检索结果-南通市图书馆

bFGF、EGF和NGF对人角膜内皮细胞生长调控的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

眼科学报 2008年第1期24卷 9-12页

作者：邵应峰胡诞宁陈家祺中山大学中山眼科中心中山大学眼科学国家重点实验室广州510060 纽约眼耳医院组织培养研究中心纽约医学院纽约10003

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(Basicfibroblastgrowthfacfor,bFGF)、表皮细胞生长因子(Epidermalgrowthfactor,EGF)和神经细胞生长因子(Nervegrowthfactor,NGF)对体外培养的人角膜内皮细胞的生长调控作用。方法:将相同数量的人角膜内皮细胞接种于96孔板。加入浓度分别为0ng/ml、1ng/ml、3ng/ml、10ng/ml、30ng/ml、100ng/ml的EGF、bFGF和NGF进行培养。5天后MTT法用检测增殖情况。结果:在0ng/ml、1ng/ml、3ng/ml、10ng/ml、30ng/ml、100ng/ml浓度下bFGF组的平均OD值分别为:0.224±0.045、0.239±0.040、0.262±0.0342、0.278±0.0319、0.281±0.0324、0.260±0.0310。EGF组的平均OD值分别为:0.228±0.0304、0.245±0.0418、0.267±0.0454、0.275±0.0347、0.271±0.0449、0.250±0.0253。NGF组的平均OD值分别为:0.216±0.0187、0.228±0.0226、0.231±0.0225、0.242±0.0279、0.245±0.0294、0.247±0.0349。结论:bFGF在30ng/ml范围内对内皮细胞生长有促进作用,并具有剂量依赖性。高于100ng/ml时促生长作用降低。EGF在10ng/ml范围内对内皮细胞生长有促进作用,并具有剂量依赖性。高于30ng/ml时促生长作用降低。NGF本次实验剂量范围内对角膜内皮细胞生长无明显作用。

关键词：角膜内皮细胞生长因子调控

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

人负重关节软骨细胞的体外分离与培养

临床骨科杂志 2004年第2期7卷 209-212页

作者：周新社戴尅戎汤亭亭胡诞宁上海第二医科大学附属第九人民医院骨科上海200011 纽约大学眼耳医院组织培养中心美国纽约10003

目的　研究人负重关节软骨细胞的分离培养技术。方法　对 10例手术切除的负重关节软骨进行0 2 %Ⅱ型胶原酶分离、10 %DMEM中培养 ,观察软骨细胞获得率、贴壁率、增殖状况及形态学改变。结果　① 0 2 %Ⅱ型胶原酶消化尽 2 0 0～ 70 0m... 详细信息

目的　研究人负重关节软骨细胞的分离培养技术。方法　对 10例手术切除的负重关节软骨进行0 2 %Ⅱ型胶原酶分离、10 %DMEM中培养 ,观察软骨细胞获得率、贴壁率、增殖状况及形态学改变。结果　① 0 2 %Ⅱ型胶原酶消化尽 2 0 0～ 70 0mg软骨标本需 4～ 14h ,细胞获得率 (1 82± 0 5 7)× 10 6/g ,存活率(79 4± 9 9) %。②细胞可传 6～ 12代 ,前 4代培养时间平均 (33± 10 )d ,生长倍数平均 198倍 ,倍增时间(4 13± 1 34)d。③第 3、4代细胞呈多角形、部分梭形 ,8、9代后细胞梭状铺平。结论　 30 0～ 5 0 0mg软骨标本 ,经该方法培养 3～ 4周后可达第 4代 ,细胞数可达 (0 6～ 1 0 )× 10 8个 ,可满足临床上修复 15～ 2 5cm2软骨缺损的需要。

关键词：关节软骨软骨细胞分离细胞培养

国际间合作遏制青光眼：2008年3月6日第一届“世界青光眼日”

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

眼科 2008年第1期17卷 10-11页

作者： Buys Y Goldberg I Lambrou GN Ritch R 李建军王爽加拿大多伦多大学眼科澳大利亚悉尼大学眼科美国纽约眼耳医院Einhom临床研究中心

