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b型流感嗜血杆菌疫苗及新型疫苗或联合疫苗的免疫原性评价方法

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中国生物制品学杂志 2015年第10期28卷 1097-1104页

作者：朱朗刘一非陆玮林纪胜高强蔡芳北京科兴生物制品有限公司北京100085 美国阿拉巴马大学伯明翰分校病理学系NIH呼吸道病原参考实验室美国阿拉巴马州伯明翰35294 北京科兴中维生物技术有限公司北京100085 北京市新型人用预防性疫苗工程技术研究中心北京100085

b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza type b,Hib)是全球范围内引起3个月到5岁龄儿童肺炎、脑膜炎和败血症等严重疾病的重要病原菌。接种疫苗是唯一有效的预防和控制Hib引起疾病的公共卫生措施,将Hib结合疫苗纳入儿童常规免疫程序的... 详细信息

b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza type b,Hib)是全球范围内引起3个月到5岁龄儿童肺炎、脑膜炎和败血症等严重疾病的重要病原菌。接种疫苗是唯一有效的预防和控制Hib引起疾病的公共卫生措施,将Hib结合疫苗纳入儿童常规免疫程序的国家,Hib发病率和携带率均明显降低。本文现对Hib疫苗种类、免疫学特性、临床效力以及Hib新型疫苗或联合疫苗的免疫原性评价方法作一综述。

关键词： b型流感嗜血杆菌疫苗免疫原性

人脑膜炎球菌参考血清 Men10的制备及其抗A、C、Y、W135群脑膜炎血清群荚膜多糖抗体IgG含量和体外杀菌试验滴度

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第6期34卷 459-464页

作者：赵志强王欣茹李亚南王浩刘方蕾袁菲乔瑞洁蒋井明何彦林林纪胜叶强谢贵林国药中生兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心730046 中国食品药品检定研究院美国阿拉巴马大学伯明翰分校病理学系呼吸道病原参考实验室、WHO肺炎链球菌参考实验室中国生物技术股份有限公司北京100029

目的：制备人脑膜炎球菌参考血清，对其中A、C、Y、W135血清群的抗荚膜多糖抗体IgG含量和体外杀菌试验（ serum bactericidal assay ， SBA）滴度进行定值。方法用4价A、C、Y、W135群脑膜炎荚膜多糖疫苗免疫20名健康成人，采集免疫后的... 详细信息

目的：制备人脑膜炎球菌参考血清，对其中A、C、Y、W135血清群的抗荚膜多糖抗体IgG含量和体外杀菌试验（ serum bactericidal assay ， SBA）滴度进行定值。方法用4价A、C、Y、W135群脑膜炎荚膜多糖疫苗免疫20名健康成人，采集免疫后的血浆进行混合、去纤维蛋白原、过滤、分装、冻干，得到人脑膜炎球菌参考血清Men10。在兰州生物制品研究所有限责任公司（ LIBP ）实验室，用标准检测人血清中抗脑膜炎球菌荚膜多糖抗体IgG定量ELISA方法，以国际标准血清CDC1992为标准，对其中4个血清群抗荚膜多糖抗体IgG含量定值；以临时定值的Men10和CDC1992分别为标准检测12份美国疾病预防控制中心（ CDC）的校正血清、56份4价多糖疫苗免疫后的血清，通过比较对定值的准确性进一步验证。同时以体外杀菌试验测定针对4个血清群的SBA滴度。结果制备了4000支（0．5 ml/支）冻干人脑膜炎球菌参考血清Men10。该血清HBV、HCV、HIV、梅毒螺旋体检测均阴性，残留水分含量2．3％。以Men10为标准检测的12份CDC校正血清和56份4价多糖疫苗免疫后的血清群抗荚膜多糖抗体结果，与以CDC1992为标准检测的结果均具有良好的直线相关关系（ r＝0．99，P＜0．05）；以Men10为标准检测的CDC1992的4个血清群抗荚膜多糖抗体的新值与其原定值比较，各血清型的误差均＜10％。同时确立了Men10中各血清群的体外杀菌试验滴度。结论 LIBP成功制备了人脑膜炎球菌参考血清Men10并完成了对其中的4个血清群抗荚膜多糖抗体IgG含量的准确定值，并确定了其中各群别抗体的体外杀菌试验滴度。

关键词：人脑膜炎球菌参考血清抗体含量酶联免疫吸附试验血清杀菌试验

人肺炎球菌参考血清09CS的制备及其中13个肺炎球菌结合疫苗血清型抗体的IgG含量和调理吞噬滴度

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中国生物制品学杂志 2014年第12期27卷 1554-1559,1564页

