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盐碱地苜蓿饲料特性及牛羊饲粮中的应用

草业科学 2024年

作者：哈丽代·热合木江郭江鹏屠焰中国农业科学院饲料研究所农业农村部饲料生物技术重点实验室北京市畜牧总站

盐碱地是盐类地块聚集成的土地，土壤分布发生改变形成的实质为可溶性盐，盐分在土壤表层积累超过了正常值。盐碱化使得草牧业和畜牧业的发展受到严重的制约。本文综合分析19种苜蓿品种，其中WL343HQ的越冬率最高，为98.20%，其次是WL16... 详细信息

盐碱地是盐类地块聚集成的土地，土壤分布发生改变形成的实质为可溶性盐，盐分在土壤表层积累超过了正常值。盐碱化使得草牧业和畜牧业的发展受到严重的制约。本文综合分析19种苜蓿品种，其中WL343HQ的越冬率最高，为98.20%，其次是WL168HQ，最低的为三得利，为57.67%。各苜蓿返青后的株高，金黄后和草原2号最高，而株草原3号最低（57.50 cm）。各品种干草产量，草原2号最高(12.94 t/hm2)，其次是中苜2号、阿迪娜、三得利，而驯鹿产量最低，仅为7.35 t/hm2。粗蛋白含量苜蓿王最高（24.25%）；粗脂肪含量驯鹿最高，为6.40%，其次是“SR4030”，为5.50%；中性洗涤纤维含量≤40%的品种有54V09、阿迪娜、傲寒苜蓿、苜蓿王和中苜1号等5个品种，傲寒苜蓿NDF和粗灰分含量最高，为39.09%和6.47%。各品种钙含量在1.63%～2.38%，其中草原3号最高；总磷含量在0.17%～0.70%，驯鹿总磷最高。随着饲粮中苜蓿比例的增加对动物的效益也增加，饲粮中盐碱地苜蓿完全可以替代普通苜蓿，效果与普通苜蓿相同。总之，越冬率、生产性能和饲料特性可初步得出，草原2号和WL343HQ两个品种表现较为突出，拥有良好的综合性状，种植适宜盐碱地苜蓿，不仅在盐碱化草地具有较高的推广价值，对于改良盐碱地降低土壤钾含量具有推进作用。

关键词：盐碱地苜蓿生长特性营养价值饲喂效果草食家畜应用

施肥处理对种植饲料桑改良稀土尾矿土壤理化性质的影响

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草地学报 2024年

作者：陈荣强欧翔邱静芸张强连海谢华亮黄际发徐树明雷小文赣州市畜牧水产研究所定南县农业农村局

为探究不同施肥处理对种植饲料桑（Morus alba L.）改良稀土尾矿土壤理化性质的影响，设置CK（对照组：化肥）、T1（牛沼液）、T2（腐熟牛粪）、T3（腐熟牛粪+牛沼液）、T4（蚯蚓粪）、T5（蚯蚓粪+牛沼液）6种施肥处理，连续施肥3年测定... 详细信息

为探究不同施肥处理对种植饲料桑（Morus alba L.）改良稀土尾矿土壤理化性质的影响，设置CK（对照组：化肥）、T1（牛沼液）、T2（腐熟牛粪）、T3（腐熟牛粪+牛沼液）、T4（蚯蚓粪）、T5（蚯蚓粪+牛沼液）6种施肥处理，连续施肥3年测定0～20 cm表层土壤的理化性质及重金属含量。结果表明：在土壤修复第3年，相比与CK，T2，T3，T4，T5处理的土壤容重显著降低（P＜0.05），土壤孔隙度、最大持水量、有机质、全氮、碱解氮、全磷、有效磷、速效钾含量显著增加（P＜0.05），T1，T2，T3，T4，T5处理的pH显著提高（P＜0.05）；各处理镉、汞、砷、铬、铅、铜、锌重金属单项污染指数均低于1，内梅罗综合污染指数均低于0.7；各处理综合肥力指数和模糊数学隶属函数平均值大小排序均为T5＞T4＞T3＞T2＞T1＞CK。综上，T5处理在改良稀土尾矿土壤理化性质方面效果最佳。

