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农杆菌介导的人参链格孢（Alternaria panax）遗传转化体系的构建

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植物病理学报 2024年

作者：兰金玲张琳徐静赫荣琳高洁吉林农业大学植物保护学院中国科学院天津工业生物技术研究所

人参链格孢(Alternaria panax)是人参黑斑病的主要致病菌之一，可侵染人参地上部的叶片、茎秆和果实，引起叶枯、茎秆坏死及果实干瘪，对人参产量及品质影响很大。本研究以人参链格孢为研究对象，建立根癌农杆菌介导的遗传转化方法。为... 详细信息

人参链格孢(Alternaria panax)是人参黑斑病的主要致病菌之一，可侵染人参地上部的叶片、茎秆和果实，引起叶枯、茎秆坏死及果实干瘪，对人参产量及品质影响很大。本研究以人参链格孢为研究对象，建立根癌农杆菌介导的遗传转化方法。为了进一步验证遗传转化体系的可行性，对人参链格孢赖氨酸合成相关基因ApLYS2进行了敲除。结果表明，当共培养时间为48h，共培养温度为22℃，农杆菌菌液浓度OD600为0.6，原生质体浓度为106个·mL-1时，转化效率最高，转化率约为23个/106个·mL-1，潮霉素抗性基因成功转入人参链格孢中；采用本研究所构建的遗传转化方法，成功实现了赖氨酸合成相关基因ApLYS2的敲除。所获得的基因缺失突变体ΔAplys2-4和ΔAplys2-7无法在缺乏赖氨酸的培养基上生长，外源添加赖氨酸突变体生长得到恢复。本研究成功构建了农杆菌介导的人参链格孢遗传转化体系并以赖氨酸合成相关基因ApLYS2的成功敲除进行了验证，为其致病机制研究提供了有效的技术手段。

关键词：人参链格孢农杆菌介导转化条件优化基因敲除

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生物多样性信用的概念、原则、交易和挑战

生物多样性 2024年第2期32卷 150-160页

作者：彭昀月靳彤张小全大自然保护协会(美国)北京代表处北京100600

为应对生物多样性资金缺口、遏止与扭转全球生物多样性丧失,生物多样性信用以碳信用为蓝本应运而生。与以生物多样性损失为前提的生物多样性抵消不同,生物多样性信用是一种可测量、追踪和交易的,能为生物多样性带来净效益的经济工具。... 详细信息

为应对生物多样性资金缺口、遏止与扭转全球生物多样性丧失,生物多样性信用以碳信用为蓝本应运而生。与以生物多样性损失为前提的生物多样性抵消不同,生物多样性信用是一种可测量、追踪和交易的,能为生物多样性带来净效益的经济工具。本文旨在介绍生物多样性信用的概念内涵,详细阐释了其与生物多样性抵消和碳信用的概念异同,在参考高质量碳信用的基础上汇总了生物多样性信用的原则,包含其核算方法和治理体系,同时介绍了目前全球生物多样性信用市场,提供了不同交易项目的具体实践案例,并梳理了生物多样性信用在定价、是否会成为企业漂绿的工具、监管与治理体系以及与碳信用的兼容等4方面的问题和挑战。未来,生物多样性信用挑战与机遇并存。

关键词：生物多样性丧失生物多样性信用生物多样性抵消碳信用市场机制

西湖龙井茶对高脂高果糖饮食小鼠肠道菌群的调节作用

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2024年第3期50卷 481-494页

作者：胡俐泉屠琳玥赵悦伶谢亨通徐安安徐平周继红王岳飞浙江大学农业与生物技术学院茶叶研究所浙江杭州310058

越来越多的研究表明,肠道菌群及其介导的微生态环境在高脂高果糖饮食引起的相关代谢障碍中发挥着关键作用。本研究首先探究了西湖龙井茶对常规饮食小鼠肠道菌群的作用,随后构建高脂高果糖饮食小鼠模型,进一步研究西湖龙井对预防高脂高... 详细信息