作者：赵志强王欣茹石继春王浩刘方蕾乔瑞洁吴兵王弢何彦林叶强林纪胜谢贵林兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046 中国食品药品检定研究院北京100050 美国阿拉巴马大学伯明翰分校病理学系呼吸道病原参考实验室伯明翰35294 中国生物技术股份有限公司北京100029

目的制备人肺炎球菌参考血清,对其中13价肺炎球菌结合疫苗(pneumococcal conjugate vaccine,PCV)血清型(1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F型)的抗荚膜多糖抗体Ig G含量和调理吞噬滴度进行定值。方法用23价肺炎荚膜... 详细信息

目的制备人肺炎球菌参考血清,对其中13价肺炎球菌结合疫苗(pneumococcal conjugate vaccine,PCV)血清型(1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F型)的抗荚膜多糖抗体Ig G含量和调理吞噬滴度进行定值。方法用23价肺炎荚膜多糖疫苗免疫20名健康成人,采集免疫后血浆,进行混合、去纤维蛋白原、过滤、分装、冻干,制备人肺炎球菌参考血清09CS。在WHO细菌性呼吸道病原参考实验室(University of Alabama at Birmingham,UAB)和兰州生物制品研究所有限责任公司(Lanzhou Institute of Biological Products,LIBP)实验室,采用WHO推荐的Pn PS ELISA法,以国际标准血清89SF为标准,对其中13价PCV血清型抗荚膜多糖抗体Ig G含量定值;以临时定值的09CS为标准,检测12份WHO校正血清、16份LIBP质控血清和89SF,对定值的准确性进一步验证。同时以调理吞噬杀菌试验(opsonophagocytic killing assay,OPA)测定针对13个血清型的调理吞噬滴度。结果制备了5 000支(0.5 ml/支)冻干人肺炎球菌参考血清09CS,残留水分含量2.3%。确定了09CS中13价PCV血清型抗荚膜多糖抗体Ig G含量的临时定值;以09CS为标准检测的12份WHO校正血清和16份LIBP质控血清的13价PCV血清型抗荚膜多糖抗体结果,与以89SF为标准检测的结果,均具有良好的直线相关关系(r≈1.00,P参考血清09CS,完成了对其中的13价PCV血清型抗荚膜多糖抗体Ig G含量的准确定值,并确定了调理吞噬滴度。

关键词：肺炎球菌参考血清免疫球蛋白G 酶联免疫吸附试验调理吞噬杀菌试验

人血清中A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖IgG抗体含量ELISA检测方法的建立

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中国生物制品学杂志 2014年第11期27卷 1448-1453页

作者：王欣茹赵志强李亚南刘方蕾于旭博孔素娟范锋锋林纪胜叶强谢贵林兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046 中国食品药品检定研究院北京100050 美国阿拉巴马大学伯明翰分校病理学系呼吸道病原参考实验室伯明翰35294 中国生物技术股份有限公司北京100029

目的建立人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖Ig G抗体含量的ELISA定量检测方法,并进行验证。方法筛选适用的酶标板,优化抗原包被浓度,确定ELISA检测过程的关键条件,对建立的ELISA方法的特异性、线性、准确性、精密度、最低检... 详细信息

目的建立人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖Ig G抗体含量的ELISA定量检测方法,并进行验证。方法筛选适用的酶标板,优化抗原包被浓度,确定ELISA检测过程的关键条件,对建立的ELISA方法的特异性、线性、准确性、精密度、最低检测值和稳定性进行验证,并建立实验室质控血清的质控检测范围。结果酶标板的板内CV为9.8%,板间CV为16.4%,符合检测使用要求。免疫血清经多糖吸收后,群特异性抗体含量与同群多糖吸收剂量呈明显的剂量依赖关系。12份美国CDC质控血清中各群Ig G抗体含量与血清的稀释度呈负相关,相关系数（r）和斜率（slope）均接近-1,线性关系良好;检测结果与CDC公布数据一致性良好,一致性相关系数A、C、W135、Y群分别为0.912 5、0.939 6、0.963 7和0.920 6,准确度较好。实验室内部质控血清Men20中各群Ig G抗体含量试验内和试验间精密度分别小于10%和20%,精密度较好;各血清群别的CV值均〈30%,稳定性较好;A、C、Y、W135群多糖Ig G抗体含量最低检测值分别为0.092、0.118、0.067和0.035μg/ml,质控血清的检测范围分别为：92.49~36.53、37.29~17.69、66.18~25.54和50.15~23.31μg/ml。结论建立了标准化的检测人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖Ig G抗体含量的定量ELISA方法,并确定了实验室日常用质控血清Men20的质控检测值范围。

