用噻唑蓝法检测细胞增殖活力,用实时荧光定量聚合酶链反应法测定增殖及凋亡相关基因mRNA表达水平,用荧光探针2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯法检测活性氧(ROS)相对荧光强度,用蛋白质印迹法测定B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)及p53蛋白的表达水平。结果对照组、模型组和低、中、高剂量实验组的细胞增殖活力分别为0.27±0.02、0.50±0.04、0.40±0.03、0.38±0.03和0.34±0.03,Bcl-2 mRNA表达水平分别为1.57±0.28、1.00±0.00、0.87±0.05、0.75±0.08和0.41±0.18,caspase-3 mRNA分别为0.84±0.10、1.00±0.00、1.33±0.10、1.61±0.15和1.83±0.16,ROS相对荧光强度分别为6.05±1.50、31.45±3.12、30.03±1.85、18.39±5.62和17.18±1.97,Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.65±0.02、0.60±0.02、0.49±0.02、0.48±0.03和0.49±0.01,caspase-3蛋白相对表达水平分别为0.03±0.00、0.25±0.01、0.42±0.01、0.46±0.02和0.64±0.03,p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相对表达水平比值分别为0.97±0.05、1.44±0.04、1.62±0.10、2.18±0.05和2.70±0.05,p53蛋白相对表达水平分别为0.20±0.01、0.30±0.01、0.34±0.02、0.37±0.01和0.42±0.01。模型组的上述指标与对照组比较,中、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 SFN可抑制ET-1诱导的VSMC增殖,促进VSMC凋亡,其机制可能与SFN抗氧化、激活p38MAPK及p53依赖的细胞凋亡途径有关。

关键词：萝卜硫素增殖内皮素-1 凋亡血管平滑肌细胞

基于网络药理学和实验验证探讨桦褐孔菌三萜抗宫颈癌HeLa细胞的作用机制

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中国现代应用药学 2024年第3期41卷 313-323页

作者：邵骏菁杨颖王传功张晓平济宁医学院基础医学院山东济宁272067 济宁医学院药理学重点实验室山东济宁272067 山东中医药大学药学院济南250355

目的利用网络药理学和分子对接及体内验证实验探讨桦褐孔菌三萜成分抗宫颈癌HeLa细胞的潜在作用机制。方法基于文献研究结合数据库筛选桦褐孔菌三萜的主要活性成分,寻找活性成分以及HeLa细胞交集靶点,进行PPI网络构建,GO和KEGG富集分析... 详细信息

目的利用网络药理学和分子对接及体内验证实验探讨桦褐孔菌三萜成分抗宫颈癌HeLa细胞的潜在作用机制。方法基于文献研究结合数据库筛选桦褐孔菌三萜的主要活性成分,寻找活性成分以及HeLa细胞交集靶点,进行PPI网络构建,GO和KEGG富集分析,分子对接进行验证。建立HeLa裸鼠模型,桦褐孔菌三萜灌胃给药,裸鼠处死后采用Western blotting检测指标。结果经过筛选得到15个符合条件的活性成分的274个相关联靶点。与2046个HeLa细胞相关靶点取交集,获得104个桦褐孔菌三萜抗HeLa细胞的潜在靶点。通过“药物-成分-靶点-疾病”网络分析,PIK3CA、MAPK3、MDM2、AR、CCND1可能是桦褐孔菌三萜纯化物抗HeLa细胞的潜在靶点。KEGG富集分析结果显示,PI3K/Akt信号通路、Ras信号通路、MAPK信号通路等多个信号通路可能是桦褐孔菌三萜抗HeLa细胞的潜在作用途径。分子对接结果显示,核心成分与关键靶点均有较强的潜在结合能力。体内实验结果表明桦褐孔菌三萜可抑制模型小鼠肿瘤生长,调节模型小鼠的免疫功能,促进模型小鼠肿瘤凋亡,抑制PI3K和AKT的磷酸化。结论基于网络药理学、分子对接和体内验证方法,证明了桦褐孔菌三萜通过多组分、多靶点发挥抗HeLa细胞的作用,为桦褐孔菌的进一步研发及其抗肿瘤作用机制的探讨提供参考。

关键词：桦褐孔菌三萜 HeLa细胞网络药理学分子对接 PI3K/Akt通路 HeLa裸鼠模型