众所周知,青光眼是全球第二位可治疗的致盲性眼病。作为不可逆盲的重要原因,其防治已成为重要的公共卫生问题,其在世界各国致盲眼病的排名不断攀升。尽管在发展中国家及发达国家,白内障和年龄相关性黄斑变性分别是首位的致盲原因，

关键词：青光眼国际间合作世界年龄相关性黄斑变性致盲性眼病公共卫生问题发展中国家致盲眼病

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

单层培养的人关节软骨细胞生物学行为研究

解剖与临床 2006年第1期11卷 14-17页

作者：周新社戴尅戎汤亭亭胡诞宁上海第二医科大学附属第九人民医院骨科上海200011 美国纽约大学眼耳医院组织培养中心

目的:研究单层培养的人关节软骨细胞生物学行为的改变。方法:对来自8例手术切除负重关节非负重区的软骨细胞在10%DMEM中进行单层传代培养,观察细胞形态学、增殖细胞倍增时间(DT)、细胞Ⅱ型胶原免疫组织化学染色以及流式细胞分析细胞增... 详细信息

目的:研究单层培养的人关节软骨细胞生物学行为的改变。方法:对来自8例手术切除负重关节非负重区的软骨细胞在10%DMEM中进行单层传代培养,观察细胞形态学、增殖细胞倍增时间(DT)、细胞Ⅱ型胶原免疫组织化学染色以及流式细胞分析细胞增殖指数(PI)和细胞凋亡。结果:随着传代次数的增加,(1)细胞形态由原代的多角形转变为第3、4代的短梭形、第8、9代的成纤维细胞形态;(2)DT在逐渐延长,PI在逐渐减小;(3)细胞分泌的Ⅱ型胶原逐渐减少;(4)细胞凋亡指数未见明显的改变(P>0.05)。结论:体外单层培养的关节软骨细胞存在着失分化和老化,但第3、4代能较好地保持软骨细胞的生物学行为,可作为种子细胞的来源。

关键词：软骨细胞单层培养增殖表型凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人常染色体遗传的病理性近视基因定位

中华眼科杂志 2007年第3期43卷 233-238页

作者：于志强李月彬黄传新褚仁远胡诞宁申宗侯黄薇复旦大学附属眼耳鼻喉科医院 200031 复旦大学生物化学教研室国家人类基因组南方研究中心美国纽约医学院眼耳医院眼科

目的在中国人群中进行病理性近视致病基因的定位。方法1个12人的病理性近视家系（患者7名）经过研究人员告知，同意参加本研究。从每个家系成员静脉血中提取DNA，选取覆盖全基因组的330对高度杂合的微卫星DNA引物，进行基因组扫描；以... 详细信息

目的在中国人群中进行病理性近视致病基因的定位。方法1个12人的病理性近视家系（患者7名）经过研究人员告知，同意参加本研究。从每个家系成员静脉血中提取DNA，选取覆盖全基因组的330对高度杂合的微卫星DNA引物，进行基因组扫描；以常染色体显性遗传为模式，基因频率0．0133和外显率100％的条件下，运用Linkage软件进行二点连锁分析，运用Genehunter软件进行多点连锁分析。标记位点之间的遗传距离根据Genethon连锁图谱来确定。基于最低重组率原则，用cyanic软件构建单倍型。结果二点连锁分析发现15号染色体长臂上存在与病理性近视密切连锁的位点。在重组率为0的情况下，最大对数优势记分（LOD）值1．76出现在D15S1010，D15S1007和D15S1042位点；多点连锁分析也支持这个区域内存在连锁，最大NIL值为5．16。单倍型分析把这个近视眼位点局限在15q12-13上D15S1019和D15S146之间大约12cM的区间内。在已知的近视眼相关位点，包括18p11．31，12q21-23，7q36，17q21-22，4q22-q27，2q37．1，15q15-21，12q13．11-13．2，6p21．3，1q21-31，1p21和21q22．3，均没有发现明确的连锁证据。结论在15q12-13可能存在一个新的近视眼基因位点。在这个区域内至少有94个已知的基因，因此有必要对此区域进行测序寻找致病基因，这个新的基因位点的发现也证实了病理性近视存在很强的遗传异质性。