关键词：脑膜炎球菌荚膜多糖抗体酶联免疫吸附试验

Possible involvement of integrin signaling pathway in the process of recovery from restraint stress in rats

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Neuroscience Bulletin 2007年第4期23卷 229-235页

作者：高玉振郭试瑜印其章 Xiang—Qin CUI 久光正蒋星红苏州大学医学院神经生物学教研室苏州215123 苏州大学衰老与神经疾病实验室苏州215123 昭和大学医学部第一生理学教室东京142855日本阿拉巴马大学伯明翰分校生物统计学系阿拉巴马35294—0022美国

Objective To search novel genes or pathways involved in the recovery process after restraint stress in rats. Methods We compared the hypothalamus transcriptional profiles of two different recovery patterns （fast recovery vs slow recovery） from restraint stress in rats using oligonucleotide microarray, the recovery pattern was determined by the decrement of plasma adrenocorticotropic-hormone （ACTH） and corticosterone levels during one hour recovery period after stress. A real-time quantitative RT-PCR was applied to validate the differential expressed genes. Results Analysis of the microarray data showed that most of genes were not differentially expressed between fast recovery group and slow recovery group. Among the differentially expressed genes we found that talin, together with serine/threonine protein phosphatase PPl-beta catalytic subunit （PP-1B） and integrin α-6 precursor （VLA-6） genes, were at least 1.5 fold upregulated in the fast recovery group, while junctional adhesion molecule 1 （F11r） was 1.5 fold down-regulated in the fast recovery group. Conclusion The results implied that integrin signaling pathway may be involved in the recovery from restraint stress in rats. The present study provided a global overview of hypothalamus transcriptional profiles during the process of recovery from the restraint stress in rats. The integrin signaling pathway seems to be involved in the recovery process, which deserves further study to clarify the integrin-mediated recovery mechanism after restraint stress.

关键词： physical restraint adrenocorticotropic hormone corticosterone post-stress recovery oligonucleotide microarray

A、C、Y、W135群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法的建立及其验证

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中国生物制品学杂志 2014年第11期27卷 1435-1442页

作者：乔瑞洁赵志强王浩王欣茹刘佳刘方蕾吴兵于旭博林纪胜李亚南叶强谢贵林兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046 美国阿拉巴马大学伯明翰分校病理系NIH细菌性呼吸道病原参考实验室伯明翰35294 中国食品药品检定研究院北京100050 中国生物技术集团公司北京100029

目的建立A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法 (serum bactericidal assay,SBA),并进行验证。方法对SBA中活菌收获时间、靶菌的制备、反应时间及补体进行优化,并确定质控血清Men10的质控范围。对优化后的方法进... 详细信息

目的建立A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法 (serum bactericidal assay,SBA),并进行验证。方法对SBA中活菌收获时间、靶菌的制备、反应时间及补体进行优化,并确定质控血清Men10的质控范围。对优化后的方法进行特异性、线性、精密度验证。结果确定A600值为0.5~0.8时为收获细菌最佳收获时间;冻存菌种可替代新鲜制备菌种作为靶菌;最佳杀菌反应时间为60 min;17830和84321N批补体均可用于试验。质控血清Men10的质控范围A群为521~4 689,C群为1 047~9 423,W135群为1 779~16 008,Y群为1 416~12 741。A、C、W135和Y同群多糖吸收血清样品后能够抑制≥80%的同群SBA滴度,而异群多糖则实验内相同样品检测结果 CV≤25%,实验间相同样品的95%的检测结果落在检测值中位数3倍(一个稀释度)的范围内,CV≤40%,不同实验室间相同样品的检测结果至少有70%落在美国CDC公布结果的3倍(一个稀释度)范围内。结论建立了标准化的具国际间可比性的A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌SBA,该方法特异性、线性和精密度良好。

关键词：血清抗体杀菌试验脑膜炎奈瑟菌

表面分析法对直接印模及石膏模型扫描获得数字模型的一致性分析

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南京医科大学学报（自然科学版） 2016年第9期36卷 1132-1135页

作者：李青奕 Chung How Kau 南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室南京医科大学附属口腔医院正畸科江苏南京210029 阿拉巴马大学伯明翰分校牙学院正畸系美国阿拉巴马州伯明翰AL35294

目的：用表面分析方法对三维激光扫描仪分别扫描石膏模型和印模获得的数字模型的准确性和一致性进行比较。方法：对20个病例分别采用两种方法采集上颌和下颌数字模型。将同一病例的两种数字模型输入Rapid Form软件以最佳配对算法进行叠... 详细信息