越来越多的研究表明,肠道菌群及其介导的微生态环境在高脂高果糖饮食引起的相关代谢障碍中发挥着关键作用。本研究首先探究了西湖龙井茶对常规饮食小鼠肠道菌群的作用,随后构建高脂高果糖饮食小鼠模型,进一步研究西湖龙井对预防高脂高果糖饮食小鼠脂质积累、肠道屏障功能损伤和肠道微生态紊乱的效果。结果表明:西湖龙井茶汤能够抑制高脂高果糖饮食小鼠的体质量上升和脂肪积累,有效改善代谢紊乱。进一步探究西湖龙井对高脂高果糖饮食小鼠肠道稳态的保护作用时发现,西湖龙井茶汤处理抑制了小鼠肠道上皮细胞低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)及其靶基因烯醇化酶-1(enolase-1, ENO1)和乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A, LDHA)的表达。此外,西湖龙井茶汤干预可以降低小鼠肠道厚壁菌门/拟杆菌门菌群丰度的比值,使norank_f_Muribaculaceae等益生菌富集,且高脂高果糖饮食+低浓度茶汤处理下毛螺菌科菌群富集,高脂高果糖饮食+高浓度茶汤处理使颤螺菌属菌群的相对丰度增加。本研究结果为龙井茶通过改善肠道菌群紊乱来调节脂肪积累提供了理论依据,为饮茶能够改善肠道健康、发挥降脂减肥作用提供了理论支持。

关键词：西湖龙井茶高脂高果糖饮食肠道菌群肠道屏障

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细胞色素P450介导的杂草抗药性研究进展

植物保护 2024年第4期50卷 1-15页

作者：谷涛张自常曹晶晶李贵娄远来王红春江苏省农业科学院植物保护研究所南京210014

细胞色素P450(cytochrome P450)是一类重要的亚铁血红素-硫醇盐蛋白超家族,属于单加氧酶,广泛分布于生物界中。研究发现P450主要具有“生物合成”和“生物解毒”两大功能,被誉为“万能的生物催化剂”。大多数除草剂在植物体内代谢的初... 详细信息

细胞色素P450(cytochrome P450)是一类重要的亚铁血红素-硫醇盐蛋白超家族,属于单加氧酶,广泛分布于生物界中。研究发现P450主要具有“生物合成”和“生物解毒”两大功能,被誉为“万能的生物催化剂”。大多数除草剂在植物体内代谢的初始阶段即涉及植物细胞色素P450的作用。近些年,由P450介导的抗药性杂草呈多发态势,其复杂的抗性谱,给杂草化学防除带来了新的挑战。本文对P450分类命名、P450与除草剂代谢的关系、P450抗性鉴定手段、P450介导抗性杂草发生情况、与除草剂代谢有关的植物细胞色素P450基因克隆等内容进行了综述,旨在为该领域的相关研究提供参考。

关键词：细胞色素P450 除草剂鉴定手段抗性杂草 P450基因

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硅藻土介导的截形叶螨成螨爪哇虫草菌敏感性提升和表皮特征变化

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昆虫学报 2024年第5期67卷 651-658页

作者：赵冬晓张志春牛洪涛郭慧芳江苏省农业科学院植物保护研究所南京210014

【目的】截形叶螨Tetranychus truncatus抗药性演化快,防治难度不断加大,研发微生物杀螨剂迫在眉睫。杀虫真菌爪哇虫草菌Cordyceps javanica JS001菌株已开发为防烟粉虱Bemisi tabaci等害虫的生防药剂。本研究旨在探索爪哇虫草菌对截形... 详细信息