关键词：近视连锁(遗传学) 染色体图

有色光对视网膜色素上皮细胞分泌TGF-β的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国眼耳鼻喉科杂志 2004年第2期4卷 86-88页

作者：陈冬红褚仁远周国民胡诞宁复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科上海200031 复旦大学上海医学院组织胚胎教研组美国纽约医学院眼耳医院组织培养中心

目的研究不同色光对RPE细胞分泌生长因子的影响,从细胞生物学和分子生物学水平探讨RPE细胞在有色光信号传导中的作用.方法将第二代RPE细胞以每孔5×104的密度接种于4个6孔板,培养3 d后,将培养液换为含1%胎牛血清的F12培养液,置于各种色... 详细信息

目的研究不同色光对RPE细胞分泌生长因子的影响,从细胞生物学和分子生物学水平探讨RPE细胞在有色光信号传导中的作用.方法将第二代RPE细胞以每孔5×104的密度接种于4个6孔板,培养3 d后,将培养液换为含1%胎牛血清的F12培养液,置于各种色光下培养,分别于4、8、12、24、48h后收集培养液,采用酶联免疫吸附实验(enzyme linkedimmunosorbent assay,ELISA),测定TCF-β的量;将置于红色、黄色和蓝色光下照射24h后的细胞取出,采用Trizol一步法提取RPE细胞总RNA,通过RT-PCR检测不同色光照射后RPE细胞TGF-β的mRNA表达水平.结果 ELISA结果显示人胚RPE细胞可分泌TGF-β,在受到不同波长的光照射后,不同时段TGF-β的分泌量也不一样,数据采用两因素方差分析,差异有统计学意义;RT-PCR结果显示不同色光照射24h后RPE细胞TGF-β的mRNA表达水平不同.结论有色光线可能引起RPE细胞蛋白质合成功能受阻,进而对眼球的生长发育产生作用.

关键词：有色光视网膜色素上皮细胞 TGF-β 近视信号传导酶联免疫吸附实验生长因子

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

bFGF对人关节软骨细胞增殖和凋亡的影响

解剖与临床 2004年第4期9卷 235-237页

作者：周新社戴尅戎汤亭亭胡诞宁周建生肖玉周蚌埠医学院附属医院骨科安徽蚌埠233004 上海第二医科大学附属第九人民医院骨科美国纽约大学眼耳医院组织培养中心

目的 :观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对体外单层培养的人负重关节软骨细胞的增殖和凋亡的影响。方法 :对 8例来自人负重关节软骨细胞系进行体外单层传代培养 ,从第 2代起试验组培养液中加入bFGF ,观察细胞的倍增时间 (DT)、流式细... 详细信息

目的 :观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对体外单层培养的人负重关节软骨细胞的增殖和凋亡的影响。方法 :对 8例来自人负重关节软骨细胞系进行体外单层传代培养 ,从第 2代起试验组培养液中加入bFGF ,观察细胞的倍增时间 (DT)、流式细胞分析细胞增殖周期和凋亡指数 ,并与无bFGF组相比较。结果 :与未加bFGF相比较 ,加用 10 μg/mlbFGF后 ,DT缩短 ,S期细胞数升高 ,细胞凋亡无变化。结论 :bFGF能促进培养的人关节软骨细胞生长 ,不引起细胞凋亡。

关键词：关节软骨细胞增殖细胞凋亡碱性成纤维细胞生长因子软骨细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

病理性近视的基因位点筛查

眼科研究 2006年第4期24卷 429-432页

作者：于志强黄传新申宗侯黄薇胡诞宁褚仁远复旦大学附属眼耳鼻喉科医院上海200031 复旦大学上海医学院生化教研室上海200032 国家人类基因组南方研究中心上海201203 美国纽约医学院附属眼耳医院