关键词：稀土尾矿饲料桑土壤理化性质蚯蚓粪腐熟牛粪牛沼液重金属

雌激素介导circZNF423作为ceRNA调控oar-miR-541-3p/CALM3通路促进绵羊成肌细胞增殖

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中国农业科学 2024年第3期57卷 597-612页

作者：池润清韩海银王鹏李凯扬储明星刘玉芳河北工程大学生命科学与食品工程学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室北京市畜牧总站

【背景】雌激素是雌性哺乳动物卵巢组织分泌的主要激素，其对肌肉的生长发育起着重要的调控作用，circRNA已被发现参与多种与肌肉生长发育相关的信号通路。【目的】根据团队前期卵巢摘除苏尼特羊与假手术苏尼特羊全转录组整合分析发现ci... 详细信息

【背景】雌激素是雌性哺乳动物卵巢组织分泌的主要激素，其对肌肉的生长发育起着重要的调控作用，circRNA已被发现参与多种与肌肉生长发育相关的信号通路。【目的】根据团队前期卵巢摘除苏尼特羊与假手术苏尼特羊全转录组整合分析发现circZNF423可作为内源性竞争RNA(ceRNA)调控oar-miR-541-3p/CALM3的表达。为进一步探究雌激素在绵羊肌肉生长中分子机制，通过体外培养绵羊原代成肌细胞，检测成肌细胞中外源添加雌激素介导circZNF423调控oar-miR-541-3p/CALM3对成肌细胞增殖的影响，为进一步研究雌激素及circRNA在绵羊生长发育性状中的作用机制提供理论依据，为绵羊分子设计育种提供新的研究思路。【方法】采集绵羊背最长肌组织，对绵羊原代成肌细胞进行体外分离培养，通过免疫荧光染色、RNA原位杂交（FISH）和核质分离试验确定circZNF423在成肌细胞中的表达位置；RNAhybrid在线软件预测circZNF423、oar-miR-541-3p和CALM3存在结合关系，通过双荧光素酶活性检测和生物素标记的miRNA下拉试验验证circZNF423和oar-miR-541-3p、oar-miR-541-3p和CALM3结合情况；体外构建合成circZNF423过表达或干扰载体、oar-miR-541-3p的模拟物（mimics）或抑制剂（inhibitor）、CALM3过表达或干扰载体，在绵羊原代成肌细胞中进行转染，利用RT-qPCR、Western blot、EdU和CCK-8检测绵羊成肌细胞增殖标志因子的表达和成肌细胞增殖情况；为进一步明确雌激素在绵羊肌肉生长发育中的作用，体外添加不同浓度的外源性雌二醇（E2），利用RT-qPCR、Western blot、CCK-8和EdU检测绵羊肌细胞增殖标志基因的表达变化。【结果】免疫荧光染色显示分离的原代细胞为绵羊成肌细胞，可用于后续功能验证；RNA原位杂交和核质分离试验表明，circZNF423主要在绵羊成肌细胞质中表达。RNAhybrid、双荧光素酶活性检测和生物素标记的miRNA下拉试验结果表明，circZNF423与oar-miR-541-3p、oar-miR-541-3p与CALM3 3’UTR之间均存在显著的结合关系；抑制circZNF423/CALM3表达或过表达oar-miR-541-3p后，绵羊成肌细胞增殖标志因子PCNA、CDK2和Pax7 mRNA与蛋白表达水平一致，均显著上调（P<0.05或P<0.01）;EdU和CCK8结果表明，抑制circZNF423/CALM3表达或过表达oar-miR-541-3p后，绵羊成肌细胞增殖率显著上升（P<0.05）；过表达circZNF423/CALM3或抑制oar-miR-541-3p后则相反。添加不同浓度外源雌二醇（E2）后，在浓度为10 nmol·L-1时绵羊成肌细胞增殖标志因子表达最高，显著高于1和100 nmol·L-1的添加浓度（P<0.05或P<0.01）；绵羊肌细胞增殖标志因子PCNA、CDK2和Pax7mRNA和蛋白表达水平一致，均显著上调，circZNF423和CALM3的表达量显著降低，oar-miR-541-3p的表达量显著升高（P<0.05或P<0.01）;EdU和CCK8结果显示，体外添加雌二醇后绵羊成肌细胞增殖率显著升高（P<0.05）。【结论】绵羊成肌细胞中circZNF423作为ceRNA调控oar-miR-541-3p和CALM3的结合及表达，添加外源雌激素可通过抑制circZNF423/oar-miR-541-3p/CALM3通路促进绵羊肌肉细胞的增殖。这些结果为揭示雌激素及circZNF423在绵羊骨骼肌发育性状中的分子机制提供理论基础。