【目的】截形叶螨Tetranychus truncatus抗药性演化快,防治难度不断加大,研发微生物杀螨剂迫在眉睫。杀虫真菌爪哇虫草菌Cordyceps javanica JS001菌株已开发为防烟粉虱Bemisi tabaci等害虫的生防药剂。本研究旨在探索爪哇虫草菌对截形叶螨的致病力以及其理想助剂材料,以挖掘爪哇虫草菌对截形叶螨的生防潜力。【方法】采用喷雾法测定爪哇虫草菌JS001菌株1.0×106孢子/mL孢子悬浮液侵染后截形叶螨卵、若螨以及成螨的累计死亡率;分别用硅藻土(0.025 g/L)溶液以及添加了硅藻土的爪哇虫草菌JS001菌株孢子悬浮液(1.0×106孢子/mL)喷施截形叶螨2日龄成螨,观察记录成螨的感染死亡情况;以硅藻土溶液(0.025 g/L)喷施截形叶螨2日龄成螨,扫描电子显微镜下观察并计算截形叶螨2日龄成螨表皮褶皱间距和单位距离(10μm)内褶皱数。【结果】爪哇虫草菌JS001菌株对截形叶螨的卵未表现出致病力,造成成螨的死亡率为81.75%,显著高于若螨的死亡率(40.91%)。硅藻土能加速爪哇虫草菌JS001菌株对成螨的致死作用,平均存活时间缩短0.6 d。扫描电子显微镜观察结果表明,与对照比较,硅藻土处理能疏松成螨表皮的微阵列结构,相邻褶皱之间的平均距离显著变大,且单位距离(10μm)内的平均褶皱数目显著下降。【结论】爪哇虫草菌JS001菌株对截形叶螨成螨具有较高致病力,硅藻土能改变成螨表皮物理结构并提升爪哇虫草菌JS001菌株的杀螨活性。

关键词：截形叶螨爪哇虫草菌致病力硅藻土表皮生物防治

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反枝苋对氟磺胺草醚的抗性机制代谢组学研究

农药学学报 2024年

作者：宋伟丰韦庆慧师正浩李志勇潘亚清黑龙江省农业科学院植物保护研究所

二苯醚类除草剂氟磺胺草醚是防除大豆田杂草反枝苋Amaranthus retroflexus L.的主要除草剂，但目前黑龙江省大豆田反枝苋对氟磺胺草醚的抗性越来越强，严重影响大豆产量。目前没有关于反枝苋对氟磺胺草醚抗性机制的代谢组学研究。本研... 详细信息

二苯醚类除草剂氟磺胺草醚是防除大豆田杂草反枝苋Amaranthus retroflexus L.的主要除草剂，但目前黑龙江省大豆田反枝苋对氟磺胺草醚的抗性越来越强，严重影响大豆产量。目前没有关于反枝苋对氟磺胺草醚抗性机制的代谢组学研究。本研究基于未处理（CK）以及氟磺胺草醚处理后反枝苋敏感（SY）、抗性（RY）组的叶组织的代谢谱、主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）结果显示，RY组代谢分子表型更贴近于CK组。京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析和拓扑分析结果发现，有3条通路是氟磺胺草醚的主要作用通路，分别是氨基酸的生物合成(biosynthesis of amino acids)、精氨酸生物合成(arginine biosynthesis)和2-羧酸代谢(2-oxocarboxylic acid metabolism)。CK vs RY和SY vs RY有1条共有的差异通路——类黄酮的降解(degradation of flavonoids)，因此，类黄酮的降解可能是RY组抗性的特异性通路。通过支持向量机（SVM）进一步分析发现，4-羟基2-氧化戊二酸(4-hydroxy-2-oxoglutaric acid)、瓜氨酸(citrulline)和L-鸟氨酸(L-ornithine)是氟磺胺草醚处理后反枝苋产生抗药性的关键代谢物。

关键词：反枝苋氟磺胺草醚代谢组学支持向量机抗药性

西花蓟马FKBP6蛋白多克隆抗体制备、真核表达及亚细胞定位

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农业生物技术学报 2024年第7期32卷 1606-1613页

作者：王鑫郑立敏赵星月苗淑月叶倩张宇史晓斌张德咏陈建斌湖南大学生物学院隆平分院湖南省农业科学院植物保护研究所内蒙古农业大学园艺与植物保护学院河南省农业科学院烟草研究所

西花蓟马(Frankliniella occidentalis)是为害全球农业生产的入侵害虫，通过探寻西花蓟马亲免素蛋白FK506-binding protein 6 (FKBP6)的生物功能，为防控西花蓟马挖掘新的靶标。本研究运用生物信息学分析西花蓟马FKBP6蛋白(GenBank No.... 详细信息