目的通过基因组扫描和家系连锁分析,对已知病理性近视相关位点进行筛查。方法收集符合常染色体显性遗传的病理性近视家系,选取330对微卫星标记进行基因组扫描,在显性遗传模式、基因频率0·0133和外显率100%的条件下,进行二点连锁分析和... 详细信息

目的通过基因组扫描和家系连锁分析,对已知病理性近视相关位点进行筛查。方法收集符合常染色体显性遗传的病理性近视家系,选取330对微卫星标记进行基因组扫描,在显性遗传模式、基因频率0·0133和外显率100%的条件下,进行二点连锁分析和多点连锁分析。结果连锁分析在9个家系中均未发现连锁位点。第12号染色体上LODs最大0·773459,最小-8·121303,第18号染色体上LODs最大0·559933,最小-8·936928,排除了与已知病理性近视基因位点MYP2和MYP3连锁。结论我国病理性近视基因位点与国外报道不同,存在遗传异质性。病理性近视遗传模式可能不是单一的单基因常染色体显性遗传。

关键词：病理性近视连锁分析遗传异质性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

一种用于内耳siRNA转染的新型蛋白载体

中华耳科学杂志 2020年第5期18卷 932-937页

作者：亓卫东丁大连曹轶倓袁芳复旦大学附属华山医院耳鼻咽喉头颈外科上海200040 美国纽约州立大学布法罗分校耳聋及听力研究中心 NY 14214 USA

目的通过体外实验与脂质载体LipoFiter^(TM)进行对比,验证小干扰RNA(siRNA)蛋白载体TAT-DRBD载体在耳蜗的转染效率及安全性。并在卡铂南美栗鼠内耳损害实验模型中,通过TAT-TRBD载体携带siRNA特异性下调铜转运蛋白Slc31a1基因的表达,验... 详细信息

目的通过体外实验与脂质载体LipoFiter^(TM)进行对比,验证小干扰RNA(siRNA)蛋白载体TAT-DRBD载体在耳蜗的转染效率及安全性。并在卡铂南美栗鼠内耳损害实验模型中,通过TAT-TRBD载体携带siRNA特异性下调铜转运蛋白Slc31a1基因的表达,验证对毛细胞的保护。方法离体条件下,应用TAT-DRBD携带Cy3标记的siRNA转染新生SD大鼠耳蜗基底膜,12小时后激光共聚焦显微镜观察;TAT-DRBD及LipoFiter^(TM)载体转染新生SD大鼠耳蜗基底膜48小时后计数毛细胞丢失及损伤情况。南美栗鼠在接受单次腹腔内卡铂注射前24小时左耳通过TAT-DRBD载体行Slc31a1基因特异性siRNA转染,右耳为对照,12天后处死并通过行全耳蜗基底膜铺片计数毛细胞丢失比例。结果在离体耳蜗器官型培养中,TAT-DRBD可高效转染Cy3标记的siRNA进入毛细胞,效率几达100%。新生SD大鼠耳蜗基底膜中段在加入脂质体LipoFiterTM48小时后会导致严重的耳基底膜内、外毛细胞损害及纤毛排列紊乱;TAT-DRBD组却无明显毛细胞丢失及纤毛排列紊乱。在活体南美栗鼠,治疗耳的内毛细胞(IHC)仅在距蜗尖(Apex)45%~85%距离处有不超过20%的毛细胞丢失。而对照组全程均有IHC损害,在距蜗尖65%~75%处有近40%的IHC丢失。结论 TAT-DRBD作为一种新型的基因重组蛋白载体,在离体条件下可有很高的转染效率且无明显耳毒性作用,在内耳转染安全性方面较脂质体有明显优势。通过RNAi手段特异性抑制铜离子跨膜转运蛋白表达可以有效降低卡铂耳毒性。

关键词：内耳小干扰RNA 转染