关键词：绵羊肌肉发育雌激素 circZNF423 oar-miR-541-3p CALM3

饲养密度对肉鸭生长性能和保健生理功能的影响

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南京农业大学学报 2024年

作者：屠民航蔡根谭闫乐艳韩国峰施振旦马龙飞陈顺王恬陈哲王超南京农业大学动物科技学院江苏省农业科学院畜牧研究所/农业农村部种养结合重点实验室江苏省农业科学院农业设施与装备研究所/农业农村部长江中下游设施农业工程重点实验室

[目的]本试验旨在研究不同饲养密度对肉鸭生长性能、免疫力、肠屏障和抗氧化能力的影响。[方法]试验选取1日龄雄性樱桃谷鸭200只，随机分为4个不同饲养密度的试验组，分别为SD1(11只·m-2)、SD2(12只·m-2)、SD3(13只·m-2)、SD4(14只·... 详细信息

[目的]本试验旨在研究不同饲养密度对肉鸭生长性能、免疫力、肠屏障和抗氧化能力的影响。[方法]试验选取1日龄雄性樱桃谷鸭200只，随机分为4个不同饲养密度的试验组，分别为SD1(11只·m-2)、SD2(12只·m-2)、SD3(13只·m-2)、SD4(14只·m-2)，每组3个重复，试验期为42 d。[结果] 肉鸭42 d体重和1 ～ 42 d平均日增重在SD1与SD2组间无显著差异（P > 0.05），与SD1、SD2组相比，SD3、SD4组平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和最终体重显著降低（P 0.05）。与SD1、SD2组相比，SD4组血清中D-乳酸（D-LA）、脂多糖（LPS）含量和二胺氧化酶（DAO）活性显著升高（P < 0.05）。与SD1、SD2组相比，SD3、SD4组空肠黏膜中闭锁蛋白（OCLN）、闭合小环蛋白-1（ZO-1）、血红素加氧酶-1（HO-1）、超氧化物歧化酶1（SOD1）和分泌型免疫球蛋白A（SlgA）mRNA的表达量显著下降（P < 0.05），核因子-κB（NF-κB）和白细胞介素-2（IL-2）mRNA的表达量显著升高（P < 0.05），且SD4组紧密连接蛋白2（CLDN2）、GSH-Px、核因子E2相关因子2（Nrf2）mRNA的表达显著降低（P < 0.05），肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA的表达量显著升高（P < 0.05）。[结论]综上，高饲养密度(13 ～ 14只·m-2)可导致肠屏障受损并抑制肉鸭生长、免疫及抗氧化功能，这可能与高密度可抑制Nrf2信号通路及激活NF-κB信号通路密切相关。在本试验条件下，肉鸭饲养密度为11 ～ 12只·m-2较适。

关键词：饲养密度肉鸭生长性能抗氧化肠道功能

基于状态向量增强ByteTrack的新生羔羊活动量自动计算方法

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农业工程学报 2024年第13期40卷 146-155页