西花蓟马(Frankliniella occidentalis)是为害全球农业生产的入侵害虫，通过探寻西花蓟马亲免素蛋白FK506-binding protein 6 (FKBP6)的生物功能，为防控西花蓟马挖掘新的靶标。本研究运用生物信息学分析西花蓟马FKBP6蛋白(GenBank No. XP＿026292958.1)，克隆FKBP6基因(GenBank No. XM＿026437173.1)，原核诱导表达FKBP6蛋白并制备其多克隆抗体，利用Bac-to-Bac杆状病毒系统表达FKBP6蛋白，借助荧光免疫(immunofluorescence, IF)标记和Western blot检测多克隆抗体及亚细胞定位。结果显示，氨基酸多序列比对与系统进化发育树分析发现，20种昆虫的FKBP6蛋白之间存在保守的区域，但只在种间亲缘性较高。利用杆状病毒系统在Sf9细胞内表达FKBP6蛋白，使用多克隆抗体经IF和Western blot检测显示，该抗体能与FKBP6蛋白发生特异性结合；亚细胞定位发现，FKBP6被定位到细胞质。本研究为FKBP6蛋白的生物功能研究提供分子条件。

关键词：西花蓟马 FKBP6蛋白抗体制备 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统

群结腐霉PmCA1抑制植物PTI免疫反应促进病原菌侵染

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植物病理学报 2024年

作者：刘会如逯佳琪沈汝彬 ANJAGO Wilfred Mabeche 薛宇威魏利辉纠敏王楠扬州大学植物保护学院江苏省农业科学院植物保护研究所河南科技大学食品与生物工程学院

群结腐霉（Pythium myriotylum）是一种植物病原卵菌，可侵染大豆、番茄、小麦等多种重要经济、粮食作物，引起根腐、茎基腐病，造成严重危害。然而我们对其致病机制还知之甚少。本研究报道一个来源于群结腐霉的碳酸酐酶家族蛋白（Carba... 详细信息

群结腐霉（Pythium myriotylum）是一种植物病原卵菌，可侵染大豆、番茄、小麦等多种重要经济、粮食作物，引起根腐、茎基腐病，造成严重危害。然而我们对其致病机制还知之甚少。本研究报道一个来源于群结腐霉的碳酸酐酶家族蛋白（Carbanhydrase）-PmCA1，发现其在群结腐霉侵染植物过程中上调表达，同时其可抑制flg22诱导的活性氧迸发及防御相关基因表达，促进辣椒疫霉的侵染。以上结果表明PmCA1可能是群结腐霉的毒性因子，通过抑制植物PTI免疫反应来促进病原菌侵染定殖。研究结果将为群结腐霉分泌蛋白的功能研究提供思路，为探究群结腐霉的致病机制提供理论支撑。

关键词：群结腐霉分泌蛋白碳酸酐酶植物免疫

暗褐脉柄牛肝菌产淀粉水解酶最适温度及最适初始pH研究

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北方园艺 2024年第12期 122-126页

作者：高锋许欣景杨天伟刘静方艺伟张春霞云南省热带作物科学研究所植物保护与微生物利用研究中心云南景洪666100

以20113和21014暗褐脉柄牛肝菌菌株为试材,采用刚果红、卢戈氏碘液变色圈法,研究了温度、pH对暗褐脉柄牛肝菌产淀粉水解酶能力的影响,以期为研发暗褐脉柄牛肝菌淀粉高效利用方案提供参考依据。结果表明:刚果红变色圈试验中,随着温度升高... 详细信息

以20113和21014暗褐脉柄牛肝菌菌株为试材,采用刚果红、卢戈氏碘液变色圈法,研究了温度、pH对暗褐脉柄牛肝菌产淀粉水解酶能力的影响,以期为研发暗褐脉柄牛肝菌淀粉高效利用方案提供参考依据。结果表明:刚果红变色圈试验中,随着温度升高,菌丝生长速率、淀粉水解酶指数逐渐升高,并在28℃达到最大值,随后逐渐下降;卢戈氏碘液变色圈试验中,随着温度升高,菌丝生长速率、淀粉水解酶指数逐渐升高,并分别在30℃和28℃达到最大值,随后逐渐降低;随着初始pH逐渐升高,淀粉水解酶指数逐渐升高并在pH 6.5时达到最大值,pH 7.0~8.0变化不显著;随着pH升高,21014菌株生长速率逐渐降低,20113菌株生长速率无显著变化。综上,暗褐脉柄牛肝菌产淀粉水解酶最适宜温度为30℃,最适初始pH为6.5。

关键词：暗褐脉柄牛肝菌淀粉水解酶酶指数温度 pH

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