目的：用表面分析方法对三维激光扫描仪分别扫描石膏模型和印模获得的数字模型的准确性和一致性进行比较。方法：对20个病例分别采用两种方法采集上颌和下颌数字模型。将同一病例的两种数字模型输入Rapid Form软件以最佳配对算法进行叠加,并采用表面分析方法对叠加结果加以分析。测量两模型上各点的线性距离,在容差设定为0.05、0.10、0.25、0.50、0.75、1.00 mm的情况下,确定相关模型之间的重叠百分率。此外,对6个预定的线性测量指标也进行测量和分析。结果：平均上颌模型的线性距离是0.097~0.191 mm,而下颌模型的平均线性距离是0.092~0.257 mm。在0.50 mm容差值水平,可以得到超过94%的表面相关性。组内相关系数（intraclass correlation coefficients,ICCs）统计表明两种方法获得的数字模型间有很好的一致性（0.972≤ICCs≤0.998）。结论：两种方法生成的数字模型在软件中有很好的重叠,经表面分析方法分析统计两者一致性较好,表明直接从印模获取数字模型是可行的。

关键词：表面分析数字模型石膏模型

HL-60分化细胞表面标志、活性及其对肺炎链球菌调理吞噬杀菌能力的动态变化

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微生物学免疫学进展 2012年第5期40卷 10-14页

作者：王浩乔瑞洁史晓玲林纪胜谢贵林赵志强兰州生物制品研究所有限责任公司兰州730046 阿拉巴马大学伯明翰分校病理系伯明翰亚拉巴马美国35294

目的分析HL-60分化细胞的表面标志、活性及其对肺炎球菌调理吞噬杀菌能力的动态变化。方法以流式细胞仪连续监测分化1～7 d的HL-60细胞表面标志CD11b、CD35和CD71的表达以及活细胞、凋亡细胞和死亡细胞的比例,同时用09CS、QC2、B、C和F ... 详细信息

目的分析HL-60分化细胞的表面标志、活性及其对肺炎球菌调理吞噬杀菌能力的动态变化。方法以流式细胞仪连续监测分化1～7 d的HL-60细胞表面标志CD11b、CD35和CD71的表达以及活细胞、凋亡细胞和死亡细胞的比例,同时用09CS、QC2、B、C和F 5份质控血清以调理吞噬杀菌试验检测肺炎链球菌血清型6B、7F、14和23F的杀菌滴度。结果分化3～6 d的HL-60细胞表面标志、活细胞比例可达到实验室要求,5份质控血清的调理吞噬杀菌滴度稳定而且在质控范围之内。结论分化3～6 d的HL-60细胞可以用于评价肺炎链球菌疫苗免疫血清的调理吞噬杀菌试验,为调理吞噬杀菌试验的建立和标准化提供了依据。

关键词： HL-60细胞分化细胞表面标志肺炎链球菌调理吞噬杀菌试验

23价肺炎链球菌多糖疫苗和13价肺炎链球菌结合疫苗在成年人中的应用

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国际生物制品学杂志 2015年第5期38卷 239-245页

作者：朱朗陈磊林纪胜高强王见冬王新立蔡芳北京科兴生物制品有限公司研发中心 100085 北京科兴生物制品有限公司研发中心肺炎事业部 100085 美国阿拉巴马大学伯明翰分校病理学系NIH细菌性呼吸道病原参考实验室 35294 北京科兴中维生物技术有限公司 100085 北京市新型人用预防性疫苗工程技术研究中心 100085

肺炎链球菌是引起全球不同年龄人群,尤其是幼儿和老年人肺炎、败血症和脑膜炎等严重疾病的重要病原菌,由肺炎链球菌导致的这些疾病可以通过疫苗进行预防.在将肺炎链球菌疫苗纳入国家免疫计划的国家,儿童肺炎链球菌病的发病率以及疫苗型... 详细信息

肺炎链球菌是引起全球不同年龄人群,尤其是幼儿和老年人肺炎、败血症和脑膜炎等严重疾病的重要病原菌,由肺炎链球菌导致的这些疾病可以通过疫苗进行预防.在将肺炎链球菌疫苗纳入国家免疫计划的国家,儿童肺炎链球菌病的发病率以及疫苗型肺炎链球菌的携带率大大降低,且可在未免疫人群中产生间接保护作用.此文对23价肺炎链球菌多糖疫苗和1 3价肺炎链球菌结合疫苗在成年人中的应用进行探讨.

关键词：肺炎球菌菌苗多糖类,细菌疫苗,结合接种