作者：林庆霞顾兴健陈新文熊迎军张国敏王锋张生福陆明洲南京农业大学人工智能学院南京210031 农业农村部养殖装备重点实验室南京210031 新疆畜牧科学院畜牧业质量标准研究所乌鲁木齐830000 南京农业大学动物医学院南京210095 南京农业大学动物科技学院南京210095 青海民族大学计算机学院西宁810007

为评价母羊繁殖性能并及时发现分娩栏中的弱活力羔羊,该研究提出一种基于状态向量增强ByteTrack的新生羔羊活动量自动计算方法。针对传统ByteTrack算法在跟踪目标被遮挡时易发生身份切换的问题,引入置信度信息增强的状态向量,提高跟踪... 详细信息

为评价母羊繁殖性能并及时发现分娩栏中的弱活力羔羊,该研究提出一种基于状态向量增强ByteTrack的新生羔羊活动量自动计算方法。针对传统ByteTrack算法在跟踪目标被遮挡时易发生身份切换的问题,引入置信度信息增强的状态向量,提高跟踪算法区分遮挡与被遮挡羔羊的能力。针对跟踪目标丢失导致轨迹预测不准确的问题,构建目标丢失期间的虚拟轨迹并重更新轨迹状态向量,以纠正轨迹误差。在获取各羔羊活动轨迹后,计算各羔羊帧间移动距离统计羔羊活动量。在江苏海门山羊研发中心采集的新生羔羊活动视频数据集上,测试状态向量增强的ByteTrack多目标跟踪算法性能。测试结果表明,研究提出的多目标跟踪方法在高阶跟踪精度、多目标跟踪精度、多目标跟踪准确度、IDF1得分上分别达到80.8%、86.1%、84.5%和92.2%,相较于现有算法的最高精度,分别提高2.7、0.2、2.3和3.9个百分点。该研究所提方法能够实现同窝多只新生羔羊的稳定跟踪,为新生羔羊活动量的自动计算、母羊繁殖性能的自动评估提供技术支撑。

关键词：动物目标检测多目标跟踪数据关联遮挡羔羊活动量

中华鳖源按蚊伊丽莎白菌的分离鉴定及药敏特性研究

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水生生物学报 2024年第4期48卷 683-693页

作者：王玉柱蒋巍巍刘文舒路晶晶唐艳强肖海红郭小泽李思明江西省农业科学院畜牧兽医研究所南昌330200 四川农业大学动物科技学院成都611130

研究对从江西省抚州市南丰县某中华鳖养殖基地患病中华鳖(Trionyx sinensis)组织中分离培养得到的一株按蚊伊丽莎白菌(Elizabethkingia anophelis)疑似菌株进行鉴定和药敏特性研究。在无菌环境中解剖患病中华鳖得到肝脏、脾脏组织,匀浆... 详细信息

研究对从江西省抚州市南丰县某中华鳖养殖基地患病中华鳖(Trionyx sinensis)组织中分离培养得到的一株按蚊伊丽莎白菌(Elizabethkingia anophelis)疑似菌株进行鉴定和药敏特性研究。在无菌环境中解剖患病中华鳖得到肝脏、脾脏组织,匀浆后接种在LB培养基上,分离得到优势菌株EJX2021。对该菌株进行形态学观察、16S RNA基因序列测定和生理生化鉴定以鉴定菌株种类;进行人工回归感染、组织病理学观察、毒力因子分析和抗生素药物敏感性试验研究其致病能力和药物敏感性特征。从患病中华鳖中分离出一株优势菌株EJX2021,结合其表型特征、16S RNA基因序列测定和生理生化鉴定,确定其为按蚊伊丽莎白菌。在人工回归感染后,该菌株对中华鳖15d的LD50为1.62×10^(8)CFU/mL,95%置信区间为(0.78—3.37)×10^(8)CFU/mL;组织病理学观察肠道、肺脏、脾脏、肝脏等组织出现不同程度病变。毒力因子分析显示该菌株包含246个潜在毒力基因。药物敏感性试验显示该菌株为多重耐药菌株,对多西环素、米诺环素、卡那霉素、哌拉西林、恩诺沙星、氟苯尼考敏感,对头孢曲松、头孢哌酮中度敏感,对新霉素等15种抗生素具有耐药性。研究证明了按蚊伊丽莎白菌是能够导致中华鳖病害的一种病原菌,为该细菌导致中华鳖病害的检测、鉴别和防治提供科学依据。

关键词：按蚊伊丽莎白菌分离鉴定药敏特性中华鳖

紫花苜蓿SAUR基因家族的鉴定及其在非生物胁迫中的表达模式研究

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草业学报 2024年第4期33卷 135-153页

作者：刘昊李显炀何飞王雪李明娜龙瑞才康俊梅杨青川陈林中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 青岛农业大学草业学院山东青岛266109

SAUR(small auxin-up RNA)是植物早期响应生长素的一类基因,参与植物生长发育与非生物胁迫响应等一系列生物过程。在拟南芥、水稻、棉花等物种中已经对SAUR基因家族进行了系统鉴定与分析,但是,在世界上最重要的豆科牧草紫花苜蓿中关于S... 详细信息

SAUR(small auxin-up RNA)是植物早期响应生长素的一类基因,参与植物生长发育与非生物胁迫响应等一系列生物过程。在拟南芥、水稻、棉花等物种中已经对SAUR基因家族进行了系统鉴定与分析,但是,在世界上最重要的豆科牧草紫花苜蓿中关于SAUR基因家族的研究尚未开展。本研究利用生物信息学的方法在紫花苜蓿参考基因组共鉴定到433个MsSAUR成员,并对其基因组位置、基因结构、启动子顺式作用元件以及不同组织中的表达模式进行了分析。同时,利用紫花苜蓿在不同非生物胁迫下的转录组数据,发现有5、11、19以及12个MsSAUR成员分别响应干旱、盐、冷以及碱胁迫,MsSAUR14/94/254可以同时响应干旱和盐胁迫,MsSAUR297可以同时响应干旱、盐以及碱胁迫,MsSAUR306可以同时响应干旱、盐以及冷胁迫。本研究结果可为后期通过基因工程技术创制高产抗逆新种质提供重要的候选基因。

关键词：紫花苜蓿 SAUR基因全基因组鉴定非生物胁迫表达模式

紫花苜蓿MsBBX20基因克隆及耐盐功能分析

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草业学报 2024年第10期33卷 55-73页

作者：周昕越蒋庆雪贾会丽马琳樊璐王学敏中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 山西农业大学草业学院山西太原030032

BBX家族转录因子参与光形态建成、成花生理、避荫反应、种子生长发育、激素信号转导及对逆境胁迫的响应等植物重要生长发育过程。紫花苜蓿是耐盐性较强的牧草饲料作物,其品质优良,有“牧草之王”的美誉。发掘并探索紫花苜蓿MsBBX20基因... 详细信息

BBX家族转录因子参与光形态建成、成花生理、避荫反应、种子生长发育、激素信号转导及对逆境胁迫的响应等植物重要生长发育过程。紫花苜蓿是耐盐性较强的牧草饲料作物,其品质优良,有“牧草之王”的美誉。发掘并探索紫花苜蓿MsBBX20基因响应非生物胁迫的分子机理,有助于揭示紫花苜蓿抗逆生物学基础,为紫花苜蓿抗逆分子育种提供新的基因资源。通过RT-PCR、3'/5'RACE PCR技术克隆得到MsBBX20基因cDNA序列,生物信息学分析发现其CDS全长834 bp,编码278个氨基酸,该基因编码的蛋白质为锌指结构蛋白家族成员。利用qRTPCR技术分析MsBBX20在紫花苜蓿不同组织和不同非生物胁迫下的表达模式。通过基因枪轰击技术,在洋葱表皮瞬时表达MsBBX20进行亚细胞定位。克隆得到大小为1737 bp的MsBBX20启动子序列并分析了顺式作用元件,该启动子可驱动GUS报告基因在烟草的叶、茎和根中高效表达。将MsBBX20启动子序列与包含GUS基因的pCAMBIA-1301载体连接,瞬时转化烟草并通过组织化学染色对不同组织进行GUS活性分析。构建pCAMBIA3301-MsBBX20植物超表达载体,通过农杆菌介导的方法遗传转化野生型拟南芥,获得超表达MsBBX20的拟南芥株系。用不同浓度盐溶液(150、200和300 mmol·L^(-1)NaCl)处理拟南芥转基因株系并分析其MDA含量和抗氧化酶活性。进化分析表明紫花苜蓿MsBBX20蛋白与红三叶TpBBX20的亲缘关系最近。MsBBX20蛋白定位于细胞核。MsBBX20基因在花中表达量最高,且MsBBX20可以响应干旱、盐、冷、脱落酸、赤霉素、光照等多种非生物胁迫。遗传转化获得MsBBX20过表达拟南芥株系,并选择3个高表达阳性株系进行功能验证。在不同浓度NaCl处理条件下,过量表达MsBBX20的拟南芥株系的丙二醛(MDA)含量显著低于对照,而超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性均显著高于对照。克隆获得紫花苜蓿锌指蛋白转录因子基因MsBBX20,该基因在花中表达量最高,能够响应多种非生物逆境胁迫和外源激素处理,表明MsBBX20可能参与紫花苜蓿的多个逆境响应过程。进一步的研究证明MsBBX20可能通过调节植物的抗氧化酶系统,缓解逆境造成的植物细胞氧化损伤,提高转基因拟南芥对盐胁迫的抗性,进而增强植株的耐盐性。

关键词：紫花苜蓿 MsBBX20 基因克隆耐盐性功能分析

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基于Smart-seq2探究玻璃化冷冻对猪孤雌激活囊胚基因表达的影响

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畜牧兽医学报 2024年第9期55卷 3936-3946页

作者：杨柏高龙熙张亮徐皆欢戴建军赵学明潘红梅重庆市畜牧科学院重庆402460 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106

旨在探究玻璃化冷冻对猪孤雌激活(parthenogenetic activation,PA)囊胚基因表达的影响。本研究以猪PA囊胚为研究对象,根据试验处理分为新鲜组、玻璃化冷冻组Ⅰ和玻璃化冷冻组Ⅱ,随后从每组挑选3枚形态良好的囊胚,利用Smart-seq2单细胞... 详细信息

旨在探究玻璃化冷冻对猪孤雌激活(parthenogenetic activation,PA)囊胚基因表达的影响。本研究以猪PA囊胚为研究对象,根据试验处理分为新鲜组、玻璃化冷冻组Ⅰ和玻璃化冷冻组Ⅱ,随后从每组挑选3枚形态良好的囊胚,利用Smart-seq2单细胞全长转录组测序技术进行转录组测序分析。结果显示,玻璃化冷冻组Ⅰ与新鲜组相比,共鉴定到772个差异表达基因(differential expression genes,DEGs),GO和KEGG富集分析结果显示,这些DEGs与细胞脂质代谢过程、细胞葡萄糖稳态、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路等相关;玻璃化冷冻组Ⅱ与新鲜组相比,共鉴定到1613个DEGs,主要与糖异生、代谢途径、氨基酸生物合成等相关;玻璃化冷冻组Ⅱ与玻璃化冷冻组Ⅰ相比,鉴定到822个DEGs,主要与丙酮酸代谢过程、N-聚糖生物合成、细胞衰老等相关。综上,本研究基于Smart-seq2单细胞全长转录组测序技术揭示了玻璃化冷冻对猪PA囊胚脂质代谢、能量代谢、MAPK信号通路等相关基因表达的影响。

关键词： Smart-seq2 玻璃化冷冻猪孤雌激活囊胚